實驗動物學期末考試

第一章實驗動物概念和分類第一節(jié)實驗動物概念一、實驗動物二、動物實驗三、實驗動物學第二節(jié)實驗動物分類生物學分類二、遺傳學分類三、微生物學分類一、實驗動物實驗動物（laboratoryanimal)是隨著生命科學的發(fā)展和對實驗動物認識的進一步提高，以及實驗動物學學科的成立而逐步明晰了解的。人們最初的認識是：凡是科學實驗研究中使用的動物，統(tǒng)稱為實驗動物。后來又提出：凡是為了科學實驗的需要而專門飼養(yǎng)、繁殖的動物，稱為實驗動物。但隨著生命科學的發(fā)展，實驗動物學已成為一門新興的獨立學科，才對實驗動物的定義有了進一步明確。因此，從我國《實驗動物國家標準GB14925-2010》中可以看出：實驗動物是指經人工培育，對其攜帶微生物和寄生蟲實行控制，遺傳背景明確或者來源清楚，用于科學研究、教學、生產、檢定以及其他科學實驗的動物。這才對實驗動物有了客觀的描述二、實驗用動物凡是以研究、實驗、教學、藥品生產等為目的而使用的動物，統(tǒng)稱為實驗用動物（animalforresearch），包括實驗動物、野生動物、經濟動物和觀賞動物等。因此實驗動物只是實驗用動物其中的一種，不能混淆。實驗動物的演化過程：野生動物↙↘實驗動物←經濟動物（家畜家禽）動物人工培育繁殖遺傳背景物種來源微生物和寄生蟲用途實驗動物嚴格人工明確明確人工控制科學實驗野生動物未經自然不明確不明確自然選擇生態(tài)保護經濟動物一定程度人工一般一般一般發(fā)展經濟觀賞動物一定程度人工一般一般一般觀賞三、動物實驗動物實驗（animalexperiment）是以標準的實驗動物為對象的科學研究，觀察實驗過程中實驗動物有關器官的組織形態(tài)改變、機能反應變化及其發(fā)生發(fā)展規(guī)律，以探討或檢驗生命科學中未知因素的專門活動。實驗動物學研究的主要內容是實驗動物和動物實驗有關的科學知識。四、實驗動物學實驗動物學（laboratoryanimalscience)是生命科學研究中重要的基礎性工具學科，是以標準的實驗動物本身為研究對象，動物實驗為研究手段，專門研究實驗動物的遺傳、育種、質量控制、疾病防治、資源保存、動物福利、開發(fā)應用、規(guī)范操作、信息數據收集等一門體系完整的獨立學科。它包括（一）實驗動物遺傳育種學根據遺傳學原理，運用遺傳調控的方法，控制動物的遺傳特性，研究實驗動物的育種、保種和遺傳質量檢測及遺傳改良，培育新的動物品系和各種動物模型。對有實驗使用價值的經濟動物和野生動物進行人工定向培育，凈化或純化遺傳背景，實現實驗動物化。二）實驗動物微生物學與寄生蟲學對實驗動物可能攜帶的微生物和寄生蟲進行分類，研究其對實驗動物和動物實驗的影響，以及與人類的相互關系。探索實驗動物傳染病預防和控制方法，建立實驗動物微生物和寄生蟲的監(jiān)控和檢測技術與方法，實現對實驗動物微生物和寄生蟲的質量控制。三）實驗動物環(huán)境生態(tài)學根據實驗動物與周圍環(huán)境因素之間的相互關系，運用工程技術手段，建立標準化實驗動物設施和設備，控制各種環(huán)境要素，創(chuàng)建適宜動物生活的優(yōu)良環(huán)境。可以從環(huán)境中的理化因素（溫度、濕度、噪音、換氣次數、風速、壓力梯度、光照強度、氨濃度等）、生物因素（微生物、寄生蟲、動物密度等）、營養(yǎng)因素（飼料、飲水等）考慮標準化實驗動物設施的建設和各項指標的監(jiān)測。（四）實驗動物營養(yǎng)學根據實驗動物食性、消化生理、攝食行為等特性，研究各種營養(yǎng)要素的作用及其缺乏癥。根據不同種屬和等級的實驗動物在生長發(fā)育、繁殖、實驗等各階段的營養(yǎng)需求，研制全價配伍的特定飼料的加工工藝、滅菌方法、檢測技術和標準，以滿足實驗動物的正常需要。也可根據模型動物和實驗的特殊需求，研制藥物添加飼料或特殊配方飼料。（五）實驗動物飼養(yǎng)管理研究實驗動物在引種、育種、保種、繁育、擴群生產和實驗期間的飼育等過程的科學管理。探索在確保質量的前提下降低生產成本，提高社會效益和經濟效益，同時兼顧實驗動物福利。研究實驗動物飼養(yǎng)集約化（規(guī)?；?、標準化和法制化管理。（六）實驗動物醫(yī)學運用獸醫(yī)學原理，研究實驗動物疾病的診斷、預防、治療和控制。發(fā)現和保留與人類相似的實驗動物疾病，為人類類似疾病的研究提供模型。制定實驗動物健康標準，確定實驗動物疾病治療原則。（七）比較醫(yī)學通過分析比較人類與實驗動物之間基本生命現象的異同，開發(fā)建立各種人類疾病的實驗動物模型，從病因、病機、病理的角度對各種人類疾病進行類比研究。以實驗動物為對象進行疾病診斷、模擬手術、藥效檢定和安全性評價等實驗研究，從而了解人類疾病的發(fā)生、發(fā)展，研發(fā)和篩選安全有效的治療手段，為人類健康事業(yè)服務。（八）動物實驗方法學從實驗設施、儀器設備、試劑藥品、手術器械、動物準備等角度研究動物實驗的基本條件。從實驗設計、動物選擇、模型復制、操作技術、標本采集、指標檢測、統(tǒng)計分析等角度研究動物實驗的基本方法。（九）實驗動物倫理與福利研究實驗動物所涉及的倫理學問題，確立倫理學審查原則。研究實驗動物的替代方法，減輕因實驗操作造成的動物痛苦，通過優(yōu)化實驗設計減少動物的用量，即通常國際上所說的“3R”原則：替代（replacement）、減少（reduction）、優(yōu)化（refinement）。研究和改善實驗動物的生活環(huán)境條件、動物的“內心感受”、人道的實驗技術等動物福利要求，制定相適應的法律法規(guī)。實驗動物學是一門內容極為豐富的學科，它涉及到醫(yī)學、生物學、畜牧獸醫(yī)學和環(huán)境科學等多個領域，它與遺傳學、生理學、解剖學、病理學、生物化學、微生物學、免疫學、營養(yǎng)學、藥理學、毒理學、環(huán)境學等多門學科有密切關系。因此，在醫(yī)學領域中無論是臨床醫(yī)學、預防醫(yī)學、藥物學還是基礎醫(yī)學研究都需要實驗動物學的基本理論知識和操作技術。實驗動物的應用1、基礎生物研究2、人類醫(yī)學獸醫(yī)學產品研發(fā)3、醫(yī)療產品檢驗4、獸醫(yī)產品檢驗5、安全性評價6、培訓教育7、其他實驗動物的分類：動物種類繁多，目前已知的有150萬種以上，為了便于識別、研究和利用，通常以生物的外部性狀、內部構造、生活方式、生物的發(fā)生和彼此間的血緣關系為依據。根據自然分類法，生物可分為動物和植物兩大界。界以下分為門、綱、目、科、屬、種等，以及更細的亞門、亞綱、亞目、亞科、亞屬、亞種、變種等分類等級。生物學分類：1、種：由自然選擇形成的生物分類學上的基本單位。2、品種和品系：在實驗動物中把同一種動物中具有不同遺傳特性的動物再細分為不同的品種和品系。有些品系還進一步細分為亞系。（1）品種：是種以下的非自然分類單位。主要通過人工選擇或定向培育，把動物的某些生物學特性進行改良，并能穩(wěn)定遺傳的一類動物。如：實驗用兔可分為新西蘭兔、日本大耳白兔、青紫藍兔等品種。（2）品系：即”株”，為實驗動物專有分類名詞，根據不同實驗目的采用一定的交配方式繁殖且祖先明確的動物群，具有獨特的生物學特性并能穩(wěn)定遺傳的群體，如近交系、突變系等。遺傳學分類實驗動物是遺傳限定的動物，按遺傳學控制方法和基因純合的程度，把實驗動物分為：相同基因類型的近交系動物，不同基因類型的封閉群動物。而雜種（mongerl）是未經遺傳學控制進行無計劃交配繁殖的動物，故不屬于本分類范圍。一、近交系動物1、定義：近交系動物（inbredstrainanimals）通常也稱為純系動物。是指至少經過20代以上連續(xù)全同胞兄妹交配，品系內所有個體都可追溯到起源于第20代或以后代數的一對共同祖先的動物群。一般以大小鼠為典型代表，如BALB/c小鼠、C57BL/6小鼠、F344大鼠近交系動物各染色體上的基因趨于純合，等位基因基本一致，其近交系數可達98.6％，血緣系數達99.6%，品系內個體差異接近于零，實驗重復性高，結果準確，應用廣泛。經連續(xù)20代以上親子交配與全同胞兄妹交配有等同效果。近交系的近交系數應大于99%。較大個體近交系動物很難培育。有些學者提議：禽類和兔的血緣系數到達80％以上時（相當兄妹交配四代）也可稱為近交系。因研究需要，已培育出兔、犬、貓、雞、羊、豬等若干個近交系。