分子生物學(xué)復(fù)習(xí)

分子生物學(xué)復(fù)習(xí)題注意：請參照歷年題型復(fù)習(xí)（有判斷、填空、名詞解釋、看圖、問答等）第二章的復(fù)制與修復(fù)名詞解釋：⑴復(fù)制起點(diǎn)（ ）： 復(fù)制是從 分子上特定位置開始，此位置稱復(fù)制起點(diǎn)，是 復(fù)制所必需的一段特殊的 序列。⑵復(fù)制叉： 正在復(fù)制的分叉部位稱為復(fù)制叉（ ）⑶復(fù)制眼：復(fù)制的 （尤其是雙向復(fù)制）在電鏡下象只眼睛稱復(fù)制眼（泡）⑷復(fù)制子：基因組中具有一個復(fù)制起點(diǎn)和一個復(fù)制終點(diǎn)并能在細(xì)胞中自主復(fù)制的單位。⑷：解旋酶，引發(fā)體成員，使復(fù)制叉形成，并在以后結(jié)合于一個復(fù)制叉，推動復(fù)制叉向前延伸（ c⑸滾筒式復(fù)制：一種單向復(fù)制的特殊方式，一般是環(huán)狀單鏈分子在復(fù)制過程中先形成共價(jià)閉環(huán)的雙鏈分子（復(fù)制型），然后其正鏈在特定位置切開，游離出一個末端，然后在聚合酶催化下，以環(huán)狀負(fù)鏈為模板從正鏈末端加入脫氧核苷酸使鏈不斷延長，通過滾動而合成出新的正鏈。⑹型：一種單向復(fù)制的特殊方式，雙鏈在固定點(diǎn)解開進(jìn)行復(fù)制，但兩條鏈的合成高度不對稱，一條鏈先復(fù)制，另一條保持單鏈而被取代，在電鏡下看呈環(huán)型。待一條鏈復(fù)制到一定程度露出另一條鏈的復(fù)制起點(diǎn)，另一條鏈才開始復(fù)制。⑺0式復(fù)制：環(huán)狀 的一種雙向復(fù)制方式，雙鏈從起點(diǎn)處解開并雙向復(fù)制，呈e型狀，直到復(fù)制終點(diǎn)。⑻端粒：真核生物線性染色體的兩個末端具有的特殊結(jié)構(gòu)，由許多成串短的重復(fù)序列組成。⑼修復(fù)： 受到嚴(yán)重?fù)p傷，細(xì)胞處于危急狀態(tài)時所誘導(dǎo)的一種 修復(fù)方式。修復(fù)結(jié)果只是能維持基因組完整性，但留下的錯誤較多，又稱為錯誤傾向修復(fù)，使細(xì)胞有較高的突變率。修復(fù)分四個階段：誘導(dǎo)前期 正常生長。誘導(dǎo)因素作用于 ，正常復(fù)制作用受抑制，產(chǎn)生誘變信號缺口， 等，是損傷因子第二信使。）誘導(dǎo)過程（裂解的 又反饋?zhàn)饔糜?增強(qiáng)其活性，使 全部水解。原來受 蛋白阻遏的基因去抑制，結(jié)構(gòu)基因活化，提高修復(fù)。）終止隨誘導(dǎo)產(chǎn)物濃度增高，損傷修復(fù)，又導(dǎo)致上升， 作為阻遏物又關(guān)閉操縱子，終止特點(diǎn)：1、易錯的修復(fù)2、 校對功能降低產(chǎn)生多種突變體，是由于 修復(fù)II參與修復(fù)2名詞對比⑴引物酶和引發(fā)體：引物酶即 ，是負(fù)責(zé) 復(fù)制起始階段 引物合成的酶；引發(fā)體指由 解螺旋酶和 引物合成酶構(gòu)成了復(fù)制體的一個基本功能單位。⑵ ip和 I： m是由多個亞基組成的蛋白質(zhì)，真正負(fù)責(zé)從新合成 的復(fù)制酶； I是一個多功能酶，兼有聚合酶、3 ,、 ’ 3核酸外切酶的活性，主要起修復(fù)酶作用。復(fù)制的先導(dǎo)鏈和隨從鏈： 復(fù)制時以35鏈為模板連續(xù)合成的子鏈；而以5'鏈為模板的不連續(xù)合成的子鏈為隨后鏈。簡述同位素標(biāo)記、密度梯度離心技術(shù)在分子生物學(xué)研究中的應(yīng)用⑴標(biāo)記研究 的半保留復(fù)制：把細(xì)菌放在含 的培養(yǎng)液中培養(yǎng)若干代，分離出的是含的“重”，密度比一般含的 高。用密度梯度離心法， 形成的致密帶位于普通 所形成的致密帶的下方。把含一的細(xì)菌放回含普通的培養(yǎng)液中培養(yǎng)。細(xì)菌在營養(yǎng)條件充足時，分鐘就可以生長成新一代。提取子一代的再作密度梯度離心分析，發(fā)現(xiàn)其致密帶介于重帶與普通帶之間，看不到有單獨(dú)的重帶或普通帶。實(shí)驗(yàn)結(jié)果說明：子一代 雙鏈中有一股是單鏈，而另一股是單鏈。前者是從親代接受和保留下來的，后者則是完全新合成的。密度梯度離心實(shí)驗(yàn)，完全支持半保留復(fù)制的設(shè)想。含 的細(xì)菌在普通培養(yǎng)液中繼續(xù)培育出子二代，其則是中等密度的與普通各占一半這也進(jìn)一步證明復(fù)制是采取半保留式的。實(shí)驗(yàn)還可按子代、子代……進(jìn)行下去，一則按/8/……的幾何級數(shù)逐漸被“稀釋”掉。⑵標(biāo)記研究 的半不連續(xù)復(fù)制，即連接酶突變核酸序列特點(diǎn)研究等：用脈沖標(biāo)記大腸桿菌培養(yǎng)物，優(yōu)先標(biāo)記的是新合成的。新合成的大多數(shù)是一些含有 核苷酸的短片段，若再將菌放到不帶的培養(yǎng)基中保溫，發(fā)現(xiàn)出現(xiàn)在大片斷中了。若用連接酶突變的菌株作以上測試，一直出現(xiàn)在小片段中，說明 的復(fù)制是不連續(xù)的。4舉例說明染色體外遺傳元件的不同復(fù)制機(jī)制O型、型、滾筒型）有些病毒（如腺病毒、①噬菌體等）及線粒體 的復(fù)制是單向進(jìn)行的，滾筒式屬單向復(fù)制。質(zhì)粒整合前為e式或滾筒式復(fù)制，整合后為一個復(fù)制子，質(zhì)粒為雙向復(fù)制e式。真核細(xì)胞內(nèi)線粒體 的復(fù)制方式為環(huán)復(fù)制（復(fù)制）形式。環(huán)復(fù)制特點(diǎn)是兩條鏈的不同步復(fù)制。詳見名詞解釋。.通過什么實(shí)驗(yàn)證明 合成岡崎片段是以 為引物。以a標(biāo)記未標(biāo)記 為底物，引發(fā)合成后用稀堿處理，水解和 的連接處，使上的轉(zhuǎn)移到了上，證明為引物。.生物體內(nèi)哪些機(jī)制保證了DNA復(fù)制的保真性.DNA聚合酶的校對作用；NA引物起始復(fù)制可減少復(fù)制錯誤；修復(fù)系統(tǒng)有多種機(jī)制光修復(fù)、切除修復(fù)、錯配修復(fù)、易錯修復(fù)、 修復(fù)和酶。7簡要說明沉默突變、致死突變、滲漏突變、進(jìn)化突變的原因⑴沉默突變：主要因?yàn)槊艽a子的簡并性，點(diǎn)突變不引起氨基酸的變化；或者個別氨基酸改變?yōu)榻Y(jié)構(gòu)和性質(zhì)相似的氨基酸，則不影響表形，即基因型（ ）改變表現(xiàn)型（ ）不變。⑵致死突變：關(guān)鍵氨基酸改變，如酶的活性中心突變，或者發(fā)生無義突變，使編碼的蛋白質(zhì)功能喪失，影響生物存活。⑶滲漏突變：某個氨基酸改變，但基因產(chǎn)物并無重大改變，如酶的 和 a改變。可使生物適應(yīng)環(huán)境或喪失某些功能，可產(chǎn)生新種。⑷進(jìn)化突變：發(fā)生了有利于物種生存的結(jié)果，使生物進(jìn)化。.什么叫端粒？端粒的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)，說明端粒復(fù)制的特點(diǎn)？端粒酶在何種細(xì)胞中才有活性？⑴端粒位于真核生物染色體DNA的末端特定的序列結(jié)構(gòu)。⑵端粒是由簡單而串聯(lián)重復(fù)的序列組成的。端粒DNA序列有取向性可以與由蛋白質(zhì)和NA組成的端粒酶結(jié)合配對，以NA為模板進(jìn)行類似逆轉(zhuǎn)錄合成DNA,向5'-3’延伸端粒至模板NA末端后，延長的DNA末端與NA模板解離，端粒酶移動，重新定位于延長后的DNA3‘端，開始下一輪延長過程，如此反復(fù)可達(dá)數(shù)百次，以對抗DNA復(fù)制過程中5’引物消后無法補(bǔ)齊造成的染色體逐漸縮短，維持染色體的長度。⑶端粒酶在生殖細(xì)胞中起作用，在體細(xì)胞中無活性或活性低。9DNA復(fù)制中都包括那些酶系統(tǒng)和蛋白因子，這些酶在復(fù)制中的各自作用是什么？是通過那些試驗(yàn)現(xiàn)象發(fā)現(xiàn)的？（）解旋酶：DNA復(fù)制時，解旋酶在A的作用下可促使DNA母鏈不斷解開形成單鏈；單鏈DNA結(jié)合蛋白：防止單鏈DNA形成發(fā)卡結(jié)構(gòu)，保持伸展?fàn)顟B(tài)，保護(hù)單鏈DNA不被水解；DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶使DNA磷酸二酯鍵單鏈斷裂斷裂，形成DNA c使DNA可以旋轉(zhuǎn)以釋放解鏈時的張力；DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶i使DNA復(fù)制完畢后“互鎖”的兩個子代環(huán)狀DNA解離；引物酶：引物酶以單鏈DNA為模板，利用核糖核苷酸合成NA乍為DNA合成的引物；DNA聚合酶的功能a.5'-3'聚合作用，b.3‘一5’外切酶活性（校對作用），c.5‘一3’外切酶活性（切除修復(fù)作用）；DNA聚合酶 的功能：主要是合成新的DNA鏈；DNA聚合酶的功能：主要與修復(fù)有關(guān)；DNA連接酶，借助A水解提供的能量，催化DNA單鏈 由勺5'端與3’端生成磷酸二酯鍵。⑵DNA聚合酶i可以用N合成DNA鏈，并且該酶突變使菌易受環(huán)境影響而突變；聚合酶I聚合酶的合成速度不能滿足菌生長的需要，并且 聚合酶突變的菌仍然可以復(fù)制n引物酶：通過以a 標(biāo)記未標(biāo)記 為底物，引發(fā)合成后用稀堿處理，水解 和的連接處，使 上的轉(zhuǎn)移到了 上，證明 為引物，從而發(fā)現(xiàn)引物酶。第三章重組名詞解釋：1同源重組：同源重組（交換 是兩條具有同源序列的 靠近時所發(fā)生的 交換。結(jié)構(gòu)：兩個 分子交叉重組時，在連接處則形成一個“四螺旋”作為中間物。這種結(jié)構(gòu)稱為結(jié)構(gòu)（交叉結(jié)構(gòu)）。細(xì)菌的接合作用（ ）a細(xì)菌的細(xì)胞相互接觸時遺傳信息可以由一個細(xì)胞轉(zhuǎn)移到另一個細(xì)胞，稱為接合作用。性因子或因子：能夠促使染色體基因轉(zhuǎn)移的接合質(zhì)粒稱為致育因子（ ），簡稱為性因子或因子。位點(diǎn)專一性重組：在專一酶的作用下，在 特定位點(diǎn)上發(fā)生斷裂和重接，從而產(chǎn)生精確的 重排的重組方式。