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第3課時(shí)基因工程的應(yīng)用(時(shí)間:30分鐘滿分:50分)一、選擇題(共8小題,每小題2分,共16分)1.下列有關(guān)轉(zhuǎn)基因植物的說(shuō)法中不正確的是()A.科學(xué)家可以利用一些調(diào)節(jié)細(xì)胞滲透壓的基因來(lái)提高作物的抗鹽堿和抗干旱的能力B.由于抗蟲棉可以抵抗一切危害棉花植株的害蟲,所以抗蟲棉已經(jīng)推廣應(yīng)用C.科學(xué)家往往將必需氨基酸含量多的蛋白質(zhì)編碼基因?qū)胫参镏校蕴岣咿r(nóng)作物的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值D.引起植物生病的病原微生物,主要有病毒、真菌和細(xì)菌等解析轉(zhuǎn)基因抗蟲棉只是對(duì)棉鈴蟲具有較強(qiáng)的抗性,并不針對(duì)所有害蟲。答案B2.某科學(xué)家從細(xì)菌中分離出耐高溫淀粉酶(Amy)基因a,通過(guò)基因工程的方法,將a轉(zhuǎn)到馬鈴薯植株中,經(jīng)檢測(cè)發(fā)現(xiàn)Amy在成熟塊莖細(xì)胞中存在,下列說(shuō)法正確的是()A.基因a只有導(dǎo)入到馬鈴薯受精卵中才能表達(dá)B.目的基因來(lái)自細(xì)菌,可以不需要載體直接導(dǎo)入受體細(xì)胞C.基因a導(dǎo)入成功后,將抑制細(xì)胞原有的新陳代謝,開(kāi)辟新的代謝途徑D.目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞后,可通過(guò)復(fù)制傳給子代細(xì)胞并表達(dá)解析培育轉(zhuǎn)基因植株可以以體細(xì)胞或受精卵作為受體細(xì)胞;目的基因必須借助載體才能導(dǎo)入受體細(xì)胞;目的基因?qū)氤晒?,不抑制?xì)胞原有的代謝途徑。答案D3.番茄營(yíng)養(yǎng)豐富,是人們喜愛(ài)的一類蔬菜。普通番茄細(xì)胞中含有多聚半乳糖醛酸酶基因,控制細(xì)胞產(chǎn)生多聚半乳糖醛酸酶,該酶能破壞細(xì)胞壁,使番茄軟化,不耐貯藏。科學(xué)家通過(guò)基因工程將一種抗多聚半乳糖醛酸酶基因?qū)敕鸭?xì)胞,獲得了抗軟化番茄。下列關(guān)于培育抗軟化番茄的敘述中,錯(cuò)誤的是()A.載體常用質(zhì)粒B.受體細(xì)胞是番茄細(xì)胞C.目的基因?yàn)槎嗑郯肴樘侨┧崦富駾.目的基因的表達(dá)延緩了細(xì)胞的軟化解析抗軟化番茄的培育常用質(zhì)粒作載體,將目的基因(抗多聚半乳糖醛酸酶基因)與質(zhì)粒結(jié)合形成重組DNA分子,利用含重組DNA分子的土壤農(nóng)桿菌去感染普通番茄,目的基因?qū)肫胀ǚ鸭?xì)胞中染色體的DNA上,從而使多聚半乳糖醛酸酶基因不能表達(dá)。答案C4.在用基因工程技術(shù)構(gòu)建抗除草劑的轉(zhuǎn)基因煙草過(guò)程中,下列操作錯(cuò)誤的是()A.用限制性核酸內(nèi)切酶切割煙草花葉病毒的核酸B.用DNA連接酶連接經(jīng)切割的抗除草劑基因和載體C.將重組DNA分子導(dǎo)入煙草原生質(zhì)體D.用含除草劑的培養(yǎng)基篩選轉(zhuǎn)基因煙草細(xì)胞解析限制性核酸內(nèi)切酶切割的是DNA,而煙草花葉病毒的遺傳物質(zhì)為RNA;目的基因與載體的連接由DNA連接酶催化連接;受體細(xì)胞為植物細(xì)胞,所以可以是煙草原生質(zhì)體,目的基因?yàn)榭钩輨┗?,所以篩選的時(shí)候應(yīng)該用含除草劑的培養(yǎng)基篩選轉(zhuǎn)基因細(xì)胞。答案A5.年僅4歲的美國(guó)女孩阿尚蒂由于ADA基因缺陷導(dǎo)致T淋巴細(xì)胞不斷死亡,患有嚴(yán)重的復(fù)合型免疫缺陷癥。