島津培訓(xùn)資料課件

液相色譜基礎(chǔ)培訓(xùn)免費(fèi)電話：800-810-0439400-650-0439維修部：零配件：9

內(nèi)容原理基本操作保養(yǎng)與維護(hù)原理溶于流動(dòng)相(mobilephase)中的各組分經(jīng)過固定相時(shí)，由于與固定相(stationaryphase)發(fā)生作用（吸附、分配、離子吸引、排阻、親和）的大小、強(qiáng)弱不同，在固定相中滯留時(shí)間不同，從而先后從固定相中流出。液相色譜流程圖輸液泵進(jìn)樣器色譜柱柱溫箱檢測(cè)器溶劑數(shù)據(jù)處理反相HPLC色譜柱C18(ODS)typeC8(octyl)typeC4(butyl)typePhenyltypeTMStypeCyanotype-Si-C18H37SiNon-polarproperty溶劑等級(jí)水的等級(jí)純化水蒸餾水去離子水波長(zhǎng)(nm)純化水去離子水因?yàn)椴患兾锏拇嬖?，去離子的吸光率較高純化水中去除了無機(jī)和有機(jī)的污染物吸光率HPLC用水可以通過以下幾個(gè)方面來得到：1專門的純水機(jī)或超純水機(jī)；2去離子水重蒸；3二次或三次重蒸水；4采用類似家用的純水機(jī)；5市場(chǎng)上瓶裝的純凈水或蒸餾水；6其它途徑；不管采用何種途徑，配制流動(dòng)相應(yīng)用新鮮水，水質(zhì)越高放置時(shí)間越短。理想的HPLC用水應(yīng)為18.2Ω的超純水，并通過0.22um的濾膜，除去熱源、有機(jī)物、無機(jī)離子及空氣等。溶劑前處理

過濾：0.45um或更小孔徑濾膜目的：除去溶劑中的微小顆粒，避免堵塞色譜柱，尤其是使用無機(jī)鹽配制的緩沖液。溶劑前處理

脫氣

目的：除去流動(dòng)相中溶解或因混合而產(chǎn)生的氣泡一般混合溶劑中能容納的空氣量往往要比單個(gè)溶劑所能容納的空氣總量要小氣泡對(duì)測(cè)定的影響：1）柱壓波動(dòng)，流量偏小2）基線波動(dòng)

返回等度洗脫輸液泵進(jìn)樣器色譜柱柱溫箱檢測(cè)器單一或混合溶劑梯度洗脫

A泵進(jìn)樣器色譜柱柱溫箱檢測(cè)器B泵AB時(shí)間B

濃度95%30%MeOH濃度梯度洗脫混合器低壓梯度比例閥高壓梯度低壓梯度脫氣機(jī)高壓/低壓梯度系統(tǒng)工作原理手柄位進(jìn)樣(Load)位置時(shí)，樣品經(jīng)微量進(jìn)樣針從進(jìn)樣孔注射進(jìn)定量環(huán)，定量環(huán)充滿后，多余樣品從放空孔排出；將手柄轉(zhuǎn)動(dòng)至進(jìn)樣(Inject)位置時(shí)，閥與液相流路接通，由泵輸送的流動(dòng)相沖洗定量環(huán)，推動(dòng)樣品進(jìn)入液相分析柱進(jìn)行分析。手動(dòng)進(jìn)樣器的原理圖

