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文檔簡介

實(shí)驗一

動物細(xì)胞制片技術(shù)及減數(shù)分裂觀察一、實(shí)驗?zāi)康?/p>

1、了解動物生殖細(xì)胞的形成過程,觀察減數(shù)分裂過程中染色體的動態(tài)變化;

2、學(xué)習(xí)并掌握制片和染色技術(shù)。

二、實(shí)驗原理

減數(shù)分裂是一種特殊方式的細(xì)胞分裂,僅在配子形成過程中發(fā)生。這一過程的特點(diǎn):

1、連續(xù)進(jìn)行兩次核分裂,而染色體只復(fù)制一次,結(jié)果形成四個核,每個核只含單倍體數(shù)的染色體,即染色體數(shù)減少一半,所以稱為減數(shù)分裂;

2、前期特別長,而且變化復(fù)雜,包括同源染色體的配對、交換與分離。整個減數(shù)分裂過程可分為下列幾個時期:減數(shù)第一次分裂

前期Ι

細(xì)線期:第一次分裂開始,染色質(zhì)濃縮為幾條細(xì)而長的細(xì)線。每一條染色體已復(fù)制為二個單體,但在顯微鏡下仍看不出染色體的雙重性。(減數(shù)I前期-----細(xì)線期)偶線期:染色體形態(tài)與細(xì)線期沒有多大差別,同源染色體開始配對(聯(lián)會),出現(xiàn)聯(lián)會復(fù)合體。(減數(shù)Ι前期-----偶線期)粗線期:同源染色體配對完畢,稱雙價體,每個雙價體含有四個染色單體(四分體)。染色體繼續(xù)變短變粗。(減數(shù)Ι前期-----粗線期)雙線期:配對的同源染色體開始分開。由于非姊妹染色單體間發(fā)生過交換,因此有交叉現(xiàn)象。交叉數(shù)減少,交叉向染色體端部移動(交叉端化),染色體螺旋化程度加深。(減數(shù)Ι前期----雙線期)

濃縮期:又稱終變期,仍為n個雙價體,染色體變得更短粗。核仁核膜消失。(減數(shù)Ι前期-----濃縮期)中期Ι

:各個雙價體排列在赤道板上,紡錘體形成,兩個同源染色體上的著絲粒逐漸遠(yuǎn)離。雙價體開始分離。染色體仍為2n,每一染色體含有兩個染色單體。(減數(shù)Ι-----中期)后期Ι:兩條同源染色體分開,分別移向兩極。每一條染色體有一著絲粒,帶著兩個染色單體。每一極得到n條染色體。染色體數(shù)目減半。(減數(shù)Ι-----后期)末期Ι:染色體解旋,又呈絲狀,核膜形成,胞質(zhì)分裂,成為二個子細(xì)胞。(減數(shù)Ι-----末期)間期:在減數(shù)第二次分裂開始以前,兩個子細(xì)胞進(jìn)入間期。但有的植物如延齡草和大多數(shù)動物不經(jīng)過末期和間期,直接進(jìn)入減數(shù)第二次分裂的晚前期。(間期)前期

:染色體縮短變粗,染色體開始清晰起來。每個染色體含有一個著絲粒和縱向排列的兩條染色單體。(減數(shù)Ⅱ-----前期)中期Ⅱ:染色體排列在赤道面上,每個染色體有一個著絲粒,兩條染色單體開始分離。此時細(xì)胞的染色體數(shù)為n,每條染色體有兩條染色單體。(減數(shù)Ⅱ-----中期)減數(shù)第二次分裂后期Ⅱ:

兩條染色單體分離,移向兩極,每極含n條染色體。(減數(shù)Ⅱ-----后期)末期Ⅱ:

染色體逐漸解螺旋,變?yōu)榧?xì)絲狀,核膜重建,核仁重新形成。胞質(zhì)分裂,各成為兩個子細(xì)胞。(減數(shù)Ⅱ-----末期)

減數(shù)分裂模式圖

減數(shù)分裂結(jié)果:

一個細(xì)胞經(jīng)減數(shù)分裂形成四個子細(xì)胞,每個子細(xì)胞中有n個染色體。因為細(xì)胞分裂兩次,染色體只復(fù)制一次。三、實(shí)驗材料短角斑腿蝗(Catantops

brachycerus)精巢四、實(shí)驗儀器和試劑

儀器:冰箱,顯微鏡試劑:Carnoy固定液,1NHCL,70%乙醇,改良苯酚品紅染液

五、實(shí)驗步驟

1、采集蝗蟲:

隨蝗蟲物種的不同,采集時間有變化。

采集方法可用手抓或用網(wǎng)捕捉。如短角斑腿蝗喜溫暖,可在十月左右,在晴天陽光下的草地用掃網(wǎng)捕捉。

2、取材固定:

用鑷子夾住雄蟲尾部,向外拉??梢姷揭粓F(tuán)黃色組織塊,這就是蝗蟲的精巢。剔除精巢上的其他組織,將其放到Carnoy

固定液中固定1.5-2小時,再放入70%酒精溶液中。

3、剝曲精細(xì)管:切取較粗端,約占全長的1/3-1/2(粗端遠(yuǎn)離輸精管,細(xì)胞分裂旺盛,細(xì)端近輸精管,多已經(jīng)生成精子),棄細(xì)端,蒸餾水沖洗,吸干水分。

4、1MHCL解離2-5分鐘,蒸餾水多次沖洗(因為HCL影響染色)。

5、將材料放在載片上,滴一滴改良苯酚品紅,染15-20分鐘。

6、壓片:在材料上加蓋玻片,吸去多余染液,上覆吸水紙,用拇指壓蓋玻片。

7、鏡下觀察。

六.實(shí)驗結(jié)果繪制觀察到的減數(shù)分裂各時期、尤其是前期Ι各個時期染色體的變化圖。

七.實(shí)驗分析與討論

1、分析此次實(shí)驗成敗的原因。

2、本次實(shí)驗有哪些地方可以改進(jìn)?

八.思考題

1、減數(shù)分裂的遺傳學(xué)意義。

2、減數(shù)的機(jī)理是什么?

3、交叉和交換的關(guān)系。

九.參考文獻(xiàn)

1.劉祖洞,江紹慧,《遺傳學(xué)》,人民教育出版社,北京2.遺傳學(xué)實(shí)驗高等教育出版社3.遺傳學(xué)實(shí)驗方法和技術(shù)高等教育出版社附圖減數(shù)Ι前期----細(xì)線期減數(shù)Ι前期----偶線期減數(shù)Ι前期----粗線期減數(shù)Ι前期----雙線期減數(shù)Ι前期-----濃縮期(終變期)減數(shù)Ι-----中期減數(shù)Ι-----后期減數(shù)Ι-----末期間期減數(shù)Ⅱ-----前期減數(shù)Ⅱ-----中期減數(shù)Ⅱ-----后期減數(shù)Ⅱ-----末期減數(shù)Ι前期—細(xì)線期偶線期

粗線期雙線期

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