標(biāo)準(zhǔn)解讀
《GB/T 17778-1999 預(yù)混料中D-生物素的測(cè)定 分光光度法》是一項(xiàng)由中國(guó)發(fā)布的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn),旨在規(guī)定一種通過(guò)分光光度法來(lái)測(cè)定預(yù)混合飼料中D-生物素(也稱為維生素H或生物素)含量的方法。該標(biāo)準(zhǔn)詳細(xì)說(shuō)明了檢測(cè)流程、所需試劑、儀器設(shè)備、操作步驟以及計(jì)算方法,確保測(cè)試結(jié)果的準(zhǔn)確性和可重復(fù)性。以下是該標(biāo)準(zhǔn)的主要內(nèi)容概述:
標(biāo)準(zhǔn)適用范圍
本標(biāo)準(zhǔn)適用于預(yù)混料中D-生物素含量的測(cè)定,預(yù)混料指的是為了補(bǔ)充動(dòng)物飼料中營(yíng)養(yǎng)成分而預(yù)先配制的、含有微量營(yíng)養(yǎng)元素的混合物。
測(cè)定原理
測(cè)定基于D-生物素與某種顯色劑反應(yīng)后形成的化合物在特定波長(zhǎng)下的吸光度變化。通過(guò)建立D-生物素標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度與其濃度之間的線性關(guān)系,可以計(jì)算出樣品中未知濃度的D-生物素含量。
試劑與材料
- D-生物素標(biāo)準(zhǔn)品:用于制備標(biāo)準(zhǔn)曲線。
- 顯色劑:與D-生物素反應(yīng)產(chǎn)生有色化合物的化學(xué)試劑。
- 提取溶劑:用于從預(yù)混料中提取D-生物素。
- 緩沖液和其他輔助試劑,確保反應(yīng)條件穩(wěn)定。
儀器設(shè)備
- 分光光度計(jì):用于測(cè)量溶液的吸光度。
- 精確稱量設(shè)備:用于稱取樣品和標(biāo)準(zhǔn)品。
- 振蕩器/攪拌器:用于樣品的均勻處理。
- 容量瓶、移液管等實(shí)驗(yàn)室玻璃器皿:用于溶液的準(zhǔn)確配制和轉(zhuǎn)移。
操作步驟
- 樣品準(zhǔn)備:準(zhǔn)確稱取適量預(yù)混料樣品,使用提取溶劑進(jìn)行處理,以釋放出D-生物素。
- 標(biāo)準(zhǔn)曲線制作:制備一系列已知濃度的D-生物素標(biāo)準(zhǔn)溶液,分別加入相同量的顯色劑后,測(cè)定各標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度。
- 樣品測(cè)定:將處理后的樣品溶液同樣加入顯色劑,測(cè)定其吸光度。
- 計(jì)算:根據(jù)樣品的吸光度及標(biāo)準(zhǔn)曲線,計(jì)算出樣品中D-生物素的含量。
結(jié)果計(jì)算與表示
利用標(biāo)準(zhǔn)曲線得到的線性回歸方程,將樣品的吸光度值轉(zhuǎn)換為D-生物素的濃度,再根據(jù)樣品的處理體積和原始重量,計(jì)算出預(yù)混料中D-生物素的實(shí)際含量,通常結(jié)果以mg/kg(每千克預(yù)混料中的毫克數(shù))表示。
注意事項(xiàng)
- 實(shí)驗(yàn)過(guò)程中需嚴(yán)格控制實(shí)驗(yàn)條件,如溫度、反應(yīng)時(shí)間等,以保證結(jié)果的準(zhǔn)確性。
- 所有試劑應(yīng)為分析純或以上級(jí)別,確保實(shí)驗(yàn)無(wú)污染。
- 詳細(xì)記錄實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù),包括空白試驗(yàn)和重復(fù)試驗(yàn)的結(jié)果,以評(píng)估實(shí)驗(yàn)的精度和重復(fù)性。
如需獲取更多詳盡信息,請(qǐng)直接參考下方經(jīng)官方授權(quán)發(fā)布的權(quán)威標(biāo)準(zhǔn)文檔。
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- 被代替
- 已被新標(biāo)準(zhǔn)代替,建議下載現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)GB/T 17778-2005
- 1999-06-14 頒布
- 2000-02-01 實(shí)施
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ICS65.120B46中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB/T17778-1999預(yù)混料中d-生物素的測(cè)定分光光度法Methodfordeterminationofd-biotininpremix-Spectrophotometry1999-06-14發(fā)布2000-02-01實(shí)施國(guó)家質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局布
