動物細(xì)胞與組織培養(yǎng)課件

動物細(xì)胞與組織培養(yǎng)課件你還記得她嗎？“奮斗之光”講座中的南京女孩——媛媛動物細(xì)胞工程通常采用的技術(shù)手段動物細(xì)胞與組織培養(yǎng)細(xì)胞融合體細(xì)胞克隆單克隆抗體制備細(xì)胞核移植動物細(xì)胞與組織培養(yǎng)前景展望資料一：培養(yǎng)的動物細(xì)胞還可以用于檢測有毒物質(zhì)。許多致畸、致癌物質(zhì)加入培養(yǎng)液后，培養(yǎng)細(xì)胞會發(fā)生染色體結(jié)構(gòu)和數(shù)目的變異。根據(jù)變異細(xì)胞占全部培養(yǎng)細(xì)胞的百分?jǐn)?shù)，可以判斷某種物質(zhì)的毒性?，F(xiàn)在動物細(xì)胞培養(yǎng)已經(jīng)成為檢測有毒物質(zhì)的快速而靈敏的有效手段。資料二：人工關(guān)節(jié)——軟骨再生1.第一次手術(shù):從病人關(guān)節(jié)軟骨中未受力的部分，取出一片約為葡萄干大小的健康軟骨組織。2.分離山軟骨細(xì)胞并經(jīng)三星期的體外培養(yǎng)，使細(xì)胞數(shù)增加約10～20倍。3.第二次手術(shù):清理軟骨受損的部分，從下方骨頭部位取出一片約與傷口大小相同的骨膜，縫在傷口上方，再將軟骨細(xì)胞注射到骨膜下方。資料三：結(jié)果:經(jīng)過復(fù)健一年后即可恢復(fù)正常的生活。一、應(yīng)用(Why)大規(guī)模培養(yǎng)生產(chǎn)生物制品（病毒疫苗、干擾素、單克隆抗體）培養(yǎng)的動物細(xì)胞可以用于檢測有毒物質(zhì)，判斷某種物質(zhì)的毒性用于生理、病理、藥理等方面的研究，為治療和預(yù)防疾病提供理論依據(jù)作為基因工程中的受體細(xì)胞什么（What）是動物細(xì)胞培養(yǎng)如何（How）進(jìn)行動物細(xì)胞培養(yǎng)？二、過程（How）幼齡動物取動物器官和組織剪碎組織胰蛋白酶處理單個(gè)細(xì)胞細(xì)胞培養(yǎng)請同學(xué)根據(jù)視頻和圖2-10來描述細(xì)胞培養(yǎng)的基本過程：探究3、如何將動物組織分散成單個(gè)的細(xì)胞呢？2、動物細(xì)胞培養(yǎng)過程將組織分散成了單個(gè)細(xì)胞，這樣做有什么好處？4、胰蛋白酶的作用是什么呢？由此可說明細(xì)胞間的物質(zhì)是什么成份？根據(jù)圖2-10中細(xì)胞培養(yǎng)過程，回答下列問題：5、細(xì)胞膜的主要成份是什么？胰蛋白酶能將其破壞嗎？由此可見，將動物組織分散成單個(gè)細(xì)胞要注意什么問題呢？1、動物細(xì)胞培養(yǎng)取材時(shí)，一般是取胚胎組織或幼齡動物的組織或器官，請解釋原因？積極思考細(xì)胞貼壁過程細(xì)胞接觸抑制細(xì)胞接觸抑制

細(xì)胞在貼壁生長過程中，隨著細(xì)胞分裂，數(shù)量不斷增加，最后形成一個(gè)單層，此時(shí)細(xì)胞間相互接觸，細(xì)胞分裂和生長停止，數(shù)量不再增加。6、培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng)到出現(xiàn)什么現(xiàn)象時(shí)就不再分裂增殖？7、細(xì)胞出現(xiàn)此現(xiàn)象后，如果此時(shí)細(xì)胞數(shù)量并未達(dá)到人們的需求，應(yīng)該怎樣辦？分析積極思考原代培養(yǎng)：

傳代培養(yǎng)：從供體獲取組織或細(xì)胞后的初次培養(yǎng)，一般把第1代細(xì)胞的培養(yǎng)與傳10代以內(nèi)的細(xì)胞培養(yǎng)統(tǒng)稱為原代培養(yǎng)。將原代培養(yǎng)的細(xì)胞分離稀釋后轉(zhuǎn)入到新的培養(yǎng)基中繼續(xù)培養(yǎng)，稱為傳代培養(yǎng)。一般是10代以后傳到40、50代。閱讀書49頁第三段，然后回答問題8、傳代培養(yǎng)的細(xì)胞都能一直傳代下去嗎？9、有些細(xì)胞為何能一直傳代下去？10、人們在進(jìn)行藥物測試、基因表達(dá)等實(shí)驗(yàn)研究時(shí)，希望保存哪類細(xì)胞？為什么？分析歸納過程取

的組織、器官細(xì)胞懸浮液

酶

10代細(xì)胞

培養(yǎng)40-50代細(xì)胞

培養(yǎng)細(xì)胞株無限傳代細(xì)胞系單個(gè)細(xì)胞加

液遺傳物質(zhì)

改變遺傳物質(zhì)

