高三一輪復(fù)習(xí)探究：酵母菌種群數(shù)量的變化(結(jié)合微生物培養(yǎng)技術(shù))

探究：培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量的變化目的要求1、學(xué)習(xí)利用血球計(jì)數(shù)板進(jìn)行微生物計(jì)數(shù)的方法2、實(shí)驗(yàn)探究培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量的變化3、注意樣方法的應(yīng)用4、體會(huì)影響種群數(shù)量變化的因素1、酵母菌的呼吸方式是:兼性厭氧(可進(jìn)行有氧呼吸和無(wú)氧呼吸)回顧思考:2、為什么用液體培養(yǎng)基培養(yǎng)酵母菌？

固體培養(yǎng)基可以嗎？培養(yǎng)基

固體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基按物理性質(zhì)分用途用途固體培養(yǎng)基1.平板，主要用于培養(yǎng)出細(xì)菌菌落2.植物組織培養(yǎng)得到新的植株1.平板，主要用于培養(yǎng)出細(xì)菌菌落2.植物組織培養(yǎng)得到新的植株固體培養(yǎng)基用途1.主要是用于擴(kuò)增細(xì)胞，使細(xì)胞數(shù)量增多。如動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、研究酵母菌種群數(shù)量的變化等2.用于得到細(xì)胞產(chǎn)物的時(shí)候：在液體環(huán)境中，表達(dá)大量的產(chǎn)物，再離心收集。如通過(guò)植物組織培養(yǎng)技術(shù)來(lái)大量獲得抗癌藥物---紫杉醇液體培養(yǎng)基離體的組織、器官或細(xì)胞脫分化愈傷組織細(xì)胞增殖細(xì)胞代謝產(chǎn)物（紫杉醇）例如：酵母菌的種群數(shù)量在營(yíng)養(yǎng)條件有限的情況下呈S型增長(zhǎng)。探究：培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量的變化酵母菌的計(jì)數(shù)（1）計(jì)數(shù)工具——血球計(jì)數(shù)板實(shí)物圖正面圖側(cè)面圖計(jì)數(shù)室滴液處血球計(jì)數(shù)板是一種專(zhuān)門(mén)用于計(jì)算較大單細(xì)胞微生物的一種儀器。計(jì)數(shù)時(shí)，常采用樣方法。酵母菌的計(jì)數(shù)（1）計(jì)數(shù)工具——血球計(jì)數(shù)板探究培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量

的動(dòng)態(tài)變化放大后的計(jì)數(shù)池每塊計(jì)數(shù)板由H形凹槽分為2個(gè)同樣的計(jì)數(shù)池。每個(gè)計(jì)數(shù)池分為9個(gè)大方格。25個(gè)中格16個(gè)小格16個(gè)中格25個(gè)小格25X16=400小格16X25=400小格如果使用16格×25格規(guī)格的計(jì)數(shù)室,要按對(duì)角線(xiàn)位,取左上,右上,左下,右下4個(gè)中格(即100個(gè)小格)的酵母菌數(shù).問(wèn)題1、如何取樣計(jì)數(shù)呢？25個(gè)中格16個(gè)中格*********用規(guī)格為25格×16格的計(jì)數(shù)板,除了取其4個(gè)對(duì)角方位外,還需再數(shù)中央的一個(gè)中格(即80個(gè)小方格)的酵母菌數(shù).（五點(diǎn)取樣法）每1ml菌液中所含的酵母菌個(gè)數(shù)計(jì)算公式（如長(zhǎng)和寬各為1mm）：(1)16格×25格的血球計(jì)數(shù)板計(jì)算公式酵母細(xì)胞數(shù)/ml=(100小格內(nèi)酵母細(xì)胞個(gè)數(shù)/100)×400×稀釋倍數(shù)10-4即(100小格內(nèi)酵母細(xì)胞個(gè)數(shù)/100)×4×

106×稀釋倍數(shù)(2)25格x16格的血球計(jì)數(shù)板計(jì)算公式:酵母細(xì)胞數(shù)/ml=(80小格內(nèi)酵母細(xì)胞個(gè)數(shù)/80)×400×稀釋倍數(shù)10-4即(80小格內(nèi)酵母細(xì)胞個(gè)數(shù)/80)×4×