2、命名近交系動物的命名由國際實驗動物協會（ICLAS）負責，每四年公布一次。命名的原則是根據動物的來源、歷史和培育經過而定，用一系列字母和數字來表示。（1）近交系的命名法一般用一個或幾個大寫英文字母表示，如A、AE、BA、AKR、DBA等。有些品系在英文字母間加些阿拉伯數字來表示，如C3H、C57BL、C57BR、C57W等。已被廣泛保留沿用的非正規(guī)命名，如129、101、615等。近交系的近交代數用大寫英文字母“F”（Filial的縮寫）表示。例如當一個近交系的近交代數為87代時，寫成（F87）。如果對以前的代數不清楚，近知道近期的近交代數為25，可以表示為（F？＋25）。例如C57BL/Jnga（F73＋16）表示C57BL第73代小鼠移到Jnga實驗室又繁殖到第16代的代數。（2）、亞系的命名法所謂亞系（sub-strain）是指同一個近交系由于殘合基因分離或某些基因突變形成具有不同于原品系特性的一類動物。具有三種命名方法：在原品系名稱后加一條斜線“/”，再標上亞系符號。它可以分為兩類：一類亞系符合是用研究人員或研究機構名稱的縮寫英文字母，第一個字母須大寫隨后字母要小寫，例如A/He（人名）、CBA/Jax（實驗室）。另一類亞系符合是用阿拉伯數字或小寫英文字母作為亞系的符合，例如A/Crgl/1和A/Crgl/2，C57BR/a和C57BR/cd，C57BL/6J和C57BL/10J。代乳、胚胎或卵巢移植所形成的亞系。代乳（fosternursing):C3HfC57BL(或C3HfB），A/HefB表示A的Heston亞系由C57BL代乳所產生的后代。胚胎（embryo）、卵巢（ovary）移植：AeB表示A的受精卵轉輸到C57BL母鼠的子宮所產生的后代。復合亞系符合：由代乳、移植、基因突變、基因導入以及誰培育、誰保種等歷史時間順序來表達。例如：BALB/cf、DBA/2eB、C3H/Ha-p亞系中，c、2、Ha為亞系符合，f、e、p分別說明代乳、受精卵轉輸、突變種。再如：DBA/2eB/De亞系是由Deringer把DBA/2的受精卵轉輸C57BL，由Deringer保種。（3）、品系名稱不能隨便縮寫，特別是在論文或實驗報告中。例如，C57可以代表C57BL及其6個亞系；C57BL可以包括幾個不同特征的亞系（C57BL/1、C57BL/6J、C57BL/6N、C57BL/10J等）。國際上公認的品系縮寫有：AKR－AK，BALB/c－C，CBA－CB，C3H－C3，C57BL－B，C57BL/6－B6，C57BL/10－B10，C57BR－BR，C57L－L，DBA/1－D1，DBA/2－D2，HRS/J－HR，RⅢ－R3等3、特殊類型的近交系動物重組近交系：是以兩個無關的高度近交品系進行交配產生雜種一代，再互交產生F2代后，再進行全同胞交配達20代以上而培育的一個具有雙親品系特征又有重組后新品系特征的近交系動物。例如：C57BL/6JxDBA/2J=BxD-5、30、89…..重組同類系：由兩個近交系雜交后。子代與兩個親代近交系中的一個近交系進行回交（通常回交2次），再經不對特殊基因選擇的連續(xù)兄妹交配（通常大于14代）而育成的近交系。例如CcS1，表示以BALB/c（C）為親代受體近交系，以STS（S）品系為供體近交系，經2代回交育成的編號為1的重組同類系。同源導入近交系：通過雜交—互交或回交等方式將一個基因導入到近交系中，形成一個新的近交系。該近交系與原近交系只在一個很小的染色體片段上的基因不同，簡稱同源導入系或同類系。命名方法如：B10.129-H-12b:表示該同源導入近交系的遺傳背景為C57BL/10sn（即B10），導入B10的基因為H-12b，基因提供者為129/J近交系。C.129P（B6）-I12tm1Hor:表示經過第三個品系B6導入的。B6.Cg-（D4Mit25-D4Mit80）/Lt：表示導入的基因片段標記為D4Mit25-D4Mit80。同源突變近交系：是指某個近交系在某一特定基因位點上發(fā)生基因突變而分離出的，其他位點上的基因完全相同的近交系亞系。命名方法為：在發(fā)生突變的近交系名稱后加突變基因符號（用英文斜體印刷體）組成，二者之間用連接號分開。DBA/Ha-D：表示DBA/Ha品系突變基因為D的同源突變近交系。當突變基因必須以雜合子形式保持時，用“+”號代表野生型基因，如：A/Fa-+/c。129S7/SvEvBrd-FyntmlSor:表示用來源129S7/SvEvBrd品系的AB1ES細胞株制作的Fyn基因變異的同源突變系核轉移系：將某個品系的核基因組移到其他品系細胞質而培育的品系。例如C57BL/6J-mtBALB/c指帶有C57BL/6J核基因組和BALB/c細胞質的品系。這種品系是以雄的C57BL/6J小鼠與雌的BALB/c小鼠交配，子代雌鼠與C57BL/6J雄鼠反復回交10代而成。雜交群：指由兩個不同近交系雜交產生的后代群體，子一代簡稱F1。例如（C57BL/6×DBA/2）F1=B6D2F1，這類動物不僅具有雙親的品系特征，又能表現出雜種優(yōu)勢，對環(huán)境的適應能力更強。染色體置換系：是為把某一染色體全部導入到近交系中，反復進行回交而培育的近交系。例如：C57BL/6J-Chr19SPR為M.spretus的第19染色體回交于B6的染色體置換系。遺傳修飾動物：經人工誘發(fā)突變或特定類型基因組改造建立的動物。包括轉基因動物、基因定位突變動物、誘變動物等。例：C57BL/6J-TgN（CD8Ge）23Jwg轉基因小鼠：意思是來源于美國杰克遜研究所（J）的C57BL/6品系小鼠被轉入人的CD8基因組（Ge）；轉基因在JonW.Gordon（Jwg）實驗室完成，獲得于一系列顯微注射后得到的序號為23的小鼠。近交系小鼠的保護方式：近交系動物“金字塔”式保種、生產方法基礎群（核心群）（采用兄妹交配法）（foundationcolony血緣擴大群（增殖群）（采用兄妹交配法）（pedigreedexpansioncolony生產群（隨機交配二代）（productioncolony)(供研究用）6、近交系動物的特點基因純合性：同一近交品系內所有動物的各個基因位點都是純合子，沒有暗藏的隱性基因。遺傳穩(wěn)定性：堅持近交繁育，清除遺傳變異動物，則可代代相傳。如DBA系已維持近百年，C57BL系維持了80多年。同基因性：是指一個近交系中所有個體在遺傳上是同源的，個體間極為相似，可以用一只動物檢測群體的基因型或從子代群體中檢定母系群體，品系內個體皮膚和腫瘤移植不會被排斥。表現型的均一性：由于遺傳是均質的，所以其表現型是均一的，反應性是一致的，往往只用少量的近交系動物就能達到統(tǒng)計需要的精確度。個體性：國際公認的250個近交系小鼠間均有各自的生物學特性，選擇小鼠實驗研究時，決不能隨便就選一個品系來做實驗?？煞直嫘裕好總€近交系都具有自己獨特的遺傳概貌，可以通過生化位點法、皮膚移植法、毛色基因法、下頜骨測量法對兩個外貌近似的品系加以辨別。分布的廣泛性：許多近交系在國際上廣泛分布，因不同環(huán)境可能引起遺傳變異，實驗數據無法重復驗證，因此，應該力求環(huán)境條件的一致性。資料可查性：由于近交系動物在培育和保種過程中都有詳細記錄，而這些數據都是最有價值的背景資料二、封閉群動物1、定義：封閉群動物（closedcolony）：是指一個種群在不從外部引進新種，僅在固定場所以非近親交配方式進行繁殖生產，且至少連續(xù)繁殖4代以上的一個實驗動物種群。亦稱遠交群。從整個群體來看，封閉群在一定范圍內保持有相對穩(wěn)定的遺傳特征。如ICR、KM小鼠，Wistar、SD大鼠，DunkinHatley豚鼠，新西蘭兔，青紫藍兔等。2、封閉群（遠交群）的命名封閉群由2~4個大寫英文字母命名，種群名稱前標明保持者的英文縮寫名稱，第一個字母須大寫，后面的字母小寫，一般不超過4個字母。保持者與種群名稱之間用冒號分開。示例：N：NIH表示由美國國立衛(wèi)生研究院（N）保持的NIH封閉群小鼠。Lac：LACA表示由英國實驗動物中心（Lac）保持的LACA封閉群小鼠。某些命名較早的封閉群繼續(xù)沿用，如Wistar大鼠，ICR小鼠等3、特點封閉群動物具有雜合特性，可以避免出現近交衰退現象，其繁殖率、抗病能力都比近交系動物強，所以能夠大量生產，市場供應充足。當然，封閉群動物因其有雜合性，個體間的反應性存在差異，實驗的重復性和一致性不如近交系動物好，一般僅適用于藥物篩選、毒理安全試驗和教學示范使用。