實驗六產(chǎn)淀粉酶細菌的分離篩選_第1頁
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文檔簡介

實驗六

產(chǎn)淀粉酶細菌的分離篩選掌握分離篩選產(chǎn)生淀粉酶細菌的方法學習酶活分析實驗目的樣品：新鮮土壤樣品（同學自備）。培養(yǎng)基：淀粉培養(yǎng)基。無菌水：帶有玻璃珠裝有18mL無菌水三角瓶。其它：無菌培養(yǎng)皿、無菌吸管、無菌離心管、電子天平、記號筆、玻璃涂棒、酒精燈、火柴。實驗材料制備土壤稀釋液：

稱取土壤2g，放入18mL帶有玻璃珠的無菌水三角瓶中，振蕩5min，即為稀釋10-1的土壤懸液。然后在離心管中依次稀釋至10-3、10-4稀釋度。制備淀粉培養(yǎng)基平板

每組制5塊牛膏蛋胨培養(yǎng)基平板

具體制法為：倒入融化好的牛膏蛋胨培養(yǎng)基約15ml后（溫度為不燙手為宜），置于桌面冷卻為固體平板。在無菌培養(yǎng)皿底部注明分離菌名、稀釋度、組別、班級。

實驗步驟吸取稀釋液

無菌操作法分別吸取10-3、10-4土壤稀釋液0.1mL，分別加在已制好的2塊淀粉平板培養(yǎng)基上。涂板

用涂布棒將稀釋液在培養(yǎng)基上充分混勻鋪平，靜置5min劃線分離

將10-1土壤稀釋液用接種環(huán)挑取一環(huán)，每人在一塊淀粉培養(yǎng)基上進行劃線分離。然后倒置于恒溫箱培養(yǎng)。看演示培養(yǎng)

倒置于房間37℃恒溫箱培養(yǎng)24小時。

24小時后(定時間），在之前稀釋涂布和劃線的3塊淀粉培養(yǎng)基上選取典型細菌菌落（盡量選取邊緣整齊和規(guī)則的菌落），測量其菌落半徑（C值）并用記號筆進行編號、記錄。然后將編號后的菌落用無菌牙簽挑取，在備用的1塊淀粉培養(yǎng)基平板上分別點種。演示

12312觀察水解圈的產(chǎn)生，并測量其半徑加入碘液到長有菌落的3塊淀粉培養(yǎng)基上，觀察是否有水解圈的產(chǎn)生，并測量其半徑（H值）。對照備用點種平板和編號菌落的水解圈大小，挑取水解圈最大的一個菌斑（計算H/C），用記號筆將其勾選出來。將點種平板繼續(xù)置于30℃培養(yǎng)。

實驗紀錄：拍照紀錄篩選培養(yǎng)基平板上的水解圈。

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