實驗十三、糞便潛血及HCG測定

實驗十三、糞便隱血

和尿絨毛膜促性腺激素試驗臨床檢驗診斷學(xué)教研室一、糞便隱血檢查-匹拉米洞半定量法目的

掌握糞便隱血檢查的常用方法。原理

血紅蛋白在酸及過氧化氫作用下與匹拉米洞反應(yīng)，產(chǎn)生紫藍紫紅的顏色,據(jù)此來進行判讀及對陽性結(jié)果半定量。器材與試劑：便隱血試劑盒標(biāo)本：人工大便便隱血試劑盒操作：1.取樣直接打開測試卡正面的蓋子，用木棒挖取不同部位的糞便檢體涂抹在測試卡A窗或B窗的方格內(nèi)，然后合上蓋子。2.將測試卡背面朝上，并打開印有“DevelopmentWindow”的封蓋。3.加試劑在方格內(nèi)滴1滴顯色劑A，待試劑完全滲透后，再滴1滴顯色劑B。

4.觀察結(jié)果加入試劑后立即觀察顏色變化。

5.結(jié)果判斷:立即產(chǎn)生紫藍色，報告為4+。10s內(nèi)產(chǎn)生紫藍色，報告為3+。1min內(nèi)產(chǎn)生紫紅色，報告為2+。1-2min內(nèi)才逐漸產(chǎn)生紫紅色，報告為1+。2min內(nèi)無顏色反應(yīng)，報告為陰性（-）。6.報告方式：FOBT：陰性或陽性（+-4+）。注意事項：1.糞便標(biāo)本須新鮮，否則靈敏度降低。2.標(biāo)本檢測時應(yīng)做陰、陽性對照。3.冬天溫度低時測試卡反應(yīng)可能遲緩，應(yīng)適當(dāng)延長觀察時間。4.試劑盒不能與氧化劑共同存放，避免直射、潮濕。5.檢驗前2天禁食動物血、葉綠素、鐵劑、VitC等。6.每次使用后擰緊瓶蓋，以免試劑揮發(fā)。二、尿絨毛膜促性腺激素檢查目的掌握尿絨毛膜促性腺激素檢查的方法。原理應(yīng)用雙抗體夾心法及免疫層析法，尿液中的hCG先與包被在試帶一端硝酸纖維膜上的膠體金標(biāo)記的鼠抗人β-hCG單克隆抗體結(jié)合，再與吸附在玻璃纖維膜上的羊抗人hCG多克隆抗體結(jié)合，形成金標(biāo)鼠抗人β-hCG單抗-尿hCG抗原-羊抗人hCG多抗的雙抗夾心式復(fù)合物，顯現(xiàn)出紅色反應(yīng)線，同時游離的膠體金標(biāo)記的鼠IgG隨尿上行至試帶末端的包被有羊抗鼠IgG抗體區(qū)帶處，形成抗原抗體復(fù)合物，顯現(xiàn)紅色質(zhì)控線。hCG-單克隆抗體膠體金試驗圖示1、金標(biāo)鼠抗人β-hCG(單抗)2、金標(biāo)鼠IgG羊抗人hCG(多抗)

羊抗鼠IgG對照線檢測線hCG-單克隆抗體膠體金試驗圖示尿中hCG的β鏈金標(biāo)鼠抗人β-hCG單抗羊抗人hCG多抗-尿hCG-β-hCG單抗結(jié)合β-hCG單抗—尿β-hCG復(fù)合物金標(biāo)鼠IgG-羊抗鼠IgG金標(biāo)記鼠IgG尿液尿HCG的鏈與檢測線中的羊抗人HCG多抗的鏈結(jié)合試劑試劑盒

標(biāo)本新鮮尿操作：

1.插入試帶將測試帶標(biāo)有箭頭的一端插入尿液中，插入尿液中的深度不可超過標(biāo)志線。5秒后取出平放。2.觀察結(jié)果

5min后肉眼觀察。3.結(jié)果報告：陽性：兩條紫紅色線。陰性：一條紫紅色線。試帶失效：無紫紅色線或僅在檢測線出現(xiàn)一條紅色線。優(yōu)點：簡便、快速、靈敏度高、無污染，可室溫保存，有效期長等。注意事項：1.尿液要