UPLC法測定注射用頭孢噻肟鈉含量

UPLC法測定注射用頭孢噻肟鈉含量摘要：目的優(yōu)化含量測定方法，縮短注射用頭孢噻肟鈉的含量的檢測時(shí)間，提高檢驗(yàn)效率，確保樣品含量的準(zhǔn)確性。方法采用Agilent-poroshellEC-C18(120mm*50mm,2.7口m)色譜柱，柱溫30°C;以0.05mol/L磷酸鹽緩沖液-甲醇(85:15)為流動(dòng)相，等度洗脫；進(jìn)樣量2口1；檢測波長為230nm。結(jié)果頭抱噻肟的線性范圍為92.2?1383.0口g/ml；平均回收率為99%,RSD%為0.42%。結(jié)論優(yōu)化后的含量測定方法分析速度快、進(jìn)樣量小，節(jié)省溶劑、是快速分析的理想選擇。關(guān)鍵詞：UPLC；注射用頭抱噻肟鈉；含量測定DeterminationofCefotaximeSodiumforInjectionbyUPLCGaoJialu1，LiuChao2，WangNing3，YaoQingmei*ChenXi*(HainanGeneralSanYangPharmaceuticalCo.,Ltd)Abstract:ObjectiveTooptimizethemethodofcontentdetermination，sheortentheinterleafdetectionandimprovetheefficiencyofdetermination.Ensuretheaccuracyofsamplecontent.MethodsAgilentporoshellEC-C(120mm*50mm,2.7口m)Thecolumntemperaturewas30C;18Themobilephasewas0.05mol/Lphosphatebuffer(-methanol(85:15)withisocraticelution;Injectionvolume2口l；Thedetectionwavelengthwas230nm.ResultsThecalibrationcurvewaslinearovertherangeof92.2?1383.00口g/mlforCefotaximeSodium；Theaveragerecoverywas99%.Thecoefficientsofvariationwere0.42%.ConclusionTheoptimizdemethodhastheadvantagesoffastanalysisconfusion，smallinjectionvolume,savingsolvent,Itistheidealchoiceforquickanalysis.Keywords:UPLC;CefotaximeSodiumforInjection;Assay.注射用頭孢噻肟鈉收載于2020年版“中國藥典”二部，為頭孢菌素藥，是頭孢噻肟鈉的無菌粉末，用于敏感細(xì)菌所致的肺炎及其他下呼吸道感染、尿路感染、腦膜炎、敗血癥、腹腔感染、盆腔感染、皮膚軟組織感染、生殖道感染、骨和關(guān)節(jié)感染等。我司規(guī)格有1.5g和2.0g，其含量測定檢測耗時(shí)長。因此，有必要對(duì)其質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行提升研究。本研究建立UPLC法測定含量，研究表明，檢測時(shí)間明顯縮短，為其質(zhì)量控制提供簡便、快速可靠的檢測方法。1、儀器與試劑1.1儀器高效液相色譜儀：Waters-ArcACQUITY；電子天平：MettlerXS1051.2試劑超純水、無水磷酸氫二鈉、甲醇、頭孢噻肟系統(tǒng)適用性對(duì)照品、頭孢噻肟對(duì)照品、注射用頭孢噻肟鈉（三洋藥業(yè)）2、檢驗(yàn)方法2.1色譜條件色譜柱為Agilent-poroshellEC-C，120mmX50mm2.7口m；流動(dòng)相為180.05mol/L磷酸鹽緩沖液-甲醇（85:15）；流速為l.Oml/min；檢測波長230nm；柱溫30°C；進(jìn)樣量2口l2.2溶液制備2.2.1對(duì)照品溶液：取頭孢噻肟對(duì)照品適量，精密稱定，加流動(dòng)相溶解病定量稀釋制成每1ml中約含頭抱噻肟1mg的溶液;2.2.2供試品溶液：取裝量差項(xiàng)下得內(nèi)容物適量，精密稱定，加流動(dòng)相溶解病定量稀釋制成每1ml中約含頭抱噻肟1mg的溶液；系統(tǒng)適用性溶液;取頭孢噻肟系統(tǒng)適用性對(duì)照品適量，加流動(dòng)相溶解并稀釋制成每1ml中約含1mg的溶液。3、方法驗(yàn)證及結(jié)果3.1專屬性-溶劑干擾、定量限、頭抱噻肟峰與頭抱噻肟系統(tǒng)適用性出峰是否一致3.1.1溶劑干擾取本品溶劑，按第2項(xiàng)色譜條件進(jìn)樣2ul,空白溶劑在頭抱噻肟主峰位置應(yīng)無干擾，結(jié)果符合規(guī)定。3.1.2頭抱噻肟系統(tǒng)適用性試驗(yàn)取頭抱噻肟鈉系統(tǒng)適用性對(duì)照約5mg精密稱定，至5ml量瓶中，加溶劑稀釋至刻度，按第2項(xiàng)色譜條件進(jìn)樣，頭抱噻肟主峰的保留時(shí)間為2.943min。定量限（LOQ）取頭抱噻肟鈉精密稱定用溶解溶解配制成每ml含0.2口g的溶液；S/N應(yīng)在10-30；連續(xù)進(jìn)樣6針樣品的主峰的保留時(shí)間RSDW1.0%；峰面積RSDW10%；結(jié)果S/N在17.8-23.2之間，保留時(shí)間及峰面積RSD分別未0.9%和7.3%。3.2進(jìn)樣精密度。取頭抱噻肟對(duì)照品精密稱定，加流動(dòng)性制成每ml中含頭抱噻肟1mg的溶液,按2項(xiàng)色譜條件進(jìn)樣；連續(xù)進(jìn)樣5次對(duì)照品溶液的峰面積及保留時(shí)間RSDW1.0%；結(jié)果，連續(xù)進(jìn)樣5次峰面積及保留時(shí)間RSD分別為0.10%和0.055%。3.3重復(fù)性

