GB/T 14926.24-2001實(shí)驗(yàn)動(dòng)物小鼠肺炎病毒檢測(cè)方法

ICS65.020.30B44中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB/T14926.24—2001代替GB/T14926.24-1994實(shí)驗(yàn)動(dòng)物小鼠肺炎病毒檢測(cè)方法Laboratoryanimal-—MethodforexaminationofPneumoniavirusofmice（PVM)2001-08-29發(fā)布2002-05-01實(shí)施中華人民共和國(guó)發(fā)布國(guó)家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局

GB/T14926.24-2001前言本標(biāo)準(zhǔn)是對(duì)GB/T14926.24—1994實(shí)驗(yàn)動(dòng)物小鼠肺炎病毒檢驗(yàn)方法》的修訂。刪除了血凝抑制試驗(yàn)檢測(cè)方法，對(duì)個(gè)別文字作了修改。本標(biāo)準(zhǔn)由中華人民共和國(guó)科學(xué)技術(shù)部提出并歸口。本標(biāo)準(zhǔn)起草單位：中國(guó)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)會(huì)。本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：屈霞琴。本標(biāo)淮于1994年1月首次發(fā)布。

中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物GB/T14926.24-2001小鼠肺炎病毒檢測(cè)方法代替GB/T14926.24-1994Laboratoryanimal--MethodforexaminationofPneumoniavirusofmice（PvM)范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了小鼠肺炎病毒(PVM)的檢測(cè)方法、試劑等本標(biāo)準(zhǔn)適用于小鼠、大鼠、地鼠、豚鼠PVM的檢測(cè)。引用標(biāo)準(zhǔn)下列標(biāo)準(zhǔn)所包含的條文，通過(guò)在本標(biāo)準(zhǔn)中引用而構(gòu)成為本標(biāo)準(zhǔn)的條文。本標(biāo)準(zhǔn)出版時(shí)·所示版本均為有效。所有標(biāo)淮都會(huì)被修訂，使用本標(biāo)準(zhǔn)的各方應(yīng)探討使用下列標(biāo)準(zhǔn)最新版本的可能性。GB/T14926.50一2001實(shí)驗(yàn)動(dòng)物酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)GB/T14926.51-2001實(shí)驗(yàn)動(dòng)物免疫酶試驗(yàn)GB/T14926.52-2001實(shí)驗(yàn)動(dòng)物免疫熒光試驗(yàn)3原理根據(jù)免疫學(xué)原理,采用PVM抗原檢測(cè)小鼠、大鼠、地鼠、豚鼠血清中PVM抗體主要試劑和器材4.1試劑：4.1.1ELISA抗原4.1.1.1特異性抗原PVM感染小鼠待發(fā)病后取肺臟,研磨.制成10%懸液,3000r/min離心10min后取上清液感染BHK21細(xì)胞,吸附1.5～2h,加維持液培養(yǎng)10～14d.當(dāng)細(xì)胞病變達(dá)十十+時(shí)收獲。凍融三次或超聲波處理后，低速離心去除細(xì)胞碎片，上清液再經(jīng)超速離心濃縮后制成ELISA抗原。4.1.1.2正?？乖瑽HK21細(xì)胞凍融破碎后·經(jīng)低速離心去除細(xì)胞碎片而獲得的上清波。4.1.2抗原片PVM感染BHK21細(xì)胞，培養(yǎng)5～7d,病變達(dá)十+～十十十時(shí),將細(xì)胞用膀酶消化分散.PBS洗滌,徐片。室溫干燥后，冷丙酮固定10min,一20℃保存4.1.3陽(yáng)性血清PVM免疫清清或SPF小鼠、大鼠、豚鼠、地鼠所獲得的