免疫增殖病的檢驗(yàn)

免疫增殖病的檢驗(yàn)何印蕾第一節(jié)免疫增殖病的分類(lèi)一、定義免疫增殖?。╥mmunoproliferativedisease）是指免疫器官、免疫組織或免疫細(xì)胞（包括淋巴細(xì)胞和單核—巨噬細(xì)胞）異常增生（包括良性或惡性）所致的一組疾病。

這類(lèi)疾病的表現(xiàn)有免疫功能異常及免疫球蛋白質(zhì)和量的變化。二、免疫增殖病的分類(lèi)增殖細(xì)胞疾病T細(xì)胞ALL、淋巴母細(xì)胞瘤、部分非霍奇金淋巴瘤等。B細(xì)胞CLL、MM、傳單、原發(fā)性巨球蛋白血癥、淋巴瘤等組織-單核細(xì)胞急單、急性組織細(xì)胞增多癥等其它毛細(xì)胞白血病、其他霍奇金病等第二節(jié)免疫增殖病的免疫損傷機(jī)制一、漿細(xì)胞異常增生漿細(xì)胞異常增生是指單克隆漿細(xì)胞異常增生并伴有單克隆免疫球蛋白或其多肽鏈亞單位合成異常。

對(duì)多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞的起源觀察表明，骨髓瘤細(xì)胞起源于骨髓中的前B細(xì)胞進(jìn)入淋巴細(xì)胞階段，當(dāng)受到抗原刺激后，其增殖產(chǎn)生記憶的B細(xì)胞，B細(xì)胞在淋巴結(jié)中完成免疫球蛋白類(lèi)別轉(zhuǎn)換，可變成為漿細(xì)胞的瘤細(xì)胞并移至骨髓定居并增殖。在通常情況下IL-6是支持漿細(xì)胞增殖分化的關(guān)鍵因子，所以漿細(xì)胞的瘤細(xì)胞的持續(xù)增殖當(dāng)有IL-6的持續(xù)高水平存在。而臨床檢測(cè)表明骨髓瘤患者血清IL-6確有異常升高。因此，高水平的IL-6是漿細(xì)胞瘤的原因之一。二、正常體液免疫抑制正常的體液免疫是B細(xì)胞的增殖分化產(chǎn)生效應(yīng)的過(guò)程，一系列細(xì)胞因子將有序地啟動(dòng)上述過(guò)程，IL-4可啟動(dòng)休止期的B細(xì)胞進(jìn)入DNA合成期；IL-5促進(jìn)B細(xì)胞繼續(xù)增殖；IL-6促使B細(xì)胞分化為漿細(xì)胞，正常條件下IL-6可以反饋抑制IL-4控制B細(xì)胞的增殖分化過(guò)程，上述過(guò)程構(gòu)成了一個(gè)生物信息調(diào)節(jié)回路，恰到好處地控制體液免疫應(yīng)答過(guò)程的有序進(jìn)行。

漿細(xì)胞瘤患者體內(nèi)IL-6水平異常增高，其直接的效應(yīng)是抑制IL-4的產(chǎn)生，從而抑制了整個(gè)體液免疫反應(yīng)的過(guò)程。另外，漿細(xì)胞瘤可以分泌大量無(wú)抗體活性的免疫球蛋白，其Fc段與正常B細(xì)胞和原漿細(xì)胞以及其它有Fc受體的細(xì)胞結(jié)合，這些細(xì)胞表面將被無(wú)活性的免疫球蛋白封閉，影響對(duì)其他生物信息的接收，并可阻斷B細(xì)胞的增殖、發(fā)育和影響抗原提呈。三、異常免疫球蛋白增生所造成的病理?yè)p傷漿細(xì)胞異常增生的后果是產(chǎn)生大量的單克隆型免疫球蛋白或其片段，這類(lèi)免疫球蛋白或片段無(wú)正常的免疫功能。多為一種類(lèi)型或?yàn)橹劓溁蜉p鏈，其含量遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于正常的免疫球蛋白。