地中海貧血分子基礎(chǔ)及產(chǎn)前診斷課件

地中海貧血分子基礎(chǔ)及產(chǎn)前診斷南方醫(yī)科大學(xué)徐湘民即將來(lái)臨的一天，比過(guò)去的一年更為悠長(zhǎng)?！査固亍居ⅰ可镉虚T(mén)功課，名叫接受：接受愛(ài)的人離開(kāi)，接受親的人離世，接受喜歡的人無(wú)論如何也不能在一起以及接受自己的出身相貌天份。無(wú)論活多大，每一次在接受面前，我們依舊像個(gè)只會(huì)嚎哭的孩子區(qū)別是，長(zhǎng)大的自己會(huì)對(duì)自己說(shuō)：接受，是變好的開(kāi)始。有先見(jiàn)之明，是一種智慧。有自知之明，是一種成熟。有知人之明，是一種素養(yǎng)！

坐姿如鐘，必須穩(wěn)重；站立如松，必須正直；容貌如鏡，必須明凈；行止如法，必和禮儀；視聽(tīng)如教，必能受益；思想如流，必然清澄。

得意失意，切莫在意；順境逆境，切莫止境。善待自己，幸福無(wú)比；善待別人，快樂(lè)無(wú)比；善待生命，健康無(wú)比。

做人處事六原則:一要守本分。二要守規(guī)矩。三要守時(shí)限。四要守承諾。五要重方法。六要重效果！

做人要如鏡，時(shí)刻自我觀照；做人要如箱，隨時(shí)提放自如；做人要如本，不斷記錄功過(guò)；做人要如燭，永遠(yuǎn)照亮別人；做人要如鐘，分秒珍惜生命。

積極進(jìn)取的生活態(tài)度，健康向上的生活情趣，豁達(dá)樂(lè)觀的生活襟懷，反身求己的思過(guò)習(xí)慣。人格有品，生活才會(huì)有質(zhì)！你現(xiàn)在正在享受的正在體會(huì)的，才是你真正擁有的。你名義上的財(cái)富地位乃至感情再多，如果不能真實(shí)體會(huì)和品味，也等同于沒(méi)有。所以，珍惜遇到的每一個(gè)善緣，真實(shí)地體會(huì)她：一縷清風(fēng)，一個(gè)微笑，一只飛過(guò)眼前的小鳥(niǎo)，一間整潔的旅館的房間，一絲若有若無(wú)的花香。隨著年齡的增長(zhǎng)，人總會(huì)變得越來(lái)越寬容；所以很多事情到最后并不是真的解決了，而是算了吧。不是井里沒(méi)有水，而是挖的不夠深。不是成功來(lái)得慢，而是努力的不夠狠。地中海貧血分子基礎(chǔ)及產(chǎn)前診斷南方醫(yī)科大學(xué)徐湘民地中海貧血分子基礎(chǔ)及產(chǎn)前診斷南方醫(yī)科大學(xué)徐湘民即將來(lái)臨的一天，比過(guò)去的一年更為悠長(zhǎng)。——福爾斯特【英】生命里有門(mén)功課，名叫接受：接受愛(ài)的人離開(kāi)，接受親的人離世，接受喜歡的人無(wú)論如何也不能在一起以及接受自己的出身相貌天份。無(wú)論活多大，每一次在接受面前，我們依舊像個(gè)只會(huì)嚎哭的孩子區(qū)別是，長(zhǎng)大的自己會(huì)對(duì)自己說(shuō)：接受，是變好的開(kāi)始。有先見(jiàn)之明，是一種智慧。有自知之明，是一種成熟。有知人之明，是一種素養(yǎng)！

坐姿如鐘，必須穩(wěn)重；站立如松，必須正直；容貌如鏡，必須明凈；行止如法，必和禮儀；視聽(tīng)如教，必能受益；思想如流，必然清澄。

得意失意，切莫在意；順境逆境，切莫止境。善待自己，幸福無(wú)比；善待別人，快樂(lè)無(wú)比；善待生命，健康無(wú)比。

做人處事六原則:一要守本分。二要守規(guī)矩。三要守時(shí)限。四要守承諾。五要重方法。六要重效果！

做人要如鏡，時(shí)刻自我觀照；做人要如箱，隨時(shí)提放自如；做人要如本，不斷記錄功過(guò)；做人要如燭，永遠(yuǎn)照亮別人；做人要如鐘，分秒珍惜生命。