4、繁殖方式封閉群動物具有基因多態(tài)性，在種群生產維持中要有足夠的數量，避免近交系數隨繁殖代數增加而過快上升，必須保證每代近交系數的上升速度不超過1%。因此，封閉群的種群大小、選種方式和交配方法與近交系數的上升速度有關。已知近交系數上升率F1與有效群體數目Ne之間的關系為F1=1/2Ne由此可見，當Ne過小，必然導致F1上升速度加大。也就是Ne=50時，F1=1%，為了控制F1＜1%，則引種時Ne至少要達到25對（50只）。通常當封閉群中每代交配雄性個體為10~25只時，一般采用最佳避免近交法；26~100只時，一般采用循環(huán)交配法；雄性個體數大于100只時，一般采用隨選交配法5、應用鑒定實驗：生物制品、化學藥品、食品安全性等方面的鑒定。各類篩選性實驗：例如某一藥物的初步療效，可以通過封閉群動物實驗得到綜合的平均療效。遺傳學研究：利用其雜合性研究某一性狀。誘導突變研究：封閉群動物可攜帶大量的隱性有害突變基因，可為生理學、胚胎學、醫(yī)學研究提供模型。教學實驗：封閉群動物繁殖力強，產子數多，生長快，成本低，可大量供應于教學實驗和一般的預實驗。實驗動物本身對多種病原菌敏感，在生產過程中多采用規(guī)?；?、集約化繁殖，在實驗過程中又以“組”為單位，動物的飲食、活動、睡眠、排泄同為一處，極易造成疾病的爆發(fā)和流行。實驗動物如果感染動物烈性傳染病，就會引起群內爆發(fā)，導致動物大量死亡或質量下降；如果感染人獸共患病，不僅造成動物生病或死亡，而且對飼養(yǎng)和實驗人員的健康造成危害。所以，嚴格控制實驗動物的微生物、寄生蟲質量，排除人獸共患病和動物烈性傳染病病原體的感染，實行標準化飼養(yǎng)管理，是保證實驗結果科學、可靠及實驗人員安全的重要前提。目前按照對微生物和寄生蟲控制的凈化程度，國際上將實驗動物分為普通級動物、無特殊病原體動物、悉生動物或無菌動物三類。而我國則分為普通級動物、清潔級動物、無特定病原體動物、悉生動物或無菌動物四類根據微生物和寄生蟲對實驗動物的致病性和對動物實驗的影響與干擾，一般將其分為五類。Ⅰ類：為主要人獸共患病病原體，能在動物群和人群之間交叉感染，嚴重損害患者健康。Ⅱ類：為動物的烈性傳染病病原體，一般不傳染人，但能在動物群中相互傳染，爆發(fā)烈性傳染病，具有高度致病性和極強的傳染力。Ⅲ類：為動物的弱致病性病原體，雖然危害性和傳染力較弱，但也能引起動物疾病，對實驗動物生產和動物實驗評價有一定的影響。Ⅳ類：為能引起動物隱性感染和潛伏感染的病原體，受外界環(huán)境應激因素刺激后，可能會誘發(fā)疾病。Ⅴ類：非病原體，一般對實驗動物沒有致病性，僅可作為飼養(yǎng)環(huán)境的微生物學監(jiān)控指標，如雙歧桿菌、乳酸桿菌等。病毒細菌寄生蟲人畜共患病病原體腦膜炎、狂犬病、猴Ⅰ型（B病毒）、漢坦（出血熱）病毒沙門氏菌、布魯桿菌、志賀菌、結核分枝桿菌、鉤端螺旋體、真菌等體外寄生蟲弓形蟲動物烈性傳染病病原體鼠痘、兔出血熱、仙臺病毒、犬細小病毒、犬瘟熱病毒、傳染性犬肝炎病毒等泰澤病原體、多殺性巴斯德桿菌、鼠棒狀桿菌、支原體等兔腦原蟲、蠕蟲、螨蟲等一般性疾病病原體小鼠肺炎病毒、大鼠細小病毒、輪狀病毒、猴反轉錄D型病毒、猴痘病毒等肺炎克雷伯桿菌、金黃色葡萄球菌、肺炎鏈球菌、銅綠假單胞菌等瘧原蟲、鞭毛蟲、纖毛蟲等實驗動物分類應排除病原體類型普通級動物Ⅰ類、Ⅱ類清潔級動物Ⅰ類、Ⅱ類、Ⅲ類SPF級動物Ⅰ類、Ⅱ類、Ⅲ類、Ⅳ類無菌動物一切微生物、寄生蟲一、普通級動物1、定義：普通級動物（conventionalanimal,CV），是指不攜帶所規(guī)定的人獸共患疾病病原和動物烈性傳染病病原的實驗動物。是實驗動物微生物學、寄生蟲學質量控制要求最低的動物。2、質量標準和飼養(yǎng)條件普通級實驗動物一般飼養(yǎng)在開放式環(huán)境中飼養(yǎng)，但室內溫濕度、光照強度、換氣次數、噪聲、氨濃度等要符合國標要求，能防止人獸共患病、動物烈性傳染病病原體的污染。動物墊料和食物需清潔衛(wèi)生但不一定要高壓滅菌；飲水只需符合城市飲用水的衛(wèi)生標準；保持籠具和籠舍干凈清潔，人員進出需更衣、換鞋；動物設施應有防止野鼠、昆蟲等動物進入室內的措施。外來動物引進必須經過嚴格的隔離檢疫；一旦檢出Ⅰ類、Ⅱ類病原體必須采取相應的防疫措施直至全群淘汰。3、應用由于普通級動物易感染人獸共患病和動物烈性傳染病，也可能攜帶其他病原體，所以在保障動物群體和接觸人員相對安全前提下進行操作。實驗時由于某些應激因素的刺激可能誘發(fā)條件致病菌的爆發(fā)，導致動物患病或異常死亡。因此，普通級動物長期實驗存活率低，實用價值較低，多用于急性實驗、教學示教和某些科研預實驗使用。我國在2010年修訂的國家標準中已取消了實驗大鼠和小鼠的普通等級。二、清潔級動物1、定義：清潔級動物（cleananimal，CL）是指除普通動物應排除的病原外，不攜帶對動物危害和對科學研究干擾大的病原體的實驗動物。國外英文摘要中用MinimalDiseaseAnimal表示的這類動物相當于我國的清潔級動物2、質量標準和飼養(yǎng)條件：清潔級動物是我國按照國情而設立的等級動物。清潔級動物的種群來自無特定病原體動物或無菌破腹產動物。清潔級動物應飼養(yǎng)在相對恒溫、恒濕的正壓屏障環(huán)境（空氣潔凈度達1萬級）中；所用的墊料、飼料、飲水、籠具、實驗用具等均應經過高壓消毒滅菌；實驗者和工作人員都應經過淋浴或風淋、穿上干凈無菌服和腳套、戴上口罩和手套，才能進入屏障環(huán)境。清潔級動物動物實驗室應經常消毒、定期檢測環(huán)境指標，一旦發(fā)現污染即刻淘汰或酌情降低動物等級。3、應用：由于清潔級動物排除的微生物和寄生蟲遠遠多于普通級動物，生產和使用成本較低，易于普及推廣，也較符合我國國情，不能與國際接軌。但清潔級動物仍可能攜帶條件致病菌，受實驗應激因素刺激后也會發(fā)病，影響動物健康，干擾實驗結果的判斷，故通常用于短期或部分科研實驗。三、無特定病原體動物1、定義：無特定病原體動物（specificpathongenfreeanimal，SPF）：是指除清潔級動物應排除的病原外，不攜帶主要潛在感染或條件致病和對科學實驗干擾大的病原體的實驗動物。SPF動物是國際上公認的標準化實驗動物。2、質量標準和飼養(yǎng)條件：SPF動物來自于無菌動物，飼養(yǎng)在屏障環(huán)境內。SPF級動物沒有相應病原體的抗體，一旦感染就會迅速傳播或爆發(fā)，造成全群毀滅。所以SPF級動物必須飼養(yǎng)在1萬級凈化屏障環(huán)境或隔離環(huán)境內，必須嚴格控制進出人員、物品、籠具、飲水、空氣和動物傳遞，嚴防交叉感染。SPF級的屏障環(huán)境控制措施要比清潔級更嚴，經常消毒和檢測環(huán)境指標，發(fā)現污染立馬淘汰所飼養(yǎng)的動物或酌情降級使用，清空所有動物，對環(huán)境設施重新、徹底消毒后才能啟用。3、應用：SPF動物由于排除了隱性感染和條件致病菌等特定病原體的干擾，是真正健康無病的動物。SPF級動物基本上排除病原微生物的干擾，其實驗結果具有較高的準確性和重復性，長期飼養(yǎng)動物存活率較高，因而被廣泛運用于腫瘤免疫學、藥理學、毒理學、血清和疫苗制備，以及生物學鑒定等領域。四、無菌動物1、定義：無菌動物（germfreeanimals，GF）：是指無可檢出一切生命體的實驗動物，即利用現有的檢測技術，在其體內外應該檢不出任何微生物和寄生蟲。此種動物在自然界中并不存在，必須經過人為培育、無菌操作、人工哺乳、隔離飼養(yǎng)才能獲得。因此，無菌動物好比有生命的“分析純試劑”2、質量標準和飼養(yǎng)條件：無菌動物必須飼育在隔離環(huán)境內，采用相對恒溫、恒濕、恒壓的無菌隔離器，空氣潔凈度必須達到100級。所有飼料、墊料、飲用水、籠器具必須徹底滅菌后才能使用。通常隔離器為正壓環(huán)境，要防止風機突然停機時導致外部空氣逆流，使用者必須通過隔離器上的密封手套進行操作，定期檢測隔離器內微生物狀況，一旦檢出其他生命體，即不得再作為無菌動物使用。3、應用：無菌動物是一種超常生態(tài)模型，等同于活的“基礎培養(yǎng)基”，是最高級的實驗材料，在微生物學、寄生蟲學、免疫學、老年醫(yī)學、放射醫(yī)學、器官移植等領域廣泛應用。