時間分辨分析儀

時間分辨分析儀永州職業(yè)技術(shù)學(xué)院楊曉斌2第四節(jié)時間分辨分析儀近年來，時間分辨熒光免疫分析（time-resolvedfluorescenceimmunoassay，TRFIA）作為一種新型的非放射性免疫標(biāo)記技術(shù)，具有靈敏度高、線性范圍寬、應(yīng)用范圍廣等優(yōu)點。返回目錄3一、時間分辨分析儀的分型及特點TRFIA可以分為均相和非均相兩種類型。均相

TRFIA省去了洗滌、分離和加增強液等煩瑣的步驟，具有快速、方便等優(yōu)點，但不足之處是需要特殊螯合劑。

非均相

TRFIA目前廣泛應(yīng)用于臨床，又可以分為好幾種測量方法。12返回目錄4一、時間分辨分析儀的分型及特點非均相TRFIA

解離增強測量法

固相熒光測量法

直接熒光測量法

協(xié)同熒光測量法

返回目錄5二、時間分辨分析儀的檢測原理與基本結(jié)構(gòu)用鑭系三價稀土離子及其螯合物作為示蹤物標(biāo)記抗原、抗體、核酸探針等物質(zhì)，反應(yīng)后，將結(jié)合部分與游離部分分開，根據(jù)稀土離子螯合物的熒光光譜的特點（特異性強、Stokes位移大、熒光半衰期長），待背景熒光信號降低到零以后，再進(jìn)行測定，此時所得信號完全是稀土元素螯合物發(fā)射的特異熒光。根據(jù)熒光強度判斷反應(yīng)體系中分析物的濃度，達(dá)到定量分析的目的。（一）檢測原理返回目錄6（一）檢測原理正常情況下，免疫復(fù)合物中的稀土離子自身熒光信號很微弱，若加入一種酸性增強液，可使原來微弱的熒光信號增強將近100萬倍。返回目錄7（二）基本結(jié)構(gòu)DELFIA為臺式儀器，由樣品處理系統(tǒng)、實驗運行系統(tǒng)、檢測系統(tǒng)和電腦數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)四部分組成。返回目錄8三、性能評價時間分辨熒光免疫分析儀具有靈敏度高、特異性高、線性范圍寬、標(biāo)準(zhǔn)曲線穩(wěn)定性好、試劑有效期長和易于自動化等優(yōu)點，是臨床醫(yī)學(xué)實驗室理想的免疫分析儀之一。此外，時間分辨熒光免疫檢測動態(tài)范圍寬，可達(dá)4~5個數(shù)量級；標(biāo)記物制備簡單，穩(wěn)定性好，有效使用時間長，多數(shù)可達(dá)6個月；標(biāo)記蛋白時反應(yīng)條件溫和，免疫活性很少受損；測量快速。返回目錄9四、儀器的使用與維護(hù)及常見故障處理開

機檢查試劑和耗材是否到位，選擇測試模式，設(shè)置系統(tǒng)參數(shù)，進(jìn)行校準(zhǔn)、定標(biāo)和質(zhì)控樣品放入樣品架，并放到裝載位置，創(chuàng)建工作表，編輯試管架圖，輸入樣品ID和測試項目樣品裝載關(guān)

機處理廢棄物，清洗管路，關(guān)閉電腦電源，關(guān)閉微孔板處理器和樣品處理器電源依次打開樣品處理器電源、微孔板處理器電源、計算機電源，運行系統(tǒng)軟件結(jié)果測定結(jié)果被保存在指定的文件夾中，可以在屏幕瀏覽結(jié)果并發(fā)送報告，并打印結(jié)果。樣本測定按開始鍵，儀器顯示試劑架各試劑和消耗品的情況，檢查無誤后，點擊“OK”。（一）操作流程圖工作前準(zhǔn)備返回目錄10（二）儀器的維護(hù)時間分辨熒光免疫分析儀所在實驗室需要適宜的溫濕度，實驗室應(yīng)注意清潔，防止灰塵。我們對儀器的維護(hù)工作包括：1．每日維護(hù)2．每周維護(hù)3．每月維護(hù)返回目錄11（三）常見故障處理故障現(xiàn)象原因分析處理方法儀器自檢不通過，或在開始實驗時提示錯誤，實驗無法繼續(xù)（1）左側(cè)增強液瓶未擰緊或無增強液或儀器的流量傳感器漂移。（2）測量部件濾光片灰塵較多，儀器本底過高。（3）試劑傳送器或微孔板傳送器的傳感器有灰塵或故障。（1）重新擰緊增強液瓶。對儀器的流量傳感器漂移問題應(yīng)聯(lián)系維修工程師（2）打開儀器蓋子，用擦鏡頭紙擦拭干凈。（3）用酒精棉球擦拭相應(yīng)傳感器和滑軌，然后用潤滑油擦拭滑軌，重新引導(dǎo)系統(tǒng)。不能正常加樣，實驗停止（1）試劑液體量不足，可能由于緩沖液（或標(biāo)記抗體）不夠。（2）試劑液體量過多，可能由于緩沖液（或標(biāo)記抗體）過多。（3）實驗中緩沖液（或標(biāo)記抗體）中氣泡過多，加樣頭遇到氣泡由于全自動儀器需要一定的保底量，在實驗前應(yīng)確保有足夠的液體，但也要注意不要超過一瓶未用過試劑相應(yīng)的量，需要溶解的試