積極進(jìn)取的生活態(tài)度，健康向上的生活情趣，豁達(dá)樂(lè)觀的生活襟懷，反身求己的思過(guò)習(xí)慣。人格有品，生活才會(huì)有質(zhì)！你現(xiàn)在正在享受的正在體會(huì)的，才是你真正擁有的。你名義上的財(cái)富地位乃至感情再多，如果不能真實(shí)體會(huì)和品味，也等同于沒(méi)有。所以，珍惜遇到的每一個(gè)善緣，真實(shí)地體會(huì)她：一縷清風(fēng)，一個(gè)微笑，一只飛過(guò)眼前的小鳥(niǎo)，一間整潔的旅館的房間，一絲若有若無(wú)的花香。隨著年齡的增長(zhǎng)，人總會(huì)變得越來(lái)越寬容；所以很多事情到最后并不是真的解決了，而是算了吧。不是井里沒(méi)有水，而是挖的不夠深。不是成功來(lái)得慢，而是努力的不夠狠。遺傳性血紅蛋白病Geneticdisordersofhumanhemoglobin異常血紅蛋白Abnormalhemoglobin,Structuralvariants地中海貧血(地貧)Thalassemias-thalassemia-thalassemia遺傳性持續(xù)性胎兒血紅蛋白Hereditarypersistenceoffetalhemoglobin(HPFH)Thalassemia地中海貧血是全球最大的單基因遺傳病之一中國(guó)南方不同高發(fā)地區(qū)人群攜帶率1~23%研究背景全球血紅蛋白病人群負(fù)荷WHO地區(qū)人口(百萬(wàn))出生(百萬(wàn))純合子出生(千)非洲65030.0230美洲73017.55.0亞洲315084.0120.0歐洲78011.01.6大洋洲300.50.2合計(jì)5340143.0356.8中國(guó)南方地中海貧血人群攜帶率地區(qū)攜帶率(%)地貧β地貧廣東8.532.54廣西14.956.78四川1.922.18臺(tái)灣4.201.10香港5.023.41Xu,etal.JClinPathol2019,57:517-22.Cai,etal.ChiJEpidemiol2019,23:281-5.排序出生缺陷分析例數(shù)發(fā)生頻率(/萬(wàn))1先天性心臟病26019.662重型地貧20815.733多指20015.124肢體短縮1118.395唇裂/腭裂1098.24廣州市主要出生缺陷的發(fā)生率(2019-2019)Pedigreefor-thalassemiainatypicalfamily.地中海貧血:常染色體隱性遺傳病地貧是嚴(yán)重致死、致殘性遺傳性血液病常染色體隱性遺傳病受累基因：地貧-珠蛋白基因（16p13.3）β地貧-β珠蛋白基因（11p15.3）突變純合子：重型地貧-致死中間型地貧-致殘病理學(xué)基礎(chǔ)：/β鏈比例失衡地貧純合子：致死性出生缺陷重型地貧:胎兒水腫綜合征早產(chǎn)死胎或出生前后死亡可導(dǎo)致嚴(yán)重產(chǎn)科并發(fā)癥無(wú)理想治療方法重型地貧出生后1年內(nèi)發(fā)病多于未成年前因嚴(yán)重貧血而夭折輸血和去鐵治療可維持,代價(jià)昂貴家系樣品采集現(xiàn)場(chǎng)中間型地貧是嚴(yán)重致殘性遺傳病研究地中海貧血的意義重癥地貧患兒的出生是世界公認(rèn)的公共衛(wèi)生問(wèn)題通過(guò)產(chǎn)前診斷阻止重癥患兒出生是首選預(yù)防措施WHO優(yōu)先推薦在發(fā)展中國(guó)家實(shí)施預(yù)防的遺傳性疾病預(yù)防地貧是中國(guó)南方高發(fā)區(qū)減少出生缺陷的戰(zhàn)略需求研究背景中國(guó)需要解決的研究主題發(fā)展用于臨床和預(yù)防的分子診斷技術(shù)高發(fā)地區(qū)人群中的遺傳流行病學(xué)調(diào)查開(kāi)展人群水平的地中海貧血預(yù)防指導(dǎo)制定計(jì)劃大人群監(jiān)控和預(yù)防用于基因分型用于產(chǎn)前診斷診斷篩查預(yù)防地中海貧血的研究策略研究背景遺傳流行病學(xué)調(diào)查建立一系列診斷標(biāo)準(zhǔn)和診斷技術(shù)地中海貧血的臨床特征小細(xì)胞低色素性溶血型貧血(中、重度)黃疸肝脾腫大(脾大明顯)骨髓擴(kuò)增發(fā)育遲緩合并感染Bart’s水腫胎(α地貧,宮內(nèi)或出生后半小時(shí)內(nèi)死亡)地中海貧血的血液學(xué)表型特征RBC參數(shù)MCVMCH細(xì)胞形態(tài)變化Hb電泳分析HbA2()或()HbBart’sHbH()HbE()地中海貧血分子基礎(chǔ)及產(chǎn)前診斷南方醫(yī)科大學(xué)徐湘民即將來(lái)臨的一地中海貧血分子基礎(chǔ)及產(chǎn)前診斷課件2地中海貧血分子基礎(chǔ)及產(chǎn)前診斷課件3地中海貧血分子基礎(chǔ)及產(chǎn)前診斷課件4地中海貧血分子基礎(chǔ)及產(chǎn)前診斷課件5地中海貧血分子基礎(chǔ)及產(chǎn)前診斷課件6地中海貧血分子基礎(chǔ)及產(chǎn)前診斷課件7地中海貧血分子基礎(chǔ)及產(chǎn)前診斷課件8地中海貧血分子基礎(chǔ)及產(chǎn)前診斷課件9地中海貧血分子基礎(chǔ)及產(chǎn)前診斷課件10研究地中海貧血的意義

重癥地貧患兒的出生是世界公認(rèn)的公共衛(wèi)生問(wèn)題

通過(guò)產(chǎn)前診斷阻止重癥患兒出生是首選預(yù)防措施

WHO優(yōu)先推薦在發(fā)展中國(guó)家實(shí)施預(yù)防的遺傳性疾病

預(yù)防地貧是中國(guó)南方高發(fā)區(qū)減少出生缺陷的戰(zhàn)略需求研究背景研究地中海貧血的意義研究背景11中國(guó)需要解決的研究主題

發(fā)展用于臨床和預(yù)防的分子診斷技術(shù)

高發(fā)地區(qū)人群中的遺傳流行病學(xué)調(diào)查

開(kāi)展人群水平的地中海貧血預(yù)防中國(guó)需要解決的研究主題12指導(dǎo)制定計(jì)劃大人群監(jiān)控和預(yù)防用于基因分型用于產(chǎn)前診斷診斷篩查預(yù)防地中海貧血的研究策略研究背景遺傳流行病學(xué)調(diào)查建立一系列診斷標(biāo)準(zhǔn)和診斷技術(shù)指導(dǎo)制定計(jì)劃用于基因分型用于產(chǎn)前診斷診斷13地中海貧血的臨床特征小細(xì)胞低色素性溶血型貧血(中、重度)黃疸肝脾腫大(脾大明顯)骨髓擴(kuò)增發(fā)育遲緩合并感染Bart’s水腫胎(α地貧,宮內(nèi)或出生后半小時(shí)內(nèi)死亡)地中海貧血的臨床特征小細(xì)胞低色素性溶血型貧血(中、重度)14地中海貧血的血液學(xué)表型特征RBC參數(shù)MCVMCH細(xì)胞形態(tài)變化Hb電泳分析HbA2

()或()HbBart’sHbH()HbE()地中海貧血的血液學(xué)表型特征15地貧血象：紅細(xì)胞著色不足、異形紅細(xì)胞和骨髓成紅血細(xì)胞增多癥地貧血象：紅細(xì)胞著色不足、異形紅細(xì)胞和骨髓成紅血細(xì)胞增多癥16血紅蛋白電泳圖譜123451.正常人HB2.輕型地貧3.異常HBE雜合子4.新生兒HBBart’s(地貧標(biāo)準(zhǔn)型）5.HBHNormalAA2AEBart’sAFHA+-500V,25min血紅蛋白電泳圖譜1217地貧發(fā)生的分子病理學(xué)經(jīng)典機(jī)制

α地貧:基因缺失使基因功能丟失地貧:結(jié)構(gòu)基因變異使轉(zhuǎn)錄異常地貧發(fā)生的分子病理學(xué)經(jīng)典機(jī)制α地貧:基因缺失使基因功能18

-50kb-10kb0kb10kb20kb30kb

(--SEA)Deletion(-

4.2)Deletion(-

3.7)Deletion21導(dǎo)致α地貧的不同類(lèi)型的基因缺失-50kb-10kb19α

GlobingenesaffectedbythalassemiadeletionSilentcarrierThalassemiatraitHbHdiseaseHydropsfetalisNormalαGlobingenesaffectedbytha20α地貧疾病嚴(yán)重程度的單倍型順序21T

2–

–1

2T1

–1T

––α地貧疾病嚴(yán)重程度的單倍型順序21Hematologicaldataoftheproposituseandherfamilymembers.

