飲食行業(yè)益生菌制品的質量控制與審批程序

益生菌制品的

質量控制與審批程序

中國疾病預防控制中心營養(yǎng)與食品安全所益生菌ProbioticsPRO-BIOTICS

meansForlife

益生菌意味著“為了生命”FAO/WHO益生菌的定義

益生菌是活的微生物，通過攝入足夠數(shù)量，對宿主起有益健康的作用。FAO/WHO—Probioticsare:“

Livemicroorganismswhichwhenadministeredinadequateamountsconferahealthbenefitonthehost

”益生菌－益生菌是活的微生物，通過攝入足夠數(shù)量，對宿主產(chǎn)生一種或多種特殊且經(jīng)論證的功能性健康益處。（歐洲食品與飼料菌種協(xié)會2002）PROBIOTICS－Probioticsarelivingmicroorganisms,whichwheningestedorlocallyappliedsufficientnumbers,haveoneormorespecifieddemonstratedfunctionalhealthbenefits

forthehost(EFFCA2002)我國有關益生菌的定義：益生菌是指對人和動植物有益的菌。由益生菌生產(chǎn)的產(chǎn)品稱為益生菌制品，包括活菌體、死菌體、菌體成分及代謝產(chǎn)物。益生菌的應用食品、功能性食品、膳食補充劑藥品、飼料、化妝品益生菌制品作為膳食補充劑（foodsupplements）有粉劑、膠囊或片劑乳酸菌Lacticacidbacteria是指能發(fā)酵糖和其它碳水化合物，產(chǎn)生大量乳酸的細菌的通稱。美國功能性食品市場每年以15~20%的速度增長,產(chǎn)值達33億美元。日本保健食品銷售額20世紀90年代初達4000億日元。（Berner&O’Donnell,1998）美國主主要的的功能能食（Berner&O’Donnell,1998）添加植物成成分或植物物提取物抗氧化、降降低心血管管疾病的危危險、降低低癌癥發(fā)發(fā)生的危險險、降低高高血壓的危危險添加生物活活性肽提高免疫系系統(tǒng)的功能能、提高礦礦物質的活活性等添加膳食纖纖維預防便秘、、降低腸癌癌發(fā)生的危危險、降低低血中膽固固醇添加ω-3多不飽飽和脂肪酸酸降低心臟病病發(fā)作的危危險、降低低某些癌癥癥發(fā)生的危危險、提高高免疫系統(tǒng)統(tǒng)功能等；；添加益生菌菌(probiotics)改善胃腸道道功能、提提高免疫系系統(tǒng)功能、、降低腸癌癌發(fā)生的危危險添加益生原原（prebiotics））改善胃腸道道功能、提提高免疫系系統(tǒng)功能、、降低腸癌癌發(fā)生的危危險常用的益生生菌雙歧桿菌（（Bifidobacterium）乳桿菌（Lactobacillus）世界上有70多種含含雙歧桿菌菌和乳桿菌菌的產(chǎn)品，，包括酸奶奶、奶粉和和冷凍甜點點等。日本有50多種含有有益生菌的的不同形式式的奶制品品歐洲酸奶對益生菌菌菌種的基本本要求1首先先而且最重重要的是安安全性必須來自人人體或食品品有長期安全全使用歷史史2生產(chǎn)產(chǎn)菌種的質質量控制3有實實驗證明具具有聲稱的的功能中國的益生生菌類保健健食品調節(jié)腸道菌菌群增強免疫力力從1997年至2004年一一共做了28個產(chǎn)品品，16個個含雙歧歧桿菌、9個含乳桿桿菌。劑型型包括粉劑劑、膠囊、、片劑、口口服液。