取注射用頭抱噻肟鈉樣品，精密稱取6份，加流動(dòng)相稀釋制成每ml中含lmg的樣品，按第2項(xiàng)色譜條件進(jìn)樣，分別按平均裝量計(jì)算(平均裝量1.6083g)；6份供試品溶液頭抱噻肟含量結(jié)果RSDW2.0%；結(jié)果，6份供試品溶液按平均裝量計(jì)，平均含量為103.6%,RSD均為0.15%。3.4線性關(guān)系考察取頭抱噻肟鈉對(duì)照品50mg精密稱定，加流動(dòng)相溶解并稀釋至25ml量瓶中作為儲(chǔ)備液，分別精密量取儲(chǔ)備液0.5ml(10%)、1ml(20%)、2ml(40%)、3ml(60%)、5ml(100%)、7.5ml(150%)分別置10ml量瓶中，在設(shè)置的濃度范圍內(nèi)，以濃度為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)進(jìn)行線性回歸，相關(guān)系數(shù)R應(yīng)不小于0.998；結(jié)果，線性方程為Y=4550078.5X+100,R2=0.99923.5準(zhǔn)確度取注射用頭抱噻肟鈉精密稱定，加流動(dòng)相稀釋制成含量為80%、100%、120%的溶液，每個(gè)濃度分別配制3份，按外標(biāo)法計(jì)算9個(gè)樣品的實(shí)測濃度，并計(jì)算回收率。X100%公式：X100%回收率=要求：各濃度下的回收率均應(yīng)遵循下表(2020年版藥典四部要求)，在98%?101%之間，9個(gè)數(shù)據(jù)的RSDW2.0%。結(jié)果見表1：理論加入實(shí)際測得量(mg)量(mg)理論加入實(shí)際測得量(mg)量(mg)濃度回收率％平均回收率％RSD%80%-15.2915.1799.280%-15.5915.4899.380%-15.8115.8099.9100%19.5819.5399.7990.42100%18.8818.8399.7100%18.2518.0999.1120%23.6123.3398.81120% 23.0023.21 99.123.61100.023.61100.0結(jié)果：9份樣品平均回收率99%，RSD:0.42%。4、優(yōu)化方法與優(yōu)化前方法含量測定結(jié)果對(duì)比。隨機(jī)取3批放置48小時(shí)的樣品溶液，按第2項(xiàng)色譜條件測定，將測定結(jié)果與原色譜條件的測定結(jié)果進(jìn)行對(duì)比；結(jié)果見表2：批號(hào)HPLC法含量測定結(jié)果UPLC含量測定結(jié)果（溶液放置48h）相對(duì)偏差按平均裝量計(jì)批號(hào)1（長期6月）99.4%100.6%0.60%批號(hào)2（長期6月）99.2%100.9%0.85%批號(hào)3（長期6月）99.5%100.6%0.55%結(jié)果：方法變更后與變更前含量測定結(jié)果的相對(duì)偏差V1.0%。5、討論：注射用頭抱噻肟含量測定現(xiàn)行執(zhí)行方法為2020版中國藥典（HPLC法），色譜柱為C，規(guī)格為250mmX4.6mm,5um、進(jìn)樣量為10口1,在原方法基18礎(chǔ)上，經(jīng)過改良后的方法（UPLC法），色譜柱規(guī)格變更為120mmX50mm,2.7口m,進(jìn)樣量減少至2?1、主峰保留時(shí)間縮短為約3min（原方法主峰保留時(shí)間約為40min），比原色譜方法出峰時(shí)間大大提前，檢驗(yàn)效率大幅提高，放置48小時(shí)樣品測定結(jié)果與原色譜條件的含量測定結(jié)果對(duì)比，結(jié)果優(yōu)于HPLC法。所以，改良后的UPLC法能較好的用于注射用頭抱噻肟鈉的含量測定，對(duì)改進(jìn)方法的可操作性，提高工作效率，節(jié)約資源有較好體現(xiàn)，建議采用。參考文獻(xiàn)《中國藥典2020年版》四部9101分析方法驗(yàn)證指導(dǎo)原則及0512高效液相色譜法。MarkEB.使用超高效液相色譜ACQUITYUPLC快速分析醛酮類化合物[J].環(huán)境化學(xué),2008,27（4）：549-550.陳佳，王鋼力，姚令文，等?超高效液相色譜（UPLC）在藥物分析領(lǐng)域中的應(yīng)用[J].藥物分析雜志，2008，28（11）：1976-1981.高青，劉穎，宋彬彬，等.超高效液相色譜與高效液相色譜方法轉(zhuǎn)換及驗(yàn)證.藥物分析雜志，0254-1793（2016）07-1279-08.作者簡介：高嘉璐、1983年3月、女、漢族、遼寧清河、海南通用三洋藥業(yè)有限公司、QC主管、制藥工程師、執(zhí)業(yè)藥師、本科、研究方向：質(zhì)量控制與質(zhì)量研究、郵箱：劉超、1981年9月、男、漢族、湖北武漢、海南通用三洋藥業(yè)有限公司、研發(fā)主任工程師、制藥工程師、本科、研究方向：實(shí)驗(yàn)室管理與質(zhì)量研究、郵箱：王寧、1979年11月、女、漢、海南、海南通用三洋藥業(yè)有限公司、質(zhì)量主任工