Ι1Ι2Ⅱ1Ⅱ2Ⅱ3Ⅱ4Ⅱ5Ⅲ1Ⅲ2Sex/age(Y)F/49M/54M/33F/27F/25M/22F/35F/1M/5Hb(g/L)118150173126135135118112141RBC(×1012)5.634.965.706.234.514.575.876.095.02MCV(fL)64.585.788.162.187.882.363.056.278.5MCH(pg)21.030.230.420.229.929.520.118.428.1HbA(%)97.897.593.197.096.695.796.990.097.4HbA2(%)2.202.503.272.983.373.283.122.182.65HbF(%)003.6200007.790Genotype--11.1/ααΑα/ααΑα/αα--11.1/ααΑα/ααΑα/αα--11.1/αα--11.1/ααΑα/ααHematologicaldataoftheprop22JiaSQ,etal.JClinPathol,2019;57:164-7.

JiaSQ,etal.JClinPathol,23DifferentpointmutationsreducingglobingeneexpressionEXON1IVS1

EXON2EXON3

IVS2PromotermutationRNAsplicingInitiationmutationFrameshiftNonsensePoly(A)signalRund.&Rachmilewitz.N.Engl.J.Med.

2019,353:1135-46.

DifferentpointmutationsEXON24世界上不同種族的常見(jiàn)β地貧突變類(lèi)型

種族突變類(lèi)型

地中海人IVS-1,position110(GA)CD39,nonsense(CAGTAG)IVS-1,position1(GA)IVS-2,position745(CG)IVS-1,position6(TC)IVS-2,position1(GA)黑人

29,(AG);88,(CT)Poly(A),(AATAAAAACAAA)世界上不同種族的常見(jiàn)β地貧突變類(lèi)型種族25東南亞人,中國(guó)人

CD41-42,Frameshift(CTTT)IVS-2,position654(CT)

28,(AG);HbE(GA)CD17,nonsense(AAGTAG)IVS-1,position5(GC)亞洲印地安人

IVS-1,position5(GC)619-bpdeletionCD8-9,Frameshift(+G)IVS-1,position1(GT)CD41-42,Frameshift(CTTT)東南亞人,中國(guó)人CD41-42,Framesh26SexProbandfemale

Motherfemale

Father

maleBrothermale

Husband

maleRBC(x1012)5.7

4.84.75.86.4Hb(g/L)

139

105154144145MCV(fl)

73.6

68.288.273.467.1MCH(pg)23.6

21.833.024.722.8MCHC(g/L)

357

320374336340RDW(%)

0.149

0.1520.1320.1440.159HbA(%)

94.3

93.697.294.097.1HbA2(%)

5.7

6.42.86.02.9Genotype

β-90/βN

β-90/βNβN/βNβ-90/βNβN/βNβ/αratio

2.130

2.2193.7162.2385.341Resultsofbloodanalysis,DNAdiagnosisandmRNAdetectioninthefamilymembers.SexProbandMotherFatherBrother27Sequencingofthe-globingeneamplifiedfromtheprobandHeterozygosityfortheCTsubstitutionatposition-90oftheβ-globingeneSequencingofthe-globingen28近年來(lái)發(fā)現(xiàn)的部分中國(guó)南方新突變基因突變?chǔ)林榈鞍谆?1.1大片段缺失α珠蛋白基因

2CD118(+TCA)β珠蛋白基因

90(C→T)β珠蛋白基因73(A→T)β珠蛋白基因28(A→C)β珠蛋白基因

CDs15/16(+G)β珠蛋白基因CD38(A)近年來(lái)發(fā)現(xiàn)的部分中國(guó)南方新突變基因突變?chǔ)?9地中海貧血的產(chǎn)前診斷

胎兒取樣技術(shù)

DNA診斷技術(shù)

-地貧的診斷-地貧的診斷地中海貧血的產(chǎn)前診斷胎兒取樣技術(shù)30羊膜穿刺(amniocentesis)抽取胎兒樣品示意圖羊膜穿刺(amniocentesis)抽取胎兒樣品示意圖31植入前基因診斷Preimplantationgeneticdiagnosis(PGD)超聲產(chǎn)前診斷Prenataldiagnosis:Ultrasoundmeasurement

母體外周血分離胎兒細(xì)胞進(jìn)行產(chǎn)前診斷Prenataldiagnosis:Fetalcellsinthematernalcirculation母體血漿或血清中胎兒DNA分析AnalysisoffetalDNAinmaternalplasmaandserum目前及今后的胎兒產(chǎn)前診斷新技術(shù)植入前基因診斷目前及今后的胎兒產(chǎn)前診斷新技術(shù)32DingC,ChiuRW,LauTK,LeungTN,ChanLC,ChanAY,CharoenkwanP,NgIS,LawHY,MaES,XuX,WanapirakC,SanguansermsriT,LiaoC,AiMA,ChuiDH,CantorCR,LoYM.

MSanalysisofsingle-nucleotidedifferencesincirculatingnucleicacids:Applicationtononinvasiveprenataldiagnosis.

