論文寫(xiě)作格式模板

第7頁(yè)（共7頁(yè)）小4號(hào)仿宋體、居中，作者在上、指導(dǎo)教師在下；小4號(hào)仿宋體、居中，作者在上、指導(dǎo)教師在下；作者與標(biāo)題、指導(dǎo)教師與摘要之間空小四單倍行距。摘要內(nèi)容與正文左右縮進(jìn)2字符，小4號(hào)仿宋體，兩端對(duì)齊方式排列，首行縮進(jìn)2字符，行距20磅。不能用第一、第三人稱(chēng)，不得出現(xiàn)評(píng)價(jià)性語(yǔ)言。標(biāo)題小2號(hào)黑體、居中。應(yīng)簡(jiǎn)練，一般不超過(guò)25個(gè)漢字?！啊罢薄ⅰ瓣P(guān)鍵詞”字體為小四黑體。作者：×××指導(dǎo)老師：×××摘要：從寶天曼地區(qū)采集的腐木中富集、分離出了16株能夠降解木聚糖的菌株。利用剛果紅活性染色法對(duì)菌株進(jìn)行染色，根據(jù)透明圈的大小篩選出6株產(chǎn)木聚糖酶菌株。6株菌株在搖床180r/min、28℃的條件下發(fā)酵培養(yǎng)48h，利用DNS法測(cè)定各菌株木聚糖酶的活力大小，結(jié)果表明菌株M3的酶活力最高，酶活力為19.098U/mL。提取菌株M3的基因組進(jìn)行26SrDNAPCR擴(kuò)增并進(jìn)行序列測(cè)定，經(jīng)相似性分析和系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)分析，初步鑒定菌株M3屬于Trichosporonporosum關(guān)鍵詞：木聚糖降解菌；篩選；分子鑒定；木聚糖酶；酶活正文與關(guān)鍵詞之間空小4單倍行距一行。正文文字用四號(hào)宋體正文與關(guān)鍵詞之間空小4單倍行距一行。正文文字用四號(hào)宋體、22磅行距、全角標(biāo)點(diǎn)詞與詞之間用分號(hào)。一般為3～5個(gè)，盡量不與標(biāo)題重復(fù)。種名用斜體上標(biāo)格式按出現(xiàn)的先后順序標(biāo)序；連續(xù)文獻(xiàn)如[2-6]，不連續(xù)文獻(xiàn)如[1,4,7]來(lái)表示。纖維素類(lèi)物質(zhì)是一類(lèi)大量存在而又可再生的重要潛在資源，半纖維素占總纖維素的15%~30%，其中主要成分是木聚糖。與纖維素相比，半纖維素更易為微生物所降解和轉(zhuǎn)化[1]。木聚糖酶是一類(lèi)以?xún)?nèi)切方式降解木聚糖分子中β-1,4-木糖苷鍵的酶類(lèi)，其水解產(chǎn)物主要是木二糖和木寡糖，也有少量木糖和阿拉伯糖。該酶具有廣泛的應(yīng)用前景[2]，該酶在造紙業(yè)中部分替代二氧氯用于紙漿漂白，可改善紙漿性能；木聚糖酶作為飼料添加劑，可提高飼料的能量值和禽、畜對(duì)飼料的利用率；食品工業(yè)中可利用木聚糖酶降解半纖維素的主要成分木聚糖生產(chǎn)低聚木糖等高附加值的產(chǎn)品?？梢?jiàn)木聚糖酶在工業(yè)中的用途非常廣泛。因此國(guó)內(nèi)外很多研究者都致力于對(duì)木聚糖酶的研究，已有不少研究者對(duì)黑曲霉、木霉(Trichodermasp.)等真菌及短小芽孢桿菌(Bacilluspumilus)、環(huán)狀芽孢桿菌(B.circulans)等細(xì)菌的木聚糖酶進(jìn)行了研究。種名用斜體上標(biāo)格式按出現(xiàn)的先后順序標(biāo)序；連續(xù)文獻(xiàn)如[2-6]，不連續(xù)文獻(xiàn)如[1,4,7]來(lái)表示。英文縮寫(xiě)首次出現(xiàn)，應(yīng)標(biāo)出英文全稱(chēng)。森林腐木中富含半纖維素，這種環(huán)境中有大量的微生物都能分解木聚糖，從中很容易篩選得到高效降解木聚糖的菌株。本研究主要從寶天曼森林腐木中富集、分離、篩選出產(chǎn)木聚糖酶菌株，并分析它們木聚糖酶的酶活力大小，找出酶活力較高的分離菌株。