丙型肝炎病毒的生物危害評估報告

丙型肝炎病毒的生物危害評估報告丙型肝炎病毒的傳播與致病1212HCV30-90%輸血后肝炎為丙型肝炎，我國輸血后肝炎中丙型肝炎占1/3。此外還可通過其他方式如母嬰垂直傳播，家庭日常接觸和性傳播等。輸入含HCVHCV-RNA的血漿或血液制品，一般經(jīng)73T上升，抗HCV50%可進展為慢性肝炎，甚至局部病人會導(dǎo)致肝硬及肝細胞癌。其余約半數(shù)病人為自限性，可自動康復(fù)。丙型肝炎發(fā)病機理仍未格外清楚，當(dāng)HCV在肝細胞內(nèi)復(fù)制引起肝細胞構(gòu)造和功能轉(zhuǎn)變或干擾肝細胞蛋白合成，可造成肝細胞變性壞死，說明HCV直接損害肝臟，導(dǎo)致發(fā)病起肯定作用。但多數(shù)學(xué)者認為細胞免疫病理反響可能起重要作用，覺察丙型肝炎與乙型肝炎一樣，其組織浸潤細胞以CD3+為主，細胞毒T細胞〔TC〕HCV感染的靶細胞，可引起肝細胞損傷。臨床觀看資料說明，人感染HCV后所產(chǎn)生的保護性免疫力很差，能再感染不同，甚至局部病人會導(dǎo)致肝硬化及肝細胞癌。其余約半數(shù)病人為自限性，可自動康復(fù)。結(jié)核桿菌通常指結(jié)核分枝桿菌和牛分枝桿菌〔Mycobacteriumtuberculosis〕是引起人類結(jié)核病的主要病原體。話時隨呼吸道分泌物排出到空氣中，或排菌的肺結(jié)核病人隨地吐痰通過再生氣溶膠(塵埃)，(尤其是痰涂片陽性未經(jīng)治療者)是結(jié)核病的主要傳染源。一般結(jié)核病患者痰中結(jié)核桿菌越多，傳播的危急性越大?；颊吲懦龅娘w沫在1-10微米者，在空氣中漂移時間長，傳染性越大?；蓟颊咄幱诳諝獠涣魍ǖ氖覂?nèi)的親熱接觸者，受感染的可能性增大。豬、貓、狗等也都可以患結(jié)核病。2個月～20年才發(fā)病。典型肺結(jié)核起病緩慢，病程較長，有低熱、倦怠、食欲不振、咳嗽及少量咯血。但多數(shù)患者病〔1〕病癥①全身病癥表現(xiàn)為午后低熱、乏力、食欲不振、消瘦、盜汗等。②呼吸系統(tǒng)病癥通常為干咳或帶少量黏液痰；繼發(fā)感染時，痰呈粘液膿性。約1/3患者有不同程度咯血，咯血后常有低熱。大咯血時可發(fā)生失血性休克，偶因血塊堵塞大而加重。假設(shè)并發(fā)氣胸或大量胸腔積液，呼吸困難病癥尤為嚴峻〔2〕體征早期病灶小或位于肺組織深部，多無特別體征。假設(shè)病變范圍較大，患側(cè)肺部呼吸運動減弱，叩診呈濁音，聽骨上下、肩胛區(qū)叩診略濁，咳嗽后偶可聞及濕啰音，對診斷有參考意義。肺部病變發(fā)生廣泛償性肺氣腫征。二、結(jié)核桿菌的生物學(xué)特性從分類學(xué)上看結(jié)核桿菌屬于裂殖菌綱、放線菌目、分枝桿菌科、分枝桿菌屬。1-4納米，寬0.3-0.6V、T、Y”形排列，菌體多時細菌扭集一起呈繩索狀、束狀或叢狀。此外結(jié)核桿菌菌體還具有多形態(tài)特征，受不良生長條件的影響可分別表現(xiàn)為桿菌型(根本形態(tài))、濾過型、顆粒型和球菌型(L型)4種不同的類型。分枝桿菌生長緩慢，在人工培育基內(nèi)生殖一代約需15-20小時，一般需2-4周或更長時間始8周以上才開頭有菌落生長35-40℃，pH5.5-7.2生菌落形態(tài)、毒力、L型及藥物耐藥性變異，如在人工培育基上反復(fù)連續(xù)傳代，可產(chǎn)生變異而致毒力降低。