自殺性底物具有類似于底物的結(jié)合和反應(yīng)基團(tuán)可結(jié)合于酶的活性部位并在其作用之下發(fā)生反應(yīng)與底物不同的是它還有潛伏的反應(yīng)基團(tuán)受酶催化之后即被活化與酶活性中心基團(tuán)共價(jià)結(jié)合使酶喪失活性轉(zhuǎn)座子（ 即能夠反復(fù)插入到基因中許多位點(diǎn)的特殊 片段，它們可從一個位點(diǎn)轉(zhuǎn)移到另一個位點(diǎn)從一個復(fù)制子到另一個復(fù)制子。（在轉(zhuǎn)移時原來位置上的這些結(jié)構(gòu)依然存在或不存在）。8反轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)座子 或 ：指通過 為中介，反轉(zhuǎn)錄成 后進(jìn)行轉(zhuǎn)座的可動元件。這樣的轉(zhuǎn)座過程稱為反轉(zhuǎn)座作用 一 細(xì)（）、反轉(zhuǎn)座作用出現(xiàn)在真核生物，包括兩類①能感染宿主細(xì)胞的反轉(zhuǎn)錄病毒，②通過以 為中介進(jìn)行轉(zhuǎn)座的 序列。（）、除反轉(zhuǎn)錄病毒外，反轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)座子可以分成兩類：一類是病毒超家族 ，這類反轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)座子編碼反轉(zhuǎn)錄酶或整合酶 ，能自主地進(jìn)行轉(zhuǎn)錄，其轉(zhuǎn)座的機(jī)制同反轉(zhuǎn)錄病毒相似，但不能像反轉(zhuǎn)錄病毒那樣以獨(dú)立感染的方式進(jìn)行傳播；另一類是非病毒超家族 。（）非病毒超家族反轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)座子的特點(diǎn)：、自身沒有轉(zhuǎn)座酶或整合酶的編碼能力，而在細(xì)胞內(nèi)E有的酶系統(tǒng)作用下進(jìn)行轉(zhuǎn)座。、病毒超家族同非病毒超家族都來源于細(xì)胞內(nèi)的轉(zhuǎn)錄物，兩者的明顯區(qū)別在于病毒超家族成員的 分子兩端有長末端重復(fù)序列 ， ，這是反轉(zhuǎn)錄病毒 基因組的特征性結(jié)構(gòu)，非病毒超家族的成員沒有 結(jié)構(gòu)。3同時，病毒超家族成員都能編碼產(chǎn)生轉(zhuǎn)座酶或整合酶，或者二者兼而有之，所以能自主地進(jìn)行轉(zhuǎn)座。非病毒超家族成員不產(chǎn)生有生物學(xué)活性的酶，因此不能進(jìn)行自主轉(zhuǎn)座。、所有反轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)座子都有一個共同的特點(diǎn)，即在其插入位點(diǎn)上產(chǎn)生短的正向重復(fù)序列。9反轉(zhuǎn)錄子（ ）或反轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)座子（ ）：逆轉(zhuǎn)錄病毒（ ）的基因組是單鏈的 N它被逆轉(zhuǎn)錄成雙鏈 中間體復(fù)制，雙鏈 通過類似轉(zhuǎn)座的機(jī)制被插入到宿主基因組中。它們的轉(zhuǎn)座是通過介導(dǎo)的。因此稱之為反轉(zhuǎn)錄子（ ）或反轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)座子（ ni生物體內(nèi) 重組的類型，各自的不同和生物學(xué)意義。⑴同源重組：真核生物減數(shù)分裂過程中，染色體間的物質(zhì)交換，即分子的斷裂和在重組酶作用下的交換連接；細(xì)菌沒有減數(shù)分裂，同源重組發(fā)生在接合過程中，交配的染色體在兩個緊密連接的細(xì)胞中轉(zhuǎn)移；減數(shù)分裂期染色體變化與發(fā)生交換的分子的相互作用；重組修復(fù)中也發(fā)生同源重組。特點(diǎn)：要求較大的片段進(jìn)行交換；存在重組熱點(diǎn)；整個基因組頻率不穩(wěn)定，受綜合和局部效應(yīng)影響；同一條染色體上的兩個基因間發(fā)生交換的頻率取決于他們之間的物理距離相距越遠(yuǎn)越容易發(fā)生交換；分子的斷裂和再結(jié)合是同源重組的主要特點(diǎn)。意義：維持生物多樣性；引起進(jìn)化；瞬間物理連接，對染色單體正確分離到子代細(xì)胞，至關(guān)重要；用于損傷修復(fù)。功能：維持生物種群的多樣性。即遺傳多樣性染色體瞬間的物理連接，對染色單體正確分離到子代細(xì)胞至關(guān)重要。用于損傷修復(fù)。以未損傷的同源染色體修復(fù)因損傷而丟失的染色體序列通過重組可調(diào)控基因表達(dá)⑵位點(diǎn)專一性重組：在專一酶作用下，在 特定位點(diǎn)上發(fā)生斷裂和重接，從而產(chǎn)生精確的 重排的重組方式。特點(diǎn)：要專一識別位點(diǎn)，交換的為短同源片段需專一酶識別，結(jié)合；參與該過程的酶的表達(dá)被細(xì)胞調(diào)節(jié)過程引發(fā)。意義：發(fā)生在特殊序列對之間，是噬菌體進(jìn)入宿主細(xì)胞后整合到宿主上的重組形式。⑶轉(zhuǎn)座重組：轉(zhuǎn)座子在基因的許多為點(diǎn)間反復(fù)插入而實(shí)現(xiàn)的重組。特點(diǎn)：移動片段與受體同源性無關(guān)；真核，原核中均可發(fā)生轉(zhuǎn)座重組； 轉(zhuǎn)座子可沿染色體移動，也可在染色體見跳躍。意義： 可使原本相距較遠(yuǎn)的基因結(jié)合在一起，形成新的操縱子，產(chǎn)生新蛋白。在啟動子部位插入可使基因打開或關(guān)閉。 轉(zhuǎn)座發(fā)生時，大多數(shù)受體基因被鈍化，也有基因被激活。 過多轉(zhuǎn)座對細(xì)胞不利，細(xì)胞在長期進(jìn)化中形成了一些不利轉(zhuǎn)座的代謝途徑與轉(zhuǎn)座平衡⑷異常重組：不需要同源性片段，也不需要酶或特異性序列的參與與識別，并以復(fù)制完成重組過程，又稱復(fù)制性重組（機(jī)制尚不清楚）。意義：常導(dǎo)致基因破壞而引起突變，與人類遺傳疾病，癌癥和基因組進(jìn)化有關(guān)。2何謂轉(zhuǎn)座子？轉(zhuǎn)座子有哪些類型，研究轉(zhuǎn)座重組有哪些意義？⑴定義：能夠反復(fù)插入到基因中許多位點(diǎn)的特殊片段，它們可以從一個位點(diǎn)轉(zhuǎn)移到另一個位點(diǎn)，從一個復(fù)制子到另一復(fù)制子。⑵分類：簡單轉(zhuǎn)座子（插入序列（ ）可獨(dú)立存在的單元，帶有介到自身移動的蛋白；復(fù)合轉(zhuǎn)座子（ ）除轉(zhuǎn)座酶基因外，還帶有其他功能性基因的轉(zhuǎn)座子，通常是兩端為兩個簡單轉(zhuǎn)座子，中間夾帶一個基因片段。⑶研究意義：了解進(jìn)化意義；為細(xì)胞分化發(fā)育提供理論依據(jù)；有助研究基因調(diào)控機(jī)制。（）特點(diǎn)：、不必借助同源序列就可移動的 片段，即轉(zhuǎn)座作用與供體和受體之間的序列無關(guān)。、原核生物和真核生物均有轉(zhuǎn)座子。、轉(zhuǎn)座序列可沿染色體移動，甚至在不同染色體間跳躍。（）結(jié)構(gòu)特征：、兩端有 的反向重復(fù)序列（ 、具有編碼轉(zhuǎn)座酶的基因（ ，轉(zhuǎn)座酶可催化轉(zhuǎn)座子插入新位置。、復(fù)合轉(zhuǎn)座子除轉(zhuǎn)座酶外還有一數(shù)個基因。、轉(zhuǎn)座酶催化轉(zhuǎn)座子插入新位點(diǎn)。.說明下列符號意義：， 等，答：⑴：插入序列，即最簡單的轉(zhuǎn)座子，來源：在細(xì)菌操縱子中以自發(fā)插入形式鑒定出來，是細(xì)菌質(zhì)粒和染色體的成分。⑵：復(fù)合轉(zhuǎn)座子的一種，帶有某些功能性基因。⑶和08座噬菌體，屬于溫和噬菌體，可致突變，溫和噬菌體一般整合到寄主染色體的一定位置上。但沒有一定的整合位置（隨機(jī)整合）引起突變。和 經(jīng)轉(zhuǎn)座可插入宿主染色體的任何一位置，（隨即整合）引起突變。、轉(zhuǎn)座重組的遺傳效應(yīng)。⑴引起插入突變：以O(shè)8頻率進(jìn)行的轉(zhuǎn)座會引起插入突變，， 噬菌體都可以引起插入突變，插入位點(diǎn)若在一個順反子的前端功能基因中，可能造成極性突變。⑵造成插入位點(diǎn)靶 的少量堿基對重復(fù)。⑶插入位點(diǎn)出現(xiàn)新基因，復(fù)合轉(zhuǎn)座子帶有抗性基因，可產(chǎn)生兩方面效應(yīng)：靶基因被插入突變；靶位點(diǎn)出現(xiàn)抗藥基因。⑷轉(zhuǎn)座后供體序列不變，即復(fù)制型轉(zhuǎn)座。⑸引起染色體畸變，在一個染色體上如有同一轉(zhuǎn)座子的兩個拷貝提供的相同為點(diǎn)，可由重組導(dǎo)致染色體缺失，倒位，插入。⑹切除效應(yīng)，轉(zhuǎn)座子從原來位置上消失，準(zhǔn)確切除，使原插入發(fā)生恢復(fù)突變，若不準(zhǔn)確，會留下轉(zhuǎn)座子殘跡，產(chǎn)生插入突變，但轉(zhuǎn)座子標(biāo)志消失。5轉(zhuǎn)座效應(yīng)意義：可使原來相距較遠(yuǎn)的基因組合在一起，形成一個操縱子。產(chǎn)生一個新蛋白，把原來兩段分離的 序列連在一起。啟動子部位的插入可使基因打開或關(guān)閉。過多轉(zhuǎn)座（頻率過高）對細(xì)胞不利，細(xì)胞在長期進(jìn)化中形成Y一些不利于轉(zhuǎn)座的代謝途徑，可與轉(zhuǎn)座過程平衡。轉(zhuǎn)座基因插入時，大多數(shù)受體基因均被鈍化，但也有基因被激活。（這是因?yàn)檗D(zhuǎn)座子有自己的啟動子，在使轉(zhuǎn)位酶轉(zhuǎn)錄的同時，也可使相鄰基因轉(zhuǎn)錄）。.何謂同源重組？特點(diǎn)及機(jī)制？⑴定義，特點(diǎn)參見一題。⑵機(jī)制：A斷裂復(fù)合機(jī)制：：斷裂復(fù)合：發(fā)生在染色體復(fù)制完成后，每對聯(lián)會染色體有個染色單體，在染色單體水平發(fā)生斷裂，斷裂交叉重組，解除張力。b拷貝選擇：姐妹染色單體復(fù)制途中各自交換了模板。B雙鏈斷裂啟動重組：在受體上形成雙鏈斷裂（核酸內(nèi)切酶），重組開始產(chǎn)生‘端單鏈，受體3末端遷移至供體同源區(qū)，受體’末端修復(fù)延伸合成，供體置換，鏈遷移至受體鏈，在受體上的另一3末端合成，相互遷移產(chǎn)生雙鏈交換。7舉例說明位點(diǎn)專一性重組。人噬菌體 入侵宿主基因組進(jìn)入溶原狀態(tài)，是通過人 和細(xì)菌 特定的附著位點(diǎn)之間的重組實(shí)現(xiàn)的。