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文檔簡介

2023學(xué)年高考生物模擬試卷注意事項(xiàng):1.答題前,考生先將自己的姓名、準(zhǔn)考證號(hào)碼填寫清楚,將條形碼準(zhǔn)確粘貼在條形碼區(qū)域內(nèi)。2.答題時(shí)請(qǐng)按要求用筆。3.請(qǐng)按照題號(hào)順序在答題卡各題目的答題區(qū)域內(nèi)作答,超出答題區(qū)域書寫的答案無效;在草稿紙、試卷上答題無效。4.作圖可先使用鉛筆畫出,確定后必須用黑色字跡的簽字筆描黑。5.保持卡面清潔,不要折暴、不要弄破、弄皺,不準(zhǔn)使用涂改液、修正帶、刮紙刀。一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1.科學(xué)家用槍烏賊的神經(jīng)纖維進(jìn)行實(shí)驗(yàn)(如圖甲,電流左進(jìn)右出為+),記錄在鈉離子溶液中神經(jīng)纖維產(chǎn)生興奮的膜電位(如圖乙),其中箭頭表示施加適宜刺激,陰影表示興奮區(qū)域。若將記錄儀的微電極均置于膜外,其他條件不變,則測(cè)量結(jié)果是A. B.C. D.2.下列關(guān)于染色體組和染色體變異的敘述,錯(cuò)誤的是A.不同物種的染色體組中可能含有相同的染色體B.同種生物的細(xì)胞處于有絲分裂后期時(shí)染色體組數(shù)最多C.減數(shù)分裂過程中的染色體結(jié)構(gòu)變異可導(dǎo)致異常配子的產(chǎn)生D.細(xì)胞內(nèi)染色體數(shù)目以染色體組形式成倍增加導(dǎo)致個(gè)體不育3.下列生物大分子空間結(jié)構(gòu)改變后,導(dǎo)致其功能喪失的是()A.解旋酶使DNA分子的空間結(jié)構(gòu)改變B.RNA聚合酶使基因片段的空間結(jié)構(gòu)改變C.高溫引起抗體的空間結(jié)構(gòu)發(fā)生改變D.刺激引起離子通道蛋白空間結(jié)構(gòu)改變4.下列關(guān)于生物變異的敘述,正確的是()A.基因中個(gè)別堿基對(duì)缺失會(huì)使DNA變短、染色體片段缺失B.染色體易位改變基因的位置,不可能導(dǎo)致生物性狀的改變C.三倍體西瓜減數(shù)分裂時(shí)聯(lián)會(huì)紊亂不能產(chǎn)生種子,可通過組織培養(yǎng)繁殖后代D.花藥離體培養(yǎng)過程中可發(fā)生非同源染色體自由組合,導(dǎo)致基因重組5.下圖是溶酶體發(fā)生過程及其“消化”功能示意圖,下列敘述錯(cuò)誤的是()A.e起源于高爾基體,b來自內(nèi)質(zhì)網(wǎng)B.d是衰老的線粒體,不能為生命活動(dòng)供能C.溶酶體的作用是消化侵入細(xì)胞的病菌、病毒和自身衰老、損傷的細(xì)胞器D.囊泡融合的過程體現(xiàn)了膜的流動(dòng)性6.下列關(guān)于人體內(nèi)環(huán)境的敘述,錯(cuò)誤的是()A.精子與卵細(xì)胞的結(jié)合發(fā)生在人體內(nèi)環(huán)境中B.內(nèi)環(huán)境的成分中有營養(yǎng)物質(zhì)和代謝廢物C.肝臟處血漿中的氧氣濃度比組織液中高D.肝細(xì)胞可以和組織液直接發(fā)生物質(zhì)交換7.下列有關(guān)細(xì)胞的物質(zhì)基礎(chǔ)和結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)的敘述中,正確的是()A.