低分子量硫酸軟骨素的制備、抗補體活性構(gòu)效關(guān)系及治療骨性關(guān)節(jié)炎的實驗研究_第1頁
低分子量硫酸軟骨素的制備、抗補體活性構(gòu)效關(guān)系及治療骨性關(guān)節(jié)炎的實驗研究_第2頁
低分子量硫酸軟骨素的制備、抗補體活性構(gòu)效關(guān)系及治療骨性關(guān)節(jié)炎的實驗研究_第3頁
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節(jié)炎的實驗研究研究目的骨性關(guān)節(jié)炎(osteoarthritis,OA)的發(fā)病機理非常復雜,現(xiàn)在的研OAOA(chondroitinsulfate,CS)D-N-乙酰-D-半乳糖胺殘基組成的雙糖單位線性連接組成的一類糖胺聚OA其中低分子量硫酸軟骨素(1owmolecularweightchondroitinsulfate,LMWCSOA1MWCSsOALMWCSsLMWCSsLMWCSsLMWCSsOALMWCSs為了探討CSOA43CSLMWCSsLMWCSsLMWCS。LMWCSOACSCS研究方法1LMWCSs的制備及表征本研究擬采用氧化降解法、酶解法、酸降CSLMWCSs。采用傅里葉變換紅外光譜法(Fouriertransforminfraredspectroscopy,FTIR)、高效液相色譜法(highperformanceliquidchromatography,HPLC)、紫外可見光譜法、分子排阻色譜-多角度激光散射法(sizeexclusionchromatography-multianglelightscattering,SEC-MALLS核磁(ruclearmagneticresonance,NMRLMWCSs2LMWCSsLMWCSsIC50LMWCSsLMWCSs的抗補體活性之間的構(gòu)效關(guān)系進行研究,分析其構(gòu)效關(guān)系,進而選擇出一種具有LMWCS3LMWCSimmunosorbentLMWCS3(complement3,C3)沉LMWCSRT-PCR,LMWCSC3mRNA4LMWCSmeniscus,DMMOALMWCSOAOALMWCSOAELISAC5b-9C5b-95CS量(Mr)CS采用漫反射的方式采集近紅外光譜,利用溶血法測定樣品抑制替代途徑補體IC50adaptivereweighted(rondom的方法選擇有效信息建立偏最小二乘(partialleastsquare,PLS)回歸模型,采用預(yù)測集均方根誤差(root-mean-squareserrorofprediction,RMSEP)、相對分析誤差(residualpredictivedeviation,RPD)等參數(shù)對模型的預(yù)測能力進行評價。1LMWCSsCS12FTIRLMWCSsCSHPLCCSLMWCSLMWCSs含有不飽和糖醛酸結(jié)構(gòu);NMRLMWCSsLMWCSsCS多角度激光散射測定LMWCSsw)w1217Da8085DaLMWCSs.2LMWCSsLMWCSs結(jié)果表明,利用鯊魚來源的CS采用氧化降解的方法制備的LMWCS(LMWCS-S-O)具有更好的抗補體活性。對于LMWCSs與抗補體活性進行構(gòu)效分析表明:△Di-2,6diS,△Di-4,6diS和△Di-6S雙糖結(jié)構(gòu)有利于提高LMWCS的抗補體活性,而△Di-6S和△Di-OS不利于提高抗補體活性。LMWCS-S-OOALMWCS-S-OCS(CS-P)進行進一步的活性研究。LMWCSELISALMWCSC3,LMWCS-S-O400μg/mLCS(CS-P)1.2mg/mL500μg/mL,LMWCS-S-OCS-P400μg/mLLMWCS-S-O可以顯著性地抑制補體活性保護軟骨細胞;RT-PCR的結(jié)果表明,LMWCS-S-O(lipopolysaccharide,LPSC3mRNAC3LMWCSDMMLMWCS-S-OOALMWCS-S-OOA的進程;ELISALMWCS-S-OC5b-9OACS-POA560MwCS(IC50);利用因子設(shè)計實驗選擇了一階導數(shù)-SNV-SG-MCCARS47PLSRc=0.983,驗證集的

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