上的重組位點(diǎn) 分為、和B三部分，入上的分為、、P三部分，為核心序列，人 的整合和切離都發(fā)生在各自的序列，兩側(cè)的序列對重組也有重要作用。入 的整合過程無降解，也無合成，只是 和 兩個位點(diǎn)整合后，一種 結(jié)合蛋白 在拓?fù)洚悩?gòu)酶活性催化下，使兩個 分子的各一條單鏈斷裂，經(jīng) 作用，形成重組中間體 結(jié)構(gòu)，然后另外兩條單鏈同樣過程斷裂重接，完成重組。.比較簡單轉(zhuǎn)座子和復(fù)合轉(zhuǎn)座子。⑴相同：都是存在染色體可自由復(fù)制和位移的基本單位；轉(zhuǎn)座發(fā)生時，受體分子中有一段 的靶序列自我復(fù)制，轉(zhuǎn)座子插入這兩個重復(fù)序列之間，不同轉(zhuǎn)座子，靶序列不同。⑵不同：簡單轉(zhuǎn)座子：常稱之為插入序列（序列），可獨(dú)立存在的單元，帶有介導(dǎo)自身移動的蛋白，長度較小，是細(xì)菌或質(zhì)粒 的正常組成成分，所以序列只有一個開放讀碼框；復(fù)合轉(zhuǎn)座子：帶有一些功能性基因（如抗藥性），常由序列插入某功能基因，兩端形成有功能的復(fù)合體，序列只能作為復(fù)合體移動，其轉(zhuǎn)座能力由序列控制或調(diào)節(jié)；此外，還有一類不帶序列的，體積龐大的轉(zhuǎn)座子 家族，此類帶個基因，分別編碼轉(zhuǎn)座酶，解離酶，B內(nèi)酰胺酶，且兩翼帶有 發(fā)倒置重復(fù)序列。第四章 的生物合成i說明或?qū)Ρ纫韵赂拍睥砰喿x和閱讀框和R閱讀在 合成系統(tǒng)中，指按單向線性對核苷酸序列進(jìn)行解碼的過程。閱讀框是指分子中可轉(zhuǎn)譯成 多肽的種可能的三聯(lián)體密碼子組合方式之一。R開放閱讀框，指從起始密碼子到終止密碼子的一段基因序列。⑵編碼和讀碼：編碼是指成熟 相鄰三個堿基決定一種氨基酸。讀碼是指氨酰 與 三聯(lián)體密碼的相互識別。⑶有意義鏈和反意義鏈：（十）有意鏈， 雙鏈中與轉(zhuǎn)錄模板互補(bǔ)的鏈（與 序列相同的鏈）。（-）反義鏈， 雙鏈中的可以轉(zhuǎn)錄成 的鏈（與 互補(bǔ)的鏈）。⑷正鏈和負(fù)鏈：同上。⑸啟動子和增強(qiáng)子： （廣義上講，是控制轉(zhuǎn)錄的各種序列元件的任何組合都可以使用“啟動子”術(shù)語）通常是指位于基因5末端上游外側(cè)，緊鄰轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)的一段具特殊功能的非編碼核苷酸序列，可與結(jié)合啟動基因轉(zhuǎn)錄。 指真核生物的一段特異序列，通過順式作用方式，能夠在距離目標(biāo)基因以上位置，從上游，下游等不同位置及方向增強(qiáng)該基因轉(zhuǎn)錄活性。⑹強(qiáng)終止子和弱終止子：終止子有強(qiáng)、弱之分，強(qiáng)終止子含有反向重復(fù)順序，可形成莖環(huán)結(jié)構(gòu)，其后面為結(jié)構(gòu)，富含，無需終止蛋白參與即可以使轉(zhuǎn)錄終止。弱終止子也有反向重復(fù)序列，但無 結(jié)構(gòu)，少，需要有終止蛋白參與才能使轉(zhuǎn)錄終止。⑺足跡法和阻滯電泳： 通過檢測因受特定轉(zhuǎn)錄因子蛋白質(zhì)結(jié)合保護(hù)，而不受特定分子如切割作用的磷酸二酯鍵區(qū)域，從而鑒定出分子中特定蛋白質(zhì)結(jié)合區(qū)位置，及其核苷酸序列的一種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)。阻滯電泳，又稱電泳遷移率變動實(shí)驗(yàn)，用于檢測蛋白質(zhì)和序列的互相作用，若某片斷能和蛋白質(zhì)因子結(jié)合，則其在凝膠中電泳運(yùn)動的速度就會減慢。⑻和R 核內(nèi)不均一 r為前體指真核生物 初級轉(zhuǎn)錄物，在核內(nèi)加工，形成的大小極不均一的中間產(chǎn)物。經(jīng)5末端加帽，3末端加尾，拼接去除內(nèi)含子和核苷酸甲基化等步驟，才形成成熟 。 核內(nèi)?。┱婧思?xì)胞核內(nèi)一類長度位一核苷酸的小分子量核內(nèi) N豐度高。可與特異蛋白質(zhì)結(jié)合成核內(nèi)小核糖核蛋白質(zhì)顆粒，參與轉(zhuǎn)錄物的剪接，多聚腺核苷酸化，3末端成熟作用。⑼ 前體剪接和修飾：都是 的加工過程。前者是從 模板鏈轉(zhuǎn)錄的最初產(chǎn)物中出去內(nèi)含子，并將外顯子連接起來形成一個連續(xù)的 分子的過程，后者是 N加口帽，3加尾的過程。⑽外顯子和內(nèi)含子 ：在分子中基因編碼序列常被不編碼序列隔開，這種不編碼序列叫內(nèi)含子，編碼序列叫外顯子。但其劃分不是絕對的，內(nèi)含子也可編碼，外顯子也可不編碼；在一基因中的內(nèi)含子又可能是另外基因的外顯子。（1D 與 剪切：一些 分子具有高度專一的催化活性，在無蛋白質(zhì)情況下能進(jìn)行剪切反應(yīng)，稱為。 剪切是在轉(zhuǎn)錄時，外顯子及內(nèi)含子均轉(zhuǎn)錄到 中，核中 剪切掉內(nèi)含子，然后將外顯子各部分連接起來，而變?yōu)槌墒斓?。?與：前者是根據(jù) 模板鏈合成互補(bǔ)鏈的聚合酶。后者是依賴于 的 聚合酶。2簡述前體的剪切（剪切位點(diǎn)有何特征、剪切機(jī)制、核酶、剪切特異性的意義）⑴核酶定義見名詞解釋。⑵剪切位點(diǎn)特征：是保守序列，有共同的結(jié)構(gòu)單元 ；無互補(bǔ)；位于內(nèi)含子和外顯子交界處；以開始，以結(jié)束。⑶機(jī)制：酵母中的剪切由兩個轉(zhuǎn)酯反映完成，首先分支點(diǎn)的‘攻擊5外顯子剪切位點(diǎn)，形成’5磷酸二酯鍵，從而形成分支結(jié)構(gòu)；其次，上游外顯子3攻擊內(nèi)含子與外顯子之間的磷酸二酯鍵，使外顯子和外顯子連接；然后，釋放內(nèi)含子環(huán)，整個反應(yīng)中的磷酸二酯鍵數(shù)量未變。⑷剪切特異性的意義：內(nèi)含子必須精確的切除，否則會造成閱讀框的改變，從而合成非活性蛋白。3.簡述核酶的特征。的大小從十幾個到數(shù)百個；底物多為 也有、糖類、氨基酸酯等）， 的催化效率較酶蛋白質(zhì)低得多；必需有 存在時才能進(jìn)行催化；它也具有催化作用的專一性。對競爭性抑止劑敏感?？煞譃榧羟行秃嗣福ù呋陨砘蛘弋惣?的切割，相當(dāng)于核酸內(nèi)切酶。包括：錘頭型核酶，發(fā)卡型核酶，丁型肝炎病毒 及有蛋白質(zhì)參與協(xié)助完成催化的 復(fù)合酶）和剪接型核酶（具有核酸內(nèi)切酶核連接酶活性）。意義： 生命的最初形式可能是 、其兼有 和蛋白質(zhì)的功能。 在進(jìn)化過程中，作為遺傳模板的功能讓位于 （不穩(wěn)定），作為催化劑的功能讓位于蛋白質(zhì)。利用其機(jī)制，設(shè)計(jì)合成特異性切割病毒或其它 的核酶，以便于治療包括愛滋病、癌癥在內(nèi)的疾病。4舉例說明三種 前體的剪切和成熟過程。⑴：在轉(zhuǎn)錄時，外顯子及內(nèi)含子均轉(zhuǎn)錄到 中。核中 在核酸內(nèi)切酶作用下剪切掉內(nèi)含子，然后在連接酶作用下，將外顯子各部分連接起來，而變?yōu)槌墒斓摹?的加工修飾包括：5′端形成帽子結(jié)構(gòu)、3′端加、剪接除去內(nèi)含子和甲基化。⑵是：初級轉(zhuǎn)錄物是一條5含、5和2。轉(zhuǎn)錄過程中或剛轉(zhuǎn)錄完成時， 中約有 的核糖單位的2’被腺苷甲硫氨酸經(jīng)酶促而甲基化。⑶ 是： 經(jīng)過剪切、拼接、堿基修飾以及3' 端連接 結(jié)構(gòu)成為成熟的 。疑惑：看第題好像和這道題是重復(fù)的，懷疑這道題是問三種加工方式，即加帽子、加尾巴、剪接。5.說明真核生物 前體特異性剪接的機(jī)制及研究方法。機(jī)制見第2題。研究方法：剪切現(xiàn)象的發(fā)現(xiàn)是通過四膜蟲的前體在未加任何蛋白質(zhì)的情況下，自發(fā)的進(jìn)行剪接來發(fā)現(xiàn)的。具體研究可以用介導(dǎo)的點(diǎn)突變等方法來改變基因序列，看對剪切造成的影響，尋找剪切位點(diǎn)的規(guī)律。6簡述原核生物啟動子的研究方法（包括選材、技術(shù)路線、方法和分析及預(yù)測圖譜）。⑴可以利用模式生物比如 等來研究。⑵利用 r當(dāng)被 結(jié)合時，其覆蓋部分不被水解。標(biāo)記末端，控制適當(dāng)條件，使每個分子中未與蛋白質(zhì)結(jié)合部分的每個磷酸二酯鍵都被切割一次，切割位置可通過電泳檢測知道，未出現(xiàn)條帶的地方即轉(zhuǎn)錄因子（聚合酶）結(jié)合的地方。⑶然后可以利用突變掃描實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步分析啟動子區(qū)的順式元件。7分別說明 、 、 前體加工包括哪些內(nèi)容。見第題。、 聚合酶的催化活性：、核心酶在解鏈的 鏈上形成起始復(fù)合物開始轉(zhuǎn)錄。2、當(dāng)酶沿著模板移動，鏈延伸。3、核心酶覆蓋大約 的 區(qū)域，其中解鏈部分只有 2。、當(dāng)解旋成為模板時，每條鏈進(jìn)入酶的不同部位。5、生長著的 鏈的底物 結(jié)合位點(diǎn)之前的一段模板是游離的，在這結(jié)合位點(diǎn)之