細(xì)胞中可以找到多糖與其他分子相結(jié)合的大分子B.向酶溶液中加入雙縮脲試劑,一定能產(chǎn)生紫色反應(yīng)C.核糖體能合成多種蛋白質(zhì),溶酶體能合成多種水解酶D.原核細(xì)胞沒有線粒體,只能進(jìn)行無氧呼吸8.(10分)某研究小組同學(xué)用體重等方面大體相同的三組兔子進(jìn)行如下實(shí)驗(yàn):將少量含有放射性碘的注射液注射到A、B、C三組兔子的體內(nèi),然后定時(shí)測(cè)定兔子甲狀腺的放射量。4天后,分別給三組兔子注射①無放射性的甲狀腺激素,②無放射性的促甲狀腺激素,③生理鹽水,實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖所示。據(jù)圖判斷,A、B、C三組兔子第二次注射的物質(zhì)依次是A.②③① B.②①③C.③②① D.③①②二、非選擇題9.(10分)白細(xì)胞介素是人體重要的淋巴因子,具有免疫調(diào)節(jié)、抑制腫瘤等多種功能。近年來科學(xué)家將藥用蛋白轉(zhuǎn)向植物生產(chǎn),如圖是將人的白細(xì)胞介素基因?qū)腭R鈴薯中,培養(yǎng)生產(chǎn)白細(xì)胞介素的過程。(tsr為一種抗生素—硫鏈絲菌素的抗性基因)(1)提取人的白細(xì)胞介素基因適宜選用的限制酶是___________,不能使用限制酶SmaI的原因是___________。(2)除圖示方法外,也可從利用___________法構(gòu)建的cDNA文庫中獲取目的基因。獲得目的基因后可采用PCR技術(shù)大量擴(kuò)增,需提供Taq酶和___________等。(3)將目的基因?qū)腭R鈴薯細(xì)胞常采用___________法,其原理是將目的基因?qū)隩i質(zhì)粒上的___________。(4)為篩選出含目的基因的馬鈴薯細(xì)胞,需要在培養(yǎng)基中添加___________。最終為了檢測(cè)目的基因是否在馬鈴薯中表達(dá),可通過____________方法進(jìn)行分子水平的檢測(cè)。10.(14分)甜味蛋白Brazzein是從一種西非熱帶植物的果實(shí)中分離得到的一種相對(duì)分子質(zhì)量較小的蛋白質(zhì),它含有54個(gè)氨基酸,是目前最好的糖類替代品。迄今為止,已己發(fā)現(xiàn)Brazzein基因在數(shù)種細(xì)菌、真菌和高等植物、動(dòng)物細(xì)胞中都能表達(dá)。請(qǐng)回答下列問題:(1)Brazzein基因除了可從原產(chǎn)植物中分離得到外,還可以通過__________的方法獲得,此方法在基因比較小,且__________已知的情況下較為適用。(2)將Brazzein基因?qū)爰?xì)菌、真菌和高等植物細(xì)胞時(shí)都可使用的常用載體是__________,構(gòu)建基因表達(dá)載體是基因工程的核心步驟,其目的是__________________________________________________,同時(shí),使目的基因能夠表達(dá)和發(fā)揮作用?;虮磉_(dá)載體中,除了目的基因外,還必須有____________________、復(fù)制原點(diǎn)等。(3)若受體胞是大腸桿菌,可先用Ca2+處理細(xì)胞使其______________,再將重組表達(dá)載體DNA分子溶于緩沖液中與大腸桿菌混合;若受體是雙子葉植物,則常采用的方法是_____________。