裝填狀態(tài)進(jìn)樣狀態(tài)返回進(jìn)樣體積檢測(cè)器響應(yīng)值定量管體積的一半3倍定量管體積全量注入部分注入進(jìn)樣體積與響應(yīng)值關(guān)系返回柱的保養(yǎng)：柱子在任何情況下不能碰撞、彎曲或強(qiáng)烈震動(dòng)；當(dāng)柱子和色譜儀聯(lián)結(jié)時(shí)，閥件或管路一定要清洗干凈；要注意流動(dòng)相的脫氣；避免使用高粘度的溶劑作為流動(dòng)相；進(jìn)樣樣品要提純；嚴(yán)格控制進(jìn)樣量；每天分析工作結(jié)束后，要清洗進(jìn)樣閥中殘留的樣品；每天分析測(cè)定結(jié)束后，都要用適當(dāng)?shù)娜軇﹣砬逑粗?；若分析柱長(zhǎng)期不使用，應(yīng)用適當(dāng)有機(jī)溶劑保存并封閉；維護(hù)流程圖吸濾頭單向閥柱塞密封圈線路過濾器檢測(cè)器吸濾頭材料：不銹鋼燒結(jié)，孔徑10um故障：堵塞表現(xiàn)：管路中不斷有氣泡生成措施：用異丙醇（或5％稀硝酸），超聲波清洗，再用蒸餾水清洗單向閥T泵：串聯(lián)式往復(fù)泵D泵：并聯(lián)式往復(fù)泵單向閥單向閥結(jié)構(gòu)球座吸液沖程排液沖程出口單向閥進(jìn)口單向閥泵頭拋光面寶石球流動(dòng)相單向閥原理單向閥清洗故障：寶石球或球座受污導(dǎo)致密封不好表現(xiàn)：系統(tǒng)壓力波動(dòng)大措施：打開排液閥，以異丙醇為流動(dòng)相輸液拆下單向閥，放入異丙醇中，超聲波清洗故障1：寶石球粘附于墊片表現(xiàn)：泵無法吸液或排液，流路不通措施：1）用針筒抽出口單向閥以產(chǎn)生負(fù)壓，使寶石球與墊片分開

2）拆下單向閥，放入異丙醇或水中，用超聲波清洗單向閥粘結(jié)柱塞密封圈的更換故障：密封圈磨損導(dǎo)致密封不良現(xiàn)象：系統(tǒng)壓力波動(dòng)大或漏液措施：更換密封圈注意點(diǎn)：1）更換前，新密封圈用異丙醇浸泡15min2）拆卸泵頭前，柱塞桿復(fù)位（P－SET）流動(dòng)相泵頭清洗管路柱塞桿密封圈線路過濾器故障：堵塞現(xiàn)象：系統(tǒng)壓力波動(dòng)大或壓力偏高措施：異丙醇（或5％稀硝酸），超聲波清洗判斷依據(jù)：關(guān)閉排液閥，斷開出口管路，設(shè)定流速1mL/min，如壓力>5kgf/cm2，則堵塞。排液閥壓力傳感器線路過濾器流動(dòng)相

手動(dòng)進(jìn)樣器操作注意點(diǎn)：1）進(jìn)樣時(shí)，進(jìn)樣針應(yīng)插到底2）不使用時(shí)將針頭留在進(jìn)樣器內(nèi)3）進(jìn)樣應(yīng)使用液相色譜專用平頭進(jìn)樣針4）樣品溶液pH小于10,常用密封墊的材質(zhì)適用pH<10,否則換特氟隆材質(zhì)的密封墊pH10-135）清洗應(yīng)使用專用針口清洗器定子轉(zhuǎn)子針頭密封墊彈簧不銹鋼套清洗針口色譜柱柱效降低原因?yàn)V片或填料堵塞樣品或流動(dòng)相中雜質(zhì)吸附機(jī)械振動(dòng)產(chǎn)生空隙填料變性濾片或填料堵塞使用預(yù)柱緩沖液和溶劑使用0.45um濾膜過濾樣品溶液使用0.45um濾膜過濾反向連接色譜柱，使用清洗溶劑以小流量送液打開柱頭，清洗或更換濾片Back紫外檢測(cè)器參比池樣品池光線硅光電池板紫外燈的保養(yǎng)：在分析前、柱平衡得差不多時(shí)，打開檢測(cè)器；在分析完成后，馬上關(guān)閉檢測(cè)器。樣品池要保養(yǎng)檢測(cè)池清洗故障：樣品池受污表現(xiàn)：樣品池和參比池能量相差較大檢查方法：設(shè)定250nm波長(zhǎng)，通甲醇或水，查看SMPLEN和REFEN，如兩者相差較大，則樣品池受污措施：用針筒注入異丙醇，清洗樣品池；如污染嚴(yán)重，拆開樣品池，將透鏡等放入異丙醇中清洗。檢測(cè)池-氣