PCR基因擴增儀的分類和結構

聚合酶鏈反應基因擴增儀的分類和結構滄州醫(yī)學高等?？茖W校劉玉枝普通PCR擴增儀實時熒光定量PCR擴增儀

梯度PCR儀

原位PCR儀PCR擴增儀種類PCR基因擴增儀的分類和結構一、PCR基因擴增儀的分類

1.普通的PCR儀：一次PCR擴增只能運行一個特定退火溫度的PCR儀，又叫傳統(tǒng)的PCR儀。用途：主要是做一些簡單的、對單一退火溫度的目的基因進行擴增。PCR基因擴增儀的分類和結構

（1）梯度PCR儀：一次PCR擴增可以設置一系列不同的退火溫度條件(溫度梯度)，通常為12種溫度梯度的普通PCR儀。用途：研究未知DNA退火溫度的擴增。PCR基因擴增儀的分類和結構

（2）原位PCR：將具有細胞定位能力的原位雜交技術運用于從細胞內靶DNA的定位分析，在細胞內實現(xiàn)基因擴增的普通PCR儀。用途：用于在細胞的靶DNA所在位置上進行基因擴增。PCR基因擴增儀的分類和結構

2.實時熒光定量PCR儀：PCR擴增時加入的引物利用熒光素進行標記，使引物和熒光探針同時與模板進行特異性結合，擴增結果通過熒光信號采集系統(tǒng)實時采集信號并輸送到計算機分析處理系統(tǒng)，實時輸出量化結果，這樣的PCR儀叫實時熒光定量PCR儀。PCR基因擴增儀的分類和結構

實時熒光定量PCR儀就是在普通PCR儀的基礎上增加一個熒光信號采集系統(tǒng)和計算機分析處理系統(tǒng)。PCR基因擴增儀的分類和結構

二、PCR基因擴增儀的基本結構

1.普通的PCR儀：根據(jù)溫控方式分：PCR基因擴增儀的分類和結構普通PCR儀

水浴式PCR儀

變溫金屬塊式PCR儀

變溫氣流式PCR儀

（1）水浴式PCR儀：構成：三個不同溫度的水浴槽、機械臂、計算機?？販胤绞剑喊雽w傳感技術。由于體積較大、自動化程度低已逐漸淘汰。PCR基因擴增儀的分類和結構

（2）變溫金屬塊式PCR儀：構成：中心由鋁塊或不銹鋼制成的熱槽，上有凹孔放置樣品管?？販胤绞剑喊雽w加熱和冷卻，計算機控制恒溫和冷熱處理過程。

PCR基因擴增儀的分類和結構

（3）變溫氣流式PCR儀：構成：機殼、熱源、冷空氣泵、控制器和輔助元件等?？販胤绞剑喊雽w加熱和冷卻，計算機控制恒溫和冷熱處理過程。

PCR基因擴增儀的分類和結構

二、PCR基因擴增儀的基本結構

PCR基因擴增儀的分類和結構

2.實時熒光定量PCR儀

擴增系統(tǒng)：與普通PCR儀相似。構成熒光檢測系統(tǒng)：激發(fā)光源和檢測器。熒光檢測系統(tǒng)

激發(fā)光源

檢測器

發(fā)光二極管

鹵鎢燈光源

超低溫CCD

光電倍增管PCR基因擴增儀的分類和結構Cycle（循環(huán)數(shù)）Rn（熒光強度）

基線

對數(shù)期平臺期熒光基團熒光信號檢測系統(tǒng)

PCR基因擴增儀的分類和結構激發(fā)光源:PCR基因擴增儀的分類和結構發(fā)光二極管LED:

熒光染料受到激發(fā)后，其發(fā)射熒光透過其上方的一個透鏡陣列，通過96根單獨的光纖送至檢測元件。PCR基因擴增儀的分類和結構QiagenRotor-GeneQ定量PCR儀截面圖:PCR基因擴增儀的分類和結構

二、PCR基因擴增儀的基本結構實時熒光定量PCR儀

金屬板式實時定量PCR儀

離心式實時定量PCR儀

各孔獨立控溫的定量PCR儀PCR基因擴增儀的分類和結構2.實時熒光定量PCR儀：根據(jù)控溫方式不同分：

（1）金屬板式實時定量PCR儀：可作為普通PCR儀使用;可帶梯度功能可容納樣本量大，無需特殊耗材。溫度均一性欠佳，有邊緣效應，標準曲線的反應條件難以做到與樣品完全一致。

PCR基因擴增儀的分類和結構

（2）離心式實時定量PCR儀溫度均一性較好；使用的是同一個激發(fā)光源和檢測器，隨時檢測旋轉到跟前的樣品，有效減少系統(tǒng)誤差；可容納樣品量少，有的需用特殊毛細管作樣品管，增加了使用成本，也不帶梯度功能。PCR基因擴增儀的分類和結構LightCycleTM熒光定量PCR儀結構示意圖

PCR基因擴增儀的分類和結構

（3）各孔獨立控溫的定量PCR儀不同樣品槽分別擁有獨立的智能升降溫模塊，各孔獨立控溫，適合多指標快速檢測。SmartCyclerⅡ的軟件允許