若受體是哺乳動(dòng)物,則可將Brazzein基因與________的啟動(dòng)子等調(diào)控組件重組在一起,以便從乳汁中獲得大量的Brazzein蛋白。11.(14分)干擾素是動(dòng)物體內(nèi)的一種蛋白質(zhì),可用于治療病毒的感染和癌癥。長期以來,人們利用相關(guān)病毒誘導(dǎo)白細(xì)胞產(chǎn)生干擾素再從血液中提取,但每升血只能提取0.05μg。1982年,我國科學(xué)家通過基因工程等技術(shù)開發(fā)研制出我國首個(gè)基因工程藥物——重組人干擾素?;卮鹣铝邢嚓P(guān)問題。(1)相對(duì)于從基因組文庫中獲取干擾素基因,從已病毒免疫的白細(xì)胞中提取mRNA,再反轉(zhuǎn)錄并構(gòu)建的cDNA文庫中獲取的干擾素基因,更易在大腸桿菌中合成正常干擾素。從基因表達(dá)的角度分析,其原因是_____。(2)天然的干擾素很難在體外保存,但通過蛋白質(zhì)工程可得到“可保存的干擾素”。蛋白質(zhì)工程以_____和_____的關(guān)系為基礎(chǔ),通過基因修飾或基因合成,對(duì)現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行改造,或制造一種新的蛋白質(zhì)。(3)在構(gòu)建該基因表達(dá)載體時(shí),需同時(shí)用限制酶HindⅢ和BstⅠ處理目的基因和質(zhì)粒,主要目的是_____。(4)質(zhì)粒中LacZ基因編碼的半乳糖苷酶,能催化生成藍(lán)色物質(zhì)從而將細(xì)菌染成藍(lán)色。在含有四環(huán)素的培養(yǎng)基中,未被轉(zhuǎn)化的大腸桿菌的生長現(xiàn)象是_____,含有質(zhì)粒載體的大腸桿菌的生長現(xiàn)象是_____,含有重組質(zhì)粒的大腸桿菌的生長現(xiàn)象是_____,從而獲得所需重組細(xì)胞。(注:若能正常生長需要寫出菌落特征)(5)轉(zhuǎn)基因細(xì)菌產(chǎn)生的干擾素可能會(huì)成為某些人的過敏原,存在潛在風(fēng)險(xiǎn)。有科學(xué)家將干擾素基因轉(zhuǎn)入小鼠基因組,獲得膀胱生物反應(yīng)器,最終在尿液中獲得干擾素。在該操作中,應(yīng)使干擾素基因在_____細(xì)胞中特異性表達(dá)。12.微生物在尿素工廠的廢水中難以生長。研究人員利用2種載體固定脲酶,并比較脲酶對(duì)溫度變化的耐受性和脲酶對(duì)尿素廢水的降解能力,得到如圖所示結(jié)果,其中酶回收率(%):(固定化酶的總活力/脲酶凍干粉總活力)×l00%。請(qǐng)回答:(1)海藻酸鈉濃度過高時(shí)難以溶解,且形成的凝膠珠容易出現(xiàn)____現(xiàn)象,在海藻酸鈉完全溶化后再_______。(2)本研究固定脲酶的方法屬于_____,研究中可以通過____(寫出一種正確方法即可)增加凝膠珠的硬度和內(nèi)部交聯(lián)程度,以減少酶損失。(3)制作凝膠珠時(shí),剛?cè)芑妮d體需____后才可與脲酶混合。使用的注射器前端小孔的內(nèi)徑不宜過大,以防止凝膠珠體積過大影響____。(4)根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析,更適合用于固定化脲酶的載體是____,其依據(jù)是____。