大大部分產(chǎn)品品聲稱菌數(shù)數(shù)可達108~1011cfu/g(ml)，經(jīng)檢測測菌數(shù)可以以達到108cfu/g(ml)，液體體產(chǎn)品也可可達到106cfu/g(ml)。常用的益生生菌菌種（Berner&O’Donnel1998）菌種種菌菌株株嗜酸乳桿菌菌LactobacillusacidophilusLa1等保加利亞乳乳桿菌LactobacillusbulgaricusLb12乳乳桿菌LactobacilluslactisLa1植物乳桿菌菌Lactobacillusplatarum299v,LpO1鼠李李糖糖乳乳桿桿菌菌LactobacillusrhamnosusGG,GR-1羅伊伊氏氏乳乳桿桿菌菌LactobacillusreuteriSD2112干酪酪乳乳桿桿菌菌LactobacilluscaseiShirota,744類干酪乳桿菌菌LactobacillusparacaseiCRL431發(fā)酵乳桿菌LactobacillusfermentumRC-IRC瑞士乳桿菌LactobacillushelvertiucsBO2菌種菌菌株株青春雙歧桿菌菌-Bifidobacteriumadolescents長雙歧桿菌B.longumB536,SBT-2928短雙歧桿菌B.breveYakult兩雙歧桿菌B.bifidusBb-11乳雙歧桿菌B.lactisBb-02嬰兒雙歧桿菌菌B.infantisShirotaImmunitassB.EssensisDanone,(BioActivia)B.LaterosporusCRL431枯草芽孢桿菌菌Bacillussubtilis-雙歧桿菌和乳乳桿菌的安全全性問題認為是安全的的理由健康人體的腸腸道和泌尿-生殖道粘膜膜中數(shù)量相當當高極罕見與疾病病有關認為有安全性性問題的理由由除干酪乳桿菌菌（LactobacillusceseiShirota）和嗜酸酸乳桿菌（L.acidophilusNCFM）有幾百年年的安全使用用歷史外，大大部分益生菌菌沒有安全使使用歷史。2001年10月1日-10月4日日FAO/WHO專家委員員會在阿根廷廷科爾多瓦就就評價食品中中含活的益生生菌有關健康康及營養(yǎng)問題題召開會議。。會議認為有必必要建立評價價食品用益生生菌的系統(tǒng)方方法指南，以以確定其健康康聲稱。為建立益生菌菌的評價指南南、推薦指標標和方法成立FAO/WHO聯(lián)合合專家工作組組規(guī)定了確定健健康聲稱應提提供的資料目的是制定對對益生菌的最最低要求主要指食品用用益生菌，排排除治療用生生物制劑和基基因修飾的生生物2002年4月30日-5月1日日在加拿大安安大略省倫敦敦市FAO/WHO聯(lián)合合專家工作組組起草了《食品中益生菌菌的評價指南南GuidelinesfortheEvaluationofProbioticinFood》1確定益益生菌的屬/種/株用表型和基因因分型方法進進行株的鑒別益生菌的有益益作用有株的的特異性按國際菌種保保藏法保存菌菌株2功能能學特征體外試試驗胃酸耐耐受試試驗、、膽汁耐耐受性性、粘膜粘粘附性性和／／或人人上皮皮細胞胞粘附附性對條件件致病病菌的的抗菌菌活性性降低致致病菌菌表面面粘附附能力力膽鹽水水解酶酶活性性動物試試驗益生菌菌的安安全性性問題題全身感感染有毒代代謝活活性易感人人群過過度的的免疫疫刺激激基因轉轉移FAO/WHO專家家工作作組對對益生生菌進進行安安全性性評價價的建建議抗菌素素耐藥藥性類類型的的測定定某些代代謝活活性（（D-乳酸酸鹽的產(chǎn)生生、膽膽鹽非非共價價鍵結結合）的的評價價對人體體副作作用的的評價價售