后的模板是與新生 形成 雜合鏈， 雜合鏈的長度約，比解旋的 稍短一些。、當(dāng)酶分子離開這一區(qū)域向前移動時， 又重新形成雙鏈， 作為游離的多核苷酸鏈被取代出來。9終止子的作用是在 模板的特異位點(diǎn)處終止的合成。聚合酶可識別終止子，終止轉(zhuǎn)錄，將新生 鏈釋出，并離開模板。0 的后加工： 原核 基本無加工，原核的轉(zhuǎn)錄和翻譯偶合。原核生物的結(jié)構(gòu)基因是連續(xù)編碼序列，絕大數(shù)原核生物的 不需加工修飾，仍為初級轉(zhuǎn)錄本的形式。原核生物沒有核膜，轉(zhuǎn)錄和翻譯是相偶合的，往往轉(zhuǎn)錄還未完成E開始翻譯。 及 在轉(zhuǎn)錄后加工，①剪切 基因?yàn)槎囗樂醋?，②修飾：包括甲基化、氫化、磷酸化。③核糖體形成第五章蛋白質(zhì)合成i名詞解釋⑴核糖體結(jié)合技術(shù)：用已知的三核苷酸與核糖體去測試結(jié)合各種 ，通過對不同的 的標(biāo)記，來尋找與E知三核苷酸結(jié)合的 ，研究密碼子和的對應(yīng)情況。⑵核糖體與多核糖體：核糖體是蛋白質(zhì)合成的場所，由幾種 及多種蛋白質(zhì)組成的復(fù)合物。在蛋白質(zhì)合成中， 上有多個核糖體協(xié)同在翻譯，這些多個核糖體構(gòu)成多核糖體。⑶簡并（兼并）密碼子：編碼同一氨基酸的不同密碼子。偏愛密碼子：使用頻率較高的簡并密碼子。⑷分子伴侶：細(xì)胞中幫助新生肽正確組裝，形成成熟蛋白質(zhì)，而本身不是最終功能蛋白組合的分子。⑸簡并（兼并）：一種可以由多個密碼子編碼的現(xiàn)象。變偶： 的密碼子的第三個堿基與反密碼子的配對不是那么專一而存在的擺動性⑹密碼子的通用性：遺傳密碼在目前的從低等到高等的各種物種中都是通用的，它們幾乎使用完全相同的一套密碼；密碼子的例外：某些生物或者高等動物的線粒體等中，存在著三聯(lián)體密碼對應(yīng)的意義與眾不同的現(xiàn)象。⑺無義突變：發(fā)生在終止密碼處，是有義密碼子變成終止密碼子或終止密碼子變成有義密碼子。⑻錯義突變：由有義密碼的點(diǎn)突變引起的，突變結(jié)果只改變一個氨基酸，通常改變后產(chǎn)生一個性質(zhì)相同的氨基酸。⑼信號肽：分泌和跨膜蛋白在合成過程中端共有序列，至少有一個帶正電荷的氨基酸，它能引導(dǎo)跨膜和分泌性蛋白的肽鏈通過內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜到內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔。信號肽最終被位于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上的信號肽酶切除，因此成熟的分泌蛋白端無信號肽。⑽導(dǎo)肽：為線粒體定位信號，富含帶正電荷的氨基酸，絲氨酸含量特別高。（11）5T上5端的非編碼區(qū)，通常認(rèn)為與 和核糖體的識別和結(jié)合有關(guān)。上3上3端的非編碼區(qū)，通常認(rèn)為與加尾巴有關(guān)，與 的未定性有關(guān)。簡述遺傳密碼表的特點(diǎn)及其生物學(xué)意義密碼的基本單位是三聯(lián)體密碼子，以5f3方向、非重疊、無標(biāo)點(diǎn)的方式編碼在核酸分子上。簡并性：同一種氨基酸有兩個或更多密碼子的現(xiàn)象稱為密碼子的簡并性。編碼同一種氨基酸的密碼子稱為同義密碼子。密碼的簡并性可以減少有害突變，對維持生物物種的穩(wěn)定性有重要意義。擺動性或變偶性：在密碼子的三個堿基中，專一性主要取決于頭兩位堿基，第三個堿基比前兩個堿基專一性小，因此，與反密碼子（在上）互補(bǔ)配對時，第三個堿基有較大的靈活性，當(dāng)?shù)谌粔A基發(fā)生突變時，仍可翻譯出正確的氨基酸。密碼的變偶性減少了密碼閱讀時的誤差，增加了翻譯的準(zhǔn)確性。通用性：各種低等和高等生物，基本上共用同一套遺傳密碼。這說明了原核細(xì)胞和真核細(xì)胞的遺傳密碼是通用的，它們有共同的起源。變異性：各種不同生物的遺傳密碼可能出現(xiàn)一些變異，這是生物進(jìn)化的根據(jù)之一。連續(xù)性：兩個密碼子之間沒有任何核苷酸加以隔開。因此插入或刪去一個堿基，就會導(dǎo)致其后的密碼子的閱讀框改變，造成移碼突變。起始密碼子和終止密碼子：在種密碼子中， 既是編碼甲硫氨酸（）的密碼子，又是肽鏈合成的起始密碼子。有組密碼子（、 、 ）不編碼任何氨基酸，而是肽鏈合成的終止密碼子。在分子生物學(xué)研究中，了解某一生物的偏愛密碼子有重要意義，試說明。由于密碼子的簡并性，一個氨基酸可有多個密碼子。在原核生物細(xì)胞中，對應(yīng)于 豐富的密碼子稱為偏愛密碼子（ ）,而對應(yīng) 稀少的密碼子稱為稀有密碼子（ ）。不同生物對各種密碼子的使用頻率不同，高等動、植物中使用頻率高的密碼子可能在原核細(xì)胞中被用得很少。因此了解某一生物偏愛密碼子，有助于在基因工程中根據(jù)宿主生物偏愛密碼子改造基因的編碼序列，得到高表達(dá)的效果。是 的密碼子，但有時也可作為起始密碼子，說明其作為起始密碼子和內(nèi)部密碼子在功能上有何不同。作為起始密碼子出現(xiàn)時，編碼甲酰甲硫氨酸。起始頻率為 的/ 可與 結(jié)合，是由于反密碼子的5變偶為。當(dāng)它出現(xiàn)在基因內(nèi)部時，則被纈氨酸 識別，這是一種常用的攜帶纈氨酸的 。說明溫敏突變和冷敏突變產(chǎn)生的可能原因。錯義突變：由有義密碼的點(diǎn)突變引起，突變結(jié)果形成其它密碼子，只改變一個氨基酸，改變后產(chǎn)生一個性質(zhì)相同的氨基酸。因此對蛋白質(zhì)影響不大，一般仍具生物活性。溫敏突變：錯義突變產(chǎn)生的蛋白質(zhì)在常溫下有活性，但在高溫下構(gòu)象改變而失活，稱為溫度敏感突變型。在高溫下，多肽鏈不能折疊成正常的構(gòu)象而失活（影響分子內(nèi)氨基酸之間的互作）。啟動子突變：突變啟動子受阻遏蛋白調(diào)節(jié)，常溫下突變啟動子處于阻遏狀態(tài)，溫度過高時阻遏蛋白失活，突變啟動子有活性。冷敏感型突變：常溫或較高溫度下產(chǎn)生正常蛋白，而低溫下表現(xiàn)突變。在低溫下，多肽鏈不能折疊成正常的構(gòu)象而失活（影響分子內(nèi)氨基酸之間的互作）。何謂抑制基因突變？有哪些類型？各自的生物學(xué)效應(yīng)。染色體的另一位點(diǎn)或另一基因發(fā)生突變而消除或抑制了第一次突變的效果即抑制基因突變。第二次突變抑制了第一次突變造成的表現(xiàn)型（表型抑制），使野生型表現(xiàn)型得以恢復(fù)（并非真正的恢復(fù)突變）。一般是基因。分為兩種類型：基因內(nèi)抑制：同一基因內(nèi)第二次突變可以使該蛋白的功能部位恢復(fù)原來的構(gòu)象，從而恢復(fù)其活性。基因間抑制：是由于另一基因發(fā)生突變而產(chǎn)生抑制的。這另一基因稱為抑制基因。抑制基因的作用不是出于改變第一次突變基因上的堿基順序，而是由于其他方式產(chǎn)生抑制的，如終止密碼子的錯讀，錯誤抑制突變，移碼抑制突變，核糖體錯讀抑制突變，抑制基因引起正常基因錯讀。說明影響 壽命的因素有哪些？總體受細(xì)胞調(diào)控，外界環(huán)境也有一定影響。5末端容易被降解，如果得到保護(hù)則不易降解。3端 尾巴中是否有 結(jié)構(gòu)，有則壽命短。功能若是編碼調(diào)控細(xì)胞周期蛋白的 壽命短。持家基因 長壽。真核生物中及高度分化細(xì)胞中的 許多比較長壽。蛋白質(zhì)合成后成熟和易位包含哪些內(nèi)容和相應(yīng)的機(jī)制（折疊一修飾一易位、分泌）？大多數(shù)翻譯初級產(chǎn)物是無功能蛋白。特別是在真核生物中，翻譯初級產(chǎn)物要轉(zhuǎn)變成天然蛋白一功能蛋白，需要經(jīng)過折疊、修飾、剪切加工等過程。原核生物中一些蛋白要分泌至細(xì)胞外；真核生物除某些蛋白要分泌外，還有一些蛋白要易位至細(xì)胞器（線粒體、葉綠體、核）?？傊鞍踪|(zhì)合成后：原核生物：折疊、部分剪切、分泌。真核生物：折疊、剪切、修飾、易位、分泌。蛋白質(zhì)折疊是由多肽鏈中的氨基酸順序決定的，但與環(huán)境條件有關(guān)。蛋白質(zhì)折疊與肽鏈合成同步，體內(nèi)蛋白質(zhì)折疊環(huán)境遠(yuǎn)比體外復(fù)雜，有許多蛋白因子參與。如酶（蛋白質(zhì)二硫鍵異構(gòu)酶（s肽酰脯氨酰順反異構(gòu)酶）和分子伴侶（熱休克蛋白0 ）7蛋白質(zhì)的修飾蛋白質(zhì)的修飾可發(fā)生在蛋白質(zhì)折疊之前，折疊期間或折疊之后，也可以在肽鏈延伸期間或終止之后。修飾有利于形成正確折疊。修飾也與蛋白質(zhì)的易位和分泌有關(guān)蛋白質(zhì)修飾包括以下幾點(diǎn):末端氨基的脫甲?；?端甲硫氨酸切除（肽脫甲酰基酶、氨肽酶）。多肽鏈的水解斷裂，如：胰島素、促腎上腺激素B脂肪酸釋放因子前體。氨基酸側(cè)鏈的修飾（二硫鍵形成、羥化作用、氨基酸側(cè)鏈的交聯(lián)、羧化作用、甲基化、糖基化、脂化、-核糖基化、乙?；?、磷酸化、端酰胺基引入、硫酸化）。蛋白質(zhì)的易位和分泌：易位蛋白：核編碼的分泌蛋白、膜蛋白、核編碼的細(xì)胞器蛋白、線粒體蛋白、、葉綠體蛋白、溶酶體蛋白、核蛋白、過氧化體蛋白。蛋白質(zhì)的易位的途徑共翻譯（ 易位正在翻譯的核糖體通過信號肽插入內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上的特殊通道結(jié)合于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上（形成粗糙內(nèi)質(zhì)網(wǎng)），并使正在延伸的肽鏈轉(zhuǎn)移至內(nèi)質(zhì)網(wǎng)內(nèi)。切去信號肽后，蛋白質(zhì)停留在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)內(nèi)，或通過高爾基體轉(zhuǎn)移至溶酶體，或形成分泌小泡分泌出去。分泌和跨膜蛋白在合成過程中端有信號肽序列，它能被信號肽識別顆粒（）識別，使翻譯停止。停泊蛋白（）與結(jié)合，消耗 使內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜打開一個通道， 被釋放，新生肽進(jìn)入易位通道，翻譯延伸恢復(fù)，跨膜和分泌性蛋白的肽鏈通過內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜和到達(dá)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔。信號肽最終被位于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上的信號肽酶切除，因此成熟的分泌蛋白端無信號肽。兩類蛋白質(zhì)的去向①形成膜整合蛋白②滯留在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔、運(yùn)輸?shù)饺苊阁w或分泌的蛋白翻譯后易位由游離核糖體合成，合成后轉(zhuǎn)移至葉綠體或線粒體等細(xì)胞器中。細(xì)胞質(zhì)（胞液）是真核生物核基因編碼蛋白質(zhì)的合成場所。胞質(zhì)合成的蛋白除定位于細(xì)胞質(zhì)外，大部分被運(yùn)送到細(xì)胞核、線粒體、葉綠體、過氧化體等細(xì)胞器中定位。簡述 指導(dǎo)合成肽鏈的機(jī)制。起始 ：包括蛋白質(zhì)起始的兩個氨基酸之間形成肽鍵之前的反應(yīng)。這在蛋白質(zhì)合成中是相對較慢的，通常是翻譯的限速步驟。核糖體激活：由兩個亞基組成的無活性核糖體首先被起始因子（或）激活；起始復(fù)合物的形成：小亞基起始因子復(fù)合物、 和起始氨基酰組合成起始復(fù)合物（）,此步有參與；大亞基與起始復(fù)合物結(jié)合：起始復(fù)合物與大亞基一旦結(jié)合，起始因子即從小亞基釋放出來，他又可用于另一核糖體的起始。延伸 ：包括從第一個肽鍵形成到最后一個氨基酸摻入過程中所有的反應(yīng)。