標(biāo)準(zhǔn)解讀

《GB/T 40249-2021 斑節(jié)對(duì)蝦桿狀病毒病診斷規(guī)程 PCR檢測(cè)法》是一項(xiàng)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)，旨在通過(guò)聚合酶鏈反應(yīng)（Polymerase Chain Reaction, PCR）技術(shù)來(lái)診斷斑節(jié)對(duì)蝦中的桿狀病毒感染情況。該標(biāo)準(zhǔn)詳細(xì)規(guī)定了從樣品采集到最終結(jié)果分析的全過(guò)程要求。

首先，在樣品采集方面，標(biāo)準(zhǔn)明確了適合進(jìn)行PCR檢測(cè)的樣本類(lèi)型以及如何正確地收集這些樣本以確保后續(xù)實(shí)驗(yàn)的有效性。這包括但不限于活體或冷凍保存的斑節(jié)對(duì)蝦組織樣本的選擇與處理方法。

接著是核酸提取步驟，此部分介紹了使用何種試劑盒或者手工操作流程來(lái)進(jìn)行高質(zhì)量DNA的提取，并強(qiáng)調(diào)了避免污染的重要性，因?yàn)榧词故俏⒘康耐庠碊NA也可能導(dǎo)致假陽(yáng)性結(jié)果。

然后進(jìn)入PCR擴(kuò)增階段，這里描述了推薦使用的引物序列、反應(yīng)條件設(shè)置等關(guān)鍵參數(shù)，同時(shí)也指出了選擇合適對(duì)照組（如陰性對(duì)照和陽(yáng)性對(duì)照）對(duì)于驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)可靠性的必要性。

最后是對(duì)PCR產(chǎn)物的檢測(cè)與結(jié)果判定環(huán)節(jié)。根據(jù)擴(kuò)增曲線(xiàn)及熔解曲線(xiàn)特征，結(jié)合凝膠電泳圖像或其他形式的數(shù)據(jù)展示方式，可以準(zhǔn)確判斷樣品中是否存在斑節(jié)對(duì)蝦桿狀病毒DNA片段。此外，還提供了重復(fù)性和再現(xiàn)性指標(biāo)，用以評(píng)估不同實(shí)驗(yàn)室之間采用相同方法時(shí)的一致性水平。

整個(gè)文件不僅為從事水產(chǎn)動(dòng)物疾病研究的專(zhuān)業(yè)人士提供了一套科學(xué)嚴(yán)謹(jǐn)?shù)牟僮髦改?，也促進(jìn)了行業(yè)內(nèi)關(guān)于斑節(jié)對(duì)蝦健康監(jiān)測(cè)技術(shù)交流與發(fā)展。


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  • 現(xiàn)行
  • 正在執(zhí)行有效
  • 2021-05-21 頒布
  • 2021-12-01 實(shí)施
?正版授權(quán)
GB/T 40249-2021斑節(jié)對(duì)蝦桿狀病毒病診斷規(guī)程PCR檢測(cè)法_第1頁(yè)
GB/T 40249-2021斑節(jié)對(duì)蝦桿狀病毒病診斷規(guī)程PCR檢測(cè)法_第2頁(yè)
GB/T 40249-2021斑節(jié)對(duì)蝦桿狀病毒病診斷規(guī)程PCR檢測(cè)法_第3頁(yè)
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GB/T 40249-2021斑節(jié)對(duì)蝦桿狀病毒病診斷規(guī)程PCR檢測(cè)法-免費(fèi)下載試讀頁(yè)

文檔簡(jiǎn)介

ICS6502030

CCSB.41.

中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)

GB/T40249—2021

斑節(jié)對(duì)蝦桿狀病毒病診斷規(guī)程

PCR檢測(cè)法

CodeofdiagnosisforinfectionwithPenaeusmonodon-typebaculovirus—

PCRmethod

2021-05-21發(fā)布2021-12-01實(shí)施

國(guó)家市場(chǎng)監(jiān)督管理總局發(fā)布

國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì)

GB/T40249—2021

前言

本文件按照標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第部分標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則的規(guī)定

GB/T1.1—2020《1:》

起草

。

請(qǐng)注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專(zhuān)利本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識(shí)別專(zhuān)利的責(zé)任

。。

本文件由中華人民共和國(guó)農(nóng)業(yè)農(nóng)村部提出

。

本文件由全國(guó)水產(chǎn)標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)歸口

(SAC/TC156)。

本文件起草單位中國(guó)水產(chǎn)科學(xué)研究院黃海水產(chǎn)研究所全國(guó)水產(chǎn)技術(shù)推廣總站

:、。

本文件主要起草人楊冰萬(wàn)曉媛黃倢李清史成銀張鋒宋曉玲余衛(wèi)忠張慶利李晨劉莉

:、、、、、、、、、、、

許華

。

Ⅰ

GB/T40249—2021

斑節(jié)對(duì)蝦桿狀病毒病診斷規(guī)程

PCR檢測(cè)法

1范圍

本文件規(guī)定了斑節(jié)對(duì)蝦桿狀病毒病診斷規(guī)程中普遍適用的核酸檢測(cè)技術(shù)的要求針對(duì)斑節(jié)對(duì)蝦桿

,

狀病毒Penaeusmonodon給出了檢測(cè)法所需試劑或材料儀器設(shè)備

(-typebaculovirus,MBV),PCR、、

樣品試驗(yàn)步驟和結(jié)果判定

、。

本文件適用于對(duì)蝦各生活期樣品中帶毒情況的定性檢測(cè)以進(jìn)行斑節(jié)對(duì)蝦桿狀病毒病的流

MBV,

行病學(xué)調(diào)查診斷檢疫和監(jiān)測(cè)

、、。

2規(guī)范性引用文件

下列文件中的內(nèi)容通過(guò)文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款其中注日期的引用文

。,

件僅該日期對(duì)應(yīng)的版本適用于本文件不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改單適用于

,;,()

本文件

。

白斑綜合征診斷規(guī)程第部分組織病理學(xué)診斷法

GB/T28630.4—2012(WSD)4:

3術(shù)語(yǔ)和定義

本文件沒(méi)有需要界定的術(shù)語(yǔ)和定義

。

4縮略語(yǔ)

下列縮略語(yǔ)適用于本文件

。

堿基對(duì)

bp:(basepair)

脫氧核糖核酸

DNA:(deoxyribonucleicacid)

脫氧核糖核苷三磷酸

dNTPs:(deoxy-ribonucleosidetriphosphate)

溴化乙啶

EB:(ethidiumbromide)

乙二胺四乙酸

EDTA:(ethylenediaminetetraaceticacid)

鹽酸

HCl:(hydrogenchloride)

斑節(jié)對(duì)蝦桿狀病毒Penaeusmonodon

MBV:(-typebaculovirus)

氫氧化鈉

NaOH:(sodiumhydroxide)

聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)

PCR:(polymerasechainreaction)

十二烷基硫酸

SDS:(sodiumdodecylsulfate)

Taq水生棲熱菌

:(thermusaquaticus)

鹽酸和緩沖液

TE:TrisE

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