106×稀釋倍數(shù)計(jì)數(shù)室有長(zhǎng)×寬：1mm×1mm,2mm×2mm3mm×3mm等深度均為0.1mm。單位換算:大方格的長(zhǎng)和寬各為1mm,深度為0.1mm,其體積為0.1mm3.換算為1mL為0.1/1000即1/10000mL即10-4mL

。

計(jì)數(shù)室的規(guī)格：1mm1mm1mm每個(gè)計(jì)數(shù)室共有400小格，總?cè)莘e為0.1mm3使用方法:將血球計(jì)數(shù)板用擦鏡紙擦凈,在中央的計(jì)數(shù)室上加蓋玻片.將稀釋后的酵母菌培養(yǎng)液,用吸管吸取滴于蓋玻片的邊緣,使菌液自行滲入,多余的菌液用濾紙吸去,稍待片刻,使酵母菌全部沉降到血球計(jì)數(shù)室底部.如果先加入培養(yǎng)液，再蓋上蓋玻片，會(huì)怎樣影響使計(jì)數(shù)結(jié)果？偏大第1天第4

天第6天一個(gè)小方格內(nèi)的酵母菌數(shù)量過(guò)多，難以計(jì)數(shù)，怎么辦？酵母菌在水中會(huì)不會(huì)吸水過(guò)多而漲破？第7

天死亡關(guān)注本實(shí)驗(yàn)中的幾個(gè)關(guān)鍵點(diǎn)：酵母菌的計(jì)數(shù)利用血球計(jì)數(shù)板在顯微鏡下直接計(jì)數(shù)，是一種常用的微生物計(jì)數(shù)法，也叫做顯微鏡直接計(jì)數(shù)法。優(yōu)點(diǎn)：直觀(guān)、快速。適用于稀釋的菌懸液（或孢子懸液），即液體培養(yǎng)基中菌體的計(jì)數(shù)。此法計(jì)得的是活菌體和死菌體的總和，又稱(chēng)為總菌計(jì)數(shù)法。那么如何只計(jì)數(shù)活酵母菌？選修1中還學(xué)過(guò)，只統(tǒng)計(jì)活菌數(shù)的方法---稀釋涂布平板法加入臺(tái)盼藍(lán)染液使酵母菌混合均勻，減少誤差不需要。但是有對(duì)照，時(shí)間先后已形成自身對(duì)照。需要。盡量減少誤差。對(duì)每個(gè)樣品計(jì)數(shù)三次,取其平均值。如果未震蕩，會(huì)怎樣？偏大或偏小只計(jì)相鄰兩邊及頂角的酵母菌稀釋培養(yǎng)液。稀釋的目的是便于酵母菌懸液的計(jì)數(shù)

7.對(duì)于壓在小方格界線(xiàn)上的酵母菌應(yīng)取相鄰兩邊及頂角計(jì)數(shù)。

酵母菌的種群數(shù)量在營(yíng)養(yǎng)條件有限的情況下是呈S型增長(zhǎng)。但之后會(huì)下降。0

酵母菌細(xì)胞數(shù)（×106個(gè)/mL）時(shí)間影響酵母菌的種群數(shù)量增長(zhǎng)的因素可能是什么？營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消耗、pH下降（產(chǎn)生co2）、溶氧減少、有害代謝產(chǎn)物的積累（酒精）等(2012江蘇)在實(shí)驗(yàn)中需每天定時(shí)對(duì)藻細(xì)胞進(jìn)行取樣計(jì)數(shù)，請(qǐng)回答以下問(wèn)題：①取出的樣液中需立即加入固定液，其目的是

②在計(jì)數(shù)前通常需要將樣液稀釋?zhuān)@是因?yàn)?/p>

。③將樣液稀釋100倍，采用血球計(jì)數(shù)板（規(guī)格為1mm×1mm×0.1mm）計(jì)數(shù)，觀(guān)察到的計(jì)數(shù)室中細(xì)胞分布見(jiàn)圖3，則培養(yǎng)液中藻細(xì)胞的密度是

個(gè)/mL。（2011江蘇）下圖為不同培養(yǎng)階段酵母種群數(shù)量、葡萄糖濃度和乙醇濃度的變化曲線(xiàn)，請(qǐng)回答下列問(wèn)題：

1)酵母菌種群數(shù)量從C點(diǎn)開(kāi)始下降的主要原因除葡萄糖大量消耗外，還有__________、___________。2)某同學(xué)在T3時(shí)取樣，