氨基酸的摻入非常迅速，是蛋白質(zhì)合成中最快的步驟。結(jié)合：對應(yīng)于 上第二個密碼子的氨基酰進(jìn)入位與核糖體結(jié)合，需提供能量，還需和參與作用；轉(zhuǎn)肽：在肽酰轉(zhuǎn)移酶（ ）的催化下，位上的氨基酸的a-氨基與位上的甲硫氨?；螂孽?的羧基發(fā)生親核攻擊而形成肽鍵。新的肽鍵一旦形成，則位的即成為“無負(fù)載”的。移位：攜帶著肽酰基的 連同從第一3方向移動一個三聯(lián)體的距離，肽酰 從核糖體的位移動到位。這個過程由移位酶催化，并必須有功能的參與。與此同時，位上原有的 轉(zhuǎn)移到位點(diǎn)釋放，核糖體從 的第一3方向移動一個三聯(lián)體的距離，于是下一個密碼子進(jìn)入位，等待下一個氨基酰的進(jìn)入。終止 n包括釋放完整的多肽鏈及核糖體與 分離。在肽鏈延伸過程中，當(dāng)核糖體沿移動至終止密碼子進(jìn)入位時，肽鏈合成便自動停止。釋放因子進(jìn)入核糖體，使新生肽鏈從核糖體上釋放出來。從某一 測序結(jié)果知，該 已發(fā)生了位點(diǎn)突變，但該生物的表型與野生型相同，試分析其表型未改變的可能原因。（抑制突變、兼并密碼子、性質(zhì)相似氨基酸等）簡并性：同一種個氨基酸有兩個或更多密碼子，點(diǎn)突變造成密碼子改變，但編碼的氨基酸不變。錯義突變：由有義密碼的點(diǎn)突變引起，突變結(jié)果形成其它密碼子，只改變一個氨基酸，改變后產(chǎn)生一個性質(zhì)相同的氨基酸。因此對蛋白質(zhì)影響不大，一般仍具生物活性。抑制基因突變：第二點(diǎn)突變抑制了第一次突變造成的表現(xiàn)型（表型抑制），使野生型表現(xiàn)型得以恢復(fù)（并非真正的恢復(fù)突變）。點(diǎn)突變發(fā)生在非編碼區(qū)，導(dǎo)致基因編碼的產(chǎn)物不變。蛋白質(zhì)合成后加工包括那些機(jī)制，試就核定位、葉綠體和線粒體定位、溶酶體定位和膜定位蛋白的成熟、加工過程加以說明。核定位、葉綠體和線粒體定位蛋白是由胞質(zhì)中的游離核糖體和多核糖體合成細(xì)胞器蛋白前體，然后進(jìn)入細(xì)胞器，經(jīng)折疊和剪去轉(zhuǎn)運(yùn)序列形成成熟蛋白，是翻譯后易位蛋白。核定位蛋白：大分子蛋白進(jìn)入細(xì)胞核是一個主動過程。這些蛋白包括基質(zhì)蛋白（各種轉(zhuǎn)錄因子）、聚合酶、 聚合酶、染色體蛋白等。核定位蛋白均有一段或兩段富含堿性氨基酸殘基的轉(zhuǎn)運(yùn)序列（靶向序列），也稱核定位序列。轉(zhuǎn)運(yùn)過程：輸入蛋白與核定位蛋白結(jié)合，停泊于核孔，在水解 獲得能量的情況下，蛋白復(fù)合物進(jìn)入核孔，輸入蛋白亞基釋放回細(xì)胞質(zhì)。線粒體蛋白大多數(shù)為核編碼蛋白。合成的蛋白質(zhì)分別進(jìn)入線粒體的不同部位，內(nèi)膜、外膜、內(nèi)外膜間隙、基質(zhì)（襯質(zhì)）。因此蛋白質(zhì)進(jìn)入的途徑也不同。葉綠體定位蛋白：類似于線粒體。轉(zhuǎn)運(yùn)肽也有兩部分，分別負(fù)責(zé)外膜和類囊體膜的通過及定位。但葉綠體編碼的蛋白只有一個區(qū)域。膜整合蛋白和溶酶體蛋白是共翻譯易位蛋白。膜整合蛋白肽鏈上有一段錨定序列（ 由疏水氨基酸組成，作為終止轉(zhuǎn)移信號（ f此類信號不是在端，而是位于肽鏈內(nèi)部，使肽鏈插在膜上。此蛋白有時有相間排列的信號序列，使肽鏈多次跨膜。溶酶體或分泌的蛋白多為共翻譯的蛋白質(zhì)。其中：,一小部分滯留在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔中，滯留蛋白末端有特異序列 ，除去則分泌。,大多數(shù)在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)加工后轉(zhuǎn)入高爾基體，最終運(yùn)送至溶酶體、質(zhì)膜或分泌至胞外。保證翻譯和準(zhǔn)確形成有功能蛋白質(zhì)的機(jī)制有哪些？中包含的遺傳信息：蛋白質(zhì)的功能是由編碼蛋白質(zhì)的 中所攜帶的遺傳信息決定的；轉(zhuǎn)錄過程： 中的遺傳信息通過轉(zhuǎn)錄傳遞到 中，轉(zhuǎn)錄過程的保真機(jī)制決定了遺傳信息的穩(wěn)定性；翻譯過程：在蛋白質(zhì)的翻譯過程中， 上攜帶的遺傳信息以三聯(lián)體密碼的形式，與攜帶特定氨基酸的配對，從而翻譯出特定的蛋白；折疊、修飾、剪切加工等：大多數(shù)翻譯初級產(chǎn)物是無功能蛋白。特別是在真核生物中，翻譯初級產(chǎn)物要轉(zhuǎn)變成天然蛋白一功能蛋白，需要經(jīng)過折疊、修飾、剪切加工等過程。蛋白質(zhì)的易位和分泌：大部分蛋白的功能都只能在特定細(xì)胞、組織中才能表現(xiàn)出來，因此在胞質(zhì)中合成的蛋白質(zhì)需要轉(zhuǎn)運(yùn)或分泌到特定細(xì)胞、組織中才能發(fā)揮特有的功能。第六章 基因組的分子結(jié)構(gòu)和組織比較概念基因：DNA分子上具有特定功能的（或具有一定遺傳效應(yīng)的）核苷酸序列。順反子：決定一條多肽鏈合成的功能單位?；虺＊M義指順反子，即為最小的遺傳功能單位。但隨著研究的不斷深入，內(nèi)含子、調(diào)控基因、假基因、編碼功能的核酸序列等都是基因概念的延伸。衛(wèi)星：含有異常高或低的含量的高度重復(fù)序列。高度重復(fù)序列的微衛(wèi)星 ：重復(fù)單位很短的一類高度重復(fù)序列，普遍存在于真核生物。衛(wèi)星主要構(gòu)成著絲粒，功能和維持染色體的結(jié)構(gòu)、同源染色體的聯(lián)會有關(guān)。而微衛(wèi)星主要分布于非編碼區(qū)和端粒區(qū)，因核心序列重復(fù)次數(shù)不同而具有高度多態(tài)性。中等重復(fù)序列：基因組中重復(fù)序列較長、重復(fù)頻率為?的序列。單拷貝：基因組中只存在一個或個拷貝序列，亦稱非重復(fù)序列。大多數(shù)的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)基因?qū)儆趩慰截?，而一般?xì)胞內(nèi)需求量較大的蛋白（如組蛋白）和 （ ）基因?qū)儆谥械戎貜?fù)序列，但中等重復(fù)序列一般不是編碼序列，而在調(diào)控中起重要作用?；蚣易澹夯蚪M中來源相同、結(jié)構(gòu)相似、功能相關(guān)的一組基因，它們往往集中在一起，但也有分散排列的，甚至于不同的染色體上。屬于同一家族的各成員也并非都具功能?；蚪M：一個物種單倍體的染色體所攜帶的一整套基因。功能基因組：以基因功能鑒定為目標(biāo)，又稱后基因組（ e包括基因功能發(fā)現(xiàn)、基因表達(dá)分析及突變檢測。舉例說明測定衛(wèi)星 的實(shí)驗(yàn)。原理：各種 在 密度梯度離心中，平衡時的密度浮力決定他的 含量，含量越高，浮力密度越大。由于衛(wèi)星 含有異常高或低的 含量，使它們與大多數(shù) 具有不同的浮力密度，因此，會在主要的帶的附近伴隨一個次帶（或前或后）。實(shí)驗(yàn)：小鼠的基因組中有為數(shù)很多的衛(wèi)星 N約占基因組的％。將提取的小鼠肝細(xì)胞中的基因組進(jìn)行適當(dāng)?shù)拿盖兄翑?shù)千核苷酸長度，進(jìn)行密度梯度離心，其浮力密度曲線是覆蓋一定密度范圍的一條寬帶，但有些片段會出現(xiàn)主帶的前面或后面—一這些就是所謂的衛(wèi)星N比較原核生物和真核生物基因組的特點(diǎn)。原核生物基因組的特點(diǎn)1 基因組小，一般具有單一的復(fù)制起始點(diǎn)； 單個染色體，一般呈環(huán)狀；染色體 不合蛋白質(zhì)固定的結(jié)合； 重復(fù)序列少 不編碼的序列很少； 功能相關(guān)的基因構(gòu)成操縱子，高度集中，轉(zhuǎn)錄成多順反子 ； 基因有重疊。真核生物基因組特點(diǎn) 基因組大，具有多個復(fù)制起始點(diǎn)； 基因組包含多個染色體，一般均為線狀 N與組蛋白穩(wěn)定的結(jié)合；大量的重復(fù)序列存在，將單拷貝基因分隔開；有比例很大的不編碼序列；功能相關(guān)的基因集中程度不如原核生物，不以操縱子形式組織； 基因斷裂，被內(nèi)含子分隔。述基因組織對生物體生命活動的意義。（不清楚，請大家自己找答案。“基因組織”這個詞很可能是z也叫“基因組構(gòu)”?？赡苁菃柣蛏细鞣N元件的作用）就你閱讀過的資料，說明目前基因組研究主要包括哪些內(nèi)容，主要采用了哪些研究方法；功能基因組研究又包括哪些內(nèi)容，主要采用哪些方法。（本題比較多，為了幫助大家理解，個人根據(jù)情況可進(jìn)行適當(dāng)?shù)膭h減。）基因組學(xué)研究：基因表達(dá)概況研究，即比較不同組織和不同發(fā)育階段、正常狀態(tài)與疾病狀態(tài)，以及體外培養(yǎng)的細(xì)胞中基因表達(dá)模式的差異，技術(shù)包括傳統(tǒng)的 。 保護(hù)試驗(yàn)， 印跡雜交，但是其不足是一次只能做一個。新的高通量表達(dá)分析方法包括微點(diǎn)陣，基因表達(dá)序列分析， 芯片等；基因產(chǎn)物蛋白質(zhì)功能研究，包括單個基因的蛋白質(zhì)體外表達(dá)方法，以及蛋白質(zhì)組研究；蛋白質(zhì)與蛋白質(zhì)相互作用的研究，利用酵母雙雜交系統(tǒng)，單雜交系統(tǒng)，三雜交系統(tǒng)及反向雜交系統(tǒng)等。基因組研究應(yīng)該包括兩方面的內(nèi)容：以全基因組測序?yàn)槟繕?biāo)的結(jié)構(gòu)基因組學(xué)和以基因功能鑒定為目標(biāo)的功能基因組學(xué)。結(jié)構(gòu)基因組學(xué)代表基因組分析的早期階段，以建立生物體高分辨率遺傳、物理和轉(zhuǎn)錄圖譜為主。功能基因組學(xué)代表基因分析的新階段，往往被稱為后基因組學(xué)，利用結(jié)構(gòu)基因組所提供的豐富信息資源，發(fā)展和應(yīng)用新的實(shí)驗(yàn)手段，通過在基因組或系統(tǒng)水平上全面分析基因的功能，使得生物學(xué)研究從單一基因或蛋白質(zhì)的研究轉(zhuǎn)向多個基因或蛋白質(zhì)系統(tǒng)的研究。功能基因組學(xué)以高通量、大規(guī)模實(shí)驗(yàn)方法及統(tǒng)計(jì)與計(jì)算機(jī)分析為特征，研究內(nèi)容涉及基因表達(dá)譜的繪制、基因功能的研究、基因表達(dá)調(diào)控研究、模式生物和比較基因組學(xué)研究等。采用的手段包括經(jīng)典的減法雜交，差示篩選，基因表達(dá)差異分析以及 差異顯示等。