參考答案一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1、B【解析】

據(jù)圖分析,興奮在神經(jīng)纖維上傳導(dǎo)可以是雙向的。圖中的電位計(jì)檢測(cè)的是兩個(gè)神經(jīng)元膜外的電位差;在靜息狀態(tài)下呈外正內(nèi)負(fù),動(dòng)作電位為外負(fù)內(nèi)正,因此電流表發(fā)生兩次相反地轉(zhuǎn)動(dòng),并且兩點(diǎn)是先后興奮,因此中間會(huì)由延擱?!驹斀狻坑深}干和圖解可知,電極所示是膜外電位變化,未興奮之前,兩側(cè)的電位差為0;刺激圖中箭頭處,左側(cè)電極先興奮,左側(cè)膜外變?yōu)樨?fù)電位,而右側(cè)電極處膜外仍為正電位,因此兩側(cè)的電位差為負(fù)值;由于兩點(diǎn)中左側(cè)先興奮,右側(cè)后興奮,并且兩點(diǎn)之間具有一定的距離,因此中間會(huì)出現(xiàn)延擱;當(dāng)興奮傳導(dǎo)到右側(cè)電極后,電位差與之前的相反,因此測(cè)量結(jié)果為B。故選B。2、D【解析】

1、細(xì)胞中的一組非同源染色體,它們?cè)谛螒B(tài)和功能上各不相同,但是攜帶著控制一種生物生長發(fā)育、遺傳和變異的全部信息,這樣的一組染色體,叫做一個(gè)染色體組。2、染色體變異包括染色體結(jié)構(gòu)變異和染色體數(shù)目變異。染色體結(jié)構(gòu)變異包括染色體片段的缺失、重復(fù)、易位和倒位,染色體結(jié)構(gòu)變異會(huì)使排列在染色體上的基因的數(shù)目和排列順序發(fā)生改變,而導(dǎo)致生物性狀的改變,染色體結(jié)構(gòu)變異大多數(shù)對(duì)生物是不利的,有的甚至?xí)?dǎo)致生物死亡;染色體數(shù)目變異分為個(gè)別染色體的增減和細(xì)胞內(nèi)染色體數(shù)目以染色體組的形式成倍地增減。【詳解】A、不同物種的染色體組中可能含有相同的染色體,如二倍體西瓜與四倍體西瓜染色體組內(nèi)的染色體相同,A正確;B、同種生物的細(xì)胞處于有絲分裂后期時(shí)染色體組數(shù)最多,是體細(xì)胞染色體組數(shù)目的兩倍,B正確;C、減數(shù)分裂過程中的染色體結(jié)構(gòu)變異可導(dǎo)致異常配子的產(chǎn)生,C正確;D、細(xì)胞內(nèi)染色體數(shù)目以染色體組形式成倍增加后,導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)含有偶數(shù)個(gè)染色體組,不會(huì)導(dǎo)致個(gè)體不育,D錯(cuò)誤。故選D。3、C【解析】

1、DNA分子解旋后,空間結(jié)構(gòu)改變,但功能未喪失,如DNA解旋后進(jìn)行復(fù)制和轉(zhuǎn)錄。

2、蛋白質(zhì)的基本組成單位是氨基酸,氨基酸通過脫水縮合反應(yīng)形成肽鏈,肽鏈盤曲折疊形成具有一定的空間結(jié)構(gòu)的蛋白質(zhì),如果蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)改變,其功能也改變。【詳解】A、解旋酶使DNA分子的空間結(jié)構(gòu)改變后,只斷裂氫鍵,DNA功能沒變,A錯(cuò)誤;B、RNA聚合酶與DNA上的啟動(dòng)子結(jié)合,使基因片段的空間結(jié)構(gòu)改變,DNA仍能發(fā)揮作用,B錯(cuò)誤;C、抗體成分是蛋白質(zhì),高溫引起抗體的空間結(jié)構(gòu)發(fā)生改變后,使其變性失活,功能喪失,C正確;D、刺激引起離子通道蛋白空間結(jié)構(gòu)改變,通道打開,離子能通過通道蛋白,通道蛋白仍具有活性,D錯(cuò)誤。故選C。4、C【解析】