但無菌動物獲得和維持困難，使用成本很高，操作復雜，難于做好，而且在生理上與人類有一定的差別，應用時需謹慎。五、悉生動物1、定義：悉生動物（gnotobioticanimals，GN）：又稱已知菌動物，是指終身帶有明確其他生命體的實驗動物。根據植入已知菌的種類可分為單菌、雙菌、三菌、多菌悉生動物。一般植入的已知菌是能夠幫助其分解、消化、吸收營養(yǎng)物質的有益菌，如乳酸桿菌。2、質量標準和飼養(yǎng)條件悉生動物的飼養(yǎng)條件和質量控制與無菌動物完全一樣。3、應用：悉生動物體內攜帶有益菌，生活能力明顯強于無菌動物。因此，在研究微生物與宿主之間的關系、病毒致癌、抗體制備、細菌感染并發(fā)癥、營養(yǎng)吸收等領域具有不可替代的作用。實驗項目無菌動物SPF動物普通動物傳染病寄生蟲實驗結果應用動物數統(tǒng)計價值長期實驗自然死亡率長期實驗存活率實驗的準確設計實驗結果的討論價值無無明確少數很好可能好很少約100%可能高無無明確少數可能好可能好少約90%可能中有或可能有有或可能有有疑問多（或大量）不準確困難高約40%不可能低第二章主要實驗動物和營養(yǎng)需要一.大小鼠的生物學特性（一）大小鼠的一般特性小鼠大鼠不同點體型小，品種多，性情溫馴，易捕捉。體型較大，品種較少。對飼養(yǎng)環(huán)境中的粉塵、氨氣和硫化氫等極為敏感。易引起維生素A缺乏癥。對飼養(yǎng)環(huán)境中濕度極為敏感，相對濕度低于40%時，易患壞尾病，還會引起哺乳母鼠食仔現象發(fā)生。大鼠不能嘔吐，不能作催吐實驗。6、大鼠汗腺極不發(fā)達，易中暑引起死亡相同點尾長約與體長相等。喜黑暗安靜環(huán)境，喜群居，喜晝伏夜出，其進食、交配、分娩多發(fā)生在夜間。其中傍晚與黎明最活躍。捉取方法粗暴使其變得緊張不安難于捕捉甚至攻擊人。非同窩雄性易斗，常咬傷背部和尾部。雄鼠具有分泌醋酸銨臭氣的特性，是引起飼養(yǎng)室特異臭氣的主要原因。對外界環(huán)境反應敏感，適應性差，不耐冷熱，對疾病抵抗力弱，尤其是高質量近交系。對外界強光或噪聲刺激極為敏感，可導致哺乳母鼠神經紊亂，發(fā)生流產或食仔現象。自由采食和飲水。（二）大小鼠的解剖學特點小鼠大鼠不同點小鼠下頜骨的喙狀突較小，髁狀突發(fā)達，運用下頜骨形態(tài)的分析技術，可進行近交系小鼠遺傳監(jiān)測。淋巴系統(tǒng)發(fā)達，外界刺激可使淋巴系統(tǒng)增生，因此易患淋巴系統(tǒng)疾病。3、小鼠胸腺在性成熟前最大，35～80日齡漸漸退化大鼠食道與十二指腸相距很近，胃中有一條皺褶，收縮時會堵住賁門口，這是大鼠不會嘔吐的原因。無膽囊，肝臟共分6葉，再生能力強，部分切除術后仍可再生。大鼠無扁桃體。垂體位于視交叉神經之后，通過漏斗與腦的基部相連，易于摘除。相同點門齒終身生長，需一定硬度的香脆食物，經常磨損來維持齒端的長度。無汗腺，尾有2條動脈和3條靜脈，背腹面各有一條動脈，3條動脈撐品字形分布。尾有散熱、平衡、自衛(wèi)等功能。胃容量小，不耐饑餓，自由飲水和自由采食的生活方式。雌性為雙子宮，呈“Y”型。其乳腺發(fā)達，胸部3對，腹部2對。哺乳仔鼠以8~12只為宜。尿量少，尿中含有蛋白質和肌酸酐，濃度高，當遇到危險時，通過排尿釋放警戒的信息素。（三）大小鼠的生理學特點小鼠大鼠不同點小鼠性成熟早，敏殖力強。適配鼠齡：雌鼠35～50日齡，雄鼠45～60日。一般成年雄鼠35～60g，雌鼠30～50g。壽命為1～2年。大鼠生長發(fā)育速度的快慢與品系、母鼠的體質、生產胎次、哺乳只數、飼料營養(yǎng)和環(huán)境條件等的不同而有所差異。適配鼠齡：雌性為80日齡，雄性為90日齡。一般成年雄鼠300～600g，雌鼠250～500g。4、壽命為2～3年相同點雌鼠性周期4～5天，妊娠期19～21天，哺乳期20～22天，每胎產仔5～16只，年產4～8胎，生育期一年。全年均可繁殖，發(fā)情周期分為前期、發(fā)情期、后期和休息期四個階段。交配后10～12小時，雌鼠在陰道口形成一個白色的陰道栓，這是受孕的標志。（四）常見大小鼠品種小鼠大鼠近交系A(白化）、AKR（白化）、BALB/c（白化）、CBA（野鼠色）、C3H（野鼠色）、DBA（淡棕色）、C57BL/6（黑色）、NZB（黑色）、中國1號（C-1，白色）、津白1、2號（TA1、TA2,白化）、615（深褐色）、AMMS/1（白化）等ACI（黑色，腹部及腳白色）、BN（棕色）、F344（白色）、LEW（白色）等封閉群白化的KM、NIH、ICR、LACA小鼠等。Wistar（白色）、SD（白色）等突變系BALB/c裸鼠、SCID小鼠、db/db小鼠、ob/ob小鼠、KK小鼠、Beige小鼠等。SHR(白化）、WKY（白化）、裸大鼠等雜交群AKD2F1、BA2GF1、BCF1、BCBAF1、BC3F1、B6AF1、B6D1F1、CAF1、CAKF1等AS×AS2F1、F344×WistarF1、LEW×BNF1、LOU×RF1、WAG×BNF1等（四）大小鼠的主要應用小鼠大鼠1、藥物的篩選和毒性實驗2、藥物的安全性評價3、血清、疫苗等生物制品檢定4、自發(fā)性、誘發(fā)性動物模型的建立5、單克隆抗體的制備6、遺傳學、免疫學動物模型的研究7、老年病、計劃生育研究以及其他疾病模型的運用1、腫瘤模型研究：化學致癌劑誘發(fā)肝癌、肺癌、食道癌等。2、藥物的安全性評價。3、維生素、氨基酸、鈣磷代謝疾病的研究。4、糖尿病等內分泌疾病研究。5、行為學研究：迷宮訓練、精神藥品實驗。6、肝臟外科切除與移植實驗。7、其他應用：傳染病、心血管疾病、放射病、計劃生育、中醫(yī)中藥等。（一）豚鼠、兔的一般特性豚鼠兔不同點喜歡安靜、干燥、清潔的環(huán)境，喜歡活動和群居，但成年動物剛混養(yǎng)時易發(fā)生斗毆。需較大活動場地，單籠飼養(yǎng)時易發(fā)生足底潰瘍。有一雄多雌的穩(wěn)定群體。膽小、溫馴，一般不傷人，不互相打斗。對外界聲音刺激極為敏感，突然的聲響、震動可引起四散奔逃，甚至引起孕鼠流產。喜干怕熱。由于汗腺不發(fā)達，當氣溫超過30℃以上或濕度過高時易引起母兔減食、流產、拒乳。性情溫順，群居性差，如果群養(yǎng)常發(fā)生斗毆咬傷，因此適于單籠飼養(yǎng)。具有夜行性和嗜眠性，白天家兔表現安靜，常閉目睡眠，夜間活躍，晚間采食量占全天的75%。相同點草食性動物，喜食纖維素多的禾本科嫩草或干飼料，有食糞現象，軟糞含有較豐富的粗蛋白和維生素，幼仔可從軟糞中吸取正常菌群；另一種圓形顆粒狀硬糞。聽覺、嗅覺靈敏，膽小怕驚，能憑嗅覺辨別非親生仔兔，并拒絕給其哺乳。每天飼喂兩次顆粒飼料，自由飲水。（二）豚鼠、兔的解剖學特點豚鼠兔不同點身體短粗，頭大，耳朵和四肢短小，不善于攀登跳躍。胸腺在頸部皮下氣管兩側，易摘除。一對乳頭。表皮薄，真皮較厚。被毛的顏色和長度?？勺鳛樽R別品種的主要特征?？v膈將胸腔分左右兩室，互不相通，暴露心臟時，動物不需做人工呼吸。頸部神經血管束中有三根粗細不同的神經：最粗、白色者為迷走神經；較細、灰白色者為交感神經；最細者為減壓神經。有乳頭3～6對。相同點一對門齒銳利，終身生長。盲腸發(fā)達，有利于微生物分解纖維素被消化吸收。雌性具有雙子宮。（三）豚鼠、兔的生理學特點豚鼠兔性成熟早，雌鼠30～45日齡，雄鼠70日齡性成熟。性周期15～17天，妊娠期為59～72天，一般產子3～4只，哺乳期2～3周。新生仔有被毛，體重約80g，生后即能活動，幾小時后即可自己采食。壽命一船4～5年，最長可達8年。正常體溫38.6（37.8～39.5）℃，自動調節(jié)體溫能力較差，飼養(yǎng)最適溫度為18～22℃。外周血和骨髓細胞的形態(tài)與人相似。對抗菌素處理敏感，尤其是青霉素，輕則發(fā)生腸炎，重則死亡。體內缺乏左旋葡萄糖內酯氧化酶，其自身不能合成維生素C。易引起變態(tài)反應，對免疫抑制劑容易被致敏。常用實驗動物對致敏物質的反應程度順序為：豚鼠＞兔＞犬＞小鼠＞貓。不同品種的兔性成熟年齡有差異。一般雌性為5～6個月，雄性為7～8個月。一年四季均可交配繁殖，兔是反射性排卵的動物，交配后10～13小時排卵，妊娠期30～33天，產仔數為4～10只，哺乳期40～45天，生育年齡5～6年。仔兔初生無毛，體重約為50g，21日左右才能采食。平均壽命8年。家兔屬恒溫動物，正常體溫在38.5～39.5℃之間，對致熱物質反應敏感，適于用作熱源實驗。