ProcNatlAcadSciUSA.201920;101(29):10762-7.DingC,ChiuRW,LauTK,Leung33單堿基延伸產(chǎn)物的質(zhì)譜分析MFF父親的突變類(lèi)型SABER:singleallelebaseextensionreaction單堿基延伸產(chǎn)物的質(zhì)譜分析MFF父親的突變類(lèi)型SABE34分子量FMStandardprotocol

SABERprotocol在母血漿DNA中排除父親的β地貧突變——++雙親基因型不同：分子量FMStandardprotocolSABERp35CaseCD41/42-CTTTIVS2654CTnt–28AGCD17ATStandardprotocolSABERFetalgenotypeWeeksgestation1FMN/N112FMN/N183F

MN/N214MFF

/N185MF

F

/M176FM

F/N117FM

F/N148FN/N79

FF/N1210MF

N/N1711F

F/N2012M&FN.A.N.A.N/N18鑒定母血漿DNA中的父親β地貧突變CaseCD41/42IVS2654nt–28C36單倍型分析用于鑒定母血漿DNA中的父親等位基因CaseMotherFatherHBBmutantalleleHBBWTalleleSNPGallelePaternalHBBmutationFetalHBBgenotype3CCGCGC

N/N11CCGCGC

F/N12CCGCGC

N.A.N/N單倍型分析用于鑒定母血漿DNA中的父親等位基因CaseMo37地中海貧血的產(chǎn)前診斷

胎兒取樣技術(shù)

DNA診斷技術(shù)

-地貧的診斷-地貧的診斷地中海貧血的產(chǎn)前診斷胎兒取樣技術(shù)38DNA診斷技術(shù)多重PCR（multiplexPCR）等位基因特異性性寡核苷酸雜交（ASO）反向點(diǎn)雜交（RDB）變性高效液相色譜（DHPLC）基于微孔板(microtiterwell-based)高通量檢測(cè)

實(shí)時(shí)PCR(real-timePCR)DNA診斷技術(shù)多重PCR（multiplexPCR）39

-50kb-10kb0kb10kb20kb30kb

(--SEA)Deletion(-

4.2)Deletion(-

3.7)Deletion21導(dǎo)致α地貧的不同類(lèi)型的基因缺失-50kb-10kb40Locationofprimersanddetectionof--SEAdeletionbygap-PCRLocationofprimersanddetect41Genotypingofthe--SEAallelesbyGap-PCR

Genotypingofthe--SEAalleles42ChongSS,etal.Blood.2000;95(1):360-2.ChongSS,etal.Blood.2000;43寡核苷酸探針雜交技術(shù)寡核苷酸探針雜交技術(shù)44ASO探針檢測(cè)

-地貧基因診斷結(jié)果ASO探針檢測(cè)-地貧基因診斷結(jié)果45PCRBBBBBBgDNAHybridizationDetectionStreptavidin-PODColorSignalMMembraneASONMNMNMSubstrate(TMB)反向點(diǎn)雜交技術(shù)PCRBBBBBBgDNAHybridizationDete46RDBanalysis:applicationtorapidprenataldiagnosisforeightβthalassaemiamutations.GenotypeFatherCDs41-42(CTTT)/NMotherIVS-2-654(CT)/NFetusCDs41-42/IVS-2-654Normalcontrol

N/NRDBanalysis:applicationtor47Human-globingeneandthePCRamplicons5’UTREXON1IVS1EXON2IVS2IVS2EXON33’UTRFA(453bp)FB(364bp)FC(423bp)-90,-73,-29,-28cd2cd13-14,cd14-15,cd15-16,cd17cd26,cd27-28IVS1-1,IVS1-5cd37,cd38cd41-42,cd43cd71-72IVS2-5,IVS2-16IVS2-654,IVS2-666Human-globingeneandthePC48FragmentMutationpatternsNormalpatternsTotalMutationMutation+SNPHeterozygousHomozygousFA12221237FB5152224FC03227Total1740566868uniquelyprofiledDHPLCpatternsobservedfrom795DNAsamplesFragmentMutationpatternsNorma49實(shí)驗(yàn)結(jié)果實(shí)驗(yàn)結(jié)果50實(shí)驗(yàn)結(jié)果實(shí)驗(yàn)結(jié)果51實(shí)驗(yàn)結(jié)果實(shí)驗(yàn)結(jié)果52實(shí)驗(yàn)結(jié)果實(shí)驗(yàn)結(jié)果53實(shí)驗(yàn)結(jié)果實(shí)驗(yàn)結(jié)果54中國(guó)南方和β地中海貧血的預(yù)防計(jì)劃人群篩查預(yù)防計(jì)劃的策略

醫(yī)院水平(Hospital-based)的預(yù)防計(jì)劃

社區(qū)水平(community-based)的預(yù)防計(jì)劃

家系擴(kuò)展篩查(screeningextendedfamilies)中國(guó)南方和β地中海貧血的預(yù)防計(jì)劃55Carrierscreeningforandthalassemiainpregnancy:theresultsofan11-yearprospectiveprograminGuangzhouMaternalandNeonatalHospitalGuangzhouMaternalandNeonatalHospitalLiaoCLiJHuangYNLiQMFengQZhongHZCuiYYSouthernMedicalUniversityMoQHLiLYHuaLZhangJZZengRJiaSQXuXMPrenatDiagn2019,25:163-71Carrierscreeningforand56地貧攜帶者篩查及產(chǎn)前診斷流程被檢對(duì)象（婚前或孕中期）血液學(xué)分析（MCV，HbA2變化）排除地貧地貧攜帶者遺傳咨詢(xún)，配偶檢查血液學(xué)分析（MCVHbA2變化）地貧攜帶者排除地貧遺傳咨詢(xún)雙親基因分析胎兒產(chǎn)前診斷地貧攜帶者篩查及產(chǎn)前診斷流程被檢對(duì)象（婚前或孕中期）血液學(xué)分57年份篩查廣州總篩查孕婦數(shù)孕婦數(shù)丈夫數(shù)篩查發(fā)現(xiàn)的檢測(cè)出的完成的產(chǎn)前陽(yáng)性孕婦數(shù)陽(yáng)性夫婦數(shù)診斷數(shù)α地貧(%)β地貧(%)α地貧(%)β地貧(%)α/β地貧(%)α地貧(%)β地貧(%)1993398968393350232(5.8)129(3.2)13(3.7)8(2.3)10(2.9)12(92.3)7(87.5)1994456471617421265(5.8)164(3.6)18(4.3)8(1.9)9(2.1)16(88.9)8(100)2019390271751361227(5.8)142(3.6)17(4.7)7(1.9)12(3.3)15(88.2)7(100)2019499474460464285(5.7)181(3.6)19(4.1)8(1.7)12(2.6)17(89.5)8(100)2019439271989401250(5.7)158(3.6)21(5.2)7(1.7)10(2.5)18(85.7)7(100)2019453275378425263(5.8)172(3.8)17(4.0)8(1.9)12(2.8)17(100)8(100)2019501680141465285(5.7)186(3.7)24(5.2)8(1.7)14(3.0)23(95.8)8(100)OutcomesofscreeningprograminGZMNH1993-2019

