GB/T 5009.95-2003蜂蜜中四環(huán)素族抗生素殘留量的測定

ICS67.040C53中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)GB/T5009.95—2003代替GB/T13110-1991蜂蜜中四環(huán)素族抗生素殘留量的測定Determinationoftetracyelinesresiduesinhoney2003-08-11發(fā)布2004-01-01實施中華人民共和國衛(wèi)生部發(fā)布中國國家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會

GB/T5009.95—2003前本標(biāo)準(zhǔn)代替GB/T13110—1991《蜂蜜中四環(huán)素族抗生素殘留量的測定方法》。本標(biāo)準(zhǔn)與GB/T13110—1991相比主要修改如下：-修改了標(biāo)準(zhǔn)的中文名稱，標(biāo)準(zhǔn)中文名稱改為《蜂蜜中四環(huán)素族抗生素殘留量的測定》-按GB/T20001.4—2001《標(biāo)準(zhǔn)編寫規(guī)則第4部分：化學(xué)分析方法》對原標(biāo)準(zhǔn)的結(jié)構(gòu)進(jìn)行丁修改。本標(biāo)準(zhǔn)由中華人民共和國衛(wèi)生部提出并歸口。本標(biāo)準(zhǔn)起草單位：福建省食品衛(wèi)生監(jiān)督檢驗所、福建省藥品檢驗所本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：林升清、馬賽駿、黃宏南、耿瑩瑩、林桂生。原標(biāo)準(zhǔn)于1991年首次發(fā)布.本次為第一次修訂

GB/T5009.95—2003蜂蜜中四環(huán)素族抗生素殘留量的測定范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了用微生物管碟法測定蜂蜜中四環(huán)素族抗生素殘留量的方法本標(biāo)準(zhǔn)適用于天然或加工蜂蜜中四環(huán)素族抗生素殘留量的測定2原理試樣中四環(huán)素族抗生素經(jīng)Mcllvaine緩沖液提取后.用SEP-PAKCa柱純化。四環(huán)素族三種抗生素四環(huán)素、土霉素及金霉素利用薄層層析生物檢測法進(jìn)行分離和定性;以蠟樣芽胞桿菌為試驗菌株.用微生物管碟法進(jìn)行定量檢測試劑3.1Mcllvaine緩沖液（pH4):稱取磷酸氫二鈉（Na.HPO，·12H.O)27.6g、檸檬酸(C,H.O,·H.O)12.9g、乙二胺四乙酸二鈉37.2g,用水溶解后稀釋并定容至1000mL.3.20.1mol/L磷酸鹽緩沖液(pH4.5):稱取磷酸氫二鉀13.6g.用水溶解后稀釋并定容至1000mL115C滅菌30min,置4C冰箱中保存。3.3乙二胺四乙酸二鈉水溶液(50g/L)3.4WatersSEP-PAKC.柱(或國產(chǎn)PT-C.a柱):用時先經(jīng)10mL甲醇濾過活化，再用10mL蒸雷水置換·然后用10mL50g/L乙二胺四乙酸二鈉流過。3.5抗生素標(biāo)準(zhǔn)品：四環(huán)素、土霉素、金霉素標(biāo)準(zhǔn)品(由衛(wèi)生部藥品生物制品檢定所提供）3.6抗生素標(biāo)準(zhǔn)溶液：3.6.1抗生素標(biāo)準(zhǔn)原液的配制：準(zhǔn)確稱取四環(huán)素、土霉素、金霉素標(biāo)準(zhǔn)品適量（按效價進(jìn)行換算)用0.01mol/L鹽酸溶解并定容至1000g/mL.置4C冰箱中(可使用7天)。3.6.2抗生素標(biāo)準(zhǔn)稀釋液配制：臨用前取上述原液按1：0.8劑距用0.1mol/L磷酸鹽緩沖液逐步稀釋配制成標(biāo)準(zhǔn)稀釋液。制備四環(huán)素、土霉素標(biāo)準(zhǔn)曲線的標(biāo)準(zhǔn)濃度為0.16.0.21.0.26,0.32,0.40.0.50g/mL,參考濃度為0.25g/mL:制備金霉素標(biāo)準(zhǔn)曲線的標(biāo)準(zhǔn)濃度為0.033,0.041.0.051.0.064.0.080.0.100g/mL.參考濃度為0.050g/mL。定性試驗用標(biāo)準(zhǔn)液濃度四環(huán)素、土霉素為2gg/mL.金莓素為18/mL.3.7展開劑：正丁醇-乙酸-水(4+1+5)。4儀器4.1水式恒溫箱。4.2冰箱：0℃～4C4.3恒溫水浴。4.4高壓滅菌器4.5旋旋轉(zhuǎn)式減壓蒸留器。4.6離心機(jī)：200