可遺傳的變異包括基因突變、基因重組和染色體變異:(1)基因突變是指基因中堿基對(duì)的增添、缺失或替換,這會(huì)導(dǎo)致基因結(jié)構(gòu)的改變,進(jìn)而產(chǎn)生新基因;(2)基因重組是指在生物體進(jìn)行有性生殖的過程中,控制不同性狀的非等位基因重新組合,包括兩種類型:①自由組合型:減數(shù)第一次分裂后期,隨著非同源染色體自由組合,非同源染色體上的非等位基因也自由組合。②交叉互換型:減數(shù)第一次分裂前期(四分體),基因隨著同源染色體的非等位基因的交叉互換而發(fā)生重組。此外,某些細(xì)菌(如肺炎雙球菌轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn))和在人為作用(基因工程)下也能產(chǎn)生基因重組。(3)染色體變異包括染色體結(jié)構(gòu)變異(重復(fù)、缺失、易位、倒位)和染色體數(shù)目變異。【詳解】A、基因中個(gè)別堿基對(duì)缺失會(huì)導(dǎo)致基因結(jié)構(gòu)改變,即基因突變,不會(huì)導(dǎo)致染色體片段缺失,A錯(cuò)誤;B、染色體易位改變基因的位置,會(huì)導(dǎo)致生物性狀的改變,B錯(cuò)誤;C、三倍體西瓜聯(lián)會(huì)紊亂不能產(chǎn)生種子,可通過組織培養(yǎng)繁殖后代,C正確;D、花藥離體培養(yǎng)過程中進(jìn)行的是有絲分裂,因此不會(huì)發(fā)生非同源染色體自由組合,即不會(huì)導(dǎo)致基因重組,D錯(cuò)誤。故選C。5、A【解析】

分析圖可知,a是高爾基體,b是剛形成的溶酶體,c是內(nèi)質(zhì)網(wǎng),d是線粒體,e是包裹線粒體的小泡,溶酶體發(fā)生過程體現(xiàn)了生物膜具有一定流動(dòng)性?!驹斀狻緼.據(jù)圖可知,e起源于內(nèi)質(zhì)網(wǎng),b來自高爾基體,A錯(cuò)誤;B.從圖中可以看出,d線粒體是準(zhǔn)備被分解的,故不能再行使正常的功能,不能提供能量,B正確;C.溶酶體含有多種水解酶,能分解衰老、損傷的細(xì)胞器,吞噬并殺死侵入細(xì)胞的病毒或病菌,C正確;D.b和e融合為f的過程體現(xiàn)了生物膜具有一定的流動(dòng)性,D正確。6、A【解析】

內(nèi)環(huán)境又叫細(xì)胞外液,由血漿、組織液和淋巴組成,內(nèi)環(huán)境是多細(xì)胞生物體的細(xì)胞生活的直接液體環(huán)境,是多細(xì)胞生物體的細(xì)胞與外界環(huán)境進(jìn)行物質(zhì)交換的媒介;內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)態(tài)是細(xì)胞完成正常生命活動(dòng)的必要條件。內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)是指正常機(jī)體通過調(diào)節(jié)作用,使各個(gè)器官、系統(tǒng)協(xié)調(diào)活動(dòng),共同維持內(nèi)環(huán)境的相對(duì)穩(wěn)定的狀態(tài),內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)是機(jī)體進(jìn)行正常生命活動(dòng)的必要條件?!驹斀狻緼、精子與卵細(xì)胞的結(jié)合發(fā)生在女性的輸卵管,而輸卵管為體外環(huán)境,不屬于內(nèi)環(huán)境,A錯(cuò)誤;B、內(nèi)環(huán)境由血漿、組織液和淋巴組成,其成分中有營養(yǎng)物質(zhì)和代謝廢物,B正確;C、肝臟細(xì)胞需要的氧氣來自于組織液,而組織液中的氧氣來自于血漿,因此肝臟處血漿中的氧氣濃度比組織液中高,C正確;D、肝細(xì)胞的內(nèi)環(huán)境是組織液,其可以與組織液直接發(fā)生物質(zhì)交換,D正確。故選A。7、A【解析】

