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限制性核酸內(nèi)切酶——分子手術(shù)刀課件1第一章基因工程第一節(jié)工具酶的發(fā)現(xiàn)和基因工程的誕生第二節(jié)基因工程的原理和技術(shù)第一章基因工程2?細(xì)菌和人是差異非常大的兩種生物,通過基因重組后,細(xì)菌能夠合成人體的胰島素,這說明了什么?人和細(xì)菌共用一套遺傳密碼人和細(xì)菌遺傳物質(zhì)(DNA)的結(jié)構(gòu)和化學(xué)組成相同人體胰島素的DNA大腸桿菌的DNAmRNA人的胰島素?細(xì)菌和人是差異非常大的兩種生物,通過基因重3基因工程的基本工具準(zhǔn)確切割DNA的工具(“分子手術(shù)刀”)——限制性核酸內(nèi)切酶DNA片段的連接工具(“分子縫合針”)——DNA連接酶基因轉(zhuǎn)移工具(“分子運(yùn)輸車”)——基因進(jìn)入受體細(xì)胞的載體基因的大小以納米計(jì)算,要對它進(jìn)行剪切、拼接等操作,沒有非常精細(xì)的工具是不行的。進(jìn)行基因操作最少需要以下三種工具:基因工程的基本工具準(zhǔn)確切割DNA的工具(“分子手術(shù)刀”)4知識平臺:1、基因工程誕生的理論基礎(chǔ)是---------------------------------------------------2、-----------------------------的發(fā)現(xiàn)與應(yīng)用,又為基因工程的創(chuàng)建提供了技術(shù)上的保障。---------和---------為基因的分離和重組提供了必要的手段,而-------能夠?qū)⑼庠椿蜻\(yùn)送到受體細(xì)胞中,達(dá)到基因工程的目的。
DNA是遺傳物質(zhì)的發(fā)現(xiàn)DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)的確立遺傳信息傳遞方式的認(rèn)定限制性核酸內(nèi)切酶DNA連接酶質(zhì)粒載體限制性核酸內(nèi)切酶DNA連接酶載體知識平臺:DNA是遺傳物質(zhì)的發(fā)現(xiàn)DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)的確立遺傳信5同一種限制性核酸內(nèi)切酶猿猴病毒SV40的DNAR噬菌體的DNADNA連接酶重組DNA分子1972年,美國斯坦福大學(xué)的科學(xué)家合成第一個(gè)人工DNA重組產(chǎn)物同一種限制性核酸內(nèi)切酶猿猴病毒SV40的DNAR噬菌體的DN6同一種限制性核酸內(nèi)切酶大腸桿菌的含四環(huán)素抗性基因的質(zhì)粒大腸桿菌的含卡那霉素抗性基因的質(zhì)粒DNA連接酶重組質(zhì)粒1973年,美國斯坦福大學(xué)的科學(xué)家,第一個(gè)基因工程的誕生大腸桿菌(抗四環(huán)素和卡那霉素)同一種限制性核酸內(nèi)切酶大腸桿菌的含四環(huán)素大腸桿菌的含卡那霉素7從哪里可以找到這種切割外來的DNA而對自身不切割的物質(zhì)?這種酶具有什么作用?這種酶如何識別和切割DNA分子?限制性核酸內(nèi)切酶的作用及作用特點(diǎn):能識別和切割DNA分子一小段特殊核苷酸序列;從特定部位(特定核苷酸序列)的兩個(gè)核苷酸之間(磷酸二酯鍵)切開。限制性核酸內(nèi)切酶——“分子手術(shù)刀”從哪里可以找到這種切割外來的DNA而對自身不切割的物質(zhì)?限制8限制性核酸內(nèi)切酶的切割方式錯(cuò)切--黏性末端平切--平末端限制性核酸內(nèi)切酶的切割方式9限制性核酸內(nèi)切酶——分子手術(shù)刀課件10重播重播11
DNA被限制酶切斷后有兩個(gè)反向互補(bǔ)的“黏性末端”。被同一種限制切斷的幾個(gè)DNA具有相同的黏性末端,能夠通過互補(bǔ)進(jìn)行配對。DNA被限制酶切斷后有兩個(gè)反向互補(bǔ)的“黏性末端”。被同一12基因的針線──DNA連接酶
連接酶的作用是:將互補(bǔ)配對的兩個(gè)黏性末端連接起來,使之成為一個(gè)完整的DNA分子。DNA聚合酶和DNA連接酶有何相同和不同點(diǎn)?作用?對基因工程誕生的意義?基因的針線──DNA連接酶連接酶的作用是:將互補(bǔ)配對的兩13基因進(jìn)入受體細(xì)胞的載體
要讓一個(gè)從甲生物細(xì)胞內(nèi)取出來的基因在乙生物體內(nèi)進(jìn)行表達(dá),首先得將這個(gè)基因送到乙生物的細(xì)胞內(nèi)去!能將外源基因送入細(xì)胞的工具就是載體。作為基因工程的載體有哪些?最常用的是什么?基因進(jìn)入受體細(xì)胞的載體要讓一個(gè)從甲生物細(xì)胞內(nèi)取出來的14大腸桿菌質(zhì)粒的分子結(jié)構(gòu)示意圖能復(fù)制并帶著插入的目的基因一起復(fù)制有切割位點(diǎn)有標(biāo)記基因的存在,將來可用含青霉素的培養(yǎng)基鑒別。大腸桿菌質(zhì)粒的分子結(jié)構(gòu)示意圖能復(fù)制并帶著插入的目的基因一起復(fù)15作為基因進(jìn)入受體細(xì)胞的載體的