最后通過(guò)分子生物學(xué)方法測(cè)定分離菌株的26SrDNA序列并對(duì)其進(jìn)行序列相似性分析和系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)分析，初步鑒定出分離菌株在系統(tǒng)發(fā)育上的分類(lèi)地位。英文縮寫(xiě)首次出現(xiàn)，應(yīng)標(biāo)出英文全稱(chēng)。一級(jí)標(biāo)題用阿拉伯?dāng)?shù)字、小3號(hào)黑體、一級(jí)標(biāo)題用阿拉伯?dāng)?shù)字、小3號(hào)黑體、左頂格，不加標(biāo)點(diǎn)，段前、段后各空四號(hào)單倍行距一行。一級(jí)標(biāo)題不可置于頁(yè)尾。序號(hào)與標(biāo)題文字之間空一字之距。二級(jí)標(biāo)題采用阿拉伯?dāng)?shù)字1.1、1.2等格式標(biāo)引、4號(hào)黑體、左頂格、不加標(biāo)點(diǎn)。序號(hào)與標(biāo)題文字之間空一字之距。1.1樣品數(shù)值與單位之間空半字之距數(shù)值與單位之間空半字之距。1.2試劑2.2%溴鉀酚綠、1%剛果紅溶液、1mol/LNaCl溶液、檸檬酸緩沖液、木糖溶液、DNS試劑、試劑酵母基因組提取試劑盒、PCRMagicMix2.0、引物NL1、引物NL4、TAE緩沖液、瓊脂糖凝膠、EB試劑。1.3培養(yǎng)基[3]富集培養(yǎng)基：木聚糖1%、酵母氮基礎(chǔ)培養(yǎng)基1%、氯霉素(80μL/100mL)；英文、數(shù)字、符合等用TimeNewRome字體。分離培養(yǎng)基：酵母提取物0.5%、葡萄糖1%、溴鉀酚綠2%、瓊脂2%、氯霉素（80μL/100mL）；英文、數(shù)字、符合等用TimeNewRome字體。鑒別培養(yǎng)基：木聚糖1%、酵母氮基礎(chǔ)培養(yǎng)基1%、瓊脂2%、氯霉素（80μL/100mL）；三級(jí)標(biāo)題采用阿拉伯?dāng)?shù)字1.2.1等格式標(biāo)引，4號(hào)宋體、左頂格、不加標(biāo)點(diǎn)，序號(hào)與標(biāo)題文字之間空一字之距。斜面培養(yǎng)基：酵母粉0.3%、麥芽粉0.3%、蛋白胨0.5%、瓊脂2%、氯霉素（80μL/100mL三級(jí)標(biāo)題采用阿拉伯?dāng)?shù)字1.2.1等格式標(biāo)引，4號(hào)宋體、左頂格、不加標(biāo)點(diǎn)，序號(hào)與標(biāo)題文字之間空一字之距。1.4菌株篩選[4,5]1.4.1富集培養(yǎng)取7支干凈小試管，向每支試管中分裝入3～5mL富集培養(yǎng)基，于121℃高壓滅菌鍋中滅菌20min。用鑷子夾取少許實(shí)驗(yàn)室保存的7種森林腐木分別放入已滅菌的富集培養(yǎng)基中，于28℃溫箱中富集培養(yǎng)2～3d。1.4.2平板分離對(duì)培養(yǎng)后變混濁的富集培養(yǎng)液按照梯度稀釋法用無(wú)菌水稀釋到10-5，在超凈工作臺(tái)中的無(wú)菌條件下，準(zhǔn)確吸取100μL的10-3～10-5不同稀釋倍數(shù)的菌液涂布于已滅菌的平板培養(yǎng)基上，于28℃溫箱中倒置培養(yǎng)2～31.4.3純化菌種根據(jù)菌落形態(tài)特征的比對(duì)，找出不同形態(tài)的菌株。在無(wú)菌條件下，挑取不同形態(tài)的單菌落在已滅菌的純化培養(yǎng)基上進(jìn)行扇形劃線，于28℃溫箱中倒置培養(yǎng)2～3d。按照同樣的方法劃線2～3次后即可得到純菌落。用鑷子夾取已滅菌的牙簽，將純化培養(yǎng)基中的純菌落點(diǎn)蘸到鑒別培養(yǎng)基上，于28℃溫箱中倒置培養(yǎng)2～3d。待菌落長(zhǎng)大后用1%剛果紅進(jìn)行活性染色30min，傾去染液，再用1mol/LNaCl溶液漂洗1h，觀察菌落周?chē)欠裼型该魅Τ霈F(xiàn)以及透明圈的大小。出現(xiàn)透明圈的菌落即為所需要的木聚糖降解菌，再選出透明圈大且明顯的菌株接種到斜面培養(yǎng)基上于表包括表序、表題、表格、表注等。