三、丙型肝炎病毒的檢測與診斷一、試驗室檢查〔一〕血常規(guī)急性肝炎初期白細胞總數(shù)正常或略高，一般不超過10×109/L，黃疸期白，紅細胞下降，血紅蛋白下降。肝炎肝硬化伴脾功能亢進可有血小板、紅細胞、白細胞削減的“三少”現(xiàn)象?！捕衬虺Ｒ?guī)尿膽紅素和尿膽原的檢測是早期覺察肝炎的簡易有效方法，同時有助于黃素為主。深度黃疸或發(fā)熱患者，尿中除膽紅素陽性外，還可消滅蛋白質(zhì)、紅、白細胞或管型?！踩掣喂δ軝z查1、血清酶測定1〕丙氨酸氨酶，曾稱為谷丙氨酶：是目前林裝上反映肝細胞功能的最常用指標(biāo)。ALT在肝細胞損傷時釋放入血流。血清ALT上升，對肝病診斷的特異性比天冬氨酸氨酶〔AST〕ALTASTALT明顯上升，AST/ALT1ALTALT輕度或中度上升或反復(fù)特別，AST/ALT常大于1。比值越高，則預(yù)后愈差，病程中AST/ALT比值降低，提示未ALT膽分別現(xiàn)象，提示肝細胞大量壞死〕天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶，曾稱為谷草轉(zhuǎn)氨酶：此酶在心肌含量最高，依次為肝、骨骼肌、腎、胰。在肝臟，AST80％存在于肝細細胞線粒體中20AST上升，與肝病嚴峻程度呈正相關(guān)。當(dāng)病變長久且較嚴峻ASTAST持續(xù)在高水平，有轉(zhuǎn)為慢性肝炎的可能。心肌其其他臟器細胞受損時，AST亦上升，應(yīng)予以鑒別，以免此類疾病被肝炎病癥所掩蓋3Y谷氨酰胎酶Y：肝炎和肝癌患者可顯著上升，在膽管堵塞的狀況下更明顯，YGT活性變化與肝病病理轉(zhuǎn)變有良好的全都性〔5〕膽堿酯酶：由肝細胞合成，其活性降低提示肝細胞已有較明顯損傷，其值愈低，提示病情愈重。6〕堿性磷酸酶P或：正常人血清中TP測定主要用于肝病和骨病的臨床診ALP血清P活性上升。2、血清蛋白主要由比蛋白A，1、2、β及Y球蛋白組成。前4種主要由肝細胞合成，Y21型肝炎時消滅白蛋白下降，Y球蛋白上升，白/球〔A/G〕比例下降甚至倒置。血清蛋白電泳分析則從另一角度來檢測白、球蛋白各成份的相比照值，起到一樣的診斷作用。3慢，重型肝炎常超過171vmol/L。一般狀況下，肝損程度與膽紅素含量呈正相關(guān)。直接膽紅素在總膽紅素中的比例尚可反映淤膽程度。4、凝血酶原活動度〔PTA〕PTA凹凸與肝損程度成反比。＜40％是診斷重型肝炎的重要依據(jù)，亦是推斷重型肝炎預(yù)后的敏感指標(biāo)。5〔四〕其他生化指標(biāo)檢測1、電解質(zhì)重型肝炎常見低KNaCICa2Mg2＋、低P2K＋。2、血糖超過40％的重型肝炎患者有血糖降低。臨床上應(yīng)留意低血糖昏迷與肝性腦病的鑒別。3、血漿膽固醇60％—80成削減，故血漿膽固醇明顯下降，膽固醇愈低，預(yù)后愈險惡。梗阻性黃疸時膽固醇上升。4CH50C3補體對預(yù)后有評估作用。5、甲胎蛋白〔AFP〕HBVHCVHCC的發(fā)生有明顯相關(guān)性，AFP含量的檢測是HCCAFP均有不同程度的上升，應(yīng)進展動態(tài)觀看。急性重型肝炎AFP上升時，提示有肝細胞再生，為預(yù)后良好的標(biāo)志。6、膽汁酸血清中膽汁含量很低，當(dāng)肝炎活動時膽汁酸上升。由于肝臟對膽紅素和膽汁酸的運轉(zhuǎn)活動不同，檢測膽汁酸有助于鑒別膽汁淤積和高膽紅素血癥?！