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實(shí)驗(yàn)三雙重染色與永久

裝片的制作授課教師：鄭磊2008.12.10實(shí)驗(yàn)?zāi)康膶W(xué)習(xí)并掌握植物制片的雙重染色法掌握徒手切片制成永久裝片的方法實(shí)驗(yàn)原理番紅-固綠對(duì)染法，是植物制片中最普遍的一種二重染色法，其染色程序簡(jiǎn)單并能清晰地顯示出細(xì)胞結(jié)構(gòu)。番紅為堿性染料，能將木質(zhì)化、角質(zhì)化、栓質(zhì)化的細(xì)胞壁，以及細(xì)胞核中的染色質(zhì)、染色體和花粉外壁等染成紅色；固綠為酸性染料，能使細(xì)胞質(zhì)及纖維素的細(xì)胞壁染成綠色。實(shí)驗(yàn)用具顯微鏡、載玻片、蓋玻片、單面刀片、雙面刀片、培養(yǎng)皿、毛筆、滴瓶、膠頭滴管、濾紙實(shí)驗(yàn)材料與試劑實(shí)驗(yàn)材料

吊蘭莖、蒜苔試劑

1%番紅水溶液、1%固綠酒精溶液實(shí)驗(yàn)方法徒手切片

將材料切成薄而透明的切片，鏡檢以選擇較理想的薄片。染色

將選好的切片置于載玻片中央，加一滴1%番紅水溶液，染色15~20min，用濾紙吸去染液，再滴蒸餾水洗去浮色。實(shí)驗(yàn)方法脫水

依次滴少許30%

50%

70%

85%

95%各等級(jí)酒精各10~15s進(jìn)行脫水，每滴一滴酒精后用濾紙吸去。復(fù)染

吸去95%酒精后，加一滴1%固綠酒精溶液，復(fù)染5~10s，再滴加95%酒精去浮色。實(shí)驗(yàn)方法透明

吸去95%酒精，滴加無水酒精，然后經(jīng)1/2無水酒精+1/2二甲苯二甲苯（兩次）每次2~3s，使材料完全透明。透明后保持二甲苯不揮發(fā)，蓋好蓋片，鏡檢。制成永久裝片

掀開蓋片，滴一滴中性樹膠，再加蓋片封片，然后置于30~35℃恒溫箱中烘干。葉的橫切玉米莖橫切南瓜莖橫切南瓜莖縱切作業(yè)制作一張合格的雙重染色切片，要求薄

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