GB/T 18645-2002動(dòng)物結(jié)核病診斷技術(shù)

ICS.11.220B41中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)GB/T18645—2002動(dòng)物結(jié)核病診斷技術(shù)Diagnostictechniquesfortuberculosisofanimal2002-02-19發(fā)布2002-05-01實(shí)施中華人民共和國發(fā)布國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局

GB/T18645-2002前本標(biāo)準(zhǔn)主要是根據(jù)世界動(dòng)物衛(wèi)生組織WorldOrganizationforAnimalHealth(英），OfficeInten-tionaldesEpizootic(法）.OIEJ1996年頒布的《診斷試驗(yàn)和疫苗標(biāo)準(zhǔn)手冊》（Manualofstandardsfordiagnostictests&.vaccines)中3.2.3、3.2.3.b的牛結(jié)核病和3.6.8的禽結(jié)核病部分的內(nèi)容制定的。考恩到我國的實(shí)際情況，對其中一些在我國還無法進(jìn)行的檢驗(yàn)技術(shù)作了刪減（如：淋巴細(xì)胞增生試驗(yàn);7-干擾素試驗(yàn)）這樣，一方面通過與國際同類要求盡可能一致，以使我國適應(yīng)國際貿(mào)易、技術(shù)和經(jīng)濟(jì)交流。另一方面.又考慮到我國的實(shí)際情況，使得技術(shù)方法具有可行性。本標(biāo)準(zhǔn)中的生物制品應(yīng)符合中華人民共和國《獸用生物制品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)》1992)的要求。本標(biāo)準(zhǔn)的附錄A、附錄B、附錄C都是標(biāo)準(zhǔn)的附錄.附錄D是提示的附錄。本標(biāo)準(zhǔn)由中華人民共和國農(nóng)業(yè)部提出。本標(biāo)準(zhǔn)由全國動(dòng)物檢疫標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會歸口本標(biāo)準(zhǔn)起草單位：中國獸醫(yī)藥品監(jiān)察所。本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：毛開榮、陳向經(jīng)、關(guān)孚時(shí)、羅玉峰

中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)動(dòng)物結(jié)核病診斷技術(shù)GB/T18645-2002Diagnostictechniquesfortuberculosisofanimal1范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了動(dòng)物結(jié)核病的檢測方法和要求本標(biāo)準(zhǔn)適用于動(dòng)物結(jié)核病檢測。定義、符號和縮略語本標(biāo)準(zhǔn)采用下列符號和縮略語：PPD:提純蛋白衍生物（purifiedproteinderivative）aTU:國際單位(internationalunit)。3細(xì)菌學(xué)檢查3.1病料的采集和處理用于細(xì)菌學(xué)檢查的材料采自淋巴結(jié)及其他組織。當(dāng)活畜有可疑的呼吸道結(jié)核、乳房結(jié)核、泌尿生殖道結(jié)核、腸結(jié)核時(shí)，其痰、乳、精液、子宮分泌物、尿和糞便可作為細(xì)菌學(xué)檢查的材料。對那些結(jié)核分枝桿菌PPD皮內(nèi)變態(tài)反應(yīng)試驗(yàn)陽性·但尸檢時(shí)無病理學(xué)病變的動(dòng)物，可從下頜、咽后、支氣管、肺(特別是肺門及肺門淋巴結(jié)）、縱隔及一些腸系膜的淋巴結(jié)采集樣品送檢。樣品應(yīng)封裝在無菌的容器內(nèi)冷藏運(yùn)送。為了提高檢出結(jié)果·樣品可采取消化濃縮法處理·處理方法見附錄A(標(biāo)準(zhǔn)的附錄)3.1.1痰對牛常可用痰進(jìn)行細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)。?？μ禈O少.宜在清晨采集。用硬橡膠管自口腔伸入至氣管內(nèi)，外端連接注射器吸取痰液。亦可取?？瘸龅奶祲K進(jìn)行檢驗(yàn)。淡樣品稀薄時(shí),可加入等量的4%～6%硫酸(見附錄A中A1)處理,如痰樣品粘稠時(shí),則加人5倍量的4%硫酸處理。充分搖勾后置37C作用20min,以3000r/min～4000r/min離心，沉淀物作染色鏡檢、培養(yǎng)和動(dòng)物試驗(yàn)。也可用2倍量15%～20%安替福民(antiformin)溶液(見附錄A中A3)處理痰液，將混合物置37C作用1h～2h后離心。以滅菌生理鹽水沖洗沉淀物幾次后.取沉淀物染色鏡檢、培養(yǎng)和動(dòng)物試驗(yàn)3.1.2乳懷疑有乳房結(jié)核時(shí)，可無菌采集乳汁進(jìn)行檢驗(yàn)(一般以擠出之最后乳汁含菌量較多,早晨擠出的乳中含菌量最高)。將乳汁分置4～6支離心管中，每管10mL.以3000r/min～4000r/min離心20min～30min,吸取上層乳脂和管底的沉淀物作染色鏡檢、培養(yǎng)和動(dòng)物試驗(yàn)。乳汁10mL加酒精和乙醚各10mL及15%～20%安替福民溶液30mL,搖勺暨37C恒溫箱內(nèi)1h～2h.取出加等量滅菌蒸留水混勾，離心沉