免疫凝集試驗

免疫凝集試驗第一頁，共五十三頁，2022年，8月28日

教學(xué)目的掌握：直接凝集反應(yīng)和間接凝集反應(yīng)的試驗原理、類型；抗球蛋白參與的試驗原理熟悉：凝集反應(yīng)的特點、應(yīng)用第二頁，共五十三頁，2022年，8月28日第一節(jié)免疫凝集試驗的基本原理凝集反應(yīng)(agglutinationreaction)

是指細菌和紅細胞等顆粒性抗原或表面包被可溶性抗原（或抗體）的顆粒性載體與相應(yīng)抗體（或抗原）發(fā)生特異性結(jié)合后，在適當(dāng)電解質(zhì)存在下，出現(xiàn)肉眼可見的凝集現(xiàn)象。第三頁，共五十三頁，2022年，8月28日分兩個階段：①抗原抗體的特異性結(jié)合階段②出現(xiàn)肉眼可見的凝集現(xiàn)象第一節(jié)免疫凝集試驗的基本原理第四頁，共五十三頁，2022年，8月28日第五頁，共五十三頁，2022年，8月28日可見反應(yīng)形成第六頁，共五十三頁，2022年，8月28日第二節(jié)直接免疫凝集試驗直接凝集反應(yīng)(directagglutination)細菌、螺旋體、紅細胞等顆粒性抗原，在適當(dāng)電解質(zhì)參與下直接與相應(yīng)抗體結(jié)合出現(xiàn)肉眼可見的凝集現(xiàn)象。第七頁，共五十三頁，2022年，8月28日一、玻片凝集試驗

(slideagglutinationtest)YYY+第八頁，共五十三頁，2022年，8月28日第九頁，共五十三頁，2022年，8月28日紅細胞懸液BA紅細胞血型鑒定第十頁，共五十三頁，2022年，8月28日

方法評價:定性試驗簡便和快速敏感度低

臨床應(yīng)用:菌種鑒定血清學(xué)分型血型鑒定第十一頁，共五十三頁，2022年，8月28日

在試管內(nèi)顆粒性抗原直接與抗體結(jié)合，在電解質(zhì)的作用下，出現(xiàn)肉眼可見的凝集現(xiàn)象。二、試管凝集試驗第十二頁，共五十三頁，2022年，8月28日試管凝集試驗第十三頁，共五十三頁，2022年，8月28日

免疫血清12310

1：10陰性對照

………血清稀釋度1:201:401:80步驟：1）加生理鹽水0.5ml2）依次倍比稀釋免疫血清

3）加相同濃度的細菌懸液0.5ml第十四頁，共五十三頁，2022年，8月28日

方法評價：半定量試驗簡便、快速敏感度低可有假陽性

臨床應(yīng)用：WidalreactionWeil-felixreactionWrighttest:布魯菌病交叉配血試驗第十五頁，共五十三頁，2022年，8月28日

第三節(jié)間接免疫凝集試驗間接免疫凝集試驗(indirect

agglutination)

將可溶性抗原或抗體吸附于顆粒性載體表面，然后與相應(yīng)的抗體或抗原反應(yīng)，在電解質(zhì)的作用下，出現(xiàn)肉眼可見的凝集現(xiàn)象。第十六頁，共五十三頁，2022年，8月28日正向間接免疫凝集試驗反向間接免疫凝集試驗間接免疫凝集抑制試驗協(xié)同免疫凝集試驗一、間接免疫凝集試驗的類型第十七頁，共五十三頁，2022年，8月28日抗原致敏載體--檢測抗體（一）正向間接免疫凝集試驗第十八頁，共五十三頁，2022年，8月28日（一）正向間接免疫凝集試驗

特點：簡便快速，敏感性和特異性均高，成本低廉。應(yīng)用：傷寒沙門菌的多糖抗原致敏綿羊紅細胞測傷寒抗體?？乖贵w載體顆?？乖旅纛w粒第十九頁，共五十三頁，2022年，8月28日（二）反向間接免疫凝集試驗用抗體致敏載體----檢測抗原第二十頁，共五十三頁，2022年，8月28日（二）反向間接免疫凝集試驗應(yīng)用：檢測HbsAg、AFP等。特點：本方法快速、敏感性高、特異性強。

抗體抗原載體顆?？贵w致敏顆粒

第二十一頁，共五十三頁，2022年，8月28日（三）間接免疫凝集抑制試驗用抗原致敏載體--檢測抗原第二十二頁，共五十三頁，2022年，8月28日（三）間接免疫凝集抑制試驗

+

說明標(biāo)本中不存在相應(yīng)抗原

—

說明標(biāo)本中含有相應(yīng)抗原第二十三頁，共五十三頁，2022年，8月28日

抗原抗原致敏顆粒A抗體抗原抗體不凝集復(fù)合物抗原致敏顆粒無抗原

B抗體游離抗體凝集

第二十四頁，共五十三頁，2022年，8月28日

結(jié)果判定試驗結(jié)果+(凝集)--(不凝集)