后消消費者者不良良反應應的流行病病學調調查如待評評價的的菌株株屬于于已知知對哺哺乳動動物物有毒毒性的的產(chǎn)毒毒菌種種，必必須測測定其其產(chǎn)毒毒能力力待評價價的菌菌株屬屬于已已知具具有溶溶血性性，必必須測測定其其溶血血活性性我國益益生菌菌產(chǎn)品品安全性性評價價與質質量控控制益生菌菌作為為一類類生物物活性性制品品，必須安安全、、有效效、穩(wěn)穩(wěn)定，，益生生菌類保健健食品品的生生產(chǎn)加加工有有其自自身的特殊殊性，，如為為了使使終產(chǎn)產(chǎn)品中中存在一定定數(shù)量量的益益生菌菌活菌菌體，，產(chǎn)品不能能進行行消毒毒滅菌菌。因因此加加強其質質量量管管理理確確保保產(chǎn)產(chǎn)品品質質量量尤尤為為重重要。。菌種種安安全全性性要要求求生物物學學、、遺遺傳傳學學、、功功效效學學特特性性明明確和和穩(wěn)穩(wěn)定定。。菌種種及及其其代代謝謝產(chǎn)產(chǎn)物物必必須須無無毒毒無無害害。。來源源及及國國內內外外安安全全食食用用資資料料。。安全全性性評評價價資資料料（（包包括括毒毒力力試試驗驗））。。生產(chǎn)產(chǎn)菌菌種種的的質質量量控控制制建立立種種子子庫庫一旦旦確確定定某某一一菌菌種種作作為為生生產(chǎn)產(chǎn)用用菌菌種種，，應應建建立菌菌種種庫庫以以確確保保為為每每次次生生產(chǎn)產(chǎn)提提供供充充足足的的、、性狀狀穩(wěn)穩(wěn)定定的的菌菌種種，，以以避避免免或或減減少少菌菌種種的的污污染及及因因菌菌種種傳傳代代過過多多而而導導致致遺遺傳傳變變異異。。一一般需需要要建建立立三三級級菌菌種種庫庫，，即即原原代代（（原原始始））種子子庫庫、、主主代代（（主主））種種子子庫庫和和生生產(chǎn)產(chǎn)（（工工作作））種子子庫庫。。原代代種種子子庫庫—指經(jīng)經(jīng)研研究究、、篩篩選選、、鑒鑒定定后后確定定為為食食品品用用益益生生菌菌制制品品生生產(chǎn)產(chǎn)用用菌菌種種，，經(jīng)經(jīng)擴大大一一代代后后冷冷凍凍干干燥燥一一定定數(shù)數(shù)量量的的單單支支菌菌種種作為為種種子子，，2～～8℃保存存，，一一般般定定0代代。。主代代種種子子庫庫—原代代種種子子經(jīng)經(jīng)擴擴大大培培養(yǎng)養(yǎng)得得到到均勻勻的的，，冷冷凍凍干干燥燥制制成成一一定定數(shù)數(shù)量量的的單單支支菌菌種，，作作為為制制備備生生產(chǎn)產(chǎn)種種子子庫庫的的菌菌種種，，2～～8℃保存存。。主主代代種種子子一一般般采采用用1～～3代代。。生產(chǎn)產(chǎn)種種子子庫庫—主代代種種子子經(jīng)經(jīng)擴擴大大培培養(yǎng)養(yǎng)得得到的的均均勻勻培培養(yǎng)養(yǎng)物物，，冷冷凍凍干干燥燥制制成成一一定定數(shù)量量的的單單支支菌菌種種，，2～～8℃保存，或或懸浮于特定定培養(yǎng)液液（保護護液），，分裝安安培置–70℃以下保存存。每生生產(chǎn)一批批產(chǎn)品用一只菌菌種，用用于生產(chǎn)產(chǎn)之前要要進行部部分項目的的檢定，，合格后后方可使使用，生生產(chǎn)種子一一般采用用3～5代?！兑嫔愵惐＝∈呈称穼徳u評規(guī)定（試試行）》第二條益益生菌類類保健食食品系指指能夠促促進腸內內菌群生生態(tài)平衡衡，對人人體起有有益作用用的微生生態(tài)產(chǎn)品品。