由于這些技術(shù)不能對基因進(jìn)行全面系統(tǒng)的分析，因而產(chǎn)生了一批新技術(shù)，包括基因表達(dá)的系統(tǒng)分析（ ）， 微陣列，芯片以及蛋白質(zhì)芯片等。鑒定基因功能最有效的方法是觀察基因表達(dá)被阻斷或增加后在細(xì)胞和整體水平所產(chǎn)生的表型變異，因此需要建立模式生物體，進(jìn)行比較基因組學(xué)的研究。此外，可利用誘變技術(shù)測定未知基因，基因組多樣性以及生物信息學(xué)的應(yīng)用。第七章原核生物基因表達(dá)調(diào)控1名詞解釋⑴組成型合成：是指在操縱基因或調(diào)控基因發(fā)生突變，導(dǎo)致結(jié)構(gòu)基因的表達(dá)不能被阻遏，即在沒有誘導(dǎo)物的情況下也能進(jìn)行轉(zhuǎn)錄。組成型蛋白：是指數(shù)量和合成不受外界環(huán)境影響的蛋白質(zhì)，有的組成型蛋白是調(diào)控系統(tǒng)突變造成組成型合成的結(jié)果。⑵溶源途徑：也叫溫和噬菌體途徑，指噬菌體基因組整合到細(xì)菌基因組上，一起復(fù)制，不引起噬菌體的組裝和細(xì)菌的裂解。溶菌途徑：指噬菌體相關(guān)基因表達(dá)，進(jìn)行復(fù)制、組裝并導(dǎo)致細(xì)菌裂解和子代噬菌體的釋放。⑶操縱子：是原核生物基因表達(dá)的協(xié)調(diào)單位，通常由功能上相關(guān)的幾個結(jié)構(gòu)基因及啟動子、操縱基因、調(diào)節(jié)基因組成，轉(zhuǎn)錄后形成一條多順反子。操縱基因：調(diào)節(jié)蛋白（阻遏蛋白或激活蛋白）的結(jié)合位點(diǎn)，導(dǎo)致結(jié)構(gòu)基因的正、負(fù)調(diào)控。⑷衰減子：是位于結(jié)構(gòu)基因上游前導(dǎo)區(qū)的終止子，它能在翻譯水平上控制結(jié)構(gòu)基因轉(zhuǎn)錄的終止，通常存在于合成代謝基因中。增強(qiáng)子：是在真核生物中，距離起始位點(diǎn)很原的，可以大大增強(qiáng)基因轉(zhuǎn)錄的序列。⑸強(qiáng)啟動子：轉(zhuǎn)錄起始效率高的啟動子序列，通常含有一及一兩個保守區(qū)域。弱啟動子：轉(zhuǎn)錄起始效率低的啟動子序列，通常在一及一區(qū)域的核苷酸有多處替換，導(dǎo)致啟動子結(jié)合力下降。⑹基因重疊：指某些原核生物尤其是病毒的基因組中，存在多個基因部分重疊或相互包含的現(xiàn)象。操縱子重疊：指操縱基因通常與啟動子臨近或重疊，與調(diào)節(jié)蛋白結(jié)合后，會影響啟動子與聚合酶結(jié)合。（不確定）⑺的蛋白：是阿拉伯糖操縱子中的調(diào)節(jié)基因編碼的阻遏蛋白，在沒有阿拉伯糖時，它結(jié)合于啟動子區(qū)域，阻遏基因表達(dá)。A代謝物激活蛋白，在細(xì)胞能量缺乏時，和 結(jié)合，激活相關(guān)能量代謝基因的表達(dá)。設(shè)計(jì)試驗(yàn)證明某一突變是調(diào)節(jié)基因突變或操縱基因突變。⑴實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)：將正常細(xì)胞和突變型細(xì)胞融合成雜合二倍體，并使其處于無誘導(dǎo)物的條件下，測定結(jié)構(gòu)基因的表達(dá)情況。若其結(jié)果無組成型合成，則說明一定是調(diào)節(jié)基因突變；若有組成型合成，則是操縱基因突變。⑵原理：若調(diào)節(jié) 突變，則其中正常染色體可合成活性阻遏蛋白，與正常及突變?nèi)旧w上的操縱基因結(jié)合，阻遏結(jié)構(gòu)基因表達(dá)。若操縱基因突變，則調(diào)節(jié)基因產(chǎn)生的阻遏蛋白雖有活性，但是不能于操縱基因結(jié)合，因而不能阻遏結(jié)構(gòu)基因表達(dá)。簡述操縱子的正負(fù)調(diào)控（自己翻書仔細(xì)看看）⑴乳糖操縱子通常為負(fù)調(diào)控，即，在無乳糖時，調(diào)節(jié)基因編碼的阻遏蛋白和操縱基因結(jié)合，抑制結(jié)構(gòu)基因的表達(dá)；若有乳糖或類似物時，乳糖等和阻遏蛋白結(jié)合，阻遏蛋白脫落，結(jié)構(gòu)基因可以表達(dá)。⑵正調(diào)控，當(dāng)有乳糖或類似物存在，并且沒有葡萄糖時，細(xì)胞產(chǎn)生M與結(jié)合，形成的一復(fù)合物可以與啟動子上相應(yīng)部位結(jié)合，激活結(jié)構(gòu)基因的高效表達(dá)。但若有葡萄糖時，葡萄糖的代謝中間產(chǎn)物可以抑制的形成，而單獨(dú)的不能激活基因表達(dá)。說明 操縱子的特點(diǎn)，從其啟動子的結(jié)構(gòu)說明 在有或無葡萄糖時都可以啟動，但是表達(dá)水平有很大差異，其意義何在？（自己翻書仔細(xì)看看）⑴操縱子有個啟動子和2兩者有重疊，需要一激活才能啟動，而且是高效表達(dá)；在上游，不需要 一就可以表達(dá)，但是效率低； 一結(jié)合位點(diǎn)在附近，即，有 一結(jié)合時， 不能結(jié)合啟動子。⑵在有葡萄糖存在時，不能形成 一復(fù)合物， 不能啟動，但是可以低效啟動；沒有葡萄糖時， 一復(fù)合物結(jié)合，阻礙與聚合酶結(jié)合，但是激活高效表達(dá)。⑶意義在于，是合成細(xì)胞壁組分的重要前體物質(zhì)，同時也是可以作為能量物質(zhì)的。細(xì)菌在缺乏葡萄糖時，要高效表達(dá)基因，利用提供能量；在能量充足時，也需要少量代謝，產(chǎn)生合成細(xì)胞壁的物質(zhì)，這就通過的啟動來實(shí)現(xiàn)。5說明 操縱子和其調(diào)控蛋白的操縱子的正負(fù)調(diào)控。（自己翻書仔細(xì)看看）⑴參與 代謝的酶分布在個操縱子中，即 與代謝相關(guān)的三個酶、 、 （與轉(zhuǎn)運(yùn)有關(guān)），但是都受一個共同的調(diào)節(jié)基因產(chǎn)物蛋白調(diào)控。⑵有葡萄糖無時， 少量表達(dá)，蛋白結(jié)合于操縱基因及區(qū)，形成回折結(jié)構(gòu)，封閉Y 及基因。⑶有葡萄糖有時，蛋白結(jié)合于及區(qū)，形成直線結(jié)構(gòu)，封閉Y基因，打開Y 基因，但是沒有 一復(fù)合物結(jié)合， 啟動效率很低。

⑷無葡萄糖有 時，結(jié)果類似⑶，但是此時有 一A 高效啟動。6說明葡萄糖對糖利用型操縱子的調(diào)節(jié)。（自己翻書仔細(xì)看看）⑴葡萄糖對糖利用型操縱子的調(diào)節(jié)是通過調(diào)節(jié)的含量來進(jìn)行的，即葡萄糖效應(yīng)，當(dāng)葡萄糖存在時，其代謝中間產(chǎn)物可以抑制腺苷酸環(huán)化酶，同時激活磷酸二酯酶，導(dǎo)致水平極低；反之，無葡萄糖且細(xì)胞缺乏能量時，水平升高。⑵糖利用型操縱子一般都需要 （分解物激活蛋白）與 結(jié)合形成復(fù)合物，結(jié)合在啟動子附近，進(jìn)而極大的促進(jìn) 聚合酶與啟動子的結(jié)合，高效轉(zhuǎn)錄糖利用相關(guān)基因。⑶若有葡萄糖存在，則沒有 復(fù)合物形成，糖利用相關(guān)基因不能有效轉(zhuǎn)錄，這樣符合生物節(jié)省能量的原則，優(yōu)先利用容易利用的物質(zhì)。說明色氨酸操縱子的正負(fù)調(diào)控（自己翻書仔細(xì)看看）操縱子的前導(dǎo)區(qū)中有轉(zhuǎn)錄終止信號，即衰減子。是輔阻遏物，可與阻遏蛋白結(jié)合，一起結(jié)合到操縱基因上，阻遏轉(zhuǎn)錄，這是合成代謝基因的常見的反饋抑制模式操縱子還有一種更精細(xì)的調(diào)節(jié)方式，若細(xì)胞中水平低，阻遏蛋白本身無法與操縱基因結(jié)合，轉(zhuǎn)錄起始，隨后翻譯開始。若細(xì)胞中還有低水平的，可以使得核糖體順利通過衰減子區(qū)的兩個密碼子，則前導(dǎo)區(qū)形成類似于終止子的莖環(huán)結(jié)構(gòu)，導(dǎo)致轉(zhuǎn)錄終止；若細(xì)胞中水平非常低，則無法形成莖環(huán)結(jié)構(gòu)，轉(zhuǎn)錄繼續(xù)，可以表達(dá)合成的相關(guān)基因。簡述氨基酸合成型操縱子的共同特點(diǎn)⑴氨基酸合成型操縱子的前導(dǎo)區(qū)序列都可以形成衰減子結(jié)構(gòu)。⑵影響形成“莖環(huán)結(jié)構(gòu)”或“ O結(jié)構(gòu)的突變都會降低衰減子的作用，增加結(jié)構(gòu)基因的表達(dá)。⑶前導(dǎo)區(qū)特異密碼子突變成其他密碼子，則衰減子只能起到終止作用。⑷衰減子調(diào)控中需要翻譯，利用原核生物轉(zhuǎn)錄和翻譯幾乎同時進(jìn)行的特點(diǎn)。⑸都屬于一種反饋抑制的模式，合成的終產(chǎn)物抑制基因表達(dá)。9說明半乳糖操縱子兩個啟動子的調(diào)控意義。見第題。說明 外膜通透蛋白基因的反義調(diào)控機(jī)制（自己翻書仔細(xì)看看）⑴ 外膜通透蛋白表達(dá)是受于其 互補(bǔ)序列的小分子 調(diào)控的。有兩種外膜通透蛋白： 和，兩者化學(xué)性質(zhì)類似，功能相同，在細(xì)胞中總量不變。他們?yōu)檫m應(yīng)性合成，即，高滲下 合成增加 受抑制，低滲下 合成增加， 受抑制，但總量不變。⑵為滲透壓感受蛋白，在低滲透壓下，它與 的調(diào)控區(qū)結(jié)合，轉(zhuǎn)錄 ，最終翻譯成 ；在高滲透壓下， 與 的調(diào)控區(qū)結(jié)合，轉(zhuǎn)錄并翻譯 ，同時 也能激活 序列和 的轉(zhuǎn)錄，但的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物為一段小，可以和的 互補(bǔ)形成雙鏈，導(dǎo)致 不能翻譯成蛋白質(zhì)。的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物為一段小，可以和的 互補(bǔ)形成雙鏈，導(dǎo)致 不能翻譯成蛋白質(zhì)。.簡述人 的溶源和溶菌途徑。⑴溶源途徑：也稱溫和途徑，人 感染后，其基因組與細(xì)菌染色體整合，成為染色體的一部分，隨著染色體的復(fù)制而復(fù)制。將這種整合有噬菌體基因組的細(xì)菌稱為溶源菌，此時人 上的功能基因大部分關(guān)閉。⑵溶菌途徑：入一從細(xì)菌染色體上分離，形成環(huán)狀，其上基因按照一定的時間順序表達(dá)，并在一定程度上利用寄主的復(fù)制、轉(zhuǎn)錄、翻譯系統(tǒng)及營養(yǎng)物質(zhì)來合成人 復(fù)制所需的蛋白和酶及基因組，進(jìn)而組裝成噬菌體顆粒，溶破細(xì)菌，釋放子代噬菌體。?