檢測結(jié)果--+第二十五頁，共五十三頁，2022年，8月28日SPA:SPA-IgGFc;SPA抗體致敏----測抗原反向間接凝集反應(yīng)（四）協(xié)同免疫凝集試驗第二十六頁，共五十三頁，2022年，8月28日（四）協(xié)同免疫凝集試驗載體：金黃色葡萄球菌。優(yōu)點：特異、靈敏、簡便、快速。應(yīng)用：可用于細菌、病毒、毒素及各種可溶性抗原的快速檢測。第二十七頁，共五十三頁，2022年，8月28日第二十八頁，共五十三頁，2022年，8月28日

載體種類：常用的載體有動物或人紅細胞、聚苯乙烯膠乳顆粒、明膠顆粒和活性炭等。第二十九頁，共五十三頁，2022年，8月28日二、間接免疫血凝試驗第三十頁，共五十三頁，2022年，8月28日

（一）載體：是以紅細胞作為載體的間接免疫凝集試驗。常用的載體有：綿羊、家兔、雞紅細胞和O型人紅細胞。二、間接免疫血凝試驗第三十一頁，共五十三頁，2022年，8月28日（二）致敏

蛋白質(zhì)致敏紅細胞的方法有：

直接法和間接法。（三）血凝試驗微量滴定板或試管標(biāo)本倍比稀釋（1：64）1滴

+0.5%致敏紅細胞懸液1滴充分混勻室溫1-2h第三十二頁，共五十三頁，2022年，8月28日血凝反應(yīng)強度示意圖第三十三頁，共五十三頁，2022年，8月28日二、間接免疫血凝試驗載體：紅細胞優(yōu)點：紅細胞來源廣，價格低。該試驗為最經(jīng)典的抗原抗體反應(yīng)之一。應(yīng)用：常用于測定抗核抗體、類風(fēng)濕因子等。

第三十四頁，共五十三頁，2022年，8月28日三、顆粒免疫凝集試驗（一）膠乳顆粒凝集試驗第三十五頁，共五十三頁，2022年，8月28日（一）膠乳顆粒凝集試驗載體：聚苯乙烯膠乳優(yōu)點：性能穩(wěn)定，均一性好。缺點：敏感度不及血凝試驗。應(yīng)用：臨床常用于檢測抗溶血素0

和類風(fēng)濕因子等。第三十六頁，共五十三頁，2022年，8月28日第三十七頁，共五十三頁，2022年，8月28日（二）明膠顆粒凝集試驗（三）炭顆粒凝集試驗（四）甲苯胺紅顆粒凝集試驗第三十八頁，共五十三頁，2022年，8月28日第四節(jié)

抗球蛋白紅細胞免疫凝集試驗

(antiglobulintest)抗球蛋白試驗又稱Coombs試驗第三十九頁，共五十三頁，2022年，8月28日一、直接Coombs試驗檢測紅細胞上抗體不完全抗體第四十頁，共五十三頁，2022年，8月28日一、直接Coombs試驗

抗球蛋白抗體

抗膜抗原的抗體凝集結(jié)合在紅細胞表面第四十一頁，共五十三頁，2022年，8月28日第四十二頁，共五十三頁，2022年，8月28日

可用玻片法定性，也可用試管法半定量分析。臨床應(yīng)用：新生兒溶血癥、特發(fā)性自身免疫性貧血、自身免疫性溶血癥、和醫(yī)源性溶血性疾病等的檢測。第四十三頁，共五十三頁，2022年，8月28日二、間接Coombs試驗檢測血清中的抗紅細胞抗體第四十四頁，共五十三頁，2022年，8月28日二、間接Coombs試驗檢測血清中游離的不完全抗體標(biāo)本中不完全抗體抗球蛋白抗體具有特異抗原的紅細胞凝集

第四十五頁，共五十三頁，2022年，8月28日第四十六頁，共五十三頁，2022年，8月28日

臨床應(yīng)用：

1.檢測母體Rh(D)抗體，以便盡早發(fā)現(xiàn)和避免新生兒溶血癥發(fā)生。

2.輸血前交叉配血或不相容輸血后抗體檢測。第四十七頁，共五十三頁，2022年，8月28日

第五節(jié)自身紅細胞凝集試驗

與一般間接免疫血凝試驗不同之處在于反應(yīng)中的紅細胞是未經(jīng)致敏的受檢者新鮮紅細胞。

第四十八頁，共五十三頁，2022年，8月28日第六節(jié)免疫凝集試驗的臨床應(yīng)用一、直接免疫凝集試驗的臨床應(yīng)用

1、玻片凝集試驗:定性檢測，如細菌菌種鑒定及分型、ABO血型鑒定等

2、試管凝集試驗:半定量檢測，如輔助診斷傷寒、副傷寒的肥達試驗等。

第四十九頁，共五十三頁，2022年，8月28日

第六節(jié)免疫凝集試驗的臨床應(yīng)用二、間接免疫凝集試驗的臨床應(yīng)用（一）抗原的檢測病原體可溶性抗原、各種蛋白質(zhì)檢測（二）抗體的檢測檢測細菌、病毒等產(chǎn)生的抗體、自身免疫病抗體、超敏反應(yīng)抗體等第五十頁，共五十三頁，2022年，8