1990年9月14日她接受了人類歷史上首例基因治療,在治療過(guò)程中,可作為受體細(xì)胞的是()①受精卵②效應(yīng)細(xì)胞毒性T細(xì)胞③T細(xì)胞④造血干細(xì)胞A.①②B.③④C.②③D.①③解析女孩患病的原因是ADA基因缺陷導(dǎo)致T淋巴細(xì)胞不斷死亡,因此需要通過(guò)基因工程將正常的ADA基因?qū)雭?lái)自小姑娘體內(nèi)且能產(chǎn)生T細(xì)胞的細(xì)胞,選用小姑娘體內(nèi)細(xì)胞的原因是防止產(chǎn)生免疫排斥反應(yīng)。造血干細(xì)胞也能增殖分化成T細(xì)胞。答案B6.腺苷酸脫氨酶(ADA)基因缺陷癥是一種免疫缺陷病,對(duì)患者采用基因治療的方法是:取出患者的T淋巴細(xì)胞,進(jìn)行體外培養(yǎng)時(shí)轉(zhuǎn)入正常ADA基因,再將這些T淋巴細(xì)胞注入患者體內(nèi),使其免疫功能增強(qiáng),能正常生活。下列有關(guān)敘述中,不正確的是()A.正常ADA基因替換了患者的缺陷基因B.正常ADA基因通過(guò)控制ADA的合成來(lái)影響免疫功能C.淋巴細(xì)胞需在體外擴(kuò)增后再注射入患者體內(nèi)D.腺苷酸脫氨酶(ADA)基因缺陷癥屬于先天性免疫缺陷病解析基因治療是將正常的基因?qū)氲接谢蛉毕莸募?xì)胞中,正常的ADA基因可以控制合成正常的ADA來(lái)影響免疫功能;為獲得大量含ADA正常基因的T淋巴細(xì)胞,需在體外擴(kuò)增后再注入患者體內(nèi);腺苷酸脫氨酶(ADA)基因缺陷癥是先天性免疫缺陷病。答案A7.采用基因工程技術(shù)將人凝血因子基因?qū)肷窖蚴芫?,培育出了轉(zhuǎn)基因羊。但是,人凝血因子只存在于該轉(zhuǎn)基因羊的乳汁中。下列有關(guān)敘述,正確的是()A.如果人凝血因子基因的核苷酸序列已知,可用人工合成的方法獲得該目的基因B.人體細(xì)胞中凝血因子基因進(jìn)入羊受精卵細(xì)胞后,其傳遞和表達(dá)不再遵循中心法則C.在該轉(zhuǎn)基因羊體內(nèi),人凝血因子基因存在于乳腺細(xì)胞中,而不存在于其他體細(xì)胞中D.人凝血因子基因開(kāi)始轉(zhuǎn)錄后,DNA聚合酶以DNA分子的一條鏈為模板合成mRNA解析基因的表達(dá)包括轉(zhuǎn)錄和翻譯,基因的傳遞和表達(dá)遵循中心法則;轉(zhuǎn)基因羊體內(nèi)人凝血因子基因存在于羊所有體細(xì)胞中;人凝血因子基因開(kāi)始轉(zhuǎn)錄后,RNA聚合酶以DNA分子的一條鏈為模板合成mRNA。答案A8.“工程菌”是指()A.用物理或化學(xué)方法誘發(fā)菌類自身某些基因得到高效表達(dá)的菌類細(xì)胞株系B.用遺傳工程的方法,把相同種類、不同株系的菌類通過(guò)雜交得到的新細(xì)胞株系C.用基因工程的方法,使外源基因得到高效表達(dá)的菌類細(xì)胞株系D.從自然界中選取的能迅速增殖的菌類解析“工程菌”的形成有三個(gè)特點(diǎn):①運(yùn)用的是基因工程方法;②菌系表達(dá)的是外源目的基因而非菌系自身的基因;③利用的是菌類高效表達(dá)基因的功能。答案C二、非選擇題(共4小題,共34分)9.(7分)多聚半乳糖醛酸酶(PG)能降解果膠使細(xì)胞壁破損。成熟的番茄果實(shí)中,PG合成顯著增加,能使果實(shí)變紅變軟,但不利于保鮮。利用基因工程減少PG基因的表達(dá),可延長(zhǎng)果實(shí)保質(zhì)期??茖W(xué)家將PG基因反向接到Ti質(zhì)粒上,導(dǎo)入番茄細(xì)胞中,得到轉(zhuǎn)基因番茄,具體操作流程如圖(原生質(zhì)體是去掉細(xì)胞壁的植物細(xì)胞),據(jù)圖回答下列問(wèn)題。(1)若已獲取PG的mRNA,可通過(guò)________獲取PG基因。重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)移到大腸桿菌中的目的是_______________________。