轉(zhuǎn)錄水平調(diào)控是生物基因表達(dá)調(diào)控的主要機(jī)制，這一水平是否是唯一的途徑？不是唯一的途徑，除此之外主要是翻譯水平的調(diào)節(jié)：⑴核糖體蛋白基因表達(dá)的調(diào)控，關(guān)鍵蛋白結(jié)合的與核糖體蛋白的有同源性，因此， 與核糖體蛋白的競爭性的結(jié)合關(guān)鍵蛋白，當(dāng)核糖體蛋白的多時，關(guān)鍵蛋白較多的與結(jié)合，導(dǎo)致其不能有效的翻譯出核糖體蛋白。⑵稀有 對翻譯的調(diào)控，翻譯起始后，其速度受 上個密碼子對應(yīng)的一 供應(yīng)能力的限制，若是稀有密碼子，所識別的是稀有 ，胞內(nèi)含量低，導(dǎo)致供給不足，翻譯速度降低。⑶細(xì)菌營養(yǎng)缺乏的調(diào)控：營養(yǎng)缺乏時，產(chǎn)生報(bào)警物 ，促使細(xì)菌表達(dá)能夠利用其他糖的基因。缺乏氨基酸時，產(chǎn)生報(bào)警物 ，抑制轉(zhuǎn)錄起始及翻譯及多數(shù)耗能過程。⑷反義調(diào)控，即與 互補(bǔ)的一段小分子 序列與 結(jié)合，從而抑制其 翻譯。⑸ 二級結(jié)構(gòu)的調(diào)節(jié)， 形成的各種二級結(jié)構(gòu)可以對轉(zhuǎn)錄的終止、翻譯的起始、 的壽命等造成影響。.設(shè)計(jì)一個實(shí)驗(yàn)，研究某一原核基因的啟動子。參照第四章第題。第八章真核生物基因表達(dá)調(diào)控1比較概念⑴順式作用元件反式作用因子：真核生物的調(diào)控序列往往包含許多元件（保守序列），其上可結(jié)合各種調(diào)控蛋白，此元件即為順式作用元件。能與順式作用元件結(jié)合的可擴(kuò)散的蛋白稱為反式作用因子。⑵基礎(chǔ)轉(zhuǎn)錄因子：啟動子在啟動 合成必需因子，與 聚合酶結(jié)合形成圍繞在起始位點(diǎn)周圍的復(fù)合物。上游轉(zhuǎn)錄因子：識別并特異地結(jié)合在上游順式件上，其活性不受調(diào)控，可作用于具有其識別序列的任何啟動子上。⑶誘導(dǎo)因子：其作用與上游因子相同，但它們是受調(diào)控的。通用因子：與通用啟動子序列結(jié)合的轉(zhuǎn)錄因子？⑷結(jié)合結(jié)構(gòu)域：調(diào)控蛋白上所含有的能與特殊 調(diào)控序列結(jié)合的結(jié)構(gòu)域?；钚越Y(jié)構(gòu)域：轉(zhuǎn)錄因子所含有的能與其他蛋白結(jié)合的結(jié)構(gòu)域。⑸同源異型域：與發(fā)育相關(guān)的調(diào)控蛋白上與 結(jié)合的結(jié)構(gòu)域。同源異型基因：用同源異型突變鑒定出來的基因，調(diào)控著胚胎發(fā)育。⑹同源異型盒： 上編碼一類與發(fā)育有關(guān)的調(diào)控蛋白上與 結(jié)合的結(jié)構(gòu)域序列。⑺應(yīng)答元件：與誘導(dǎo)因子結(jié)合的順式作用元件。⑻增強(qiáng)子：在真核生物中，還發(fā)現(xiàn)某些序列可大大增強(qiáng)啟動子的轉(zhuǎn)錄，而它們離轉(zhuǎn)錄起始點(diǎn)的距離可以很遠(yuǎn)，可在上、下游其作用，這樣的序列稱為增強(qiáng)子。沉默子與增強(qiáng)子相比，起負(fù)調(diào)控作用的序列稱為沉默子。⑼啟動子： （廣義上講，是控制轉(zhuǎn)錄的各種序列元件的任何組合都可以使用“啟動子”術(shù)語）通常是指位于基因5末端上游外側(cè)，緊鄰轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)的一段具特殊功能的非編碼核苷酸序列，可與結(jié)合啟動基因轉(zhuǎn)錄。⑽轉(zhuǎn)錄本：加工成熟的 ？?轉(zhuǎn)錄因子：真核生物 聚合酶不能識別 上的結(jié)合位點(diǎn)，識別這些序列的是調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄的反式作用因子，即為轉(zhuǎn)錄因子。?持家基因：一個僅含有被基礎(chǔ)因子和上游因子所識別的元件的啟動子能在任何細(xì)胞中進(jìn)行轉(zhuǎn)錄，能被此類啟動子轉(zhuǎn)錄的基因即持家基因，其功能為所有細(xì)胞所必須的。奢侈基因：僅在某些種類的細(xì)胞中表達(dá)的基因。?編輯：在水平上發(fā)生的堿基取代，插入和缺失。剪切：轉(zhuǎn)錄初產(chǎn)物去除內(nèi)含子拼接外顯子的過程。?螺旋轉(zhuǎn)角螺旋：是常見的轉(zhuǎn)錄因子的 結(jié)合結(jié)構(gòu)域，有個 一螺旋和一個 一轉(zhuǎn)角組成。螺旋環(huán)螺旋:有兩個 螺旋和一段 組成，是常見的轉(zhuǎn)錄因子間相互左右的結(jié)構(gòu)域（二聚化結(jié)構(gòu)域）。2說明真核生物表達(dá)調(diào)控的不同層次。⑴和染色體水平的調(diào)控。包括：基因重排、基因擴(kuò)增、 修飾、基因封閉（染色體結(jié)構(gòu)）。⑵轉(zhuǎn)錄水平的調(diào)控：包括轉(zhuǎn)錄起始、延伸的弱化、終止都會對 前體水平產(chǎn)生影響，是重要的調(diào)控水平。⑶轉(zhuǎn)錄后 前體加工及轉(zhuǎn)運(yùn)的調(diào)控真核生物轉(zhuǎn)錄和翻譯不偶聯(lián)轉(zhuǎn)錄出的 前提經(jīng)加工才能成熟為翻譯模板，此過程包括剪切、修飾、編輯、5和3端的修飾及轉(zhuǎn)運(yùn)到翻譯場所等。⑷翻譯水平的調(diào)控：包括核糖體的磷酸化去磷酸化調(diào)節(jié)， 的調(diào)節(jié)，移碼和通讀等等。⑸翻譯后水平調(diào)控：包括翻譯產(chǎn)物的剪切、修飾（如糖基化、磷酸化、切除信號肽、脂化及構(gòu)象形成、轉(zhuǎn)運(yùn)和裝配形成復(fù)合蛋白體）⑹ 降解的調(diào)控，隨生長發(fā)育和外界環(huán)境改變、細(xì)胞中蛋白質(zhì)種類也在不斷變化，原有 要降解并以新代之，因此 是有一定壽命的、細(xì)胞中有控制 壽命的機(jī)制。試述真核生物 水平調(diào)控與遺傳穩(wěn)定性的關(guān)系？⑴基因封閉： 組蛋白與 結(jié)合形成核小體，進(jìn)一步形成超螺旋及螺旋管結(jié)構(gòu)，對 起封閉作用 、、3等組蛋白中堿性氨基酸較多主要起封閉 使其不能轉(zhuǎn)錄的作用。 為核小體間連接的上的組蛋白，其末端為酸性氨基酸末端為堿性氨基酸，的作用：與基因調(diào)控有關(guān)（以三種形式與結(jié)合，其中的方式與接縫封閉有關(guān)），維持染色體高級結(jié)構(gòu)。⑵基因丟失：A在個體發(fā)育中，細(xì)胞分化時一些不需要的基因被消除，目前只在低等真核生物中發(fā)現(xiàn)，高等生物尚未發(fā)現(xiàn)，也能存在高度分化的體細(xì)胞中，不易找到，也可能高等生物中無此現(xiàn)象。B低等真核生物如:原生動物、昆蟲、甲殼綱動物等中，馬蛔蟲受精卵中只有一對染色體（ =生殖細(xì)胞保存著個體發(fā)育必需的全部基因，在體細(xì)胞中，染色體碎裂成很多片斷一所謂小染色體，小染色體中具有著絲點(diǎn)的在細(xì)胞分裂中得以保存，其他丟失。從而決定了細(xì)胞分化的方向，許多原核生物有兩種類型的核：大核和小核，小核為生殖核。：高等真核生物是否具有基因丟失，有試驗(yàn)證明為丟失，核代換試驗(yàn)：說明分化的腸細(xì)胞核未發(fā)生基因丟失，但在高等多倍體生物的數(shù)萬甚至數(shù)十萬基因中，丟失少數(shù)基因是否能用目前的實(shí)驗(yàn)手段檢測出來，還有疑問。⑶基因擴(kuò)增：A基因擴(kuò)增是指某些基因的拷貝數(shù)專一性增加的現(xiàn)象，使細(xì)胞在短期內(nèi)產(chǎn)生大量專一基因滿足生長發(fā)育的需要，使基因活性調(diào)控的一種方式，擴(kuò)增基因不在染色體上，保證生物體基因組不變，或擴(kuò)增基因不用后迅速消失或形成均染色區(qū)。B非洲爪蟾卵母細(xì)胞的水平調(diào)節(jié)。C果蠅的不分離的多次赴致使基因擴(kuò)增。D生理適應(yīng)性擴(kuò)增。⑷基因重排：基因重排在轉(zhuǎn)錄前發(fā)生，在分化細(xì)胞中尤為突出，基因重排分兩大類：A非定向重排，如轉(zhuǎn)座子在染色體上的移動，可使某些基因缺失或失活致使遺傳不穩(wěn)定。B定向重排，如小鼠免疫球蛋白結(jié)構(gòu)基因的表達(dá)，使遠(yuǎn)離啟動子的基因位置到距啟動子很近而被啟動。⑸基因修飾：A基因修飾發(fā)生在水平，主要包括甲基化修飾（主要出現(xiàn)在、組蛋白）及轉(zhuǎn)座子插入等。B甲基化修飾因影響構(gòu)象而影響和參與起始轉(zhuǎn)錄的一些蛋白質(zhì)互相作用，從而影響轉(zhuǎn)錄起始。什么叫基因沉默（現(xiàn)象、實(shí)驗(yàn)），引起基因沉默的原因有哪些？通過對染色體區(qū)土^的修f來把排斥基因上大片段的封閉，稱為基因沉默?基因不表達(dá)稱為基因沉默基因沉默有位置效應(yīng)，有轉(zhuǎn)錄水平的沉默，還有轉(zhuǎn)錄后水平的沉默。是一種位置效應(yīng)，基因因他所處的位置而沉默，而不是一種對環(huán)境某一特異信號的應(yīng)答反應(yīng)。最常見的沉默形成與被稱為異染色質(zhì)的一種致密形式的染色質(zhì)有關(guān)，在光學(xué)顯微鏡下的外觀與常染色體相比看起來很致密，如果用實(shí)驗(yàn)方法將某個基因轉(zhuǎn)移到該區(qū)域，那么該基因通常被關(guān)閉。在酵母中，沉默由組蛋白的脫乙?；c甲基化作用介導(dǎo)。在哺乳動物中，甲基化與沉默狀態(tài)的基因有關(guān)，事實(shí)上，哺乳動物基因組上大片段的區(qū)域，正是通過這種方式被標(biāo)記，并且甲基化通常出現(xiàn)在異染色質(zhì)區(qū)域，這是因?yàn)榧谆男蛄型ǔ１唤Y(jié)合蛋白（如）識別。 結(jié)合蛋白可以募集組蛋白脫乙酰酶和組蛋白甲基化酶，而這兩種酶可以修飾鄰近的染色質(zhì)，因此 甲基化可以標(biāo)記隨后異染色質(zhì)形成的位點(diǎn)（見課本內(nèi)容）。原因：①點(diǎn)突變、無義突變導(dǎo)致肽鏈長度變化，原活性喪失，致死突變、使酶失活②抑制基因突變，抑制了該基因表型顯露③轉(zhuǎn)座子插入，使致失活④該基因修飾如甲基化使之封閉⑸干擾導(dǎo)致基因沉默簡述真核基因啟動子的研究方法（可加圖示），何謂突變掃描實(shí)驗(yàn)，此技術(shù)在基因表達(dá)調(diào)控中有何用途。