急性出血性結(jié)膜炎預(yù)防控制技術(shù)指南

急性出血性結(jié)膜炎預(yù)防掌握技術(shù)指南〔試行〕急性出血性結(jié)膜炎(acutehemorrhagicconjunctivitis)也稱為流行性出血性結(jié)膜炎，是主要由腸道病毒引起的，以結(jié)膜高度充血，常見結(jié)膜下出血及角膜上皮點(diǎn)狀剝脫為主要臨床特征的傳染病。一般可在2～3周痊愈，屬于自限性疾病，預(yù)后良好。該病全年均可發(fā)病，多見于夏秋季，各年齡組人群均可發(fā)病。主要通過接觸傳播，傳染性極強(qiáng)，傳播速度快，人群普遍易感，易導(dǎo)致流行或爆發(fā)。為指導(dǎo)各地做好急性出血性結(jié)膜炎疫情掌握工作，制定本指南。一、病原學(xué)腸道病毒70型〔Enterovirustype70,EV70〕和柯薩奇病毒〔Coxsackievirus〕A24型變種〔CA24v〕是急性出血性結(jié)膜炎的主要病原體。腺病毒11型也可引起該病。EV70〔Picornaviridae直徑22nm～30nm，基因組為單鏈RNA，蛋白外殼呈對(duì)稱排列的20面體，無包膜。病毒在敏感細(xì)胞胞漿內(nèi)生殖HeLa細(xì)胞培育，易分別。曾引起亞洲、中南美等地區(qū)大流行。75%的酒精是有效的消毒劑。二、流行病學(xué)〔一〕傳染源期一般為12-48小時(shí)，最長(zhǎng)可達(dá)6天。〔二〕傳播途徑也存在病毒。人群易感性混合感染。病后免疫長(zhǎng)久性差，患者病愈后，可以被不同病毒感染而再次發(fā)病，亦可能在間隔數(shù)年后被同一種病毒再次感染而發(fā)病。流行特征洲大局部國(guó)家，幾乎同時(shí)，印度尼西亞、加坡、日本、印度等也爆發(fā)流行，很快涉及亞洲大局部國(guó)家及歐洲、中東國(guó)家，澳州、美洲也有流行報(bào)道。1971年我國(guó)首次發(fā)生該病的流行，除遙遠(yuǎn)地區(qū)外，普及包括香港、臺(tái)灣在內(nèi)的全國(guó)各省市。此后，在80年月和90年月，很多國(guó)家、地區(qū)及我國(guó)均有屢次地區(qū)性小規(guī)模A24型與腸道病毒70型〔EV70〕可以同時(shí)或先后引起流行。在托幼機(jī)構(gòu)、學(xué)校、工廠企業(yè)等人群聚攏的地方易發(fā)生爆發(fā)流行。醫(yī)院門診的交*感染和口腔器械消毒不嚴(yán)格，也可造成傳播。三、病例的診斷和治療各級(jí)醫(yī)療機(jī)構(gòu)醫(yī)務(wù)人員可參考《急性出血性結(jié)膜炎診療方案〔附件1四、疫情報(bào)告情時(shí)，應(yīng)嚴(yán)格依據(jù)《中華人民共和國(guó)傳染病法》和《突發(fā)公共衛(wèi)生大事與傳染病疫情監(jiān)測(cè)信息報(bào)告治理方法》的規(guī)定，進(jìn)展疫情報(bào)告。五、流行病學(xué)調(diào)查危急因素，說明疾病傳播的特點(diǎn)，以提高疫情掌握措施的針對(duì)性。六、試驗(yàn)室檢測(cè)測(cè)工作，把握流行毒株的特征。標(biāo)本的采集、包裝、運(yùn)送和檢測(cè)可參照《急性出血性結(jié)膜炎試驗(yàn)室檢測(cè)方〔附件2。七、預(yù)防掌握措施的同時(shí)，樂觀開展安康教育，指導(dǎo)公眾做好個(gè)人預(yù)防，保持良好個(gè)人衛(wèi)生習(xí)慣?！惨弧硨?duì)病人進(jìn)展標(biāo)準(zhǔn)治療，防止眼部并發(fā)癥發(fā)生，病人一般不需住院治療。〔二〕病人病后7～10天內(nèi)，應(yīng)盡量居家治療休息，削減公共場(chǎng)所活動(dòng)?！踩巢∪私佑|過的物品應(yīng)擦拭消毒、煮沸消毒或開水澆燙。病人的洗漱用品要嚴(yán)格做到與其他*〔四制度。一旦覺察病人，應(yīng)要求病人脫離學(xué)習(xí)、工作環(huán)境，居家治療休息。〔五〕醫(yī)療機(jī)構(gòu)應(yīng)加強(qiáng)預(yù)檢分診和消毒措施的落實(shí)。醫(yī)務(wù)人員檢治病人后，必需認(rèn)真消毒雙手，*感染。加強(qiáng)對(duì)游泳池、浴池、理發(fā)室、旅館的衛(wèi)生治理與監(jiān)視。勸阻患者進(jìn)入公共場(chǎng)所或參與社交活動(dòng)。爆發(fā)流行期間，相關(guān)治理部門可依據(jù)疫情掌握需要，關(guān)閉游泳池、浴池等公共場(chǎng)所。尋常要加強(qiáng)安康教育，普及手衛(wèi)生和愛眼護(hù)眼學(xué)問，養(yǎng)成勤洗手、不共用毛巾臉盆等個(gè)人生活用品的衛(wèi)生習(xí)慣?！舶恕骋话悴灰顺惺芗w滴眼藥等方式，進(jìn)展該病的群體預(yù)防。附件：附件1急性出血性結(jié)膜炎診療方案附件2急性出血性結(jié)膜炎試驗(yàn)室檢測(cè)方案附件1

