葛根與枸杞對(duì)小鼠脂肪肝的影響課件

開(kāi)題報(bào)告

論文題目：葛根與枸杞對(duì)小鼠脂肪肝的影響對(duì)比研究方向：植物生物化學(xué)

研究生姓名：解婧

導(dǎo)師姓名：陳志論文選題的國(guó)內(nèi)外研究現(xiàn)狀及發(fā)展趨勢(shì)肝病至今仍是人類沉重的健康負(fù)擔(dān)和主要死因之一。究其原因主要為生活方式的改變導(dǎo)致肥胖、糖尿病、嗜酒及其相關(guān)脂肪性肝病(FLD)增加迅速。FLD疾病譜包括單純性脂肪肝、脂肪性肝炎、肝硬化，甚至肝細(xì)胞癌；臨床上則分為酒精性肝病(ALD)和非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)兩大類型。隨著社會(huì)老齡化以及慢性病毒性肝炎等其他肝病被控制，F(xiàn)LD現(xiàn)已成為肝病相關(guān)殘疾和死亡越來(lái)越重要的原因。此外，NAFLD還與糖尿病和心血管疾病的發(fā)病密切相關(guān)。FLD的防治不但是臨床醫(yī)學(xué)問(wèn)題，而且為預(yù)防醫(yī)學(xué)、社會(huì)醫(yī)學(xué)和衛(wèi)生行政主管部門共同面臨的重大課題。脂肪肝的研究進(jìn)展脂肪肝的病因諸多，包括飲酒過(guò)量、代謝性疾病、藥物和營(yíng)養(yǎng)不良等。脂肪肝疾患可以主要由一種病因引起，也可以由多種病因同時(shí)作用或先后參與。在不同的時(shí)期、不同的國(guó)家和地區(qū)及不同人群中，脂肪肝的發(fā)病率及病因分布不一。目前在發(fā)達(dá)國(guó)家和地區(qū)，酒精中毒、肥胖、糖尿病是脂肪肝的3大病因，營(yíng)養(yǎng)不良性脂肪肝僅流行于部分經(jīng)濟(jì)落后地區(qū)，單純遺傳因素引起的代謝性脂肪肝非常少見(jiàn)。故以下討論的脂肪肝主要為酒精性脂肪肝和非酒精性脂肪肝，主要包括肥胖、糖尿病和高脂血病所致的脂肪肝。病理病機(jī)食物中的脂肪經(jīng)水解酶消化后,其乳糜微粒(主要成分是甘油三酯)被小腸上皮吸收入血。血的乳糜微粒有3條去路:(1)分解后成為肌肉活動(dòng)的能源;

脂肪肝模型的研究進(jìn)展酒精性脂肪肝模型

（1）急性酒精性脂肪肝模型（2）慢性酒精性脂肪肝模型非酒精性脂肪肝模型

（1）營(yíng)養(yǎng)失調(diào)性脂肪肝模型（2）高脂性脂肪肝模型（3）營(yíng)養(yǎng)不良性脂肪肝模型（4）禁食大鼠脂肪肝模型脂肪肝的危害肝臟具有消化、解毒、合成、免疫、貯存等功能，是動(dòng)物機(jī)體一類組織器官。脂肪肝是肝細(xì)胞發(fā)生脂肪變性的一種脂類代謝紊亂性疾病，組織學(xué)表現(xiàn)為肝細(xì)胞胞漿內(nèi)充滿脂肪滴（三酰甘油）。脂肪肝是由多種原因引起的脂類代謝障礙,使肝細(xì)胞中脂肪含量異常增加的一種疾病,肝臟在正常情況下總脂肪量不超過(guò)肝重的5%,而脂肪肝的患者總脂肪量可高達(dá)肝重的40%～50%,肝病患者治療過(guò)程中食物攝入過(guò)多,活動(dòng)減少,極易引起脂肪肝,可導(dǎo)致肝功能反復(fù)異常,不易恢復(fù),甚至形成肝硬化,預(yù)后不良。脂肪肝一般可分為急性和慢性2種。急性脂肪肝比較少見(jiàn),臨床癥狀表現(xiàn)為疲勞、惡心、嘔吐和不同程度的黃疸,并可短期內(nèi)發(fā)生肝昏迷、腎衰、肝硬化，嚴(yán)重者可在數(shù)小時(shí)死于并發(fā)癥。慢性較為常見(jiàn),起病緩慢、隱匿,病程漫長(zhǎng),早期沒(méi)有明顯的臨床癥狀,一般是在做B超時(shí)偶然發(fā)現(xiàn),部分病人可出現(xiàn)食欲減退、惡心、乏力、肝區(qū)疼痛、腹脹,以及右上腹脹滿和壓迫感。由于這些癥狀沒(méi)有特異性,與一般的慢性胃炎、膽囊炎相似,因而往往容易被誤診誤治。脂肪肝防治的研究進(jìn)展基礎(chǔ)治療

