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文檔簡介
課程目錄實驗一植物種子萌發(fā)和根尖取材固定實驗二植物染色體制片及有絲分裂的觀察實驗三減數(shù)分裂制片技術(shù)及蝗蟲精巢細(xì)胞顯微觀察實驗四果蠅培養(yǎng)、麻醉及雌雄鑒別實驗五果蠅唾腺染色體制備實驗六果蠅單因子雜交/伴性遺傳實驗七染色體組型分析實驗八果蠅基因組DNA提取實驗九人類巴氏小體的觀察實驗十果蠅單因子雜交/伴性遺傳數(shù)據(jù)分析實驗十一Hardy-Weinberg遺傳平衡定律的檢驗實驗十二人類性狀特征的遺傳分析課程目錄實驗一植物種子萌發(fā)和根尖取材固定1
實驗九人類巴氏小體的觀察
什么是巴氏小體?巴氏小體,又叫巴爾體(Barrbody),指雌性哺乳動物體細(xì)胞間期,一塊染色很深的染色質(zhì)。巴氏小體實際上是濃縮了的X染色體,其上的基因基本不轉(zhuǎn)錄。
實驗九人類巴氏小體的觀察
什么是巴氏小體?巴氏小體,2巴氏小體位于細(xì)胞中的什么位置?在細(xì)胞內(nèi)的位置:核膜邊緣或靠近內(nèi)側(cè)形狀:半圓形、三角形、卵形、短棒形及雙球形大?。褐睆郊s為1微米巴氏小體位于細(xì)胞中的什么位置?在細(xì)胞內(nèi)的位置:核膜邊緣或靠近3巴氏小體的研究歷史1949年加拿大學(xué)者Barr在雌貓神經(jīng)原細(xì)胞核中發(fā)現(xiàn)。1955年Barr在女性口腔細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)Barrbody。1959年人們把性染色體異常造成的畸形與巴氏小體的研究聯(lián)系起來。1971年Barrbody被命名為x染色質(zhì)。食管癌病人巴氏小體出現(xiàn)率低于10%;正常人細(xì)胞出現(xiàn)率為20-45%。最新研究進(jìn)展巴氏小體的研究歷史1949年加拿大學(xué)者Barr在雌貓神經(jīng)原4主要內(nèi)容一實驗?zāi)康亩嶒炘恚ㄕ莆眨┤龑嶒灢牧纤膶嶒瀮x器及用具五藥品和試劑六實驗步驟(理解)七作業(yè)主要內(nèi)容一實驗?zāi)康?一、實驗?zāi)康?/p>
1通過實驗學(xué)會巴氏小體檢查方法,掌握觀察與鑒別X染色質(zhì)的簡易方法;2了解人類男女性別性染色體的功能差異;并為了解人體染色體的畸變與疾病提供參考條件.
一、實驗?zāi)康?/p>
1通過實驗學(xué)會巴氏小體檢查方法,掌握觀6性別分化胚胎發(fā)育早期未分化的性腺是中性的。性腺外部皮質(zhì)內(nèi)部髓質(zhì)發(fā)育為雄性生殖腺(睪丸)XY染色體發(fā)育為雌性生殖腺(卵巢)XX染色體XXY型染色體,皮質(zhì)、髓質(zhì)同時發(fā)育。二、實驗原理性別分化胚胎發(fā)育早期未分化的性腺是中性的。性腺外部皮質(zhì)內(nèi)部7哺乳動物的雌性細(xì)胞有兩條X染色體,其中一條來自母方,另一條來自父方,在胚胎發(fā)育的早期(16天),這兩條X染色體中的一條隨機(jī)濃縮形成巴氏小體,(袋鼠例外:總是來自父方的x染色體失活)。雌性哺乳動物的體細(xì)胞雄性哺乳動物的體細(xì)胞一個巴氏小體一條能轉(zhuǎn)錄的X染色體一條能轉(zhuǎn)錄的X染色體一條能轉(zhuǎn)錄的Y染色體雌性哺乳動物的體細(xì)胞雄性哺乳動一個巴氏小體一條能轉(zhuǎn)錄的X染色8雌性體細(xì)胞中1條X染色體為何失活而凝縮成巴氏小體?