改變動物胚胎或幼齡動物胰蛋白培養(yǎng)原代傳代未已三、動物細(xì)胞培養(yǎng)概念（What）動物細(xì)胞培養(yǎng)就是從動物機(jī)體內(nèi)取出相關(guān)的組織，將它分散成單個(gè)細(xì)胞，然后，放在適宜的培養(yǎng)基中，讓這些細(xì)胞生長和增殖。動物細(xì)胞培養(yǎng)的原理探究對于多細(xì)胞生物來說，細(xì)胞都生活在內(nèi)環(huán)境中，根據(jù)你所學(xué)的知識，認(rèn)為體外培養(yǎng)細(xì)胞應(yīng)該模擬內(nèi)環(huán)境的哪些內(nèi)容呢？4、無菌、無毒3、全部的營養(yǎng)物質(zhì)1、適宜的溫度和PH值2、必要的氣體條件（添加一定量的抗生素，定期更換培養(yǎng)液）（葡萄糖、氨基酸、無機(jī)鹽、維生素、動物血清等）37℃,O2和CO2（95%空氣和5%CO2）四、條件：五、培養(yǎng)基的類型:1、天然培養(yǎng)基：2、合成培養(yǎng)基：營養(yǎng)價(jià)值高，成分復(fù)雜成分明確，便于控制試驗(yàn)條件（必須加入動物血清）請同學(xué)們繼續(xù)看圖2-10，思考動物細(xì)胞培養(yǎng)和動物組織培養(yǎng)的主要區(qū)別？動物細(xì)胞培養(yǎng)過程需要用胰蛋白酶，而動物組織培養(yǎng)不需要。動物細(xì)胞與組織培養(yǎng)的概念：指體外模擬動物體內(nèi)環(huán)境，將動物細(xì)胞或組織在無菌、溫度適宜和營養(yǎng)充足的條件下培養(yǎng)，使其繼續(xù)生長、增殖并維持原有結(jié)構(gòu)和功能的技術(shù)。腫瘤組織或細(xì)胞＞正常組織或細(xì)胞拓展---動物細(xì)胞或組織培養(yǎng)的難易程度幼體組織或細(xì)胞＞老齡組織或細(xì)胞分化程度低的組織或細(xì)胞＞分化程度高的組織或細(xì)胞能力提升結(jié)合之前所學(xué)分析如下問題：1、在動物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，能用胃蛋白酶代替胰蛋白酶嗎？為什么？2、如果培養(yǎng)過程中，細(xì)胞發(fā)生微生物的污染原則上要如何處理？小結(jié)動物細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)用過程概念條件培養(yǎng)基類型2、在動物細(xì)胞培養(yǎng)過程中遺傳物質(zhì)發(fā)生改變的細(xì)胞是（）

A．細(xì)胞系B．細(xì)胞株C．原代細(xì)胞D．傳代細(xì)胞1、動物細(xì)胞工程技術(shù)的基礎(chǔ)是（）

A.動物細(xì)胞融合B.單克隆抗體C.胚胎移植D.動物細(xì)胞培養(yǎng)

AD課堂反饋練習(xí)3、用于動物細(xì)胞培養(yǎng)的組織和細(xì)胞大都取自胚胎或出生不久的幼齡動物的器官或組織，其主要原因是這樣的組織細(xì)胞（）

A、容易產(chǎn)生各種變異B、具有更強(qiáng)的全能性C、取材十分方便D、分裂增殖的能力強(qiáng)D4、在動物細(xì)胞培養(yǎng)的有關(guān)敘述中正確的是：（）A、動物細(xì)胞培養(yǎng)的目的只是為了獲得大量的細(xì)胞分泌蛋白B、動物細(xì)胞培養(yǎng)前要用胰蛋白酶使細(xì)胞分散C、細(xì)胞的癌變發(fā)生在原代培養(yǎng)向傳代培養(yǎng)的過渡過程中D、培養(yǎng)至50代后傳代細(xì)胞稱為細(xì)胞株B5、一般說來，動物細(xì)胞體外培養(yǎng)需要滿足以下條件（）①無毒的環(huán)境②無菌的環(huán)境③合成培養(yǎng)基需要加入血清④溫度與動物體溫相似⑤需要O2，不需要CO2⑥CO2能調(diào)節(jié)培養(yǎng)液PHA、①②③④⑤⑥B、①②③④C、①③④⑤⑥

D、①②③④⑥D(zhuǎn)6、動物細(xì)胞培養(yǎng)的特點(diǎn)（）①細(xì)胞貼壁②有絲分裂③分散生長④接觸抑制⑤減數(shù)分裂⑥原代培養(yǎng)一般傳1－10代A、①②④⑥B、②③④⑤C、①③④⑥

D、③④⑤⑥A7、下圖是動物細(xì)胞培養(yǎng)的基本過程示意圖。請據(jù)此回答：（1）容器A中放置的是動物器官或組織。它一般取自______________________。（2）容器A中的動物器官或組織首先要進(jìn)行的處理是

，然后用

酶處理，這是為了使細(xì)胞分散開來，這樣做的目的是

。（3）培養(yǎng)首先在B瓶中進(jìn)行，瓶中的培養(yǎng)基成分有__________________等。在