篩查發(fā)現(xiàn)的檢測(cè)出的58年份篩查廣州總篩查孕婦數(shù)孕婦數(shù)丈夫數(shù)篩查發(fā)現(xiàn)的檢測(cè)出的完成的產(chǎn)前陽(yáng)性孕婦數(shù)陽(yáng)性夫婦數(shù)診斷數(shù)α地貧(%)β地貧(%)α地貧(%)β地貧(%)α/β地貧(%)α地貧(%)β地貧(%)2000449281817418256(5.7)172(3.8)21(5.0)7(1.7)16(3.8)21(100)7(100)2019452180152411254(5.6)164(3.6)17(4.1)8(1.9)12(2.9)17(100)8(100)2019469580667415260(5.6)163(3.4)16(3.9)8(1.9)11(2.7)16(100)8(100)2019412486393372227(5.5)152(3.6)15(4.0)6(1.6)13(3.5)15(100)6(100)Total49221

860758

4503

2804(5.7)

1783(3.6)

198(4.4)

83(1.8)

131(2.9)

187(95.8)

82(98.8)

(cont’d)篩查發(fā)現(xiàn)的檢測(cè)出的完59診斷結(jié)果基因型例數(shù)正常

30雜合子(total)35CDs41-42(TCTT)/N14IVS-2-654(C>T)/N8-28(A>G)/N5CD17(A>T)/N3CD26(G>A)/N2-29(A>G)/N1CDs27-28(+C)/N1Unknown/NorNormal1Prenataldiagnosisin83fetusesat-riskforthalassemia診斷結(jié)果基因型例數(shù)正常30雜合子60診斷結(jié)果基因型例數(shù)純合子或雙重雜合子(總數(shù))18CDs41-42(TCTT)/IVS-2-654(C>T)6CDs41-42(TCTT)/-28(A>G)4CDs41-42(TCTT)/CD17(A>T)2IVS-2-654(C>T)/CD17(A>T)2CDs41-42(TCTT)/CDs41-42(TCTT)1CDs41-42(TCTT)/CDs27-28(+C)1IVS-2-654(C>T)/CDs71-72(+A)1IVS-2-654(C>T)/CD43(G>T)1總數(shù)83(cont’d)診斷結(jié)果基因型例數(shù)純合子或雙重雜合子(總數(shù))18C61胎兒診斷產(chǎn)前診斷例數(shù)α地貧β地貧總數(shù)

(%)

正常413069(25.6)攜帶者9235125(46.3)受累胎兒*541872(26.7)胎兒流產(chǎn)213(1.11)誤診000.0總數(shù)(%)187(69.3)83(30.7)270(100)Resultsin266pregnancieswhereaprecisediagnosiswasachieved*ThreeHbHdiseaseinvolved胎兒診斷產(chǎn)前診斷例數(shù)62Detectionofthe--SEA/deletionby1%agarosegelelectrophoresisofamplifiedfragmentsusinggap-PCR.MNPBFaMoFeFaMoFe

FaMoFe

NormalHeterozygoteHomozygoteFamily1Family2Family3NormalMutantDetectionofthe--SEA/deleti63篩查發(fā)現(xiàn)的陽(yáng)性孕婦或陽(yáng)性夫婦

地貧1

β地貧地貧β地貧

5.7%3.6%4.4%1.8%Totalof4503couplesscreenedOutcomesofscreeningprograminGZMNH1993-201954例Bart’s水腫兒和HbH病

18例重型β地貧

28041783198對(duì)83對(duì)產(chǎn)前診斷：187例地貧82例

β地貧篩查發(fā)現(xiàn)的陽(yáng)性孕婦或陽(yáng)性夫婦Totalo64

49221例被篩查的孕婦

4587(9.3%)地貧特征/病例

2804(5.7%)地貧

1783(3.6%)β地貧139

例其他異常Hb個(gè)體44495例正常表型個(gè)體4503(98.2%)陽(yáng)性孕婦的配偶被篩查281(6.2%)例高風(fēng)險(xiǎn)妊娠

198

重型地貧

83重型β地貧84(1.8%)例配偶未接受篩查281(100%)

例高風(fēng)險(xiǎn)妊娠孕婦進(jìn)入跟蹤隨訪(fǎng)4222例非風(fēng)險(xiǎn)妊娠49221例被篩查的孕婦4587(9.3%)地65269(95.7%)孕婦實(shí)施產(chǎn)前診斷

187地貧

83β地貧(1雙胞胎)72(26.7%)孕婦要求終止妊娠

54重型地貧

18重型β地貧(1雙胞胎)

69重型地貧被預(yù)防

51水腫胎

18重型β地貧(1雙胞胎)12孕婦不接受產(chǎn)前診斷197例孕婦繼續(xù)妊娠3例HbH病出生2例水腫胎出生269(95.7%)72(26.7%)孕婦要求終止妊娠66

自行研制的東南亞型α地貧ζ鏈免疫學(xué)檢測(cè)試劑盒AB自行研制的東南亞型α地貧ζ鏈免疫學(xué)檢測(cè)試劑67地中海貧血分子基礎(chǔ)及產(chǎn)前診斷課件68產(chǎn)前遺傳學(xué)的臨床和公共衛(wèi)生問(wèn)題利用有效的公共衛(wèi)生教育資源，首先使醫(yī)生和公眾了解更多的地貧知識(shí)和知曉選擇遺傳服務(wù)及其對(duì)待產(chǎn)前診斷的態(tài)度是我們面臨的一個(gè)重要課題；2.為滿(mǎn)足大規(guī)模預(yù)防工作的需要，我們須大力加強(qiáng)專(zhuān)科醫(yī)生,遺傳咨詢(xún)師，及其他相關(guān)專(zhuān)業(yè)人員的培訓(xùn)工作;產(chǎn)前遺傳學(xué)的臨床和公共衛(wèi)生問(wèn)題693.預(yù)防監(jiān)測(cè)系統(tǒng)建立過(guò)程中，要特別注重轉(zhuǎn)診、病例登記、實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制的把關(guān);4.政府在組織、基礎(chǔ)建設(shè)、制定政策法規(guī)和行政管理上的主導(dǎo)作用是推動(dòng)預(yù)防計(jì)劃的關(guān)鍵因素。

