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土壤菌Bacillus之分離

與

木聚糖水解脢及纖維素水解脢活性分析學(xué)生：何季庭指導(dǎo)教授：杜鎮(zhèn)研究員杜鎮(zhèn)中研院植物所425室學(xué)經(jīng)歷：德國(guó)慕尼黑大學(xué)博士IntroductionXylanase,CMCase廢料的處理資源回收再利用農(nóng)業(yè)畜牧業(yè)的利用BacillusCloningTechniqueMethod—Samplepreparation土壤樣品的採(cǎi)取Bacillus分離單株分離Congoredassay

多糖類(lèi)水解脢活性分析ZymogramCongoRedAssayXylan Congored AcetateZymogramReadproteinsizethencalculatethegenesizeSupernatant,pelletMethod—CloningTechniqueInsert：

ChromosomeDNAextraction

Partialdigest（Sau3AI）

Gelextraction（500bp-2kb）Vector：

Puc19

DigestedbyHindIII

Alkalinephosphotase

GelextractionpUC19PartialDigestionPuc19digestedbyHindIIIMethod—CloningTechniqueLigationElectroporesisLigationMethod—ClonesAssayAmpicillin-IPTG-X-galassay（Blue-whiteassay）CongoredassayPlasmidextraction,restrictionenzymecheckZymogramPlasmidAssayDigestedbyPvyII,twocutsitesonpUC19Method—FurtherexperimentSubcloningSequencingProteinpurificationProteinactivityassayCommercialapplicationFurtherresearchResult32xylanaseactivebacilliwereisolated28CMCasaactivebacilliwereisolatedNoxylanaseorCMCaseactiveclonewasdetectedDiscussionPartialdigestAmpicillinaffectscongoredassayBlue-whiteassayefficiencyisnotsoreliableThereasonoffailureImmatureoperating!!Bacillusanthracis

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