標(biāo)準(zhǔn)解讀
《GB/T 28103-2011 小麥線條花葉病毒檢疫鑒定方法》是一項(xiàng)國家標(biāo)準(zhǔn),專門針對(duì)小麥線條花葉病毒(Wheat streak mosaic virus, WSMV)的檢測與鑒定。該標(biāo)準(zhǔn)適用于進(jìn)出境植物及其產(chǎn)品的檢驗(yàn)檢疫工作中對(duì)WSMV的鑒定。
根據(jù)文檔內(nèi)容,本標(biāo)準(zhǔn)定義了通過酶聯(lián)免疫吸附測定(ELISA)和RT-PCR兩種主要技術(shù)手段來識(shí)別小麥樣品中是否存在WSMV的具體步驟。其中:
-
酶聯(lián)免疫吸附測定(ELISA):這是一種基于抗體-抗原反應(yīng)原理的方法,用于檢測特定蛋白質(zhì)的存在與否。在本標(biāo)準(zhǔn)下,使用特異性抗體捕捉樣本中的WSMV顆粒,然后通過一系列化學(xué)反應(yīng)產(chǎn)生可測量信號(hào),以此判斷樣品是否感染了該病毒。
-
RT-PCR(逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)):這種方法首先將病毒RNA逆轉(zhuǎn)錄成cDNA,再利用特定引物擴(kuò)增目標(biāo)序列,最后通過凝膠電泳等技術(shù)觀察擴(kuò)增產(chǎn)物,以確認(rèn)是否有WSMV核酸存在。
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....
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- 現(xiàn)行
- 正在執(zhí)行有效
- 2011-12-30 頒布
- 2012-06-01 實(shí)施
文檔簡介
ICS6502001
B16..
中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)
GB/T28103—2011
小麥線條花葉病毒檢疫鑒定方法
Detectionandidentificationofwheatstreakmosaicvirus
2011-12-30發(fā)布2012-06-01實(shí)施
中華人民共和國國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局發(fā)布
中國國家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì)
GB/T28103—2011
前言
本標(biāo)準(zhǔn)按照給出的規(guī)則起草
GB/T1.1—2009。
本標(biāo)準(zhǔn)由全國植物檢疫標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)提出并歸口
(SAC/TC271)。
本標(biāo)準(zhǔn)起草單位中華人民共和國天津出入境檢驗(yàn)檢疫局
:。
本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人郭京澤廖芳劉躍庭張?jiān)>齽⒂麓掼F軍王金成
:、、、、、、。
Ⅰ
GB/T28103—2011
小麥線條花葉病毒檢疫鑒定方法
1范圍
本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了小麥線條花葉病毒檢疫鑒定方法
(wheatstreakmosaicvirus)。
本標(biāo)準(zhǔn)適用于禾本科植物種子和苗木中的小麥線條花葉病毒檢疫鑒定
。
2規(guī)范性引用文件
下列文件對(duì)于本文件的應(yīng)用是必不可少的凡是注日期的引用文件僅注日期的版本適用于本文
。,
件凡是不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改單適用于本文件
。,()。
植物病毒免疫電鏡檢測方法
SN/T1840
進(jìn)出境植物及植物產(chǎn)品檢疫抽樣
SN/T2122
3小麥線條花葉病毒基本信息
小麥線條花葉病毒屬于馬鈴薯病毒科小麥花葉病毒屬
wheatstreakmosaicvirus,YPotyviridae,
Tritimovirus縮寫
。:WSMV。
小麥線條花葉病毒傳播途徑有汁液摩擦傳播種傳介體傳播
:;;。
該病毒容易通過汁液摩擦方式近距離擴(kuò)散該病毒能通過帶病小麥種子的調(diào)運(yùn)遠(yuǎn)距離傳播該病
。。
毒的傳毒介體為小麥卷葉螨Aceriatosichella成蟲和若蟲均可帶毒傳染卵不傳病毒
,,。
小麥線條花葉病毒其他信息參見附錄
A。
4方法原理
小麥線條花葉病毒的形態(tài)學(xué)特征分子生物學(xué)特性和血清學(xué)特性是該病毒檢疫鑒定方法的主要依
、
據(jù)采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附測定方法植物病毒免疫電鏡檢測方法反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)檢測
。、、
方法確定樣品中帶有的小麥線條花葉病毒
,。
5儀器設(shè)備用具及試劑
、
51儀器設(shè)備
.
酶標(biāo)儀洗板機(jī)恒溫水浴鍋普通冰箱低溫冰箱超低溫冰箱植物
、、、(0℃~4℃)、-20℃、-80℃、
光照培養(yǎng)箱溫度可調(diào)范圍為超凈工作臺(tái)電子天平微量榨汁機(jī)透射電子
(0℃~50℃)、、(1/10000g)、、
顯微鏡低速離心機(jī)轉(zhuǎn)速為儀純水儀電泳儀凝膠成像系統(tǒng)
、(3000r/min~5000r/min)、PCR、、、。
52用具
.
可調(diào)微量移液器和相應(yīng)的吸頭酶聯(lián)板封口膜
(2.5L、10L、100L、1000L、5000L)、、、pH
計(jì)或試紙條廣泛試紙μ和精密μ試紙μ離心μ管μ反應(yīng)管容量瓶解
pH()、1.5mL、PCR、(500mL、1000mL
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