(2)用含目的基因的農(nóng)桿菌感染番茄原生質(zhì)體后,可用含有________的培養(yǎng)基進(jìn)行篩選,理由是________________。之后,還需將其置于質(zhì)量分?jǐn)?shù)為25%的蔗糖溶液中,觀察細(xì)胞________現(xiàn)象來(lái)鑒別細(xì)胞壁是否再生。(3)由于導(dǎo)入的目的基因能轉(zhuǎn)錄出反義RNA,且能與________________互補(bǔ)結(jié)合,因此可抑制PG基因表達(dá)的翻譯過(guò)程。若________,則可確定轉(zhuǎn)基因番茄培育成功。解析(1)PG的mRNA在反轉(zhuǎn)錄酶的作用下,反轉(zhuǎn)錄為PG基因。重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)移到大腸桿菌中,目的是大量復(fù)制目的基因。(2)根據(jù)圖示,PG基因插在四環(huán)素抗性基因中間,在BamHⅠ酶作用下,四環(huán)素抗性基因被破壞了,即重組質(zhì)粒中含卡那霉素抗性基因,但不含四環(huán)素抗性基因,故用含有PG基因的農(nóng)桿菌感染番茄原生質(zhì)體后,可用含有卡那霉素的培養(yǎng)基進(jìn)行篩選。若將其置于質(zhì)量分?jǐn)?shù)為25%的蔗糖溶液中,可通過(guò)觀察細(xì)胞是否發(fā)生質(zhì)壁分離現(xiàn)象來(lái)鑒別細(xì)胞壁是否再生。(3)根據(jù)圖示,導(dǎo)入的目的基因能轉(zhuǎn)錄出PG反義RNA,天然PG基因轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生正常的RNA,這兩種RNA能互補(bǔ)結(jié)合,從而抑制了PG基因的正常表達(dá)。若番茄果實(shí)的保質(zhì)期延長(zhǎng),則確定轉(zhuǎn)基因番茄培育成功。答案(1)反轉(zhuǎn)錄法大量復(fù)制目的基因(或克隆目的基因)(2)卡那霉素重組質(zhì)粒中含卡那霉素抗性基因而四環(huán)素抗性基因被破壞是否發(fā)生質(zhì)壁分離(3)天然的PG基因轉(zhuǎn)錄的mRNA番茄果實(shí)的保質(zhì)期延長(zhǎng)10.(9分)如圖表示從蘇云金芽孢桿菌分離出殺蟲晶體蛋白基因(簡(jiǎn)稱Bt基因)及形成轉(zhuǎn)基因抗蟲植物的圖解。請(qǐng)分析回答:(1)寫出b過(guò)程的表達(dá)式_____________________。(2)將目的基因和載體(質(zhì)粒)結(jié)合的工具酶有________酶和________酶。(3)科學(xué)家計(jì)劃從哺乳動(dòng)物的乳汁中提取某種抗體,應(yīng)將控制抗體合成的基因?qū)朐摲N動(dòng)物的________中,導(dǎo)入基因成功表達(dá)的標(biāo)志是______________________________。解析應(yīng)用基因工程技術(shù),從蘇云金芽孢桿菌中提取殺蟲晶體蛋白基因(目的基因)導(dǎo)入棉花細(xì)胞中形成轉(zhuǎn)基因抗蟲棉,Bt基因的表達(dá),使棉花細(xì)胞中合成了原毒素,使采食棉花的昆蟲中毒死亡。要使某種動(dòng)物的乳汁中含有某種抗體,目的基因一般導(dǎo)入受精卵中。這樣,由此受精卵發(fā)育成的哺乳動(dòng)物的所有體細(xì)胞中都含有目的基因。答案(1)Bt基因eq\o(→,\s\up7(轉(zhuǎn)錄))mRNAeq\o(→,\s\up7(翻譯))原毒素(晶體蛋白)(2)限制性核酸內(nèi)切DNA連接(3)受精卵動(dòng)物乳汁中含此種抗體11.(8分)在菲律賓首都馬尼拉郊外的一片稻田里,一種被稱為“金色大米”的轉(zhuǎn)基因水稻已經(jīng)悄然收獲。這種轉(zhuǎn)基因大米可以幫助人們補(bǔ)充每天必需的維生素A。由于含有可以生成維生素A的β—胡蘿卜素,它呈現(xiàn)金黃色澤,故稱“金色大米”?!