(1)飲食治療(2)運(yùn)動(dòng)治療(3)行為治療(4)戒酒療法

藥物治療

(1)減肥藥物(2)改善胰島素抵抗藥物(3)調(diào)脂、降壓及控制血糖藥物(4)以抗炎為主的藥物(5)以抗氧化為主的藥物

青藏高原治療脂肪肝的主要藥物

大黃指唐古特大黃或藥用大黃的根狀莖，大黃是多種蓼科大黃屬的多年生植物的合稱，氣清香，味苦而微澀，嚼之黏牙，有砂粒感，含大黃素、大黃酸、大黃酚、大黃素、甲醚等蒽醌衍生物，具有降低血壓和膽固醇的作用，生大黃有通便活血化瘀等作用，適用于偏實(shí)證和大便干結(jié)的脂肪肝病人。大黃資源主要分布于青海、四川西部、云南西北部及西藏東部，大黃生物學(xué)特性：喜冷涼氣候，耐寒，忌高溫。據(jù)研究，現(xiàn)已從大黃中分離出蒽醌、二蒽酮、芪、苯丁酮、單寧、萘色酮等不同種類的80多種化合物，大體上分為蒽醌類、多糖類、鞣質(zhì)類。枸杞枸杞屬茄科植物枸杞的成熟干燥果實(shí)。我國(guó)的寧夏、青海、山東、河南等地都有生產(chǎn)。枸杞在祖國(guó)傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)中具有重要地位，其藥用價(jià)值備受歷代醫(yī)家推崇《本草綱目》記載：枸杞，補(bǔ)腎生精，養(yǎng)肝，明目，堅(jiān)精骨，去疲勞，易顏色，變白，明目安神，令人長(zhǎng)壽現(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究表明，枸杞具有抗腫瘤抗氧化、抗衰老、免疫調(diào)節(jié)、降血糖、降血脂等作用。對(duì)于枸杞上述功能起重要作用的因子，一般認(rèn)為與其所含枸杞多糖、類胡蘿卜素和甜菜堿等活性成分有關(guān)，特別是與枸杞多糖密切相關(guān)，因此枸杞多糖的藥理及臨床應(yīng)用研究受到格外關(guān)注。

葛根為豆科植物野葛的干燥根,習(xí)稱野葛。具有解肌退熱,生津,透疹,升陽(yáng)止瀉之功效。用于外感發(fā)熱頭痛、項(xiàng)背強(qiáng)痛、口渴、消渴、麻疹不透、熱痢、泄瀉,高血壓頸項(xiàng)強(qiáng)痛等疾病。異黃酮類化合物是葛根的主要成分;其中葛根素是葛根的特有成分,在治療心血管系統(tǒng)疾病上有著廣泛的應(yīng)用。論文的選題的意義及基本內(nèi)容1選題的意義脂肪肝不是一種獨(dú)立的疾病,是由多種素引起脂肪在肝內(nèi)過(guò)度蓄積，從而引起肝臟形態(tài)和功能上的改變。是僅次于病毒性肝炎的第二大肝病,已被公認(rèn)為隱蔽性肝硬化的常見(jiàn)原因。而早期診治可以阻止脂肪肝的進(jìn)一步發(fā)展，甚至使其逆轉(zhuǎn)。因此其治療日益受到重視。2.3實(shí)驗(yàn)試劑與儀器