有兩種換毛現象，一種是年齡性換毛，一種是季節(jié)性換毛。換毛期間兔抵抗力差，易發(fā)疾病。有特殊的血型和唾液型。兔的血清型有α’、β’、α’β’和ο型四種。α’和α’β’型易產生人A型抗體，β’和ο型易產生人B型抗體。唾液分為排出型和非排出型兩種。排出型易獲得人血細胞A型物質，非排出型不易獲得人血細胞A型物質。這種A型物質與A型抗體產生有關。體內具有產生阿托品酯酶的基因，即使吃了含有顛茄的飼料后，亦不會引起中毒癥狀。這是由于阿托品酯酶破壞了生物堿所致。（四）常見豚鼠、兔的品種豚鼠兔常見豚鼠分為英國種、阿爾西尼亞種、秘魯種和安哥拉種，共4種。根據毛的特性分為：短毛、硬毛、長毛3種。根據毛的顏色分為：白色、黑色、棕色、灰色、淡黃色和杏黃色等，個體的毛色組成有單毛色、雙毛色和三毛色。我國飼養(yǎng)的豚鼠，按毛色特征鑒別，屬于英國種的短毛豚鼠。常用于醫(yī)學研究的近交系豚鼠是黑、白、紅三色的近交系2和近交系13。而廣泛應用的封閉群豚鼠是白化的Hartley、FMMU、Zmu-1品系。新西蘭兔（美國）：分為白色、紅黃色、黑色三種。成年體重4～5kg，熱源實驗幾乎都是用此品種。日本大耳白兔：分為3個型，大型兔（5～6kg）、中型兔（3～4kg）、小型兔（2～2.5kg）。青紫藍兔（法國）：被毛為藍灰色，人用生物制品檢定使用的主要品種之一。中國白兔：又稱中國本兔、白兔、菜兔。皮肉兼用型。白毛黑眼兔（WHBE兔）：由浙江中醫(yī)藥大學實驗動物中心于1998年9月在日本大耳白兔群中發(fā)現的一個突變系，最適合眼科學的研究。（五）豚鼠、兔的主要應用豚鼠兔1、多種疾病模型的制作：抗組胺藥、抗結核病藥物2、藥效及安全性評價實驗：藥物、化妝品3、多種病原體所致的疾病研究：鼠疫、鉤端螺旋體、布氏桿菌、傷寒、炭疽、衣原體等。4、營養(yǎng)學研究：維生素、葉酸、氨基酸等營養(yǎng)缺乏癥研究。5、免疫學研究：過敏性休克和變態(tài)反應研究的首選動物。6、其他：耳內疾病研究，缺氧耐受性和耗氧量研究。1、免疫血清（多抗）的制備2、動脈粥樣硬化疾病模型3、眼球角膜移植、玻璃體內注射等眼科研究4、發(fā)熱、解熱及檢查致熱源等實驗5、狂犬病、天花、腦炎、血吸蟲、弓形體等感染性動物模型研究6、心、肺疾病模型研究7、皮膚燙傷、刺激反應試驗8、動物失血性休克、血管縫合、外科手術等實驗9、營養(yǎng)缺乏、生理代謝失常、遺傳性疾病等方面研究犬、猴、小型豬主要生物學特性犬猴小型豬肉食性動物。雄性愛斗，有合群與欺弱的特點。色盲，嗅覺發(fā)到，對移到物體反應敏感。有服從主人的天性，易調教。皮膚汗腺極不發(fā)達，靠鼻尖和伸舌頭散熱。具有發(fā)達的血液循環(huán)和神經系統(tǒng)，內臟與人相似，比例也近似。有A、B、C、D、E五種，只有A型血有抗原性，可引起輸血反應。發(fā)情期13～19天，為單發(fā)情動物，多數在春、秋季發(fā)情。性成熟8～10個月，每年春秋兩次發(fā)情。妊娠期60（58～63）天。哺乳期60天。每胎產仔2～8只。適配年齡，雄犬1.5～2歲，雌犬1～1.5歲。壽命10～20年。雜食性動物群居性強獼猴屬于國家二級保護動物。有乳牙和恒牙，具有五指（趾）。體內缺乏維生素C合成酶，必須從食物中補充。有兩種血型：一類同人類的ABO和Rh型相同；另一類是獼猴屬特有的，有Arh、Brh、Crh等14個，在同種異體間輸血時要做血型配對試驗。性成熟期：雄性3歲，雌性2歲；性周期28（21～35）天，月經期2～3（1～5）天，月經開始后12～13天排卵。妊娠期165天左右。每胎產仔1個，極少2個。適配年齡，雄性4.5歲，雌性3.5歲，壽命為20～30年。雜食性動物喜群居，性格溫馴，易于調教。汗腺不發(fā)達，幼年、成年豬都怕熱，最適溫度為20～23℃。心血管系統(tǒng)、消化系統(tǒng)、皮膚、營養(yǎng)需要，骨骼發(fā)育以及礦物質代謝等都與人類的情況極其相似。性成熟早，雌性4-8月齡，雄性6-10月齡。為全年性多發(fā)情動物，性周期21（16～30）天，發(fā)情期2.4（1～4）天。妊娠期114（109～120）天。哺乳期30天，每窩產仔數2～10頭，年產2～2.5胎。壽命最長達27年，平均16年。（二）犬、猴、小型豬主要品種犬猴小型豬小獵兔犬（Beagle）四系雜交犬（4－WayOvoss)黑白斑點短毛犬Labrador犬墨西哥無毛犬Boxer犬我國的獵犬、狼犬、四眼犬、華北犬、西北犬、西藏牧羊犬等也廣泛應用于動物實驗。恒河猴、食蟹猴、短尾猴、紅面猴、日本猴、平頂猴、獅尾猴、戴帽猴、頭巾猴、臺灣巖猴、熊猴、蠻猴等。戈廷根小型豬（德國）明尼蘇達小型豬（美國）布爾諾小型豬（捷克）科西嘉系小型豬（法國）日本：會津系、阿米尼系、克拉文系、CSK系、皮特曼系和育克坦系。中國：西雙版納近交系小型豬、貴州小型香豬、廣西巴馬小型豬、海南五指山小型豬。飼養(yǎng)管理：實驗犬、猴、小型豬用配合飼料，每天分兩次由飼養(yǎng)員或實驗人員定時定量飼喂，采用自由飲水。先清潔籠具后飼喂，喂完及時收回食具消毒。犬、猴、小型豬舍每日沖洗糞尿一次，每兩周消毒一次，每批實驗后徹底消毒一次。預防體表寄生蟲、狂犬病、猴B病毒、豬霍亂、豬瘟等人畜共患病，發(fā)病動物與健康動物分開飼養(yǎng)，檢疫期后才可實驗，建立詳細的飼養(yǎng)管理和實驗過程資料。（三）犬、猴、小型豬主要用途犬猴小型豬應用生理、病理、毒理、藥理、腫瘤研究外科使用研究青光眼、白血病研究紅斑狼瘡、淋巴肉瘤靈長目動物與人類的遺傳物資有75～98.5％的同源性，同人的親緣關系最接近，是研究人類健康和疾病的理想動物模型。皮膚燒傷、燙傷實驗。動脈粥樣硬化最好的動物模型。營養(yǎng)食譜和嬰兒畸形的研究。器官移植：皮膚、心臟及瓣膜等。胃和十二指腸潰瘍、胰腺炎、肝壞死、血友病等人類疾病模型的研究。第二節(jié)實驗動物的營養(yǎng)需要實驗動物為了正常生長發(fā)育及生理功能、繁衍后代，必須從外界攝取食物。實驗動物只有獲得良好的營養(yǎng)才能保持健康狀態(tài)，而健康的實驗動物才能確保動物實驗結果的可靠性。飼料的質量和營養(yǎng)成分直接影響實驗動物的質量。研究實驗動物的營養(yǎng)需求、加強飼料質量標準化管理，是實現實驗動物標準化的重要環(huán)節(jié)。二、實驗動物的食性不同種的動物攝取食物的習性各不相同，這種習性稱為食性。大體可將動物分成三類：肉食性動物如犬、貓等；草食性動物如豚鼠、兔、羊等；雜食性動物如小鼠、大鼠、地鼠、猴、小型豬等。三、常用實驗動物的營養(yǎng)需要大鼠的營養(yǎng)需要大鼠飼料中含18%~20%的蛋白質即可滿足生長、妊娠、泌乳的需要。特別要注意脂肪酸的供應，飼料中必需脂肪酸含量應占總能量的1.3%，其中亞油酸含量不低于0.3%。通常大鼠不需要補允維生素K，但要補充維生素A，在妊娠或泌乳時對鎂的需要量增加。無菌大鼠還應注意補充VitB12。小鼠的營養(yǎng)需要小鼠飼料中含有18%左右的蛋白質即可滿足需要。小鼠特別需要含亞油酸豐富的飼料。小鼠對VitA和VitD的需要量較高，但對維生素A過量敏感，尤其是妊娠小鼠，過量VitA可造成繁殖紊亂和胚胎畸形。對繁殖小鼠可適當補充VitE以提高受孕率。無菌小鼠還應注意補充Vitk。豚鼠的營養(yǎng)需要豚鼠對某些必需氨基酸特別是精氨酸的需要量較高。豚鼠屬草食性動物對粗纖維的消化能力強，飼料中要求含有10～15％的粗纖維。如果粗纖維含量不足，可引起豚鼠出現排糞障礙和脫毛現象。豚鼠對VitC缺乏特別敏感，缺乏時可引起壞血病、生殖機能下降、生長不良、抗病力降低等癥狀，最后導致死亡。一般成年豚鼠每日需補充VitC10mg,繁殖豚鼠30mg，添加到飼料或飲用水中。兔的營養(yǎng)需要兔是草食性動物，飼料中含15%蛋白質左右即可，但粗纖維含量應在11%以上，才能維持其正常的消化生理功能。因精氨酸是兔的第一限制性氨基酸，應補充足夠。兔初生時有大量鐵儲備，因而不易貧血。雖然兔腸道可合成VitK和大部分B族維生素，并通過食糞行為再加以利用，但繁殖兔仍需補充VitK。犬的營養(yǎng)需要犬是肉食性動物，必須供給犬充足的脂肪和蛋白質，同時還要考慮飼料的適口性。犬對維生素A的需要量較大，對不飽和脂肪酸也有一定量的要求。盡管犬腸道內微生物可合成B族維生素，但仍需補充VitB12。