依據(jù)流行病學(xué)、病史、臨床病癥、體征，結(jié)合一般試驗(yàn)室檢查對(duì)急性出血性結(jié)膜炎作出臨床診斷?！惨弧吃\斷依據(jù)流行病學(xué)史本病易導(dǎo)致流行或爆發(fā)，以夏秋季常見。患者多有明顯的接觸感染史。安康人可經(jīng)接觸患者眼局部泌物污染的手、物品或水而感染。臨床表現(xiàn)紅、眼刺痛、畏光、流淚等刺激病癥；早期分泌物為水性，重者帶淡紅色，繼而為粘液性。脫，熒光素染色后裂隙燈檢查可見角膜布滿散在細(xì)小點(diǎn)狀著染。試驗(yàn)室檢測(cè)結(jié)膜細(xì)胞學(xué)檢查見單核細(xì)胞反響為主，以排解細(xì)菌性感染。結(jié)膜拭子涂擦或結(jié)膜刮取物培育分別出病毒，并應(yīng)用微量中和試驗(yàn)鑒定為CA24vEV70〔見23

結(jié)膜細(xì)胞涂片或細(xì)胞培育物涂片間接免疫熒光技術(shù)檢測(cè)，查見CA24vEV70抗原〔2。CA24vEV70抗體比急性期血清抗體滴度上升≥4〔見〔二〕診斷原則依據(jù)流行病學(xué)、病史、臨床病癥、體征，結(jié)合結(jié)膜細(xì)胞學(xué)檢查作出臨床診斷。依據(jù)病原學(xué)檢查分別出CA24v或EV70病毒；或間接免疫熒光技術(shù)檢測(cè)出病毒抗原；或雙相血清進(jìn)展確診?！菜摹吃\斷標(biāo)準(zhǔn)疑似病例：應(yīng)同時(shí)符合1和2；臨床診斷病例：應(yīng)同時(shí)符合1、2和3.1；確診病例：應(yīng)同時(shí)符合1、2及3.2、3.3、3.4中任何一項(xiàng)。(五)鑒別診斷與流行性角結(jié)膜炎、急性卡他性結(jié)膜炎、衣原體性結(jié)膜炎相鑒別。強(qiáng)，可爆發(fā)或小范圍流行，常年均可見散發(fā)病例。可先有上呼吸道感染、發(fā)熱史。結(jié)膜明顯充血、水腫，7～10可持續(xù)數(shù)月或數(shù)年后消逝或遺留云翳。桿菌，流感嗜血桿菌、金黃色葡萄球菌等。屬接觸傳染，表現(xiàn)為結(jié)膜充血、水腫，粘液膿性分泌物，一般不涉及角膜?結(jié)膜可消滅小點(diǎn)狀出血。33～4天。表現(xiàn)為眼瞼紅腫、結(jié)膜高度充血、乳頭增生、穹隆部布滿濾泡??泌物或污染的游泳池水引起。病程持續(xù)數(shù)周至數(shù)月。二、治療二、治療3外表潤(rùn)滑劑或人工淚液促進(jìn)上皮修復(fù)及保護(hù)上皮。有前房炎癥時(shí)加用散瞳劑或非甾體抗炎藥。眼分泌物多時(shí)，可用溫生理鹽水或3%硼酸液清洗結(jié)膜囊。三、預(yù)后1～3周，一般預(yù)后良好，但偶有消滅神經(jīng)系統(tǒng)并發(fā)癥。附件2