A、細(xì)胞膜表面的多糖可以和蛋白質(zhì)結(jié)合形成糖蛋白,A正確;B、向化學(xué)本質(zhì)是蛋白質(zhì)的酶溶液中加入雙縮脲試劑能產(chǎn)生紫色反應(yīng),而向化學(xué)本質(zhì)是RNA的酶溶液中加入雙縮脲試劑不能產(chǎn)生紫色反應(yīng),B錯(cuò)誤;C、核糖體能合成多種蛋白質(zhì),而溶酶體不能合成多種水解酶,C錯(cuò)誤;D、原核細(xì)胞中的醋酸菌細(xì)胞沒有線粒體,但含有與有氧呼吸有關(guān)的酶,能進(jìn)行有氧呼吸,D錯(cuò)誤。故選A。8、C【解析】碘是合成甲狀腺激素的原料,進(jìn)入人體后會(huì)逐漸被甲狀腺吸收利用,題圖的縱坐標(biāo)為甲狀腺的放射量,第一次注射后4天的曲線先上升后下降,說明甲狀腺激素合成后逐漸釋放進(jìn)入血液,4天后注射無放射性甲狀腺激素,血液中甲狀腺激素含量升高,通過反饋調(diào)節(jié)使甲狀腺合成分泌甲狀腺激素的量減少,故甲狀腺內(nèi)的放射量下降最慢,維持較高水平,對(duì)應(yīng)圖中的C組曲線;若4天后注射無放射性的促甲狀腺激素,會(huì)促進(jìn)甲狀腺激素的合成與分泌,所以甲狀腺內(nèi)放射量下降最快,對(duì)應(yīng)圖中的B組曲線;A組為對(duì)照組,C正確。【考點(diǎn)定位】甲狀腺激素的調(diào)節(jié)。二、非選擇題9、PstⅠ和HindⅢ限制酶SmaⅠ酶切位點(diǎn)位于白細(xì)胞介素基因中部,使用它會(huì)造成目的基因斷裂反轉(zhuǎn)錄引物農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化T-DNA硫鏈絲菌素抗原—抗體雜交【解析】

分析題圖,圖示表示人的白細(xì)胞介素基因表達(dá)載體的構(gòu)建過程,載體和目的基因都有限制酶PstⅠ和HindⅢ的切割位點(diǎn),所以切割載體和目的基因時(shí)用限制酶PstⅠ和HindⅢ,再用DNA連接酶連接目的基因和運(yùn)載體形成重組載體。獲取目的基因的方法包括從基因文庫中獲取、cDNA文庫法、供體細(xì)胞的DNA中直接分離基因(鳥槍法)。農(nóng)桿菌通過侵染植物傷口進(jìn)入細(xì)胞后,可將Ti質(zhì)粒的T-DNA插入到植物基因組中?!驹斀狻浚?)載體和目的基因都有限制酶PstⅠ和HindⅢ的切割位點(diǎn),使用限制酶SmaI則會(huì)破壞目的基因;(2)目的基因的獲取可以采用cDNA文庫法(即逆轉(zhuǎn)錄法),指以某生物成熟mRNA為模板逆轉(zhuǎn)錄而成的cDNA序列的重組DNA群體,采用PCR技術(shù)大量擴(kuò)增,需提供Taq酶和引物等;(3)將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞常采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法,利用的是Ti質(zhì)粒上的T-DNA;(4)構(gòu)建好的表達(dá)載體含有硫鏈絲菌素的抗性基因,因此可以在培養(yǎng)基中添加硫鏈絲菌素進(jìn)行篩選,為檢測(cè)目的基因是否順利表達(dá),可以通過抗原-抗體雜交技術(shù)。【點(diǎn)睛】解答本題的關(guān)鍵是分析題圖中的限制酶切割位點(diǎn),明確目的基因和質(zhì)粒都有PstⅠ和HindⅢ的切割位點(diǎn),從而可以用于構(gòu)建基因表達(dá)載體,其他的酶切位點(diǎn)則會(huì)破壞目的基因或抗性基因。10、人工合成)核苷酸序列質(zhì)粒使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在,并且可以遺傳給下一代啟動(dòng)子、終止子、標(biāo)記基因處于一種能吸收周圍環(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài)(或成為感受態(tài)細(xì)胞)農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法乳腺蛋白基因【解析】