必要條件能自我復(fù)制有切割位點(diǎn)能與目的基因結(jié)合能進(jìn)入受體生物細(xì)胞并在受體生物細(xì)胞內(nèi)復(fù)制并表達(dá);有遺傳標(biāo)記基因?qū)κ荏w細(xì)胞無害、容易分離比較容易得到作為基因進(jìn)入受體細(xì)胞的載體的
必要條件能自我復(fù)制16限制性核酸內(nèi)切酶——分子手術(shù)刀課件17第一章基因工程第一節(jié)工具酶的發(fā)現(xiàn)和基因工程的誕生第二節(jié)基因工程的原理和技術(shù)第一章基因工程18?細(xì)菌和人是差異非常大的兩種生物,通過基因重組后,細(xì)菌能夠合成人體的胰島素,這說明了什么?人和細(xì)菌共用一套遺傳密碼人和細(xì)菌遺傳物質(zhì)(DNA)的結(jié)構(gòu)和化學(xué)組成相同人體胰島素的DNA大腸桿菌的DNAmRNA人的胰島素?細(xì)菌和人是差異非常大的兩種生物,通過基因重19基因工程的基本工具準(zhǔn)確切割DNA的工具(“分子手術(shù)刀”)——限制性核酸內(nèi)切酶DNA片段的連接工具(“分子縫合針”)——DNA連接酶基因轉(zhuǎn)移工具(“分子運(yùn)輸車”)——基因進(jìn)入受體細(xì)胞的載體基因的大小以納米計(jì)算,要對它進(jìn)行剪切、拼接等操作,沒有非常精細(xì)的工具是不行的。進(jìn)行基因操作最少需要以下三種工具:基因工程的基本工具準(zhǔn)確切割DNA的工具(“分子手術(shù)刀”)20知識平臺:1、基因工程誕生的理論基礎(chǔ)是---------------------------------------------------2、-----------------------------的發(fā)現(xiàn)與應(yīng)用,又為基因工程的創(chuàng)建提供了技術(shù)上的保障。---------和---------為基因的分離和重組提供了必要的手段,而-------能夠?qū)⑼庠椿蜻\(yùn)送到受體細(xì)胞中,達(dá)到基因工程的目的。
DNA是遺傳物質(zhì)的發(fā)現(xiàn)DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)的確立遺傳信息傳遞方式的認(rèn)定限制性核酸內(nèi)切酶DNA連接酶質(zhì)粒載體限制性核酸內(nèi)切酶DNA連接酶載體知識平臺:DNA是遺傳物質(zhì)的發(fā)現(xiàn)DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)的確立遺傳信21同一種限制性核酸內(nèi)切酶猿猴病毒SV40的DNAR噬菌體的DNADNA連接酶重組DNA分子1972年,美國斯坦福大學(xué)的科學(xué)家合成第一個(gè)人工DNA重組產(chǎn)物同一種限制性核酸內(nèi)切酶猿猴病毒SV40的DNAR噬菌體的DN22同一種限制性核酸內(nèi)切酶大腸桿菌的含四環(huán)素抗性基因的質(zhì)粒大腸桿菌的含卡那霉素抗性基因的質(zhì)粒DNA連接酶重組質(zhì)粒1973年,美國斯坦福大學(xué)的科學(xué)家,第一個(gè)基因工程的誕生大腸桿菌(抗四環(huán)素和卡那霉素)同一種限制性核酸內(nèi)切酶大腸桿菌的含四環(huán)素大腸桿菌的含卡那霉素23從哪里可以找到這種切割外來的DNA而對自身不切割的物質(zhì)?這種酶具有什么作用?這種酶如何識別和切割DNA分子?限制性核酸內(nèi)切酶的作用及作用特點(diǎn):能識別和切割DNA分子一小段特殊核苷酸序列;從特定部位(特定核苷酸序列)的兩個(gè)核苷酸之間(磷酸二酯鍵)切開。限制性核酸內(nèi)切酶——“分子手術(shù)刀”從哪里可以找到這種切割外來的DNA而對自身不切割的物質(zhì)?限制24限制性核酸內(nèi)切酶的切割方式錯(cuò)切--黏性末端平切--平末端限制性核酸內(nèi)切酶的切割方式25限制性核酸內(nèi)切酶——分子手術(shù)刀課件26重播重播27
DNA被限制酶切斷后有兩個(gè)反向互補(bǔ)的“黏性末端”。被同一種限制切斷的幾個(gè)DNA具有相同的黏性末端,能夠通過互補(bǔ)進(jìn)行配對。DNA被限制酶切斷后有兩個(gè)反向互補(bǔ)的“黏性末端”。被同一28基因的針線──DNA連接酶
連接酶的作用是:將互補(bǔ)配對的兩個(gè)黏性末端連接起來,使之成為一個(gè)完整的DNA分子。DNA聚合酶和DNA連接酶有何相同和不同點(diǎn)?作用?對基因工程誕生的意義?基因的針線──DNA連接酶連接酶的作用是:將互補(bǔ)配對的兩29基因進(jìn)入受體細(xì)胞的載體
要讓一個(gè)從甲生物細(xì)胞內(nèi)取出來的基因在乙生物體內(nèi)進(jìn)行表達(dá),首先得將這個(gè)基因送到乙生物的細(xì)胞內(nèi)去!能將外源基因送入細(xì)胞的工具就是載體。作為基因工程的載體有哪些?最常用的是什么?基因進(jìn)入受體細(xì)胞的載體要讓一個(gè)從甲生物細(xì)胞內(nèi)取出來的30大腸桿菌質(zhì)粒的分子結(jié)構(gòu)示意圖能復(fù)制并帶著插入的目的基因一起復(fù)
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