第三條益益生菌菌菌種必須須是人體體正常菌菌群的成成員，可可利用其其活菌、、死菌及及其代謝謝產(chǎn)物。。益生菌類類保健食食品必須須安全可可靠，即即食用安安全，無無不良反反應；生生產(chǎn)用菌菌種的生生物學、、遺傳學學、功效效學特性性明確和和穩(wěn)定。。第四條可可用于保保健食品品的益生生菌菌種種名單由國國家食品品藥品監(jiān)監(jiān)督管理理局公布布。第五條國國家食品品藥品監(jiān)監(jiān)督管理理局對保保健食品的的益生菌菌菌種鑒鑒定單位位進行認認定或認可，菌菌種鑒定定單位的的名單由由國家食食品藥品監(jiān)督管管理局公公布。益生菌類類保健食食品的菌菌種鑒定定工作應應在國家食品品藥品監(jiān)監(jiān)督管理理局認定定或認可可的鑒定單位進進行。第六條申申請益生生菌類保保健食品品，除按按保健食品品有關規(guī)規(guī)定提交交申報資資料外，，還應提供以下下資料：：1、產(chǎn)品品配方及及配方依依據(jù)中應應包括確確定的菌菌種屬名名、種名名及菌株株號。菌菌種的屬屬名、種種名應有有對應的的拉丁學學名。舉例：長雙雙歧桿菌Bifidobacterium.longumB5362、菌種的的培養(yǎng)條件件（培養(yǎng)基基、培養(yǎng)溫溫度等）。。3、菌種來來源及國內內外安全食食用資料4、國家食食品藥品監(jiān)監(jiān)督管理局局認定或認認可的鑒定定機構出具具的菌種鑒鑒定報告。。5、菌種的的安全性評評價資料（（包括毒力力試驗）。。6、菌種的的保藏方法法7、對經(jīng)過過馴化、誘誘變的菌種種，應提供供馴化、誘誘變的方法法及馴化劑劑、誘變劑劑等資料。。8、以死菌菌和／或其其代謝產(chǎn)物物為主要功功能因子的的保健食品品應提供功功能因子或或特征成分分的名稱和和檢驗方法法。9、生產(chǎn)企企業(yè)的技術術規(guī)范和技技術保證。。10、企業(yè)業(yè)生產(chǎn)條件件符合《保健食品生生產(chǎn)良好規(guī)范》的證明文件件。申請注冊的的保健食品品，使用《可用于保健健食品的益生菌菌菌種名單單》之外的益生生菌菌種的的，還應提供菌種種具有功效效作用的研研究報告、、相關文獻獻資料和菌種種及其代謝謝產(chǎn)物不產(chǎn)產(chǎn)生任何有有毒有害作作用的資料。。由國家食食品藥品監(jiān)監(jiān)督管理局局組織相關關專業(yè)的專家家對菌種的的食用安全全性和功能能依據(jù)進行行評價后，在在按保健食食品的評審審程序進行行評審。第七條申申請人夠買買活菌種凍凍干粉直接接生產(chǎn)保健健食品，生生產(chǎn)加工工工藝只是混混合、灌裝裝過程，本本規(guī)定第六六條第5項項至第10項的資料料可由菌種種凍干粉原原料供應商商提供復印印件（加蓋蓋原料供應應商公章））并提供購購銷憑證。經(jīng)過長期保保藏的菌種種，由于種種種原因常常易發(fā)生變變異、衰退或或死亡。變變異是生物物基本特性性之一，當當菌種處在新新陳代謝水水平最低的的生活環(huán)境境之中，生生長繁殖受到到外界抑制制變?yōu)橥顟B(tài)，往往往更容易易發(fā)生變異。。因此各類類菌種在保保藏期間必必須定期檢檢查，采取措措施防止衰衰退、變異異或死亡，，發(fā)現(xiàn)變異異或衰退時能能及時恢復復。第八條申申請注注冊的用于于益生菌類類保健食品品生產(chǎn)的菌菌種應滿足足以下條件件：1、保健食品生生產(chǎn)用菌種種應采用種種子批系統(tǒng)統(tǒng)。原始種種子批應驗驗明其記錄錄、歷史、、來源和生生物學特性性。從原始始種子批傳傳代、擴增增后保存的的為主種子子批。