從X、Y染色體自身的特點來考慮……雌性體細(xì)胞中1條X染色體為何失活而凝縮成巴氏小體?從X、Y染9基因的劑量補(bǔ)償效應(yīng)【重點】雌性xx兩條染色體上基因劑量有2份,失活1份,使x連鎖性狀的表現(xiàn)在雌雄個體間無差異。在失活的x染色體上x染色質(zhì)并不缺失,其上的某些基因如xg血型基因、類固醇硫酸酯基因并不失活。理論解釋基因的劑量補(bǔ)償效應(yīng)【重點】理論解釋10Lyon假說【重點】
雌性動物體細(xì)胞X染色體只有一條是有活性個的,那么雌雄個體X染色體上的基因效果相當(dāng)X染色體的失活是隨機(jī)的,即雌性動物的染色體角度看是嵌合體失活發(fā)生在胚胎發(fā)育的早期,已失活細(xì)胞分裂產(chǎn)生的細(xì)胞群遺傳結(jié)構(gòu)相同。雌性動物伴性基因的作用產(chǎn)生嵌合體Lyon假說【重點】
雌性動物體細(xì)胞X染色體只有一條是有活性11性染色體模式【了解】性染色體模式【了解】12體細(xì)胞間期Barr是小體的檢查體細(xì)胞間期Barr是小體的檢查13臨床意義在于:1胎兒性別鑒定:從胎兒羊水中取得脫落的細(xì)胞檢查,如有巴氏小體,胎兒為女性,如果細(xì)胞中無巴氏小體,胎兒為男性。2成人性別鑒定:變性男運動員參加女子項目,可通過檢查其白細(xì)胞中有無巴氏小體而確定其性別。3性別畸形的判斷:是否缺失或者多出巴氏小體。
巴氏小體的臨床意義有哪些?臨床意義在于:巴氏小體的臨床意義有哪些?14三、實驗材料男、女性口腔頰部粘膜細(xì)胞。四、實驗儀器及用具顯微鏡、載玻片、蓋玻片、牙簽,離心管五、藥品和試劑
Giemsa染液,固定液,5mol/LHCl,低滲液三、實驗材料15(一)直接涂片法:(每組2-3張女生口腔細(xì)胞涂片,1張男生口腔細(xì)胞涂片。)1涂片:受檢者用自來水漱口,用牙簽輕輕刮取口腔上皮細(xì)胞(腮幫子處),將刮取物均勻涂布于載玻片上,晾干。2固定:將涂片放入95%的乙醇中固定30min,取出晾干。3水解:將涂片放入5molHCl中室溫下水解10min,自來水緩緩沖洗。4染色:用Gimsa染液染色8-10分鐘,勿干燥,用水沖洗后晾干鏡檢。5鏡檢:從低倍鏡到高倍鏡依次觀察。
六、實驗步驟
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紅色字體為注意事項!??!紅色16漱口刮取涂布固定晾干取樣步驟漱口刮取涂布固定晾干取樣步驟17(二)滴片法:1取材:受檢者用自來水漱口,用牙簽輕輕刮取口腔上皮細(xì)胞,將刮取物涮于裝有1ml生理鹽水的離心管中。2離心:離心10分鐘(5000轉(zhuǎn)/分),棄上清液。3低滲:加1ml低滲液混勻,37度低滲6分鐘,離心10分鐘,棄上清液。4固定:加固定液95%的乙醇1ml,室溫固定10分鐘,離心,棄上清。5滴片:加200ul固定液與沉淀物混成細(xì)胞懸液,用滴管吸取細(xì)胞懸液,滴于潔凈載玻片上,晾干。6水解:5molHCl水解10分鐘。自來水沖洗。7染色:Giemsa染色8分鐘,沖去染液,干后鏡檢。(二)滴片法:18直接涂片法操作簡單,但口腔上皮細(xì)胞不易分散,細(xì)胞常重疊,而且標(biāo)本上涂大量細(xì)胞才能滿足計數(shù)的需要。滴片法稍繁瑣,離心收集細(xì)胞較難,但細(xì)胞分散均勻,細(xì)胞經(jīng)低滲后核膜膨脹,巴氏小體增大,利于辨認(rèn)。兩種方法的比較直接涂片法操作簡單,但口腔上皮細(xì)胞不易分散,細(xì)胞常重疊,而且19細(xì)胞的理想狀態(tài):⑴核質(zhì)是網(wǎng)狀或細(xì)顆粒狀分布。⑵核膜清晰,核無缺損。⑶染色適度。⑷周圍無雜菌。巴氏小體的辨認(rèn)標(biāo)準(zhǔn):