参濉掣卫w維化指標(biāo)一些檢測工程已在臨床上應(yīng)用，如3型較膠原體，4型膠原、層連蛋白、透亮質(zhì)酸、脯氨酰羥化酶等，對肝纖維化的診斷有肯定參考價值，但缺乏特異性?！擦巢≡瓕W(xué)檢查〔1〕HCVIgMHCVIgG：HCV抗體不是保護性抗體，HCV感染的標(biāo)志。HCVIgmHCV感染，抗HCVIgG陽性提示現(xiàn)正感染或既往感染。抗HCVIgM的檢測受較多因素的影響，如球蛋白、RF等，穩(wěn)定性不如抗HCVIgG。目前國內(nèi)多用酶免疫試驗〔EIA〕HCVIgG，試劑質(zhì)量與國外第三代診斷試劑持平?？笻CVIgG低滴度提示病毒處于靜止，高滴度提示病毒復(fù)制活潑〔2〕HCVRNA：HCV在血液中含量很少，分PCRHCVRNAPCR以提高檢出率。由于影響因素較多及技術(shù)要求較高易產(chǎn)生假陽性和假陰性，分析結(jié)果時應(yīng)結(jié)合臨床做出正確推斷。HCRNAHCVRNAbDNA探針技術(shù)、競爭PCR法、熒光定量法等，定量測定有助于了解病毒復(fù)制程度、抗病毒治療的選擇及療HCVRNA尚可進展基因分型，方法包括序列測定、PCR、酶切、探針雜交等，基因分型在流行病學(xué)和抗病毒治療等方法有肯定意義，但不作為常規(guī)。HCVHBVHCVHCVRNA，一般單位難開展此工程?！财摺秤跋駥W(xué)檢查B型超聲有助于鑒別堵塞性黃疸、脂肪肝及肝內(nèi)占位性病變。對肝硬化有較高的診斷價值，能夠反映肝臟外表變化，門靜脈、脾靜脈直徑，脾臟大小，膽囊特別等。CT、MRI的應(yīng)用價值根本同B超，但價格較昂貴，且有不同程度的損傷性，如應(yīng)用增加劑，可加重病情〔八〕肝組織病理檢查是明確診斷、衡量炎癥活動度、纖維化程度及評估療效的金標(biāo)準。還可在肝組織中原位檢測病毒抗原或核酸，以助確定病毒復(fù)制狀態(tài)。二、診斷〔一〕流行病學(xué)資料有輸血及血制品、靜脈吸毒、血液透析、多共性伴侶、懷孕或哺HCV感染等病史的肝炎患者應(yīng)疑心丙型肝炎?！捕撑R床診斷1、急性肝炎起病較急，常有畏寒、發(fā)熱、乏力、頭痛、納差、惡心、嘔吐等急性感染或黃疸前期病癥。肝大質(zhì)偏軟，ALT顯著上升。黃疸型肝炎血清膽紅素＞17.1umol/L，尿膽紅素陽性。黃疸型肝炎的黃疸前期、黃疸期、恢復(fù)期三期經(jīng)過明顯，病程6個月以內(nèi)。2者。常有乏力、厭油、肝區(qū)不適等病癥，可有肝病面容、肝掌、癡、胸前毛系血管擴張、肝〔表3—1—2〕度。3、重型肝炎主要有：極度疲乏；嚴峻消化道病癥如頻繁嘔吐、呃逆；黃疸快速加深消滅膽酶分別現(xiàn)象；肝臟進展性縮?。怀鲅獌A向，PTA＜40％，皮膚、粘膜出血；消滅肝性腦病，周內(nèi)消滅Ⅱ度以上肝性腦病或其他重型肝炎表現(xiàn)者，為急性重型肝炎；15天至20周消滅上述表現(xiàn)者為性肝炎病史。乏力，腹脹，尿少，肝掌，癡，脾大，腹水，腳腫，胃底食管下段靜脈曲張，白蛋白下降，A/G倒置等肝功能受損和門脈高壓表現(xiàn)?！踩巢≡瓕W(xué)診斷丙型肝炎具備急、慢性肝炎臨床表現(xiàn)，抗HCVHCVRNA陽性，可診斷為丙型肝炎。無任何病癥和體征，肝功能和肝組織學(xué)正常者為無病癥HCV攜帶者。三、預(yù)后1、急性肝炎多數(shù)患者在350％—80％轉(zhuǎn)為慢性或病毒攜帶。