急性出血性結(jié)膜炎的試驗(yàn)室檢測(cè)一、病毒的分別與鑒定〔一〕標(biāo)本的采集、運(yùn)送和保存患眼結(jié)膜囊淚液、分泌物是分別CA24v、EV70的主要標(biāo)本。標(biāo)本采集應(yīng)在起病1～3天以內(nèi)。Eagle液或%水解乳蛋白Hanks2mL〔-20℃～-70℃〕凍懟?/SPAN>〔二〕病毒分別10％青霉素、鏈霉素〔原濃度青1u/mL，置4℃作用4h細(xì)胞培育用生長(zhǎng)單層的HeLa10%牛血100u/mL，鏈霉素100u/mL，pH7.2-7.4。管。余標(biāo)本液置-20℃或-70℃凍存。細(xì)胞比照管4管，每管加維持液1.0mL。 37℃溫箱靜置培育。每日光學(xué)顯微鏡下觀看細(xì)胞病變。3-4天更換維持液一次，連續(xù)觀看7天。細(xì)胞病變，表現(xiàn)為細(xì)胞圓縮、分散、胞漿內(nèi)顆粒增加，最終細(xì)胞自管壁脫落，為分別陽(yáng)性結(jié)果。細(xì)胞病變達(dá)“+++-++++”時(shí)，將細(xì)胞收留凍存于-20℃或-70℃，備TCID50滴定及病毒定消滅后-20℃或-70℃凍存。第1代培育培育7日不消滅細(xì)胞病變時(shí)連續(xù)盲傳2代，如仍無細(xì)胞病變則分別結(jié)果為陰性。 〔三〕病毒TCID50滴定3次。2023rpm10Eagle10倍系列稀釋為10-1至10-8病毒液，各參加細(xì)胞板內(nèi)，每孔25μl，每稀釋度4孔細(xì)胞。每孔加細(xì)胞懸液25μl，同時(shí)設(shè)細(xì)胞比照〔25μl稀釋液+25μl37℃7細(xì)胞病變。按Reed-MuenchTCID50?！菜摹巢《捐b定〔微量中和試驗(yàn)〕將CA24v或EV70的標(biāo)準(zhǔn)血清稀釋至20個(gè)單位〔例如：血清效價(jià)為1:160時(shí)，進(jìn)展1:8稀釋。在96孔細(xì)胞培育板中每孔參加20個(gè)單位的標(biāo)準(zhǔn)抗血清25μl100個(gè)TCID50病毒25μl，37℃作用1HeLa25μl。同時(shí)設(shè)以下比照：25μl；25μl；

陽(yáng)性比照：加100TCID50病毒25μl、稀釋液25μl25μl；陰性比照：加稀釋液50μl25μl；陰性血清比照：每孔加100個(gè)TCID50病毒25μl、不含特異性抗體的血清25μl將細(xì)胞板輕輕搖勻，37℃、5％CO2溫箱培育7天。和，以此鑒定病毒。二、間接免疫熒光試驗(yàn)法〔一〕眼結(jié)膜細(xì)胞涂片用棉拭子取結(jié)膜細(xì)胞，涂于清潔的玻片上，室溫枯燥，冷丙酮于4℃固定10min。一個(gè)患者標(biāo)本作兩個(gè)涂片，分別用抗CA24vEV70單克隆抗體作間接免疫熒光試驗(yàn)，檢查結(jié)膜細(xì)胞中的病毒抗原?！捕臣?xì)胞培育物涂片眼拭子標(biāo)本接種于細(xì)胞培育管中，消滅可疑細(xì)胞病變時(shí)，取其中一管用毛細(xì)吸管吹打下分別用抗CA24VEV70單克隆抗體作間接免疫熒光試驗(yàn)檢查病毒抗原，既可以確定分別是否為陽(yáng)性，又可以準(zhǔn)時(shí)鑒定出病毒型別?！踩抽g接免疫熒光試驗(yàn)法上述結(jié)膜細(xì)胞涂片或病毒分別涂片，分別加適當(dāng)稀釋的抗CA24vEV70單克隆抗體，將玻片置于37℃濕盒內(nèi)30min。取玻片用pH7.2-7.4PBS3次，每次3min-5min。加適當(dāng)稀釋的抗鼠IgG熒光素結(jié)合物，置于37℃濕盒內(nèi)30min。取出玻片，同上法用P.B.S3次，加50P.B.S胞漿內(nèi)見黃綠色熒光為陽(yáng)性。在試驗(yàn)中設(shè)