紫外分光光度計(jì)、溫振蕩器、離心機(jī)、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)試劑盒，甘油三酯(TG)、總膽固醇(TC)試劑盒、普通飼料、葛根和枸杞子醇提物、生理鹽水。

2.4實(shí)驗(yàn)方法

2.4.1分組及造模

取小鼠80只,隨機(jī)分成8組,每組10只,雌雄各半,分為正常對(duì)照組、高脂模型組、葛根醇提物高、中、低劑量組，枸杞醇提物高、中、低劑量組。除正常組小鼠外,其余各組動(dòng)物喂高脂飼料4周后非酒精性脂肪肝模型已建立，予以灌胃治療。按0.2ml/20g體重分別灌胃高、中、低劑量的藥物,正常組和模型組給予等量生理鹽水,每天早晚9點(diǎn)各灌喂一次,連續(xù)10d,末次給藥1h后鼠尾靜脈注射LPS生理鹽水溶液(含7.5μg)0.2ml/只,然后禁食12h后,眼眶采血,離心，分離血清，所得血清于-75℃冰箱凍存，用于血液生化檢測(cè)；迅速解剖，取出肝臟，沖洗后濾紙吸干，稱肝濕重，計(jì)算其質(zhì)量指數(shù)。2.4.2觀測(cè)指標(biāo)及測(cè)定方法一般項(xiàng)目觀察動(dòng)物的體重、飲食、毛發(fā)、活動(dòng)情況、肝／體重比等。生化指標(biāo)分別按照試劑盒說(shuō)明書(shū)操作，ALT、AST、TG、TC的測(cè)定均采用酶比色法。

2.4.3數(shù)據(jù)處理

實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)均采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（X±S）表示，組間均數(shù)差異的比較用單因素方差分析，所有數(shù)據(jù)均用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件處理。2.5技術(shù)路線購(gòu)買昆明種小鼠（體重18～22g,4～5周齡）將小鼠分組

空白對(duì)照組模型對(duì)照組給藥組

基礎(chǔ)飼料 高脂飼料高脂飼料

[四周后，每日灌胃（ig）[四周后，每日灌胃（ig）[四周后，每日灌胃（ig）0.2ml生理鹽水]0.2ml生理鹽水]0.2ml藥液]

論文選題特色和創(chuàng)新之處

目前，高脂飼料誘導(dǎo)的非酒精性脂肪肝動(dòng)物模型是國(guó)內(nèi)與國(guó)外研究藥物、治療脂肪肝較為理想的動(dòng)物模型，也是國(guó)內(nèi)外許多學(xué)者所熱衷的研究課題，從而達(dá)到從篩選新藥以及從理論上研究治療脂肪肝。但是，利用高脂伺料誘導(dǎo)的非酒精性脂肪肝動(dòng)物模型來(lái)進(jìn)行青海省藏藥的篩選，還未見(jiàn)有報(bào)道。本論文將通過(guò)建立非酒精性脂肪肝動(dòng)物模型進(jìn)行兩種藏藥的篩選，來(lái)篩選出對(duì)小鼠脂肪肝有作用的成分，從而為脂肪肝的臨床實(shí)踐奠定基礎(chǔ)。

預(yù)期成果的理論意義和應(yīng)用價(jià)值隨著我國(guó)經(jīng)濟(jì)的發(fā)展，膳食結(jié)構(gòu)的改變，脂肪肝發(fā)病率逐年上升，不僅直接影響人群的健康，甚至還危及人的生命安全。其所造成的直接和間接的經(jīng)濟(jì)損失也很大，嚴(yán)重地影響了生產(chǎn)、工作和學(xué)習(xí)。由于肝病是危害人類的主要疾病之一，結(jié)合青海省藏