選定的細(xì)胞,在高倍鏡或油鏡下進(jìn)一步觀察。巴氏小體的形態(tài)表現(xiàn)為一結(jié)構(gòu)致密濃染小體,輪廓清楚,常附著于核膜邊緣或靠近內(nèi)側(cè)。細(xì)胞的理想狀態(tài):20試驗八巴氏小體課件21試驗八巴氏小體課件22七、作業(yè):1.分別觀察50個男、女性可數(shù)的細(xì)胞,計算各自的巴氏小體細(xì)胞所占的百分比。2.在觀察中畫出2~3個典型細(xì)胞,標(biāo)明巴氏小體的部位。七、作業(yè):23思考題:1男性沒有巴氏小體的理論基礎(chǔ)。2男變女的變性手術(shù)后,該女性有無巴氏小體?3性別畸形的染色體模式可能有幾種??思考題:?24課程目錄實驗一植物種子萌發(fā)和根尖取材固定實驗二植物染色體制片及有絲分裂的觀察實驗三減數(shù)分裂制片技術(shù)及蝗蟲精巢細(xì)胞顯微觀察實驗四果蠅培養(yǎng)、麻醉及雌雄鑒別實驗五果蠅唾腺染色體制備實驗六果蠅單因子雜交/伴性遺傳實驗七染色體組型分析實驗八果蠅基因組DNA提取實驗九人類巴氏小體的觀察實驗十果蠅單因子雜交/伴性遺傳數(shù)據(jù)分析實驗十一Hardy-Weinberg遺傳平衡定律的檢驗實驗十二人類性狀特征的遺傳分析課程目錄實驗一植物種子萌發(fā)和根尖取材固定25
實驗九人類巴氏小體的觀察
什么是巴氏小體?巴氏小體,又叫巴爾體(Barrbody),指雌性哺乳動物體細(xì)胞間期,一塊染色很深的染色質(zhì)。巴氏小體實際上是濃縮了的X染色體,其上的基因基本不轉(zhuǎn)錄。
實驗九人類巴氏小體的觀察
什么是巴氏小體?巴氏小體,26巴氏小體位于細(xì)胞中的什么位置?在細(xì)胞內(nèi)的位置:核膜邊緣或靠近內(nèi)側(cè)形狀:半圓形、三角形、卵形、短棒形及雙球形大?。褐睆郊s為1微米巴氏小體位于細(xì)胞中的什么位置?在細(xì)胞內(nèi)的位置:核膜邊緣或靠近27巴氏小體的研究歷史1949年加拿大學(xué)者Barr在雌貓神經(jīng)原細(xì)胞核中發(fā)現(xiàn)。1955年Barr在女性口腔細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)Barrbody。1959年人們把性染色體異常造成的畸形與巴氏小體的研究聯(lián)系起來。1971年Barrbody被命名為x染色質(zhì)。食管癌病人巴氏小體出現(xiàn)率低于10%;正常人細(xì)胞出現(xiàn)率為20-45%。最新研究進(jìn)展巴氏小體的研究歷史1949年加拿大學(xué)者Barr在雌貓神經(jīng)原28主要內(nèi)容一實驗?zāi)康亩嶒炘恚ㄕ莆眨┤龑嶒灢牧纤膶嶒瀮x器及用具五藥品和試劑六實驗步驟(理解)七作業(yè)主要內(nèi)容一實驗?zāi)康?9一、實驗?zāi)康?/p>
1通過實驗學(xué)會巴氏小體檢查方法,掌握觀察與鑒別X染色質(zhì)的簡易方法;2了解人類男女性別性染色體的功能差異;并為了解人體染色體的畸變與疾病提供參考條件.
