正確保存抗體,你了解嗎

正確保存抗體，你了解嗎？抗體保存得當(dāng)與否，直接決定了抗體的活性和使用效果！如果抗體保存得當(dāng)，大部分抗體活性都可以維持?jǐn)?shù)月甚至數(shù)年。請(qǐng)謹(jǐn)記！無論何時(shí)（請(qǐng)按照說明書推薦的保存條件正確保存抗體）1.收到抗體后請(qǐng)務(wù)必在12000rpm離心1-5分鐘后再打開管蓋進(jìn)行分裝和保存（如果抗體體積小于50ul，請(qǐng)延長離心時(shí)間至5分鐘，以保證全部抗體均離心下來）！為了昂貴&珍貴的抗體，請(qǐng)看清是12000rpm2.對(duì)于大部分抗體，比較合適的保存方式是分裝后保存在-209或-809。對(duì)絕大多數(shù)抗體來說，保存在-209是完全足夠了。沒有任何證據(jù)顯示保存在-809會(huì)有更多的好處！分裝可以最大程度的降低反復(fù)凍融對(duì)抗體活性的損害，同時(shí)也降低了由于多次從同一管中吸取抗體造成的污染可能性。分裝的量以一次實(shí)驗(yàn)用完為好，最少不能少于10ul每份。因?yàn)榉盅b體積越小，抗體的濃度越可能會(huì)受到蒸發(fā)以及管壁吸附的影響。復(fù)融后的分裝抗體如果一次用不完，將剩余母液保存在49，避免再凍起來！抗體工作液應(yīng)該當(dāng)天配制當(dāng)天用完，在49盡量不要超過1天。絕對(duì)避免將抗體保存在自動(dòng)除霜冰箱中。盡量將抗體保存在冰箱里層，而不是門上。3.大部分抗體收到后49短暫保存1-2周對(duì)抗體活性是沒有影響的。如果抗體很快（1-2周）會(huì)使用，推薦在49保存，這是為了避免反復(fù)凍融對(duì)抗體活性的損害。如果要長期保存則最好是在-209or-809。最關(guān)鍵的一點(diǎn)是要根據(jù)說明書推薦的方式來正確的保存抗體！但是，腹水形式的產(chǎn)品請(qǐng)?jiān)谑盏胶罅⒓磧銎饋?！因?yàn)樵擃惍a(chǎn)品含有大量的蛋白酶，長期在49保存會(huì)導(dǎo)致抗體的降解！4.大部分抗體的運(yùn)輸條件：一般的運(yùn)輸過程需要1-2周的時(shí)間，所以是在49的條件下來完成的。49運(yùn)輸最主要的目的是為了避免反復(fù)凍融對(duì)抗體活性的損害（如果使用干冰運(yùn)輸，那么收到時(shí)抗體是凍起來的，為了分裝就需要解凍。這就多了一次凍融的過程）。所以運(yùn)輸過程中絕對(duì)避免干冰運(yùn)輸！特殊抗體的保存條件：酶聯(lián)抗體：永遠(yuǎn)保存在49，避免凍起來。否則會(huì)導(dǎo)致酶活性的下降或者喪失。偶聯(lián)抗體：所有偶聯(lián)抗體都需要在棕色管中或使用錫箔紙避光49保存。尤其是熒光抗體，對(duì)光極為敏感，因此在所有的實(shí)驗(yàn)階段也是要避光操作的！lgG3的同型對(duì)照:永遠(yuǎn)保存在49，避免凍起來。因?yàn)槿绻霈F(xiàn)凍融過程，該抗體非常容易形成多聚體（無論是保存還是運(yùn)輸，絕對(duì)避免反復(fù)凍融），反復(fù)凍融會(huì)導(dǎo)致抗體變性，導(dǎo)致多聚體形成，從而降低抗體的結(jié)合能力！抗體保存其它相關(guān)信息:關(guān)于加入甘油保存:有些人會(huì)加50%的甘油到抗體中來避免反復(fù)凍融，甘油在-209會(huì)降低冰點(diǎn)。這對(duì)很多抗體可能是可行的。加入甘油的溶液不建議在-809保存，因?yàn)檫@已經(jīng)超過了甘油的冰點(diǎn)。如果您要加入甘油來保存抗體的話，請(qǐng)謹(jǐn)慎注意無菌操作，避免污染！關(guān)于蛋白保護(hù)劑：蛋白在高濃度時(shí)更不容易降解(1mg/ml或者更高)，這就是為什么在抗體中加入BSA之類作為穩(wěn)定劑的原因了；另一方面，加入的蛋白也可以減少抗體由于管壁吸附所造成的損失。但是如果抗體要用來標(biāo)記的話，則不能加入蛋白穩(wěn)定劑，因?yàn)檫@些穩(wěn)定劑會(huì)和抗體一起競爭結(jié)合標(biāo)記物。關(guān)于疊氮化鈉(sodiumazide)的使用：為了防止微生物污染，疊氮化鈉經(jīng)常被加入到抗體中(終濃度0.02%(w/v))在下述情況中不能使用疊氮化鈉：如果抗體用于染色或處理活細(xì)胞，用于體內(nèi)研究：疊氮化鈉在抵抗微生物的同時(shí)，對(duì)其它大部分有機(jī)物也是有毒的，因?yàn)樗钄嗔司€粒體的cytochromeelectrontransportsystem.要偶聯(lián)帶有氨基基團(tuán)的抗體：疊氮化鈉會(huì)干擾任何含有氨基基團(tuán)的偶聯(lián)，因此在進(jìn)行偶聯(lián)之前，應(yīng)將疊氮化鈉去除。偶聯(lián)后的抗體可以加入疊氮化鈉保存，但是濃度只能是0.01％。對(duì)于需要偶聯(lián)的抗體，thimerosal(merthiolate)可以替代疊氮化鈉作為保護(hù)劑！注：疊氮化鈉的去除方式：可以通過凝膠