猴的營養(yǎng)需要猴屬于靈長類動物，其屬性與人相似，飼料中的50％以上能量來自糖代謝；其體內不能合成維生素C，必須由飼料提供。并要注意飼料的適口性。此外，還應有蘋果、香蕉、蔬菜等作為補沖維生素C的材料四、實驗動物的飼料標準我國在1994年制定了實驗動物全價飼料的營養(yǎng)標準（GB14924－1994），將常用實驗動物的營養(yǎng)要求做了明確規(guī)定；2001年對標準重新修訂，制定出新的實驗動物配合飼料國家標準（GB14924－2001），2010年又對飼料國家標準再次進行修訂（GB14924－2010），目前國內實驗動物飼料生產單位均需按此標準執(zhí)行。五、實驗動物飼料的分類（一）按照營養(yǎng)成分的分類1、全價配合飼料這種飼料含有各種營養(yǎng)物質，能量均衡，可以直接飼喂，能滿足動物營養(yǎng)需求，能獲得最大經濟效益。目前大鼠、小鼠、豚鼠和兔均采用全價配合飼料。2、混合飼料又叫基礎飼料，是由能量飼料、蛋白質飼料、礦物質飼料按一定比例組成的，基本能滿足動物的營養(yǎng)需要，但營養(yǎng)不夠全面，還需要配合一定的青、粗飼料。部分中小單位用于飼養(yǎng)兔、豚鼠等動物。3、濃縮飼料以蛋白質飼料為主，加上礦物質和添加劑預混料，不能直接飼喂，必須按照各種濃縮飼料的說明添加能量飼料或者粗飼料才能配制成全價配合飼料。4、添加劑預混料是由營養(yǎng)物質添加劑和非營養(yǎng)物質添加劑按照各種飼料配方的需要加上必需的載體而配制成的各種添加劑預混料，在配料時按照具體需要分別加入。5、代乳飼料（人工乳）是專為各種哺乳期動物配制的，代替自然乳，也屬全價配合飼料。（二）按飼料加工形成的物理形狀分類1、粉料是把所有原料按需要粉碎成均勻的顆粒狀，再按比例混合好的一種料型，此料加工方法簡單、成本低。實驗時便于隨時加入藥品，但易引起動物挑食，造成浪費，比重不同的原料在運輸中容易分離。2、壓制顆粒料將粉料經蒸氣加工處理制成的塊狀飼料，部分有毒成分被破壞，且密度大，體積小，原料均勻，適口性好，可增加動物采食量，減少浪費，但經蒸氣加工后，飼料中一部分維生素和酶等活性受到破壞，應適量添加維生素。此料適合嚙齒類動物喜啃咬的習性3、膨化顆粒料：濕粉料經高溫高壓被強迫通過?？锥纬傻囊环N飼料。對魚類、猴、犬、貓的適口性佳，其他動物不宜使用。4、顆粒飼料的優(yōu)點：易于動物消化吸收、殺死部分微生物、增加適口性、便于儲存運輸、飼喂方便、避免動物扒食而造成不必要的浪費。通常大、小鼠每兩三天喂一次；兔、豚鼠、犬、小型豬每天喂2次。六、實驗動物飼料的加工飼料的營養(yǎng)價值不僅決定飼料本身的成分，而且也受加工調制工序的影響。飼料經過加工調制后能改變飼料原來的理化性狀和適口性，提高飼料的消化率，同時便于飼喂和儲存。因而飼料的加工調制是充分利用各種飼料，科學地飼養(yǎng)實驗動物的有效途徑。全價營養(yǎng)飼料中不得摻入抗生素、驅蟲劑、防腐劑、色素、促生長劑以及激素等添加劑。不同種類的實驗動物以及不同的動物實驗，對飼料加工要求也不同。大鼠、小鼠、豚鼠和兔等實驗動物的飼料就制成具有一定硬度的顆粒飼料為宜，而犬、貓則以膨化飼料為好，一般大鼠、小鼠飼料直徑10~12mm，豚鼠、兔飼料直徑4~5mm為宜，獼猴飼料制成餅干狀。有的實驗動物飼料根據實驗目的不同，常制成糊狀、粉狀或液體狀態(tài)，無論其形狀如何，在飼料加工生產過程中都要注意嚴格遵循相關產品標準七、實驗動物飼料的衛(wèi)生指標應定期對飼料產品的原料和成品按國家標準限定的有毒有害物質含量和規(guī)范的檢測方法進行檢測。配合飼料的微生物、化學污染物指標見（表4-9、表4-10）八、實驗動物飼料的消毒飼料消毒的目的主要是考慮到原料來源比較復雜，在收獲、儲存和運輸過程中都有可能污染病原菌的機會，因此通過消毒的方法達到滅菌，供應完全符合營養(yǎng)和滅菌的飼料是十分必要的。飼料的消毒方法有很多種，但飼料在保存及消毒過程中，由于外界條件所影響，飼料中的某些營養(yǎng)成分會有所損失，必須予以充分重視。（一）干熱滅菌法干熱滅菌（100℃蒸汽）置顆粒料于烤箱內在70～80℃烘烤6h，能使滅菌物表面溫度達到高溫，細菌總數可控制在4.27×103～4.23×10?范圍內,并能完全殺滅大腸桿菌和霉菌。但須較長時間才能達到滅菌物的內部，故不僅營養(yǎng)成分破壞較多，多種維生素也大部分遭到破壞，且塊料變得堅實，適口性降低，同時易使飼料炭化而造成浪費。（二）高壓蒸汽滅菌法在121℃高壓蒸汽下加熱10~15分鐘，滅菌效果明顯，營養(yǎng)成分破壞比干熱滅菌法少，但必須掌握好消毒所需的時間。此法雖然滅菌效果好，但對絕大多數維生素尤其是VitC、VitB1、VitB6、VitA破壞嚴重，并使蛋白質凝固變性，飼料變硬，對動物適口性差，采食量也會降低。需要定期補充復合維生素。（三）藥物熏蒸滅菌法利用化學藥品的氣霧劑對飼料進行消毒，這種處理方式雖然簡單，但是可能導致消毒后的飼料中還殘存一些對動物代謝有害的化合物。目前極少使用該方法。（四）放射線滅菌法放射線（60Co）穿透力強，滅菌效果好，營養(yǎng)成分破壞很少，但費用較高。一般SPF級實驗動物飼料通過25kGy照射可基本達到無菌狀態(tài)，無菌級動物飼料需加大劑量到50kGy更有保險。該方法對高脂飼料滅菌效果最好，動物采食時也不易產生粉塵。九、實驗動物飼料的儲存和運輸飼料的儲存和運輸要執(zhí)行國家關于全價營養(yǎng)飼料GB14924-2010標準。飼料庫房應具備干燥通風良好的環(huán)境，并具有防鼠、防蟲的設備，各種飼料應分批次，分類堆放整齊，防止霉變和蟲蛀，嚴禁與有毒有害物品同存。一般飼料存放量不要過多，儲存時間不宜過長，原料儲存3～6個月，顆粒料不應超過3個月，梅雨季節(jié)不應超過2個月。產品在運輸過程中應防止包裝破損、日曬、雨淋，并不得與有毒有害物品混運。滅菌料要用特殊的包裝、儲存、運輸，嚴防污染。一旦發(fā)生包裝漏氣，則不能當作無菌飼料處理。飼料進出倉庫應采用“先進先出”的原則。第三章實驗動物環(huán)境設施及規(guī)范化管理第一節(jié)實驗動物環(huán)境設施的概念一、實驗動物環(huán)境設施的定義實驗動物環(huán)境設施是指進行實驗動物飼養(yǎng)、生產、保種、維持、試驗、實驗研究等所需的建筑物、設備的總稱，是保障實驗動物能正常生長繁殖以及達到動物實驗成功的必要條件。實驗動物環(huán)境包括外環(huán)境和內環(huán)境：1、實驗動物外環(huán)境：是指動物實驗設施以外的環(huán)境，如樓與樓之間的距離、周圍的噪聲、空氣中的塵埃及有害氣體等。2、實驗動物內環(huán)境：指實驗動物賴以生存、繁殖或活動的環(huán)境。又可分為大環(huán)境和小環(huán)境。大環(huán)境是指放置飼養(yǎng)動物籠具架等輔助設施的實驗室；小環(huán)境是指動物飼養(yǎng)籠盒內及周邊的各種理化因素，如溫濕度、氣流、噪聲、光照強度、氨濃度等。內環(huán)境直接影響實驗動物的質量。二、實驗動物環(huán)境設施的分類（一）按照環(huán)境設施的使用功能，可分為實驗動物生產設施、實驗動物實驗設施和實驗動物特殊實驗設施。（二）按照空氣凈化和對微生物控制程度，可分為普通環(huán)境、屏障環(huán)境和隔離環(huán)境1、實驗動物生產設施（breedingfacilityforlaboratoryanimal）：指用于實驗動物生產的建筑物和設備的總和。包括動物生產區(qū)、輔助生產區(qū)、輔助區(qū)。2、實驗動物實驗設施（experimentfacilityforlaboratoryanimal）：指以研究、試驗、教學、生物制品和藥品及相關產品生產、檢定等為目的而進行實驗動物試驗的建筑物和設備的總和。包括動物實驗區(qū)、輔助實驗區(qū)、輔助區(qū)。3、實驗動物特殊實驗設施（hazardexperimentfacilityforlaboratoryanimal）：指包括感染性動物實驗設施（動物生物安全實驗室ABSL-1、ABSL-2、ABSL-3、ABSL-4）、放射性同位素動物實驗設施、有害化學物質動物實驗設施三種。4、普通環(huán)境(conventionalenvironment)：符合實驗動物居住的基本要求，控制人員和物品、動物出入，不能完全控制傳染因子，適用于飼育基礎級實驗動物。