表與上下文之間空小四、單倍行距，標(biāo)題在表上、小四宋體，表序與標(biāo)題間空一字之距表包括表序、表題、表格、表注等。表與上下文之間空小四、單倍行距，標(biāo)題在表上、小四宋體，表序與標(biāo)題間空一字之距；表格為“三線表”格式（自動(dòng)套用格式--簡(jiǎn)明型1），首、尾線為粗線，表內(nèi)文字為5號(hào)宋體。1.5.1木糖標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備取烘干好的木糖0.1000g溶解于蒸餾水中后，再用100mL容量瓶定容至100mL，得到1mg/mL的木糖溶液。用木糖制備標(biāo)準(zhǔn)曲線的體系見(jiàn)表1。表1制備木糖標(biāo)準(zhǔn)曲線的溶液體系（單位：mL）編號(hào)0123456木糖標(biāo)準(zhǔn)液蒸餾水DNS02.01.50.21.81.50.41.61.50.61.41.50.81.21.51.01.01.51.20.81.5注：表中所用試劑為純?cè)噭┍碜⒃诒砀裣路剑?號(hào)仿宋字，與正文左右縮進(jìn)2字符。表注在表格下方，5號(hào)仿宋字，與正文左右縮進(jìn)2字符。取7支帶刻度的平底試管，編號(hào)為1～7，分別加入上述溶液。于沸水浴中煮沸5min后，立即放入冷水中冷卻，加蒸餾水定容至25mL，用TU-1901雙光束紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)在540nm波長(zhǎng)下測(cè)OD值并制作工作曲線備用。1.5.2取一環(huán)旺盛生長(zhǎng)于斜面培養(yǎng)基上的菌種接種到已滅菌的種子培養(yǎng)基中，28℃、180r/min進(jìn)行三角瓶搖床培養(yǎng)24h，取2mL菌液加入已滅菌的發(fā)酵培養(yǎng)基中28℃，180r/min搖床培養(yǎng)1.5.3木聚糖酶粗酶液的制備取5mL發(fā)酵培養(yǎng)基菌液于已滅菌的10mL離心管中，在4℃1.5.4木聚糖酶酶活力的測(cè)定[6]取25mL具蓋帶刻度的平底試管，加入1.5mL1%木聚糖檸檬酸緩沖液于50℃水浴預(yù)熱15min，再加入0.5mL相應(yīng)酶液(對(duì)照中加入0.5mL滅活酶液)，50℃水浴保溫30min(隔幾分鐘震蕩數(shù)次)。然后加入1.5mL的DNS試劑，沸水浴煮沸5min，立即放入冷水中冷卻，并定容至25mL。版面尺寸：A4（版面尺寸：A4（210毫米×297毫米）。正文位置：上、下邊界25毫米、左邊界30毫米、右邊界20毫米、裝訂線位置定義為0毫米。1.6菌株的分子鑒定1.6.1基因組DNA的提取菌株基因組DNA的提取采用酵母菌基因組提取試劑盒法。用接種環(huán)從斜面培養(yǎng)基上取三環(huán)生長(zhǎng)旺盛的酵母菌細(xì)胞，懸浮于500μL無(wú)菌水中，12000rpm離心1min，棄上清，沉淀即為各菌株的菌體。按照酵母菌基因組提取試劑盒中使用說(shuō)明書(shū)上的流程進(jìn)行各菌株基因組的提取，并將其保存于TE緩沖液中，放入4℃冰箱中保存?zhèn)溆?。將各菌株基因組進(jìn)行瓊脂糖凝膠電泳分析，根據(jù)條帶的亮度確定基因組的稀釋倍數(shù)，作為………2結(jié)果與分析2.1菌株篩選用木聚糖作為唯一碳源從實(shí)驗(yàn)室保存的腐木中分離能產(chǎn)木聚糖酶的菌種?！?.2基因組DNA的提取和PCR的擴(kuò)增以NL1和NL4作為引物對(duì)菌株M3的26SrDNA基因組做特異性PCR反應(yīng)擴(kuò)增。將擴(kuò)增的基因組進(jìn)行瓊脂糖凝膠電泳分析得到單一條帶，片段大小長(zhǎng)度約為600bp，擴(kuò)增產(chǎn)物無(wú)明顯非特異擴(kuò)增現(xiàn)象，結(jié)果見(jiàn)圖1。圖包括圖形、圖序、圖題、圖注。圖題在圖下圖包括圖形、圖序、圖題、圖注。圖題在圖下、小4號(hào)宋字、加粗，圖序與圖題間空一字之距；圖注在圖題下方、5號(hào)仿宋字，與正文左右縮進(jìn)2字符；圖形中應(yīng)對(duì)與文中相關(guān)的信息標(biāo)注。