GB/T17778-1999本標(biāo)準(zhǔn)等效采用日本農(nóng)牧水產(chǎn)畜牧局發(fā)布并實(shí)施的飼料添加劑規(guī)格《d-生物素制劑》中的測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)第1法。在技術(shù)內(nèi)容上對(duì)日本飼料漆加劑規(guī)格《d-生物素制劑》的測(cè)定方法作了部分改動(dòng),即添加了標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制。同時(shí),按GB/T6379—1986《測(cè)試方法的精密度通過(guò)實(shí)驗(yàn)室間試驗(yàn)確定標(biāo)準(zhǔn)測(cè)試方法的重復(fù)性和再現(xiàn)性》的規(guī)定及4個(gè)質(zhì)量控制良好的實(shí)驗(yàn)室協(xié)同實(shí)驗(yàn)的結(jié)果,增設(shè)了“重復(fù)性”。本標(biāo)準(zhǔn)根據(jù)“質(zhì)技監(jiān)標(biāo)函19997178號(hào)關(guān)于標(biāo)準(zhǔn)GB/T17778—1999復(fù)合預(yù)混料中d-生物素的測(cè)定第一號(hào)修改單的函"進(jìn)行修改。本標(biāo)準(zhǔn)由全國(guó)飼料工業(yè)標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)提出并歸口。本標(biāo)準(zhǔn)由國(guó)家飼料質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)測(cè)試中心(武漢)負(fù)責(zé)起草。本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人:錢(qián)方、錢(qián)沁、楊先奎。
中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)預(yù)混料中d-生物素的測(cè)定分光光;度法GB/T17778-1999Methodfordeterminationofd-biotininpremix-Spectrophotometry范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了用-二甲氨基肉桂醛分光光度法測(cè)定飼料添加劑d生物素和預(yù)混料(維生素預(yù)混料和復(fù)合預(yù)混料)中d生物素的方法。本標(biāo)準(zhǔn)適用于飼料添加劑生物素、維生素預(yù)混料和復(fù)合預(yù)混料中生物素的測(cè)定。2方法原理將試樣中d生物素用無(wú)水乙醇提取出來(lái).在硫酸乙醇溶波中d-生物素和力-二甲氨基肉桂醛生成橙紅色化合物,在一定范圍內(nèi)顏色深淺與d-生物素含量成正比。3試劑和溶液本標(biāo)準(zhǔn)所用試劑,除特殊說(shuō)明外,均為分析純。3.1無(wú)水乙醇(GB/T678-1990)。3.2硫酸無(wú)水乙醇溶液(2+98):量取2mL硫酸和98mL無(wú)水乙醇,混勺。3.3-二甲氨基肉桂醛無(wú)水乙醇溶波(2g/L):稱取0.28→-二甲氮基肉桂醛溶于無(wú)水乙醇,用無(wú)水乙醇稀釋至100mL,混勾。3.4d-生物素標(biāo)準(zhǔn)溶液3.4.1d-生物素標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液:準(zhǔn)確稱取0.1000gd-生物素溶解于無(wú)水乙醇,定量轉(zhuǎn)入100mL棕色溶量瓶中,用無(wú)水乙酵稀釋至刻度,混勺。此液1.00mL含d-生物素1.00mg.3.4.2d-生物素標(biāo)準(zhǔn)工作溶液:準(zhǔn)確量取d-生物素標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液1.00mL于100mL容量瓶中,加無(wú)水乙醇稀釋至刻度,混勾。此液1.00mL含d-生物素10.00g。4儀器、設(shè)備4.1分光光度計(jì):1.0cm比色血,可在530nm處測(cè)定吸光度。4.2磨口平底燒瓶:200ml.。5試樣制備取具有代表性樣品至少2kg,用四分法縮分至250g,粉
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