敖鹕竺住钡呐嘤鞒倘鐖D所示,請(qǐng)回答下列問(wèn)題(已知限制性核酸內(nèi)切酶Ⅰ的識(shí)別序列和切點(diǎn)是—G↓GATCC—,限制性核酸內(nèi)切酶Ⅱ的識(shí)別序列和切點(diǎn)是—↓GATC—)。(1)培育“金色大米”的基因工程操作五步曲中,其核心是________通過(guò)該操作形成了圖中的________(填字母)。(2)在構(gòu)建c的過(guò)程中質(zhì)粒用________(填“限制性核酸內(nèi)切酶Ⅰ”或“限制性核酸內(nèi)切酶Ⅱ”)進(jìn)行了切割。檢驗(yàn)重組載體導(dǎo)入能否成功,需要利用________作為標(biāo)記基因。(3)為在短時(shí)間內(nèi)大量獲得目的基因,可用________擴(kuò)增的方法,其原理是_______________________。(4)除植物基因工程碩果累累之外。在動(dòng)物基因工程、基因工程藥物和基因治療等方面也取得了顯著成果,請(qǐng)列舉出至少兩方面的應(yīng)用______________________________。解析(1)基因工程的核心步驟是重組DNA分子的構(gòu)建,構(gòu)建成的重組DNA分子可用圖中c表示。(2)據(jù)圖可知,限制性核酸內(nèi)切酶Ⅰ的識(shí)別序列中包含了限制性核酸內(nèi)切酶Ⅱ的識(shí)別序列,若使用限制性核酸內(nèi)切酶Ⅱ?qū)|(zhì)粒進(jìn)行切割,則基因Ⅰ和基因Ⅱ都會(huì)被破壞,因此應(yīng)使用限制性核酸內(nèi)切酶Ⅰ切割質(zhì)粒。此時(shí)基因Ⅰ結(jié)構(gòu)完整,可作為標(biāo)記基因。(3)PCR技術(shù)是一項(xiàng)在生物體外復(fù)制特定DNA片段的核酸合成技術(shù),其依據(jù)的原理是DNA雙鏈復(fù)制。(4)考查基因工程應(yīng)用的相關(guān)實(shí)例,答案合理即可。答案(1)重組DNA分子的構(gòu)建c(2)限制性核酸內(nèi)切酶Ⅰ基因Ⅰ(3)PCR技術(shù)DNA雙鏈復(fù)制(4)乳腺生物反應(yīng)器;體外基因治療復(fù)合型免疫缺陷癥12.(10分)有一種病人不能抵抗疾病,只能生活在無(wú)菌室里,如果離開(kāi)無(wú)菌室,病人就會(huì)受到病毒感染而死亡,原因是其體內(nèi)缺乏一種腺苷酶基因。其治療方案如圖所示。(1)仿照上述方案設(shè)計(jì)一個(gè)為男性患者治療血友病的方案,請(qǐng)完成有關(guān)步驟,第一步:取出患者的皮膚細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng);第二步:提取目的基因;第三步:__________________________________;第四步:將重組載體導(dǎo)入受體細(xì)胞,讓這種攜帶有正常凝血因子基因的無(wú)害病毒去感染_______________________________;第五步:根據(jù)病毒上的標(biāo)記基因檢測(cè)皮膚細(xì)胞中是否導(dǎo)入正常凝血因子基因,并檢測(cè)是否產(chǎn)生了________________________;第六步:將含有目的基因的皮膚細(xì)胞擴(kuò)大培養(yǎng),當(dāng)各種指標(biāo)達(dá)到要求后,再與膠原細(xì)胞混合,制成注射針劑。將含有這種活細(xì)胞的針劑注射到患者體內(nèi),目的基因在患者體內(nèi)表達(dá),使患者的凝血因子達(dá)到可以止血的含量。(2)取患者本人的皮膚細(xì)胞作為受體細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),目的是_______________。(3)假設(shè)以大腸桿菌質(zhì)粒作為載體,并用同一種限制性核酸內(nèi)切酶切割載體與目的基因,將切割后的載體與目的基因片段混合,
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