突變掃描實(shí)驗(yàn)：逐個改變起始位點(diǎn)上游堿基（點(diǎn)突變）觀察各位點(diǎn)對啟動子轉(zhuǎn)錄效率的影響。用途：確定某基因表達(dá)的影響位點(diǎn)，如 酶的啟動子、、 、等。也可確定增強(qiáng)子的作用片斷，從而可以深入研究基因的調(diào)控機(jī)制。啟動子研究方法：（可能是）阻滯電泳法、足跡法、甲基化修飾等簡述轉(zhuǎn)錄因子的 結(jié)合結(jié)構(gòu)域和活性結(jié)構(gòu)域的結(jié)構(gòu)與特點(diǎn)。⑴結(jié)合域一般較?。?）已發(fā)現(xiàn)結(jié)構(gòu)域有：n旨，鋅指蛋白和類固醇受體中，有一小組與結(jié)合形成指狀突起，識別 大、小溝中特異序列：螺旋一轉(zhuǎn)角一螺旋（）通常會有多個與 相互作用的氨基酸殘基結(jié)合與 的大溝中。⑵活性結(jié)構(gòu)域，與 結(jié)合的蛋白常是二聚體或四聚體，兩種結(jié)構(gòu)：亮氨酸拉鏈，兩分子蛋白a螺旋區(qū)通過疏水鏈形成二聚體，其間每個有一個亮氨酸，其堿性區(qū)與 結(jié)合于 的大溝中； 一一在不同條件下形成不同的二聚體。真核生物表達(dá)調(diào)控一般是正調(diào)控，但有負(fù)調(diào)控，請分別說明。答：在真核基因轉(zhuǎn)錄的調(diào)控中，既有用激活物的調(diào)控（正調(diào)控），也有用阻竭物的調(diào)控（負(fù)調(diào)控），二者同等重要，真核中雖然既有正調(diào)控又有負(fù)調(diào)控成分，但目前為止已知主要是正調(diào)控，而且一個真核基因通常有多個調(diào)控序列，必須有多個激活物同時特異結(jié)合上才能啟動基因的轉(zhuǎn)錄。（應(yīng)該舉點(diǎn)例子）為什么內(nèi)部啟動子可以啟動轉(zhuǎn)錄而不影響轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物的準(zhǔn)確性。內(nèi)部啟動子啟動轉(zhuǎn)錄時所結(jié)合的轉(zhuǎn)錄因子分兩大類：即結(jié)合于起始位點(diǎn)處的必須因子和輔助因子（在下游），轉(zhuǎn)錄啟動后，下游輔助因子從結(jié)合位點(diǎn)脫落，故不影響轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物的準(zhǔn)確性，如 酶 內(nèi)部啟動子、i: 結(jié)合于 處 結(jié)合與其下游協(xié)助 結(jié)合在起始位點(diǎn)后，轉(zhuǎn)錄開始 、脫落； ： 直接結(jié)合于 和誘導(dǎo) 結(jié)合在起始位點(diǎn)處，啟動轉(zhuǎn)錄脫落。上游元件多樣性對真核表達(dá)調(diào)控的意義。上游元件使得更多的轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合，使轉(zhuǎn)錄正確定位。⑴真核生物基因表達(dá)是一個精確過稱，只有多樣的上游元件才能滿足其特異性要求；⑵各種轉(zhuǎn)錄因子存在其自身缺點(diǎn)，如基礎(chǔ)因子保守、誘導(dǎo)因子隨機(jī)排列，單獨(dú)無法完成基因精確調(diào)控，故需要各類因子結(jié)合，因此需要多樣上游元件與之匹配，（ 酶不能直接與啟動子直接結(jié)合，需上游因子誘導(dǎo)、啟動子需強(qiáng)啟動子增強(qiáng)轉(zhuǎn)錄）。⑶利用有限反式因子產(chǎn)生更多調(diào)控方式，減少物質(zhì)能量的浪費(fèi)什么叫應(yīng)答元件，說明其特點(diǎn)及作用原理。⑴被誘導(dǎo)轉(zhuǎn)錄因子識別和結(jié)合的上游 短序列，受同一誘導(dǎo)因子（如激素、熱休克）等調(diào)控的基因，其應(yīng)答元件相同，此應(yīng)答元件被同一起調(diào)節(jié)作用的轉(zhuǎn)錄因子識別。⑵特點(diǎn)：是啟動子上游元件或增強(qiáng)子元件；都會有短的保守序列，在不同的基因中均有寶樹形，但不完全相同；轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合區(qū)大于元件保守序列；元件與起始點(diǎn)（）沒有固定距離，通常在上游小于 處；一個元件可引起應(yīng)答調(diào)節(jié)，但有時又多拷貝。⑶作用原理：當(dāng)某一基因需要表達(dá)時，則與應(yīng)答元件結(jié)合的轉(zhuǎn)錄因子合成或活化，與應(yīng)答元件結(jié)合，此轉(zhuǎn)錄因子是聚合酶啟動轉(zhuǎn)錄的必須因子，其結(jié)合啟動轉(zhuǎn)錄和蛋白質(zhì)合成，使調(diào)節(jié)效應(yīng)出現(xiàn)。1真核生物啟動子元件具有保守性，一種元件可以在多個基因啟動子中出現(xiàn)，而一個轉(zhuǎn)錄因子也可以作用于多個基因，以上說法對嗎？具體說明。⑴以上說法正確。真核表達(dá)調(diào)控的特點(diǎn)就是由多種不同的順式元件和反式因子組合而成的復(fù)雜的以正調(diào)控為主的體系，是模塊化的組合。不同基因的啟動元件可以由相同的元件構(gòu)成，同理，同一個反式因子可以作用于所有含有相應(yīng)順式元件的基因上。⑵比如 含有 個框； 啟動子含有個 框，個 框，個框； 啟動子含有 個框，個 A框。每種順式元件需要特定的反式因子來識別，具有相同元件的基因，需要相同的反式因子來作用。各種啟動子中，上游元件的種類、數(shù)量、位置都不固定，造成了豐富多樣的組合，滿足了真核生物調(diào)控海量基因的需要。當(dāng)然，核心元件，如 框，各個啟動子中含有的數(shù)量和位置都是保守的。說明真核中多種蛋白因子（轉(zhuǎn)錄因子）對基因特異性表達(dá)的意義。真核中多種蛋白因子（轉(zhuǎn)錄因子）對基因特異性表達(dá)具有非常重要的意義，表現(xiàn)在：（）真核生物基因組大，基因種類多，準(zhǔn)確選擇，使其某一個基因表達(dá)必然需要一個十分精細(xì)的過程。（）轉(zhuǎn)錄因子中，基礎(chǔ)因子有較強(qiáng)的保守性（其結(jié)合序列的保守），單靠這些轉(zhuǎn)錄因子難以選擇特異性表達(dá)基因的啟動子。（）調(diào)節(jié)（誘導(dǎo)）因子的隨機(jī)排列不能產(chǎn)生功能轉(zhuǎn)錄，一個有功能的轉(zhuǎn)錄過程必須有多個轉(zhuǎn)錄因子的順序性特異結(jié)合，并同時與具有一定序列的序列匹配結(jié)合，才能保證正確選擇靶基因。（）真核生物大多數(shù)細(xì)胞高度分化，在分化細(xì)胞中只有少數(shù)基因表達(dá)，多個因子形成精細(xì)的正調(diào)控。（）若為負(fù)調(diào)控，則為了阻遏大多數(shù)基因表達(dá)。細(xì)胞要合成多個負(fù)調(diào)控因子一阻遏蛋白，必然給細(xì)胞造成大量能量和物質(zhì)的消耗。簡述轉(zhuǎn)錄水平調(diào)節(jié)和轉(zhuǎn)錄后調(diào)節(jié)。真核生物在轉(zhuǎn)錄水平上的調(diào)節(jié)主要是通過反式作用因子、順式作用元件和聚合酶的相互作用來完成的。當(dāng)反式作用因子和順式元件結(jié)合后，將影響轉(zhuǎn)錄起始復(fù)合物的形成，從而影響轉(zhuǎn)錄的起始和效率。a啟動子和增強(qiáng)子的順式作用元件真核細(xì)胞基因的啟動子由一些分散的保守序列組成，其中包括 框、 框和多個框等，后兩個均屬于上游控制元件，由增強(qiáng)子、沉默子及其應(yīng)答元件進(jìn)一步調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄活性。增強(qiáng)子能促進(jìn)轉(zhuǎn)錄，他由比較集中的保守序列組成，增強(qiáng)子具有組織特異性，他優(yōu)先或只能在某種類型的細(xì)胞中表現(xiàn)功能，增強(qiáng)子常存在與酶的超敏感部位。增強(qiáng)子與啟動子之間距離對活性并無影響，因?yàn)榭梢詮澢?，結(jié)合在增強(qiáng)子的反式激活因子能與轉(zhuǎn)錄復(fù)合物相作用，位于增強(qiáng)子的應(yīng)答元件可調(diào)節(jié)增強(qiáng)子的活性。b調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄的反式作用因子調(diào)解和控制轉(zhuǎn)錄活性的蛋白質(zhì)有三類：基本轉(zhuǎn)錄因子、上游因子和可誘導(dǎo)因子?；巨D(zhuǎn)錄因子結(jié)合在框和轉(zhuǎn)錄起點(diǎn)，與聚合酶一起形成轉(zhuǎn)錄起始復(fù)合物；上游因子結(jié)合在啟動子和增強(qiáng)子的上游控制位點(diǎn)；可誘導(dǎo)因子與應(yīng)答元件相互作用。所有結(jié)合的反式作用因子都有結(jié)合的結(jié)構(gòu)域，并由一些共同的結(jié)構(gòu)結(jié)合的基序結(jié)構(gòu)主要有：螺旋轉(zhuǎn)角螺旋，鋅指結(jié)構(gòu)，亮氨酸拉鏈，螺旋環(huán)螺旋等。（）轉(zhuǎn)錄后水平的調(diào)節(jié)在真核細(xì)胞中，基因轉(zhuǎn)錄的最初產(chǎn)物是前體，其長度比成熟的長的多，經(jīng)過剪切和拼接（剪切掉內(nèi)含子，把幾個外顯子拼接起來），戴帽（在轉(zhuǎn)錄后的端加上一個甲基化的鳥嘌呤核苷酸），加尾（在端加上多聚腺嘌呤核苷酸），可得成熟的分子，由不同的轉(zhuǎn)錄起點(diǎn)和終點(diǎn)轉(zhuǎn)錄的產(chǎn)物，以及內(nèi)部不同拼接點(diǎn)進(jìn)行拼接，加上不同編輯，可得到不同加工的，他們翻譯成不同的蛋白質(zhì)。在生物中存在一個基因可編碼（表達(dá)出）多種蛋白的原因（轉(zhuǎn)錄水平剪切，可變剪切和翻譯剪切）。在真核生物中存在著一個基因可編碼多種蛋白的情況，可能機(jī)制如下：（）翻譯剪切：在真核細(xì)胞中，基因轉(zhuǎn)錄的最初產(chǎn)物是前體，經(jīng)過剪切和拼接，戴帽，加尾，可得成熟的分子，由不同的轉(zhuǎn)錄起點(diǎn)和終點(diǎn)轉(zhuǎn)錄的產(chǎn)物，以及內(nèi)部不同拼接點(diǎn)進(jìn)行拼接，加上不同編輯，可得到不同加工的，他們翻譯成不同的蛋白質(zhì)。