從主主種子傳代代、擴增后后保存的為為工作種子子批。工作作種子批的的生物學性性狀應與原原始種子批批一致，每每批主種子子批和工作作種子批均均應按規(guī)程程要求保管管、檢定和和使用。在在適宜的培培養(yǎng)基上主主種子傳代代不超過10代，工工作種子傳傳代不超過過5代。2、試制單單位應有專專門的部門門和人員管管理生產(chǎn)菌菌種，建立立菌種檔案案資料，內內容包括菌菌種的來源源、歷史、、篩選、檢檢定、保存存方法、數(shù)數(shù)量、開啟啟使用、等等完整的記記錄。每年年向所在地地省級食品品藥品監(jiān)督督管理部門門書面匯報報管理情況況。3、菌種及及其代謝產(chǎn)產(chǎn)物必須無無毒無害，，不得在生生產(chǎn)用培養(yǎng)養(yǎng)基內加入入有毒有害害物質和致致敏性物質質。4、從活菌菌類益生菌菌保健食品品中應能分分離出與報報批和標識識菌種一致致的活菌。。第九條試試制益益生菌類保保健食品的的場所應具具備以下條條件：1、建立良良好生產(chǎn)規(guī)規(guī)范（GMP），并并逐步建立立危害分析析關鍵控制制典（HACCP））質量保證證體系。2、具備中中試生產(chǎn)規(guī)規(guī)模，即每每日至少可可生產(chǎn)500L3的生產(chǎn)能力力，并以中中試產(chǎn)品報報批。3、必須有有專門的廠廠房或車間間、有專用用的生產(chǎn)設設備和設施施；必須配配備益生菌菌實驗室，，菌種必須須有專人管管理，應由由具有中級級以上技術術職稱的細細菌專業(yè)的的技術人員員負責；制制訂相應的的詳細技術術規(guī)范和技技術保證。。第十條生生產(chǎn)用用菌種及生生產(chǎn)工藝不不得變更。。第十一條不不提提倡以液態(tài)態(tài)形式生產(chǎn)產(chǎn)益生菌類類保健食品品活菌產(chǎn)品品。第十二二條活活菌菌類益益生菌菌保健健食品品在其其保質質期內內活菌菌數(shù)不不得少少于106cfu/mL(g)。第十三三條益益生生菌類類保健健食品品如需需在特特殊條條件下下保存存，應應在標標簽和和說明明書中中標示示。第十四四條所所用益益生菌菌菌種種在其其發(fā)酵酵過程程中，，除培培養(yǎng)基基外，，不得得加入入具有有功效效成分分的動動植物物及其其它物物質。。第十五五條經(jīng)經(jīng)過過基因因修飾飾的菌菌種不不得用用于保保健食食品。。第十十六六條條本本規(guī)規(guī)定定由由國國家家食食品品藥藥品品監(jiān)監(jiān)督督管管理理局局負負責責解解釋釋。。第十十七七條條本本規(guī)規(guī)定定自自發(fā)發(fā)布布之之日日起起實實施施。。以以往往發(fā)發(fā)布布的的規(guī)規(guī)定定，，與與本本規(guī)規(guī)定定不不符符的的，，以以本本規(guī)規(guī)定定為為準準。?？捎糜糜谟诒１＝〗∈呈称菲返牡木N種名名單單兩歧歧雙雙歧歧桿桿菌菌Bifidobacteriumbifidum嬰兒兒雙雙歧歧桿桿菌菌B.infantis長雙雙歧歧桿桿菌菌B.longum短雙雙歧歧桿桿菌菌B.breve青春春雙雙歧歧桿桿菌菌B.adolescentis保加加利利亞亞乳乳桿桿菌菌Lactobacillusbulgaricus嗜酸酸乳乳桿桿菌菌L.acidophilus干酪酪乳乳桿桿菌菌干干酪酪亞亞種種L.caseisubsp.casei嗜熱熱鏈鏈球球菌菌Streptococcusthermophilus羅伊伊氏氏乳乳桿桿菌菌L.reuteri益生生菌菌菌菌種種鑒鑒定定單單位位名