2、慢性肝炎輕度慢性肝炎患者一般預(yù)后良好；重度慢性肝炎預(yù)后較差，約80％五年內(nèi)進展成肝硬化，少局部可轉(zhuǎn)為HCC，病死率高達45％。中度慢性肝炎預(yù)后居于輕度和重度之間。慢性丙型肝炎預(yù)后較乙型肝炎好。3、重型肝炎預(yù)后不良，病死率50％—70％。年齡較小、治療準時、無并發(fā)癥病死率炎存活者多數(shù)轉(zhuǎn)為慢性肝炎或肝炎后肝硬化；慢性重型肝炎病死率最高，可達80％以上，存活者病情可屢次反復(fù)。4、淤膽型肝炎急性者預(yù)后較好，一般都能康復(fù)。慢性者預(yù)后較差，簡潔進展成膽汁性肝硬化。5、肝炎后肝硬化靜止性肝硬化可較長時間維持生命?；顒有愿斡不A(yù)后不良。細菌的試驗室檢查及其它檢查①結(jié)核菌檢查是確診肺結(jié)核最特異性的方法藥物敏感試驗與菌型鑒定。但結(jié)核菌生長緩慢，培育較為費時，但準確牢靠，特異性高。假設(shè)涂片陰性或診斷有疑問時，培育尤其重要；而且，培育后可做藥物敏感性測定，指導(dǎo)臨床用藥。PCR技術(shù)檢測結(jié)核菌DNA快速、簡便，并可鑒定菌型，缺乏之處是可能消滅假陽性或假陰性。②影像學(xué)檢查胸部X線檢查可以覺察肺內(nèi)病變的部位、范圍、有無空洞或空洞大小、洞X線對各類結(jié)核病的透過度不同X線檢查能大致估量結(jié)核病灶的病理性質(zhì)，X線表現(xiàn)包括：纖維鈣化的硬結(jié)病灶、浸潤性病灶以及干酪樣病灶等。胸部CT檢查對于覺察微小或隱蔽性病變，了解病變范圍及病變鑒別等方面均有幫助?！瞣ldtuberculin,〕和結(jié)核菌素的純化蛋白衍化物dn,D，現(xiàn)臨床多用。皮內(nèi)注射〔m為陽性反響。結(jié)核菌素試驗有助于推斷有無結(jié)核狀況：結(jié)核菌在感染4～8周后才建立充分變態(tài)反響，在這之前，結(jié)核菌素試驗可呈陰性；消逝。④其它檢查結(jié)核病患者血像通常無轉(zhuǎn)變，嚴峻病例常有繼發(fā)性貧血，急性粟粒型肺結(jié)核時白細胞總數(shù)減低或消滅類白血病反響。血沉增快常見于活動性肺結(jié)核。用ELISA法檢測患者取活組織作病理檢查等，均有重要診斷價值。淺表淋巴結(jié)活檢，有助于結(jié)核的鑒別診斷。診斷和鑒別診斷X線檢查是診斷肺結(jié)核的必要手段，對早期診斷、確定病變部位、范圍、性質(zhì)、了解其演化及選擇治范圍及空洞部位、痰菌檢查、活動性及轉(zhuǎn)歸。肺結(jié)核分為五型：Ⅰ型為原發(fā)型肺結(jié)核；Ⅱ型為血行播散型肺結(jié)核；Ⅲ型為浸潤型肺結(jié)核；Ⅳ型為慢性纖維空洞型肺結(jié)核；Ⅴ型為結(jié)核性如傷寒、敗血癥、白血病、縱隔淋巴瘤及結(jié)節(jié)病等進展鑒別。四、結(jié)核桿菌的防治及生物安全防護細菌的防治依據(jù)《中華人民共和國傳染病防治法》和《試驗室生物安全通用要求》中的有關(guān)規(guī)定，結(jié)核病屬于乙類傳染病，依據(jù)乙類傳染病進展預(yù)防把握。源為主的綜合性防治措施，努力做到“早覺察、早報告、早治療源。臨床上肺結(jié)核化學(xué)治療的原則是早期、規(guī)律、全程、適量、聯(lián)合。整個治療方案分強化和穩(wěn)固兩個階段。我國結(jié)核病防治規(guī)劃指南規(guī)定承受統(tǒng)一標(biāo)準的化學(xué)治療方案。