這些惡性增殖的免疫球蛋白可以沉積于組織，造成組織變性和淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)，導(dǎo)致相應(yīng)器官的功能障礙，因其血漿濃度過(guò)高而導(dǎo)致血液粘稠度增加，產(chǎn)生一系列直接或間接的病理?yè)p害。第三三節(jié)節(jié)常常見(jiàn)見(jiàn)免免疫疫球球蛋蛋白白增增殖殖病病單克克隆隆免免疫疫球球蛋蛋白白增增殖殖病病是是指指患患者者體體內(nèi)內(nèi)存存在在異異常常增增多多的的單單克克隆隆免免疫疫球球蛋蛋白白的的一一類(lèi)類(lèi)疾疾病病。。免疫疫球球蛋蛋白白電電泳泳位位置置在在丙丙種種球球蛋蛋白白區(qū)區(qū)域域，，故故又又稱(chēng)稱(chēng)丙丙種種球球蛋蛋白白增增殖殖病病，，由由于于單單克克隆隆細(xì)細(xì)胞胞增增生生，，所所以以其其產(chǎn)產(chǎn)生生的的免免疫疫球球蛋蛋白白理理化化性性質(zhì)質(zhì)高高度度均均一一，，但但無(wú)無(wú)抗抗體體及及其其它它免免疫疫活活性性，，所所以以這這類(lèi)類(lèi)免免疫疫球球蛋蛋白白亦亦叫叫副副蛋蛋白白或或M蛋蛋白白。。M蛋蛋白白可可通通過(guò)過(guò)腎腎小小球球從從尿尿中中排排出出，，即即本本-周周蛋蛋白白。。一、、多多發(fā)發(fā)性性骨骨髓髓瘤瘤(一一)定定義義多多發(fā)發(fā)性性骨骨髓髓瘤瘤（（multiplemyelomaMM)是是漿漿細(xì)細(xì)胞胞增增生生的的惡惡性性腫腫瘤瘤，，其其免免疫疫學(xué)學(xué)特特征征:血血清清中中和和尿尿中中出出現(xiàn)現(xiàn)M蛋蛋白白、、血血清清中中正正常常Ig水水平平明明顯顯降降低低、、骨骨髓髓中中不不成成熟熟的的漿漿細(xì)細(xì)胞胞比比例例顯顯著著升升高高。。(二二)、、臨臨床床表表現(xiàn)現(xiàn)和和病病理理變變化化1、、早期期：：無(wú)無(wú)特特殊殊癥癥狀狀，，僅僅表表現(xiàn)現(xiàn)為為ESR增增快快，，血血中中檢檢出出M蛋蛋白白、、蛋蛋白白尿尿、、漿漿細(xì)細(xì)胞胞增增多多。。2、、典典型型病病人人癥癥狀狀及及病病理理變變化化：：(1)骨骨髓髓瘤瘤細(xì)細(xì)胞胞增增生生，，浸浸潤(rùn)潤(rùn)和和破破壞壞骨骨組組織織，，造造成成骨骨質(zhì)質(zhì)疏疏松松和和溶溶骨骨性性病病變變，，導(dǎo)導(dǎo)致致骨骨痛痛和和不不同同部部位位的的骨骨折折；；(2)、、惡惡性性增增殖殖的的骨骨髓髓瘤瘤細(xì)細(xì)胞胞代代替替了了骨骨髓髓中中的的正正常常成成分分，，引引起起貧貧血血、、粒粒細(xì)細(xì)胞胞、、血血小小板板減減少少，，由由于于M蛋蛋白白增增高高，，引引起起血血粘粘增增加加，，或或沉沉積積于于腎腎小小管管中中，，造造成成腎腎小小管管上上皮皮細(xì)細(xì)胞胞淀淀粉粉樣樣變變性性，，發(fā)發(fā)生生腎腎病病綜綜合合征征，，嚴(yán)嚴(yán)重重時(shí)時(shí)可可導(dǎo)導(dǎo)致致腎腎衰衰。。血血粘粘增增高高可可引引起起神神經(jīng)經(jīng)功功能能障障礙礙。。(3)、、骨骨髓髓瘤瘤細(xì)細(xì)胞胞浸浸潤(rùn)潤(rùn)其其它它組組織織時(shí)時(shí)，，可可引引起起其其相相關(guān)關(guān)組組織織或或器器官官的的病病變變。。