5、屏障環(huán)境（barrierenvironment）：符合動物居住的要求，嚴格控制人員、物品和空氣的進出，適用于飼育清潔級或無特定病原體（specificpathogenfree，SPF）級實驗動物。屏障環(huán)境又包括整體的屏障系統(tǒng)和局部的屏障單元（如層流架、獨立通風籠盒（IVC））6、隔離環(huán)境（isolationenvironment）：采用無菌隔離裝置以保持無菌狀態(tài)或無外源污染物。隔離裝置內的空氣、飼料、水、墊料和設備應無菌，動物和物料的動態(tài)傳遞須經特殊的傳遞系統(tǒng)，該系統(tǒng)既能保證與環(huán)境的絕對隔離，又能滿足轉運動物時保持與內環(huán)境一致。適用于飼育無特定病原體級、悉生（gnotobiotic）及無菌（germfree）級實驗動物。實驗動物環(huán)境的分類環(huán)境分類使用功能適用動物等級普通環(huán)境實驗動物生產、動物實驗、檢疫普通動物屏障環(huán)境正壓實驗動物生產、動物實驗、檢疫清潔動物、SPF動物負壓動物實驗、檢疫清潔動物、SPF動物隔離環(huán)境正壓實驗動物生產、動物實驗、檢疫SPF動物、悉生動物、無菌動物負壓動物實驗、檢疫SPF動物、悉生動物、無菌動物二、工藝主要布局（一）前區(qū)：包括辦公室、維修室、庫房、飼料室、一般走廊。（二）動物生產區(qū)：包括隔離檢驗室、緩沖間、風淋室、育種室、擴大群飼育室、生產群飼育室、待發(fā)室、清潔物品暫存室、走廊等。（三）動物實驗區(qū)：包括緩沖間、風淋室、檢疫室、隔離室、操作室、手術室、飼育間、清潔物品暫存室、走廊等?；A級大動物檢疫間必須與動物飼養(yǎng)區(qū)分開設置。（四）輔助區(qū)：包括倉庫、洗刷消毒室、廢棄物品暫存室、解剖室、動物尸體暫存室、機械設備室、淋浴室、工作人員休息室、更衣室等。（五）動物實驗設施應與動物生產設施分開設置。四、動物運輸1、運輸活體動物的籠具應符合動物特點，使動物得到最大的福利和健康要求。2、運輸籠具應符合微生物控制的等級要求，并且必須在每次使用前進行清洗和消毒。3、運輸工具能夠保證有足夠的新鮮空氣維持動物的健康、安全和舒適的需要。4、高溫天氣運輸動物需配有降溫措施，盡可能縮短路途停留時間。5、如果運輸時間超過6小時，宜配備符合要求的飼料和飲水設備。第二節(jié)實驗動物屏障環(huán)境設施一、屏障環(huán)境的概念（一）定義：屏障環(huán)境是指在外區(qū)和室內清潔區(qū)之間設有嚴格的屏障，即飼育環(huán)境是密閉的，通過屏蔽裝置與外界相通，送入飼養(yǎng)室內的空氣要經過初效、中效、高效三級過濾，潔凈度要求達到１萬級（國際7級），除生物安全屏障系統(tǒng)為負壓以外，通常應保持為正壓，各房間壓差不低于10~50Pa；排風口設有防空氣倒流裝置。室內設有一更、二更、風淋、準備室、清潔走廊、實驗室（飼養(yǎng)室）、污物走廊、緩沖間以及配套的高壓蒸汽滅菌柜、傳遞窗、動物飲用水、壓縮空氣、監(jiān)控系統(tǒng)等。屏障環(huán)境內溫度、濕度、光照、潔凈度、換氣次數、壓差、噪音、氨濃度、微生物等完全實行人工控制。一切進入屏障環(huán)境內的人、動物、飼料、飲水、墊料及各種實驗用品、儀器設備等均須經過嚴格的消毒、防護等控制微生物和寄生蟲的措施。屏障環(huán)境的設計理念功能齊全完善、運行安全可靠、管理簡易方便、經濟節(jié)能環(huán)保、有效面積提高二、屏障環(huán)境的類型（一）屏障環(huán)境的模式屏障環(huán)境從使用目的來看可分為生產和使用兩種模式；從建筑平面布局來看又可分為無走廊、單走廊、雙走廊、三走廊等幾種模式。1、無走廊屏障環(huán)境一般只用于單一品種動物的飼養(yǎng)或單一課題的動物實驗。因為課題單一，工作人員一般都比較固定，且不存在交叉污染問題，一些生產品種單一的小藥廠用于藥品異常毒性實驗可考慮采用。2、單走廊屏障環(huán)境該形式充分利用通道空間，減少中心控制區(qū)的整體面積，在一定程度上起到節(jié)能的作用，適合需要飼養(yǎng)兩種以上清潔級動物、工作人員相對固定的機構。它的缺點是進、出都共用一條走廊，管理不當或操作不當易造成交叉感染。3、雙走廊、三走廊屏障環(huán)境適用于需要同時飼養(yǎng)同一微生物等級的多個品種或品系的動物，又要同時做多個項目實驗的情況。一般來說適合于動物繁殖和一些科研任務較重、實驗項目較多的科研院所應用。優(yōu)點是人員和物品完全實行單線流動，實行潔污分離，相對于其他設施而言交叉污染的可能性較小。（二）感染性動物實驗設施ABSL-1級（P1）：進行4級微生物實驗的動物實驗室，對工作人員進出要求不嚴。ABSL-2級（P2)：禁止非工作人員進入實驗室?？赡馨l(fā)生氣溶膠擴散的3級微生物實驗在二級生物安全柜中進行。ABSL-3級（P3）：禁止非工作人員進入設施內。由雙重密封門或緩沖隔離室和外部隔離的2級微生物實驗區(qū)，進出氣體都必須經過高效過濾器。ABSL-4級（P4）：采用獨立的建筑物內用隔離區(qū)和外部隔斷的構造，使室內保持負壓。在三級生物安全柜內進行1級微生物實驗，非本區(qū)工作人員禁止入內。三、實驗動物屏障環(huán)境的建設屏障環(huán)境動物實驗室經設計、招標、施工、驗收、自檢合格等流程后交付給使用單位。使用方根據當地實驗動物許可證管理辦法的要求，向有資質的檢測單位申請屏障環(huán)境內指標檢測，同時向省或直轄市的實驗動物管理委員會提交實驗動物許可證的申請驗收材料，經專家評審各項指標合格后，主管部門頒發(fā)許可證方可啟用科研項目申報和動物實驗管理1、外單位：科研項目申報需要實驗動物使用許可證必須簽署《課題合作協議書》，并加蓋單位公章。2、本校單位：科研項目申報需要填寫《廈門大學研究、教學、測試用動物申請使用表》，經學校實驗動物福利倫理委員會審核合格后，提供《廈門大學實驗動物管理倫理委員會證明》一份。3、動物引種和實驗：從實驗動物中心網站下載《引種動物隔離飼養(yǎng)申請表》、《動物實驗登記表》填寫，網上注冊成功才能訂購實驗動物。課題組實驗人員需集中理論學習、考試和現場培訓。第三節(jié)實驗動物相關法律法規(guī)1、國家級法規(guī)：1988年10月31日經國務院批準，由國家科委頒布了2號令《實驗動物管理條例》（分八個部分，35條）。1997年12月21日由國家科委頒布了《實驗動物質量管理辦法》【1997】593號，（分五章，26條）。1998年國家科技部發(fā)布了《國家嚙齒類實驗動物種子中心引種、供種實施細則》【1998】048號2001年國家七部局（科技部、衛(wèi)生部、教育部、農業(yè)部、國家質量監(jiān)督檢驗檢疫局、國家食品藥品監(jiān)督管理局、中國人民解放軍總后勤部衛(wèi)生部）聯合頒布了《實驗動物許可證管理辦法》（2001）545號（分五章，23條）。2001年8月29日由國家質量監(jiān)督檢驗檢疫總頒布了新的《中華人民共和國實驗動物標準》（GB14922~14927-2001，18448.1~18448.10-2001）。2002年5月1日起全國統(tǒng)一實施新的實驗動物國家標準和許可證制度。2006年9月30日由國家科技部頒發(fā)了《關于善待實驗動物的指導性意見》[2006]398號（分六章，30條）。2008年12月1日由國家住房和城鄉(xiāng)建設部及國家質量監(jiān)督檢驗檢疫總局聯合發(fā)布了《實驗動物設施建筑技術規(guī)范》（GB50447-2008）（分十個章節(jié)）。2010年對實驗動物國家標準進行修訂，特別是環(huán)境設施指標、微生物檢測方法、配合飼料的成分組成和比例等作出了更加明確的規(guī)定。2、省級法規(guī)：1990年福建省人民政府頒發(fā)了《福建省實施〈實驗動物管理條例〉的辦法》，閩政[1990]46號。1994年福建省科委頒發(fā)了《福建省實驗動物管理實施細則》，閩科條[1994]012號。2002年福建省科技廳頒發(fā)了《福建省實驗動物許可證管理辦法(試行)》，閩科財[2002]102號，從2003年10月1日起實施。2004年福建省科技廳頒發(fā)了《福建省實驗動物許可證管理程序和福建省實驗動物從業(yè)人員崗位證書辦理程序》，閩科財[2004]27號。