一、實驗?zāi)康?/p>
1通過實驗學(xué)會巴氏小體檢查方法,掌握觀30性別分化胚胎發(fā)育早期未分化的性腺是中性的。性腺外部皮質(zhì)內(nèi)部髓質(zhì)發(fā)育為雄性生殖腺(睪丸)XY染色體發(fā)育為雌性生殖腺(卵巢)XX染色體XXY型染色體,皮質(zhì)、髓質(zhì)同時發(fā)育。二、實驗原理性別分化胚胎發(fā)育早期未分化的性腺是中性的。性腺外部皮質(zhì)內(nèi)部31哺乳動物的雌性細(xì)胞有兩條X染色體,其中一條來自母方,另一條來自父方,在胚胎發(fā)育的早期(16天),這兩條X染色體中的一條隨機(jī)濃縮形成巴氏小體,(袋鼠例外:總是來自父方的x染色體失活)。雌性哺乳動物的體細(xì)胞雄性哺乳動物的體細(xì)胞一個巴氏小體一條能轉(zhuǎn)錄的X染色體一條能轉(zhuǎn)錄的X染色體一條能轉(zhuǎn)錄的Y染色體雌性哺乳動物的體細(xì)胞雄性哺乳動一個巴氏小體一條能轉(zhuǎn)錄的X染色32雌性體細(xì)胞中1條X染色體為何失活而凝縮成巴氏小體?從X、Y染色體自身的特點來考慮……雌性體細(xì)胞中1條X染色體為何失活而凝縮成巴氏小體?從X、Y染33基因的劑量補(bǔ)償效應(yīng)【重點】雌性xx兩條染色體上基因劑量有2份,失活1份,使x連鎖性狀的表現(xiàn)在雌雄個體間無差異。在失活的x染色體上x染色質(zhì)并不缺失,其上的某些基因如xg血型基因、類固醇硫酸酯基因并不失活。理論解釋基因的劑量補(bǔ)償效應(yīng)【重點】理論解釋34Lyon假說【重點】
雌性動物體細(xì)胞X染色體只有一條是有活性個的,那么雌雄個體X染色體上的基因效果相當(dāng)X染色體的失活是隨機(jī)的,即雌性動物的染色體角度看是嵌合體失活發(fā)生在胚胎發(fā)育的早期,已失活細(xì)胞分裂產(chǎn)生的細(xì)胞群遺傳結(jié)構(gòu)相同。雌性動物伴性基因的作用產(chǎn)生嵌合體Lyon假說【重點】
雌性動物體細(xì)胞X染色體只有一條是有活性35性染色體模式【了解】性染色體模式【了解】36體細(xì)胞間期Barr是小體的檢查體細(xì)胞間期Barr是小體的檢查37臨床意義在于:1胎兒性別鑒定:從胎兒羊水中取得脫落的細(xì)胞檢查,如有巴氏小體,胎兒為女性,如果細(xì)胞中無巴氏小體,胎兒為男性。2成人性別鑒定:變性男運動員參加女子項目,可通過檢查其白細(xì)胞中有無巴氏小體而確定其性別。3性別畸形的判斷:是否缺失或者多出巴氏小體。
巴氏小體的臨床意義有哪些?臨床意義在于:巴氏小體的臨床意義有哪些?38三、實驗材料男、女性口腔頰部粘膜細(xì)胞。四、實驗儀器及用具顯微鏡、載玻片、蓋玻片、牙簽,離心管五、藥品和試劑
Giemsa染液,固定液,5mol/LHCl,低滲液三、實驗材料39(一)直接涂片法:(每組2-3張女生口腔細(xì)胞涂片,1張男生口腔細(xì)胞涂片。)1涂片:受檢者用自來水漱口,用牙簽輕輕刮取口腔上皮細(xì)胞(腮幫子處),將刮取物均勻涂布于載玻片上,晾干。2固定:將涂片放入95%的乙醇中固定30min,取出晾干。3水解:將涂片放入5molHCl中室溫下水解10min,自來水緩緩沖洗。4染色:用Gimsa染液染色8-10分鐘,勿干燥,用水沖洗后晾干鏡檢。5鏡檢:從低倍鏡到高倍鏡依次觀察。
六、實驗步驟
紅色字體為注意事項!?。〖t色字體為注意事項?。。。ㄒ唬┲苯油科ǎ毫?、實驗步驟
紅色字體為注意事項?。?!紅色40漱口刮取涂布固定晾干取樣步驟漱口刮取涂布固定晾干取樣步驟41(二)滴片法:1取材:受檢者用自來水漱口,用牙簽輕輕刮取口腔上皮細(xì)胞,將刮取物涮于裝有1ml生理鹽水的離心管中。2離心:離心10分鐘(5000轉(zhuǎn)/分),棄上清液。3低滲:加1ml低滲液混勻,37度低滲6分鐘,離心10分
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