(cont’d)3.預(yù)防監(jiān)測(cè)系統(tǒng)建立過(guò)程中，要特別注重轉(zhuǎn)診、(cont’d70THANKYOUTHANK71地中海貧血分子基礎(chǔ)及產(chǎn)前診斷南方醫(yī)科大學(xué)徐湘民即將來(lái)臨的一天，比過(guò)去的一年更為悠長(zhǎng)?！査固亍居ⅰ可镉虚T(mén)功課，名叫接受：接受愛(ài)的人離開(kāi)，接受親的人離世，接受喜歡的人無(wú)論如何也不能在一起以及接受自己的出身相貌天份。無(wú)論活多大，每一次在接受面前，我們依舊像個(gè)只會(huì)嚎哭的孩子區(qū)別是，長(zhǎng)大的自己會(huì)對(duì)自己說(shuō)：接受，是變好的開(kāi)始。有先見(jiàn)之明，是一種智慧。有自知之明，是一種成熟。有知人之明，是一種素養(yǎng)！

坐姿如鐘，必須穩(wěn)重；站立如松，必須正直；容貌如鏡，必須明凈；行止如法，必和禮儀；視聽(tīng)如教，必能受益；思想如流，必然清澄。

得意失意，切莫在意；順境逆境，切莫止境。善待自己，幸福無(wú)比；善待別人，快樂(lè)無(wú)比；善待生命，健康無(wú)比。

做人處事六原則:一要守本分。二要守規(guī)矩。三要守時(shí)限。四要守承諾。五要重方法。六要重效果！

做人要如鏡，時(shí)刻自我觀照；做人要如箱，隨時(shí)提放自如；做人要如本，不斷記錄功過(guò)；做人要如燭，永遠(yuǎn)照亮別人；做人要如鐘，分秒珍惜生命。

積極進(jìn)取的生活態(tài)度，健康向上的生活情趣，豁達(dá)樂(lè)觀的生活襟懷，反身求己的思過(guò)習(xí)慣。人格有品，生活才會(huì)有質(zhì)！你現(xiàn)在正在享受的正在體會(huì)的，才是你真正擁有的。你名義上的財(cái)富地位乃至感情再多，如果不能真實(shí)體會(huì)和品味，也等同于沒(méi)有。所以，珍惜遇到的每一個(gè)善緣，真實(shí)地體會(huì)她：一縷清風(fēng)，一個(gè)微笑，一只飛過(guò)眼前的小鳥(niǎo)，一間整潔的旅館的房間，一絲若有若無(wú)的花香。隨著年齡的增長(zhǎng)，人總會(huì)變得越來(lái)越寬容；所以很多事情到最后并不是真的解決了，而是算了吧。不是井里沒(méi)有水，而是挖的不夠深。不是成功來(lái)得慢，而是努力的不夠狠。地中海貧血分子基礎(chǔ)及產(chǎn)前診斷南方醫(yī)科大學(xué)徐湘民地中海貧血分子基礎(chǔ)及產(chǎn)前診斷南方醫(yī)科大學(xué)徐湘民即將來(lái)臨的一天，比過(guò)去的一年更為悠長(zhǎng)?！査固亍居ⅰ可镉虚T(mén)功課，名叫接受：接受愛(ài)的人離開(kāi)，接受親的人離世，接受喜歡的人無(wú)論如何也不能在一起以及接受自己的出身相貌天份。無(wú)論活多大，每一次在接受面前，我們依舊像個(gè)只會(huì)嚎哭的孩子區(qū)別是，長(zhǎng)大的自己會(huì)對(duì)自己說(shuō)：接受，是變好的開(kāi)始。有先見(jiàn)之明，是一種智慧。有自知之明，是一種成熟。有知人之明，是一種素養(yǎng)！

坐姿如鐘，必須穩(wěn)重；站立如松，必須正直；容貌如鏡，必須明凈；行止如法，必和禮儀；視聽(tīng)如教，必能受益；思想如流，必然清澄。

得意失意，切莫在意；順境逆境，切莫止境。善待自己，幸福無(wú)比；善待別人，快樂(lè)無(wú)比；善待生命，健康無(wú)比。

做人處事六原則:一要守本分。二要守規(guī)矩。三要守時(shí)限。四要守承諾。五要重方法。六要重效果！

做人要如鏡，時(shí)刻自我觀照；做人要如箱，隨時(shí)提放自如；做人要如本，不斷記錄功過(guò)；做人要如燭，永遠(yuǎn)照亮別人；做人要如鐘，分秒珍惜生命。