(三)、分分類(lèi)根據(jù)M蛋白白的類(lèi)類(lèi)別不不同可可分為為：IgG型：：約占占50~60%IgA型：：約占占20~25%IgD型約約：占占1~2%IgE型約約：罕罕見(jiàn)根據(jù)漿漿細(xì)胞胞合成成功能能不全全分類(lèi)類(lèi)可分分為：：輕鏈病病和重重鏈病病二、原原發(fā)性性巨球球蛋白白血癥癥是一種種伴有有血清清IgM增增加的的B細(xì)細(xì)胞增增殖病病。病病因不不明。。臨床床癥狀狀：主主要表表現(xiàn)為為IgM過(guò)過(guò)多所所致的的血液液高粘粘性綜綜合征征，另另外貧貧血、、肝脾脾、淋淋巴結(jié)結(jié)腫大大、反反復(fù)感感染也也常見(jiàn)見(jiàn)。三、重重鏈病病由于漿漿細(xì)胞胞發(fā)生生突變變并異異常增增殖，，合成成功能能障礙礙，只只產(chǎn)生生免疫疫球蛋蛋白的的重鏈鏈或有有缺陷陷的重重鏈，，不能能與輕輕鏈組組成完完整的的免疫疫球蛋蛋白白分子子，致致使血血清中中和尿尿中出出現(xiàn)大大量游游離的的無(wú)免免疫功功能的的重鏈鏈，稱(chēng)稱(chēng)為重重鏈病病。四、良良性單單克隆隆丙種種球蛋蛋白病病是指血血清中中出現(xiàn)現(xiàn)M蛋蛋白，，而不不伴有有漿細(xì)細(xì)胞惡惡性性增殖殖的疾疾病。。本病病一般般無(wú)癥癥狀，，往往往因其其它疾疾病就就診時(shí)時(shí)發(fā)現(xiàn)現(xiàn)血中中有M蛋白白。如如果尿尿中出出現(xiàn)本本-周周氏蛋蛋白則則是危危險(xiǎn)信信號(hào)。。第四節(jié)節(jié)免免疫疫檢測(cè)測(cè)方法法免疫球球蛋白白異常常增生生病的的實(shí)驗(yàn)驗(yàn)室診診斷主主要依依靠血血液學(xué)學(xué)和免免疫學(xué)學(xué)手段段，其其中免免疫學(xué)學(xué)檢測(cè)測(cè)尤為為重要要。常常用以以下方方法進(jìn)進(jìn)行檢檢測(cè)：：一、血血清蛋蛋白區(qū)區(qū)帶電電泳蛋白質(zhì)質(zhì)區(qū)帶帶電泳泳是血血清蛋蛋白的的經(jīng)典典分析析方法法，血血清(或尿尿液)標(biāo)本本中不不同性性質(zhì)的的蛋白白質(zhì)可可明顯顯分開(kāi)開(kāi)形成成不同同的區(qū)區(qū)帶，，通過(guò)過(guò)正常常的電電泳圖圖譜進(jìn)進(jìn)行比比較分分析，，可發(fā)發(fā)現(xiàn)患患者者電泳泳圖譜譜有一一狹窄窄而濃濃縮的的集中中帶，，即M區(qū)帶帶。如如下圖圖二、免免疫球球蛋白白定量量測(cè)定定常用單單向擴(kuò)擴(kuò)散法法和免免疫濁濁度法法。惡惡性性單克克隆丙丙種球球蛋白白病呈呈現(xiàn)某某一類(lèi)類(lèi)丙種種球蛋蛋白的的顯著著增高高(>30mg/ml)。良良性單單克隆隆丙種種球蛋蛋白病病增高高不顯顯著，，一般般在20mg/ml以下下。三、免免疫球球蛋白白的分分類(lèi)鑒鑒定(一)、免免疫電電泳免疫電電泳是是將區(qū)區(qū)帶電電泳和和免疫疫擴(kuò)散散結(jié)合合起來(lái)來(lái)的一一種免免疫學(xué)學(xué)分析析法。。血清清標(biāo)本本先經(jīng)經(jīng)區(qū)帶帶電泳泳將各各種蛋蛋白成成分分分開(kāi)，，繼而而用各各種特特異性性抗血血清進(jìn)進(jìn)行免免疫擴(kuò)擴(kuò)散，，根據(jù)據(jù)M蛋蛋白在在免疫疫電泳泳中所所形成成的特特殊沉沉淀弧弧，觀觀察其其電泳泳遷移移位置置與抗抗原特特異性性，可可將M蛋蛋白的的免疫疫球蛋蛋白類(lèi)類(lèi)型和和其輕輕鏈型型加以以鑒定定。