750bp500bp12圖1菌株M326SrDNA電泳圖采用小4號(hào)宋體，用“第×頁(yè)（共×頁(yè)）”采用小4號(hào)宋體，用“第×頁(yè)（共×頁(yè)）”的格式，居中，距下邊界15毫米的位置。2.326SrDNA序列相似性分析測(cè)定菌株M3的26SrDNA序列，長(zhǎng)度為595bp，將獲得的26SrDNA堿基序列經(jīng)DANMAN軟件處理后在GenBank核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)中通過(guò)BLAST進(jìn)行同源序列搜索及相關(guān)信息檢索，得到菌株M3的26SrDNA序列與其他菌種的相似性，結(jié)果見(jiàn)表2。檢索結(jié)果表明，菌株M3與Trichosporon的26SrDNA序列有較高的相似性?！?討論木聚糖作為植物半纖維素的重要組分，是自然界繼纖維素之后含量第二豐富的可更新的多糖。以往的研究中，半纖維素的再利用通常經(jīng)過(guò)酸水解處理，而后再經(jīng)微生物轉(zhuǎn)化為生產(chǎn)產(chǎn)品。然而，盡管酸水解速度快，但伴隨有毒性化合物產(chǎn)生，對(duì)隨后的生物轉(zhuǎn)化過(guò)程有影響。因自然界中許多微生物類(lèi)群都能產(chǎn)生木聚糖酶，且微生物木聚糖酶水解法處理半纖維素更為安全和有效，因而大力開(kāi)發(fā)經(jīng)濟(jì)、高效的微生物木聚糖酶具有重要意義。以往研究的木聚糖降解菌主要集中在霉菌、放線菌等，而霉菌、放線菌等生產(chǎn)木聚糖酶周期相對(duì)較長(zhǎng)，通常為4～7d。少數(shù)產(chǎn)木聚糖酶細(xì)菌的產(chǎn)酶效率相對(duì)較低。本研究以木聚糖作為唯一碳源從森林腐木中分離、篩選出6株木聚糖降解菌。利用剛果紅活性染色法對(duì)各菌株染色，根據(jù)透明圈的大小初步判定M3降解木聚糖的能力較強(qiáng)。進(jìn)一步對(duì)各菌株進(jìn)行酶活力測(cè)定，結(jié)果表明菌株M3在搖床180r/min，28℃，48h條件下利用1%木糖的酶活力最高，酶活力為19.098U/mL通過(guò)26SrDNA序列相似性分析得出，菌株M3與Trichosporonporosum親緣關(guān)系較近，其中與Trichosporonporosum的相似性為100%，因此初步鑒定菌株M3屬于Trichosporonporosum。用分子生物學(xué)的方法對(duì)酵母菌進(jìn)行分子鑒定，是一種快速、簡(jiǎn)便和有效的方法。利用26SrDNA序列分析方法對(duì)酵母菌進(jìn)行分離和分子鑒定，為研究酵母菌打下了基礎(chǔ)。頁(yè)碼頁(yè)碼采用小4號(hào)宋體，用“第×頁(yè)（共×頁(yè)）”的格式，居中，距下邊界15毫米的位置。一般位于正文結(jié)尾后下隔2行，居中，采用小3號(hào)黑體，字與字之間空半格，與參考文獻(xiàn)目錄間空小四單倍行距。一般位于正文結(jié)尾后下隔2行，居中，采用小3號(hào)黑體，字與字之間空半格，與參考文獻(xiàn)目錄間空小四單倍行距。如距離小，可以另起一頁(yè)。[1]周世寧,陸勇軍,杜揚(yáng).木聚糖降解菌的篩選和木聚糖酶性質(zhì)的研究[J].中山大學(xué)學(xué)報(bào),1996,35(1):91-96.參考文獻(xiàn)目錄標(biāo)引序號(hào)用阿拉伯?dāng)?shù)字、方括號(hào)括住，按在正文中出現(xiàn)的先后順序排列，序號(hào)與內(nèi)容間空半格，內(nèi)容為小4號(hào)仿宋體，20磅行距，左頂格，拐行時(shí)與序號(hào)后文字齊，參考文獻(xiàn)目錄標(biāo)引序號(hào)用阿拉伯?dāng)?shù)字、方括號(hào)括住，按在正文中出現(xiàn)的先后順序排列，序號(hào)與內(nèi)容間空半格，內(nèi)容為小4號(hào)仿宋體，20磅行距，左頂格，拐行時(shí)與序號(hào)后文字齊，半角標(biāo)點(diǎn)。