積極進(jìn)取的生活態(tài)度，健康向上的生活情趣，豁達(dá)樂(lè)觀的生活襟懷，反身求己的思過(guò)習(xí)慣。人格有品，生活才會(huì)有質(zhì)！你現(xiàn)在正在享受的正在體會(huì)的，才是你真正擁有的。你名義上的財(cái)富地位乃至感情再多，如果不能真實(shí)體會(huì)和品味，也等同于沒(méi)有。所以，珍惜遇到的每一個(gè)善緣，真實(shí)地體會(huì)她：一縷清風(fēng)，一個(gè)微笑，一只飛過(guò)眼前的小鳥(niǎo)，一間整潔的旅館的房間，一絲若有若無(wú)的花香。隨著年齡的增長(zhǎng)，人總會(huì)變得越來(lái)越寬容；所以很多事情到最后并不是真的解決了，而是算了吧。不是井里沒(méi)有水，而是挖的不夠深。不是成功來(lái)得慢，而是努力的不夠狠。遺傳性血紅蛋白病Geneticdisordersofhumanhemoglobin異常血紅蛋白Abnormalhemoglobin,Structuralvariants地中海貧血(地貧)Thalassemias-thalassemia-thalassemia遺傳性持續(xù)性胎兒血紅蛋白Hereditarypersistenceoffetalhemoglobin(HPFH)Thalassemia地中海貧血是全球最大的單基因遺傳病之一中國(guó)南方不同高發(fā)地區(qū)人群攜帶率1~23%研究背景全球血紅蛋白病人群負(fù)荷WHO地區(qū)人口(百萬(wàn))出生(百萬(wàn))純合子出生(千)非洲65030.0230美洲73017.55.0亞洲315084.0120.0歐洲78011.01.6大洋洲300.50.2合計(jì)5340143.0356.8中國(guó)南方地中海貧血人群攜帶率地區(qū)攜帶率(%)地貧β地貧廣東8.532.54廣西14.956.78四川1.922.18臺(tái)灣4.201.10香港5.023.41Xu,etal.JClinPathol2019,57:517-22.Cai,etal.ChiJEpidemiol2019,23:281-5.排序出生缺陷分析例數(shù)發(fā)生頻率(/萬(wàn))1先天性心臟病26019.662重型地貧20815.733多指20015.124肢體短縮1118.395唇裂/腭裂1098.24廣州市主要出生缺陷的發(fā)生率(2019-2019)Pedigreefor-thalassemiainatypicalfamily.地中海貧血:常染色體隱性遺傳病地貧是嚴(yán)重致死、致殘性遺傳性血液病常染色體隱性遺傳病受累基因：地貧-珠蛋白基因（16p13.3）β地貧-β珠蛋白基因（11p15.3）突變純合子：重型地貧-致死中間型地貧-致殘病理學(xué)基礎(chǔ)：/β鏈比例失衡地貧純合子：致死性出生缺陷重型地貧:胎兒水腫綜合征早產(chǎn)死胎或出生前后死亡可導(dǎo)致嚴(yán)重產(chǎn)科并發(fā)癥無(wú)理想治療方法重型地貧出生后1年內(nèi)發(fā)病多于未成年前因嚴(yán)重貧血而夭折輸血和去鐵治療可維持,代價(jià)昂貴家系樣品采集現(xiàn)場(chǎng)中間型地貧是嚴(yán)重致殘性遺傳病研究地中海貧血的意義重癥地貧患兒的出生是世界公認(rèn)的公共衛(wèi)生問(wèn)題通過(guò)產(chǎn)前診斷阻止重癥患兒出生是首選預(yù)防措施WHO優(yōu)先推薦在發(fā)展中國(guó)家實(shí)施預(yù)防的遺傳性疾病預(yù)防地貧是中國(guó)南方高發(fā)區(qū)減少出生缺陷的戰(zhàn)略需求研究背景中國(guó)需要解決的研究主題發(fā)展用于臨床和預(yù)防的分子診斷技術(shù)高發(fā)地區(qū)人群中的遺傳流行病學(xué)調(diào)查開(kāi)展人群水平的地中海貧血預(yù)防指導(dǎo)制定計(jì)劃大人群監(jiān)控和預(yù)防用于基因分型用于產(chǎn)前診斷診斷篩查預(yù)防地中海貧血的研究策略研究背景遺傳流行病學(xué)調(diào)查建立一系列診斷標(biāo)準(zhǔn)和診斷技術(shù)地中海貧血的臨床特征小細(xì)胞低色素性溶血型貧血(中、重度)黃疸肝脾腫大(脾大明顯)骨髓擴(kuò)增發(fā)育遲緩合并感染Bart’s水腫胎(α地貧,宮內(nèi)或出生后半小時(shí)內(nèi)死亡)地中海貧血的血液學(xué)表型特征RBC參數(shù)MCVMCH細(xì)胞形態(tài)變化Hb電泳分析HbA2()或()HbBart’sHbH()HbE()地中海貧血分子基礎(chǔ)及產(chǎn)前診斷南方醫(yī)科大學(xué)徐湘民即將來(lái)臨的一地中海貧血分子基礎(chǔ)及產(chǎn)前診斷課件73地中海貧血分子基礎(chǔ)及產(chǎn)前診斷課件74地中海貧血分子基礎(chǔ)及產(chǎn)前診斷課件75地中海貧血分子基礎(chǔ)及產(chǎn)前診斷課件76地中海貧血分子基礎(chǔ)及產(chǎn)前診斷課件77地中海貧血分子基礎(chǔ)及產(chǎn)前診斷課件78地中海貧血分子基礎(chǔ)及產(chǎn)前診斷課件79地中海貧血分子基礎(chǔ)及產(chǎn)前診斷課件80地中海貧血分子基礎(chǔ)及產(chǎn)前診斷課件81研究地中海貧血的意義

重癥地貧患兒的出生是世界公認(rèn)的公共衛(wèi)生問(wèn)題

通過(guò)產(chǎn)前診斷阻止重癥患兒出生是首選預(yù)防措施

WHO優(yōu)先推薦在發(fā)展中國(guó)家實(shí)施預(yù)防的遺傳性疾病

預(yù)防地貧是中國(guó)南方高發(fā)區(qū)減少出生缺陷的戰(zhàn)略需求研究背景研究地中海貧血的意義研究背景82中國(guó)需要解決的研究主題

發(fā)展用于臨床和預(yù)防的分子診斷技術(shù)

高發(fā)地區(qū)人群中的遺傳流行病學(xué)調(diào)查

開(kāi)展人群水平的地中海貧血預(yù)防中國(guó)需要解決的研究主題83指導(dǎo)制定計(jì)劃大人群監(jiān)控和預(yù)防用于基因分型用于產(chǎn)前診斷診斷篩查預(yù)防地中海貧血的研究策略研究背景遺傳流行病學(xué)調(diào)查建立一系列診斷標(biāo)準(zhǔn)和診斷技術(shù)指導(dǎo)制定計(jì)劃用于基因分型用于產(chǎn)前診斷診斷84地中海貧血的臨床特征小細(xì)胞低色素性溶血型貧血(中、重度)黃疸肝脾腫大(脾大明顯)骨髓擴(kuò)增發(fā)育遲緩合并感染Bart’s水腫胎(α地貧,宮內(nèi)或出生后半小時(shí)內(nèi)死亡)地中海貧血的臨床特征小細(xì)胞低色素性溶血型貧血(中、重度)85地中海貧血的血液學(xué)表型特征RBC參數(shù)MCVMCH細(xì)胞形態(tài)變化Hb電泳分析HbA2

()或()HbBart’sHbH()HbE()地中海貧血的血液學(xué)表型特征86地貧血象：紅細(xì)胞著色不足、異形紅細(xì)胞和骨髓成紅血細(xì)胞增多癥地貧血象：紅細(xì)胞著色不足、異形紅細(xì)胞和骨髓成紅血細(xì)胞增多癥87血紅蛋白電泳圖譜123451.正常人HB2.輕型地貧3.異常HBE雜合子4.新生兒HBBart’s(地貧標(biāo)準(zhǔn)型）5.HBHNormalAA2AEBart’sAFHA+-500V,25min血紅蛋白電泳圖譜1288地貧發(fā)生的分子病理學(xué)經(jīng)典機(jī)制

α地貧:基因缺失使基因功能丟失地貧:結(jié)構(gòu)基因變異使轉(zhuǎn)錄異常地貧發(fā)生的分子病理學(xué)經(jīng)典機(jī)制α地貧:基因缺失使基因功能89

-50kb-10kb0kb10kb20kb30kb

(--SEA)Deletion(-

4.2)Deletion(-

3.7)Deletion21導(dǎo)致α地貧的不同類(lèi)型的基因缺失-50kb-10kb90α

GlobingenesaffectedbythalassemiadeletionSilentcarrierThalassemiatraitHbHdiseaseHydropsfetalisNormalαGlobingenesaffectedbytha91α地貧疾病嚴(yán)重程度的單倍型順序21T

2–

–1

2T1

–1T

––α地貧疾病嚴(yán)重程度的單倍型順序92Hematologicaldataoftheproposituseandherfamilymembers.