圖26-31、如果待待測(cè)標(biāo)標(biāo)本與與某型型球蛋蛋白重重鏈及及輕鏈鏈抗血血清產(chǎn)產(chǎn)生相相同遷遷移度度的特特殊沉沉淀弧弧，提提示存存在單單克隆隆丙種種球蛋蛋白(M蛋蛋白)，此此現(xiàn)象象多見(jiàn)見(jiàn)于IgG、、IgA、、IgM型多多發(fā)性性骨髓髓瘤或或原發(fā)發(fā)性巨巨蛋白白血癥癥。2、在同同一抗抗輕鏈鏈血清清的反反應(yīng)中中，同同時(shí)出出現(xiàn)兩兩條相相鄰的的特殊殊沉淀淀弧，，則可可能是是除M蛋白白外還還存在在游離離輕，，偶爾爾也可可見(jiàn)兩兩種M蛋白白，此此時(shí)應(yīng)應(yīng)進(jìn)一一歩測(cè)測(cè)定尿尿中的的本-周蛋蛋白。。3、患患者者血清清僅與與其中中一種種抗輕輕鏈抗抗血清清產(chǎn)生生一種種特殊殊的沉沉淀弧弧，而而其它它五種種抗血血清均均不產(chǎn)產(chǎn)生沉沉淀弧弧，這這種情情況可可能是是：(1)伴有有腎功功能不不全的的輕鏈鏈病，，游離離輕鏈鏈較少少?gòu)哪蚰蛑信排懦龆鴾袅粲谘褐兄校?2)存在在輕鏈鏈的四四分子子多聚聚體，，分子子量大大，不不易從從尿中中排出出而存存于血血液中中；(3)尚未未發(fā)現(xiàn)現(xiàn)的新新重鏈鏈的免免疫球球蛋白白。4、若若患者者血清清只與與IgG、、IgA或IgM中中的一一種抗抗重血血清產(chǎn)產(chǎn)生特特殊沉沉淀弧弧，但但在兩兩抗輕輕鏈抗抗血清清中無(wú)無(wú)沉淀淀弧，，提示示可能能存在在重鏈鏈病。。5、非分分泌型骨骨髓瘤血血清標(biāo)本本在免疫疫電泳中中均不出出現(xiàn)特殊殊沉淀弧弧。(二)免免疫選擇擇電泳將含抗k或r血血清的的瓊脂制制成薄層層瓊脂板板，打孔孔后加入入待測(cè)血血清進(jìn)行行火箭電電泳，與與標(biāo)本相相應(yīng)的免免疫球蛋蛋白形成成火箭樣樣沉淀峰峰。然后后于孔的的兩側(cè)各各挖一槽槽，加入入某型免免疫球蛋蛋白的抗抗血清或或另一型型輕抗血血，溫育育擴(kuò)散后后，按沉沉淀弧形形成的情情況，進(jìn)進(jìn)行鑒定定。(三)免免疫固定定電泳將待測(cè)血血清或其其它標(biāo)本本在瓊脂脂平板上上作區(qū)帶帶電泳，，分離后后于其上上覆蓋含含抗k或或r輕鏈鏈或各類(lèi)類(lèi)重鏈的的抗血清清濾紙，，當(dāng)抗體體與某區(qū)區(qū)帶中的的單克隆隆免疫球球蛋白結(jié)結(jié)合后，，便形成成復(fù)合物物而沉淀淀下來(lái)，，再通過(guò)過(guò)漂洗與與染色，，呈現(xiàn)濃濃而狹窄窄的著色色區(qū)帶，，即可判判斷單克克隆丙種種球蛋白白的輕鏈鏈或重鏈鏈型別。。（四）其其它檢測(cè)測(cè)方法本周蛋白白檢測(cè)：：多發(fā)性性骨髓病病陽(yáng)性率率極高本周蛋白白在PH5.0的條件件下，加加熱至50~60oC時(shí)出現(xiàn)沉沉淀，繼繼續(xù)加熱熱至90oC后又重新新溶解。。根據(jù)這這種理化化性質(zhì)，，又將其其稱(chēng)為凝凝溶蛋白白。小結(jié)：1、掌握握免疫增增殖病的的定義2、熟悉悉免疫增增殖病的的免疫損損傷機(jī)制制3、熟悉悉常見(jiàn)的的免疫增增殖病的的臨床表表現(xiàn)及免免疫學(xué)特特征4、掌握握免疫增增殖病的的免疫學(xué)學(xué)檢驗(yàn)9、靜夜夜四無(wú)無(wú)鄰，，荒居居舊業(yè)業(yè)貧。。。