表1 國家防癆規(guī)劃的結(jié)核病化療方案療程 化療方案6個月 2RHZ/4RH2ERHZ/4RH4R2H22SRHZ/4RH4R2H28個月 2SRHZ/6TH或6EH2SRHZ/6S2H2Z2R代表利福平，H代表異煙肼，Z代表吡嗪酰胺，E代表乙胺丁醇，S代表鏈霉素，T代表丙2個月，斜線后字表示后幾個月。2S(E)RHZ/4RH(E)治規(guī)章治療失敗的患者，可用2S3H3Z3E3/6H3R3E3；③慢性排菌者可用敏感的一線藥與二線藥聯(lián)用，應(yīng)嚴密觀看藥物不良反響，療程以6～12個月為宜。組織形成及胸膜粘連。對咯血患者，應(yīng)對癥治療，包括休息、止咳、冷靜以及應(yīng)用止血藥如安絡(luò)血等。五、細菌的試驗室安全防護〔待公布〕結(jié)核桿菌屬于二類，BSL-3。WHO將結(jié)核桿菌生物危害等級定為Ⅲ級。全部參與結(jié)核桿菌防治和爭辯的試驗室和試驗室人員都必需遵核病診斷試驗室檢驗規(guī)程安全防護被覺察與治療。當(dāng)進展大量活菌試驗時，全部操作應(yīng)在BSL-3級試驗室生物安全柜中進展。器皿內(nèi)送檢。檢驗人員應(yīng)穿戴防護服、口罩、手套等防護裝備，嚴格遵守試驗操作規(guī)程，試驗室空氣、試驗臺面應(yīng)定時消毒。痰、尿標(biāo)本找抗酸桿菌，應(yīng)先高壓滅菌后，再涂片染色。護。藥物敏感性測定時，在磨菌、滴加菌液、接種培育物、燒灼接種環(huán)等操作過程有產(chǎn)生氣溶膠和意外濺灑的可能，試驗者有可能直接大劑量暴露細菌。因此該項操作肯定在BSL-3級試驗室完成，且最好試驗室內(nèi)要有負壓。并且操作者著二級生物防護用品。意外事故的處理結(jié)核桿菌的滅活方式有化學(xué)的和物理的方法。試驗過程中：75%已乙醇溶液的衛(wèi)生紙掩蓋污染區(qū)，15分鐘以后衛(wèi)生紙方可移去；如污染物濺落到身體外表，或有割傷、刺傷、燒傷、燙傷等狀況發(fā)生，應(yīng)馬上停頓試驗工眼睛用無菌生理鹽水沖洗；25%5%75%的乙醇溶液，2小時以上(其間適量添加溶液防止枯燥)，再經(jīng)紫外燈近距離(1米內(nèi))2小時以上；75%2處理；進展紫外燈照耀消毒過夜；其次天對污染區(qū)域進展24小時封閉空氣熏蒸消毒(乙醛消毒法：5ml乙醛+2g高錳酸鉀/平方米空間)，直接被污染的區(qū)域可參照第3)條進展處理。5〕馬上報告負責(zé)人。啟動報告程序。試驗室人員的防護工作，消滅以下狀況，不能進入：身體消滅開放性損傷；患發(fā)熱性疾?。桓忻?、上呼吸道感染、或其他導(dǎo)致抵抗力下降的狀況；妊娠、已經(jīng)在試驗室把握區(qū)域內(nèi)連續(xù)工作4h以上，或其他緣由造成的疲乏狀態(tài)。從事結(jié)核桿菌檢測工作人員可間隔數(shù)年接種卡介苗一次責(zé)人，實行早覺察、早報告、早治療以把握治理傳染源為主的綜合性防治措施。六、試驗室試驗活動危害評估具體風(fēng)險評估附表七、評估結(jié)論全部參與結(jié)核桿菌防治和爭辯的試驗室和試驗室人員都必需遵條例》和《結(jié)核病診斷試驗室檢驗規(guī)程防護要求操作，試驗室技術(shù)人員經(jīng)初審具備進展相關(guān)的試驗活動的資格。結(jié)核分枝桿菌試驗室活動風(fēng)險評估表危害發(fā)生固有措施殘留潛在危