2005年福建省科技廳頒發(fā)了《福建省實驗動物許可證驗收細則（修訂）》，閩科財[2005]3號。2006年福建省科技廳、衛(wèi)生廳、教育廳、質量技術監(jiān)督局、食品藥品監(jiān)督管理局聯合頒布《福建省實驗動物許可證管理辦法》，閩科財[2006]51號。例如：在《實驗動物許可證管理辦法》中第十條凡涉及未取得許可證的實驗動物的科研項目，其動物實驗結果不予立項和不鑒定其科研成果。第十一條凡利用未取得許可證的實驗動物及相關產品，所取得的產品檢定和安全評價結果無效，不予承認。此外，實驗動物管理與應用還應該符合各行業(yè)標準、地方標準、企業(yè)標準以及國家特有的相關規(guī)定的要求。3、我校的《廈門大學實驗動物管理辦法》和《廈門大學實驗室安全管理規(guī)定》中明確指出：實驗動物環(huán)境設施、從業(yè)人員、動物運輸、尸體處理、實驗室安全、特殊實驗要求等方面都有相關制度。詳細請參見實驗動物中心網站（http//）實驗動物質量控制體系1、實驗動物種子質量的保障實驗動物種子的來源背景和質量是實驗動物質量的源頭，抓住種子就等于抓住源頭。目前，我國在北京建立了“國家嚙齒類實驗動物種子中心”，上海設有分中心；在南京成立了“國家遺傳工程小鼠資源庫”；在云南昆明成立非人靈長類國家重點實驗室；國家農業(yè)部成立實驗兔、禽類、小型豬、Beagle犬等多種動物種源中心。2、實驗動物質量檢測體系的建立國家主管部門確立了國家和?。ㄖ陛犑校﹥杉墮C構組成的實驗動物質量檢測網絡。國家設有“國家實驗動物質量檢測中心”，各?。ㄖ陛犑校┰O有省市級實驗動物檢測機構。我省實驗動物檢測機構設在福建省疾病預防控制中心（福州）。實驗動物質量檢測機構層次國家實驗動物質量檢測中心，?。ㄖ陛犑校┘墝嶒瀯游镔|量檢測機構，行業(yè)實驗動物質量檢測機構，各單位實驗動物質量自檢實驗室4、國家級實驗動物檢測機構及具體承擔單位國家實驗動物微生物學檢測中心(中國藥品生物制品檢定所)國家實驗動物遺傳學檢測中心(中國藥品生物制品檢定所)國家實驗動物寄生蟲學檢測中心(衛(wèi)生部上海生物制品研究所)國家實驗動物病理學檢測中心(中國醫(yī)學科學院實驗動物研究所)國家實驗動物環(huán)境及設施檢測中心(中國醫(yī)學科學院實驗動物研究所)國家實驗動物飼料檢測中心(中國預防醫(yī)學科學院營養(yǎng)衛(wèi)生研究所)實驗動物的管理機構國家科技部、衛(wèi)生部、教育部、農業(yè)部、國家質量監(jiān)督檢驗檢疫總局、國家藥品監(jiān)督管理局、中國人民解放軍總后勤部衛(wèi)生部省、直轄市科技廳、衛(wèi)生廳、教育廳、質量技術監(jiān)督局、藥品監(jiān)督管理局實驗動物管理委員會（掛靠科技廳條財處）生產與使用單位（包括主管領導、實驗動物管理結構、專業(yè)技術人員）第四章動物實驗的設計和實施一.動物實驗設計的基本原則

1.相似性2.可靠性3.重復性4.可控性5.經濟性6.倫理性

二.動物實驗課題的設計

1.實驗動物選擇2.動物分組原則

三、動物實驗的實施

1、實驗動物的訂購2、動物實驗基本方法3、實驗動物安死術

四.實驗結果分析與外推生命科學研究的設計中遵循的原則

1.相似性(比較醫(yī)學)為了避免直接在人身上進行實驗，必須在人為設計的條件下，選擇動物作為人類的替代者。1.無論何種動物均與人類不屬同種生物。2.被判為對動物無效的藥物，不等于臨床無效。設計的一個重要原則是：所獲結果應盡可能類似于人類的情況2.可靠性：課題研究結果要可靠，就要求使用的動物模型能夠準確模擬人類的疾病，即可特異地，真實地反映某種疾病或機能、代謝、結構變化，應具備該種疾病的主要癥狀和體征，經化驗或X光照片，心電圖，病理切片等證實。要使實驗結果可靠,就必須使用質量符合實驗要求的實驗動物。如不合格的實驗動物易自發(fā)地出現某些相應病變的癥狀，就不應選用為了確保實驗動物在進行實驗處理后的反應可靠性，還要求實驗環(huán)境保持穩(wěn)定，動物實驗設施符合動物實驗的需要，以及保障實驗人員和環(huán)境免受實驗危害。3.重復性、科學與實用、經典與創(chuàng)新科學研究成果必須能夠重復，所用動物模型應能重復培育，且能實現標準化。如用一次定量放血法可導致動物百分之百呈出血性休克，百分之百死亡，這就符合可重復和達到標準化的要求。用犬做心肌梗死模型應較合適，犬的冠狀動脈循環(huán)與人相似，且適宜做暴露心臟的剖胸手術；但結扎犬冠狀動脈的后果差異太大，不同犬同一動脈相同部位的結扎后果無法預測，不能標準化;改用實驗小鼠、大鼠、地鼠或豚鼠結扎冠狀動脈，其結果就比較一致，可標準化?？煽匦?，對動物及其實驗操作過程控制在課題研究中使用的動物模型應考慮到今后臨床應用和便于控制其疾病的發(fā)展，以利課題的順利進展。如雌激素能終止實驗大鼠和小鼠的早期妊娠，但不能終止人的妊娠。以實驗大鼠或小鼠篩選帶有雌激素活性的藥物時，常發(fā)現這類藥物能終止妊娠，似乎是有效的避孕藥，但用于人類卻不成功。如果已知待測藥物含有雌激素，就不能使用實驗大鼠或小鼠觀察其終止妊娠的作用。實驗大鼠和小鼠對革蘭氏陰性菌有較強的抵抗力，不宜選用實驗大鼠或小鼠作實驗性腹膜炎動物模型，不容易導致腹膜炎。有的動物對某些致病因子特別敏感，很難控制，極易死亡，不適宜研究。如犬腹腔注射糞便濾液引起腹膜炎，有80％在24h內死亡；等不及實驗治療觀察；且糞便濾液中細菌菌株難于控制，不能準確重復實驗結果。經濟性，經費預算和其他考慮?？偠灾?，在選用實驗方法和觀察指標也應根據客觀、科學、易行、經濟而定。實驗動物的福利與倫理隨著世界上動物保護主義的興起，而醫(yī)學生命科學研究又不得不使用實驗動物的前提下產生的。因此，1959年Russell和Burch發(fā)表的《仁慈的試驗技術原理》一書中提出的動物實驗應采取替代、減少和優(yōu)化原則（即“3R”）被廣大生命科學工作者所接受。替代（replacement）原則：是指在試驗系統(tǒng)中盡可能用低等實驗動物替代高等實驗動物，用離體培養(yǎng)的細胞、組織、器官替代動物個體，用微生物替代動物，用物理、化學等非生命系統(tǒng)替代生命系統(tǒng)的實驗，并能獲得相同試驗結果的科學方法。減少（reduction）原則：是指如果某一研究方案中必須使用實驗動物，同時又沒有可行的替代方法，則應通過合理的實驗設計，把使用動物的數量降低到實現科研目的最小量，或用較少的動物獲得更多的實驗數據，或者綜合利用動物。優(yōu)化（refinement）原則：是指通過改善動物設施、飼養(yǎng)管理和實驗條件，精選實驗動物、技術路線和實驗手段，優(yōu)化實驗設計和實驗操作技術，熟練掌握動物實驗方法，盡量減少實驗過程中對動物機體的損傷，減輕動物遭受的痛苦和應激反應，使動物實驗得出科學的結果。在飼養(yǎng)管理和使用實驗動物過程中，要采取有效措施，使實驗動物免遭不必要的傷害、饑渴、不適、驚恐、折磨、疾病和疼痛，保證動物能夠實現自然行為，受到良好的管理和照料，為其提供清潔、舒適的生活環(huán)境，提供充足的保證健康的食物、飲水，避免或減輕疼痛和痛苦等。二.動物實驗課題的設計(一)實驗動物選擇。在生命科學和醫(yī)學的研究中，通常以動物作為實驗對象，但由于不同種動物具有不同生物學特性，即使同品種不同亞系間也存在一定的差異，必須根據動物實驗課題的要求和目的選擇合適的動物。1.選擇的基本原則：（1）根據實驗目的選擇動物。(2)選擇在結構、機能、代謝以及發(fā)病機理與人相似的實驗動物(3)選用解剖、生理上有特點的動物(4)選用特殊生理反應的動物以符合不同的實驗要求(1)根據實驗目的選擇動物。犬的甲狀旁腺位于兩個甲狀腺端部的表面，位置比較固定.作甲狀旁腺摘除實驗，應選犬而不用兔。兔的甲狀旁腺分布的比較散，位置不固定，甲狀腺摘除實驗要保留甲狀旁腺的功能，就要選兔不選犬。豬是二十世紀才開發(fā)的實驗動物。豬的皮膚在結構上與人皮膚有很多相似點，經處理后的豬皮片，常被用作嚴重燒傷病人的過度性皮膚。豬的心血管系統(tǒng)與人類也較為接近。尤其是小型豬的開發(fā)成功，為豬的大規(guī)模實驗提供了有利條件。(2)選擇在結構、機能、代謝以及發(fā)病機理與人相似的實驗動物。靈長類動物與人在分類學上地位最相近，是研究人類多種疾病的理想動物；是牙科學，胚胎學，病理學，解剖學，生理學，免疫學等多種學科的常用動物；也是