12月月-2212月月-22Thursday,December29,202210、雨雨中中黃黃葉葉樹(shù)樹(shù)，，燈燈下下白白頭頭人人。。。。03:52:3403:52:3403:5212/29/20223:52:34AM11、以我我獨(dú)沈沈久，，愧君君相見(jiàn)見(jiàn)頻。。。12月月-2203:52:3403:52Dec-2229-Dec-2212、故人江江海別，，幾度隔隔山川。。。03:52:3403:52:3403:52Thursday,December29,202213、乍見(jiàn)翻疑疑夢(mèng)，相悲悲各問(wèn)年。。。12月-2212月-2203:52:3403:52:34December29,202214、他鄉(xiāng)生白白發(fā)，舊國(guó)國(guó)見(jiàn)青山。。。29十二二月20223:52:34上上午03:52:3412月-2215、比不了了得就不不比，得得不到的的就不要要。。。十二月223:52上午午12月-2203:52December29,202216、行動(dòng)出出成果，，工作出出財(cái)富。。。2022/12/293:52:3403:52:3429December202217、做前前，能能夠環(huán)環(huán)視四四周；；做時(shí)時(shí)，你你只能能或者者最好好沿著著以腳腳為起起點(diǎn)的的射線(xiàn)線(xiàn)向前前。。。3:52:34上上午3:52上上午午03:52:3412月月-229、沒(méi)有失敗敗，只有暫暫時(shí)停止成成功！。12月-2212月-22Thursday,December29,202210、很多事情情努力了未未必有結(jié)果果，但是不不努力卻什什么改變也也沒(méi)有。。。03:52:3403:52:3403:5212/29/20223:52:34AM11、成成功功就就是是日日復(fù)復(fù)一一日日那那一一點(diǎn)點(diǎn)點(diǎn)點(diǎn)小小小小努努力力的的積積累累。。。。12月月-2203:52:3403:52Dec-2229-Dec-2212、世間間成事事，不不求其其絕對(duì)對(duì)圓滿(mǎn)滿(mǎn)，留留一份份不足足，可可得無(wú)無(wú)限完完美。。。03:52:3403:52:3403:52Thursday,December29,202213、不不知知香香積積寺寺，，數(shù)數(shù)里里入入云云峰峰。。。。12月月-2212月月-2203:52:3503:52:35December29,202214、意志堅(jiān)堅(jiān)強(qiáng)的人人能把世世界放在在手中像像泥塊一一樣任意意揉捏。。29十十二月20223:52:35上午午03:52:3512月-2215、楚塞三湘湘接，荊門(mén)門(mén)九派通。。。。十二月223:52上上午12月-2203:52December29,202216、少年十五五二十時(shí)，，步行奪得得胡馬騎。。。2022/12/293:52:3503:52:3529December202217、空空山山新新雨雨后后，，天天氣氣晚晚來(lái)來(lái)秋秋。。。。3:52:35上上午午3:52上上午午03:52:3512月月-229、楊柳散和和風(fēng)，青山山澹吾慮。。。12月-2212月-22Thursday,De