基因工程技術(shù)的基本步驟:(1)目的基因的獲取:方法有從基因文庫中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。(2)基因表達(dá)載體的構(gòu)建:是基因工程的核心步驟,基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。(3)將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞:根據(jù)受體細(xì)胞不同,導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法;將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法;將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。(4)目的基因的檢測(cè)與鑒定:分子水平上的檢測(cè):①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù);②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù);③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)。個(gè)體水平上的鑒定:抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等?!驹斀狻浚?)獲取目的基因的方法主要有兩種:一是從供體細(xì)胞(或基因文庫)中獲取,另一種是人工合成目的基因。人工合成目的基因的方法適合用于基因比較小、核苷酸序列已知的情況。(2)常用的基因載體是質(zhì)粒,構(gòu)建基因表達(dá)載體的目的是使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在,并且可以遺傳給下一代,同時(shí),使目的基因能夠表達(dá)和發(fā)揮作用?;虮磉_(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子、標(biāo)記基因、復(fù)制原點(diǎn)等。(3)若受體細(xì)胞是大腸桿菌,可先用Ca2+處理細(xì)胞,使細(xì)胞處于一種能吸收周圍環(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài);若受體是雙子葉植物,則常采用的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法;若受體是哺乳動(dòng)物,通常將目的基因?qū)肴橄偌?xì)胞,可將Brazzein基因與乳腺蛋白基因啟動(dòng)子調(diào)控組件重組在一起,可從取其乳汁中獲得所需物質(zhì)?!军c(diǎn)睛】基因工程步驟:目的基因的獲取、基因表達(dá)載體的構(gòu)建、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞、目的基因的檢測(cè)與鑒定;要求考生識(shí)記基因工程的概念、原理及操作步驟,掌握各操作步驟中需要注意的細(xì)節(jié)。11、從基因組文庫中獲得的干擾素基因有內(nèi)含子,在大腸桿菌中干擾素基因的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物中與內(nèi)含子對(duì)應(yīng)的RNA序列不能被切除,無法表達(dá)出干擾素蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律生物功能防止目的基因和載體任意連接(或自身環(huán)化或反向連接)無法生長正常生長,菌落呈藍(lán)色正常生長,菌落呈白色(或無色)膀胱上皮【解析】

基因工程技術(shù)的基本步驟:(1)目的基因的獲取:方法有從基因文庫中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。(2)基因表達(dá)載體的構(gòu)建:是基因工程的核心步驟,基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。(3)將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞:根據(jù)受體細(xì)胞不同,導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法;將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法;將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。(4)目的基因的檢測(cè)與鑒定:分子水平上的檢測(cè):①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因——DNA分子雜交技術(shù);②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA——分子雜交技術(shù);③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)﹣﹣抗原﹣抗體雜交技術(shù)。個(gè)體水平上的鑒定:抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。【詳解】(1)從基因組文庫中獲得的干擾素基因有內(nèi)含子,在大腸桿菌中干擾素基因的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物中與內(nèi)含子對(duì)應(yīng)的RNA序列不能被切除,無法表達(dá)出干擾素。因此相對(duì)于從基因組文庫中獲取干擾素基因,從已病毒免疫的白細(xì)胞中提取mRNA,再反轉(zhuǎn)錄并構(gòu)建的cDNA文庫中獲取的干擾素基因,更易在大腸桿菌中合成正常干擾素。(2)蛋白質(zhì)工程以蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律和生物功能的關(guān)系為基礎(chǔ),通過基因修飾或基因合成,對(duì)現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行改造,或制造一種新的蛋白質(zhì)。(3)在構(gòu)建該基因表達(dá)載體時(shí),需同時(shí)用限制酶HindⅢ和BstⅠ處理目的基因和質(zhì)粒,主要目的是防止目的基因和載體任意連接(或自身環(huán)化或反向連接

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