Ι1Ι2Ⅱ1Ⅱ2Ⅱ3Ⅱ4Ⅱ5Ⅲ1Ⅲ2Sex/age(Y)F/49M/54M/33F/27F/25M/22F/35F/1M/5Hb(g/L)118150173126135135118112141RBC(×1012)5.634.965.706.234.514.575.876.095.02MCV(fL)64.585.788.162.187.882.363.056.278.5MCH(pg)21.030.230.420.229.929.520.118.428.1HbA(%)97.897.593.197.096.695.796.990.097.4HbA2(%)2.202.503.272.983.373.283.122.182.65HbF(%)003.6200007.790Genotype--11.1/ααΑα/ααΑα/αα--11.1/ααΑα/ααΑα/αα--11.1/αα--11.1/ααΑα/ααHematologicaldataoftheprop93JiaSQ,etal.JClinPathol,2019;57:164-7.

JiaSQ,etal.JClinPathol,94DifferentpointmutationsreducingglobingeneexpressionEXON1IVS1

EXON2EXON3

IVS2PromotermutationRNAsplicingInitiationmutationFrameshiftNonsensePoly(A)signalRund.&Rachmilewitz.N.Engl.J.Med.

2019,353:1135-46.

DifferentpointmutationsEXON95世界上不同種族的常見(jiàn)β地貧突變類(lèi)型

種族突變類(lèi)型

地中海人IVS-1,position110(GA)CD39,nonsense(CAGTAG)IVS-1,position1(GA)IVS-2,position745(CG)IVS-1,position6(TC)IVS-2,position1(GA)黑人

29,(AG);88,(CT)Poly(A),(AATAAAAACAAA)世界上不同種族的常見(jiàn)β地貧突變類(lèi)型種族96東南亞人,中國(guó)人

CD41-42,Frameshift(CTTT)IVS-2,position654(CT)

28,(AG);HbE(GA)CD17,nonsense(AAGTAG)IVS-1,position5(GC)亞洲印地安人

IVS-1,position5(GC)619-bpdeletionCD8-9,Frameshift(+G)IVS-1,position1(GT)CD41-42,Frameshift(CTTT)東南亞人,中國(guó)人CD41-42,Framesh97SexProbandfemale

Motherfemale

Father

maleBrothermale

Husband

maleRBC(x1012)5.7

4.84.75.86.4Hb(g/L)

139

105154144145MCV(fl)

73.6

68.288.273.467.1MCH(pg)23.6

21.833.024.722.8MCHC(g/L)

357

320374336340RDW(%)

0.149

0.1520.1320.1440.159HbA(%)

94.3

93.697.294.097.1HbA2(%)

5.7

6.42.86.02.9Genotype

β-90/βN

β-90/βNβN/βNβ-90/βNβN/βNβ/αratio

2.130

2.2193.7162.2385.341Resultsofbloodanalysis,DNAdiagnosisandmRNAdetectioninthefamilymembers.SexProbandMotherFatherBrother98Sequencingofthe-globingeneamplifiedfromtheprobandHeterozygosityfortheCTsubstitutionatposition-90oftheβ-globingeneSequencingofthe-globingen99近年來(lái)發(fā)現(xiàn)的部分中國(guó)南方新突變基因突變?chǔ)林榈鞍谆?1.1大片段缺失α珠蛋白基因

2CD118(+TCA)β珠蛋白基因

90(C→T)β珠蛋白基因73(A→T)β珠蛋白基因28(A→C)β珠蛋白基因

CDs15/16(+G)β珠蛋白基因CD38(A)近年來(lái)發(fā)現(xiàn)的部分中國(guó)南方新突變基因突變?chǔ)?00地中海貧血的產(chǎn)前診斷

胎兒取樣技術(shù)

DNA診斷技術(shù)

-地貧的診斷-地貧的診斷地中海貧血的產(chǎn)前診斷胎兒取樣技術(shù)101羊膜穿刺(amniocentesis)抽取胎兒樣品示意圖羊膜穿刺(amniocentesis)抽取胎兒樣品示意圖102植入前基因診斷Preimplantationgeneticdiagnosis(PGD)超聲產(chǎn)前診斷Prenataldiagnosis:Ultrasoundmeasurement

母體外周血分離胎兒細(xì)胞進(jìn)行產(chǎn)前診斷Prenataldiagnosis:Fetalcellsinthematernalcirculation母體血漿或血清中胎兒DNA分析AnalysisoffetalDNAinmaternalplasmaandserum目前及今后的胎兒產(chǎn)前診斷新技術(shù)植入前基因診斷目前及今后的胎兒產(chǎn)前診斷新技術(shù)103DingC,ChiuRW,LauTK,LeungTN,ChanLC,ChanAY,CharoenkwanP,NgIS,LawHY,MaES,XuX,WanapirakC,SanguansermsriT,LiaoC,AiMA,ChuiDH,CantorCR,LoYM.

MSanalysisofsingle-nucleotidedifferencesincirculatingnucleicacids:Applicationtononinvasiveprenataldiagnosis.

ProcNatlAcadSciUSA.201920;101(29):10762-7.DingC,ChiuRW,LauTK,Leung104單堿基延伸產(chǎn)物的質(zhì)譜分析MFF父親的突變類(lèi)型SABER:singleallelebaseextensionreaction單堿基延伸產(chǎn)物的質(zhì)譜分析MFF父親的突變類(lèi)型SABE105分子量FMStandardprotocol

SABERprotocol在母血漿DNA中排除父親的β地貧突變——++雙親基因型不同：分子量FMStandardprotocolSABERp106CaseCD41/42-CTTTIVS2654CTnt–28AGCD17ATStandardprotocolSABERFetalgenotypeWeeksgestation1FMN/N112FMN/N183F

MN/N214MFF

/N185MF

F

/M176FM

F/N117FM

F/N148FN/N79

FF