作者3人以下全部寫(xiě)出，中間用逗號(hào)隔開(kāi)，3人以上用“第一作者，等”。[3]王辰,白逢彥.海南熱帶雨林腐木上酵母菌物種多樣性研究[J].菌物學(xué)報(bào),2009,28(3):354-362.[4]國(guó)春艷.酸性木聚糖酶產(chǎn)生菌的篩選及酶學(xué)性質(zhì)分析[J].中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué),2010,43(7):1524-1530.[5]孫豐慧,李安明.耐堿性木聚糖酶產(chǎn)生菌的篩選及發(fā)酵條件研究[J].應(yīng)用與環(huán)境生物學(xué)報(bào),2008,14(3),436-439.文獻(xiàn)題目后應(yīng)有相應(yīng)的標(biāo)識(shí)。如期刊[J],著作[M],學(xué)位論文[D],報(bào)紙[N],專(zhuān)利[P]等。[6]濮智穎.酸性木聚糖酶產(chǎn)生菌產(chǎn)酶條件及酶學(xué)性質(zhì)研究文獻(xiàn)題目后應(yīng)有相應(yīng)的標(biāo)識(shí)。如期刊[J],著作[M],學(xué)位論文[D],報(bào)紙[N],專(zhuān)利[P]等。[7]陳紅歌.酸性木聚糖酶產(chǎn)生菌的篩選及產(chǎn)酶條件[J].微生物學(xué)報(bào),1999,39(4):350-354.[8]AnthonyT,GunasekaranP,RajKC,RajendranA,GunasekaranP.Inhibitionofpro-teasesduringfermentationimprovesxylanaseproductionbyalkalitolerantAser-perillusfumigatusAR1[J].JournalofBioscienceandBioengineering,2003,96(4):394-406.[9]FukusakiE,PanbangredW.ThecompletenucleotidesequenceofthexylanasegeneofBa-cilluspumilus[J].FebsLetters,1984,171(2):197-201.[10]周德慶.微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)手冊(cè)[M].上海:上?？茖W(xué)技術(shù)出版社,1986:197-231.年，卷號(hào)（期號(hào)）：起止頁(yè)碼年，卷號(hào)（期號(hào)）：起止頁(yè)碼等信息應(yīng)齊全。沒(méi)有卷號(hào)可不標(biāo)。著作可只標(biāo)出出版年份。作者用小四號(hào)TimeNewRome體、“作者用小四號(hào)TimeNewRome體、“姓”用大寫(xiě)字母拼寫(xiě)，“名字”的第一個(gè)字母用大寫(xiě)，其余小寫(xiě)，兩字者加連字符。英文標(biāo)題用四號(hào)TimeNewRome體、加粗、行距22磅，單詞首字母大寫(xiě)（介詞和連詞除外），與姓名之間空小四單倍行距。英文標(biāo)題用四號(hào)TimeNewRome體、加粗、行距22磅，單詞首字母大寫(xiě)（介詞和連詞除外），與姓名之間空小四單倍行距。如頁(yè)面距離太小，可放到下一頁(yè)。GUANWei-weiAbstract:SixteenXylan-degradingstrainsarefilteredoutbyenrichingandseparatingfromtherotwoodgatheredfromtheMountainBaoTianMan.UsingdyeCongoredstainingonstrains,sixXylan-degradingstrainsareselectedbyobservatingthetransparentcircle’ssizeofthesestrains.