微生物-培養(yǎng)方法

選修一專題2微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用微生物的種類非細胞：病毒；原核細胞：細菌、藍藻、放線菌、支原體等。真核細胞：真菌、原生生物、藻類等。細菌：大腸桿菌、乳酸菌等真菌：酵母菌、霉菌；原生生物：草履蟲、變形蟲等。微生物的特點體積小，面積大吸收多，轉(zhuǎn)化快生長旺，繁殖快；適應(yīng)強，易變異;分布廣，種類多。微生物的營養(yǎng)培養(yǎng)基：碳源、氮源、水、無機鹽等。適宜的環(huán)境條件：溫度、pH、氧氣等。自養(yǎng)型：無機碳源；異養(yǎng)型：有機碳源。細菌(1)結(jié)構(gòu)：單細胞的原核生物，有球形，桿形，螺旋形?；窘Y(jié)構(gòu)：細胞壁、細胞膜、細胞質(zhì)、擬核。特殊結(jié)構(gòu)：莢膜、鞭毛、菌毛、芽胞。

(3)繁殖:二分裂。菌落菌落：單個細菌用肉眼是看不見的，當單個或少數(shù)細菌在固體培養(yǎng)基上大量繁殖時，便會形成一個肉眼可見的，具有一定形態(tài)結(jié)構(gòu)的子細胞群落。

菌落是菌種鑒定的重要依據(jù)。不同種類的細菌菌落的大小，形狀光澤度顏色硬度透明度都不同。培養(yǎng)基的種類及應(yīng)用按物理狀態(tài)不同劃分固體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基半固體培養(yǎng)基按化學組成不同劃分：合成培養(yǎng)基/天然培養(yǎng)基按用途不同劃分鑒別培養(yǎng)基選擇培養(yǎng)基無菌技術(shù)消毒：不能殺死芽孢和孢子。煮沸、紫外線、化學藥劑滅菌：能殺死芽孢和孢子。高壓蒸汽滅菌、灼燒、干熱、過濾。配制培養(yǎng)基包器材滅菌菌種擴增倒平板接種培養(yǎng)觀察記錄實驗操作——微生物的培養(yǎng)配制培養(yǎng)基LB培養(yǎng)基:

蛋白胨：10g

酵母粉：5gNaCl：10g

瓊脂：20g

將上述物質(zhì)溶解后，用蒸餾水定容至1000ml，分裝后及時滅菌。包器材滅菌高壓蒸汽滅菌：通過加熱使菌體內(nèi)蛋白質(zhì)凝固變性，從而達到殺菌目的。條件：壓力100kPa溫度121℃時間15-30min菌種擴增搖床震蕩培養(yǎng)12h（于LB液體培養(yǎng)基中）本圖來自十一學校實驗用具LB固體培養(yǎng)基大腸桿菌菌液（LB液體培養(yǎng)基）培養(yǎng)皿接種環(huán)酒精棉酒精燈鑷子、火柴、記號筆接種前準備用肥皂洗手并使用酒精消毒。順序：點燃酒精燈→酒精棉擦拭雙手→酒精棉擦拭桌面倒平板接種、劃線灼燒接種環(huán)→取菌液→劃線分離→燒至暗紅接種、劃線灼燒接種環(huán)→取菌液→劃線分離→菌液膜接種、劃線灼燒接種環(huán)→取菌液→劃線分離→接種、劃線①③②劃線分離為什么通過劃線分離可得到單菌落？倒置后做好標記，寫在培養(yǎng)皿側(cè)面劃線分離我們的實驗結(jié)果培養(yǎng)為什么要倒置培養(yǎng)？恒溫37℃培養(yǎng)配制菌懸液1個99ml無菌水2個9ml無菌水得10-2,10-3,10-4的菌懸液1g土壤稀釋菌懸液（10-4）高濃度→低濃度，換槍頭接種取200ul菌懸液(10-4)涂布分離低濃度→高濃度，可不用換槍頭涂布分離涂布前后三角刮刀需要灼燒嗎？37℃倒置培養(yǎng)按濃度捆成一摞恒溫37℃培養(yǎng)10-4

、10-3,、10-2常見接種方法平板劃線法：主要用于分離、純化培養(yǎng)稀釋涂布平扳法：主要用于分離菌種并計數(shù)

常用方法

微生物培養(yǎng)和組培中的應(yīng)用消毒煮沸玻璃儀器紫外