學習目標掌握色譜分析的基本原理,了解氣相色譜儀的結(jié)【-】

學習目標1、掌握色譜分析的基本原理，了解氣相色譜儀的結(jié)構(gòu)；2、掌握氣相色譜分析的條件選擇；3、掌握氣相色譜定量分析方法；4、學會利用色譜圖及相應(yīng)術(shù)語；5、了解氣相色譜分析儀的維護與保養(yǎng)方法。色譜法的最早用于分離植物色素：在一玻璃管中放入顆粒狀的碳酸鈣，將含有植物色素〔植物葉的提取液〕的石油醚倒入管中。此時，玻璃管的上端立即出現(xiàn)幾種顏色的混合譜帶。然后用純石油醚沖洗，隨著石油醚的加入，譜帶不斷地向下移動，并逐漸分開成幾個不同顏色的譜帶，繼續(xù)沖洗就可分別接得各種顏色的色素，并可分別進行鑒定。色譜法也由此而得名。第一節(jié)色譜分析的基本原理一、色譜分析法概述如今的色譜法早已不局限于色素的分離，其方法也早已得到了極大的發(fā)展，但其分離的原理仍然是一樣的。我們?nèi)匀唤兴V分析。色譜法(chromatography)以試樣組分在固定相和流動相間的溶解、吸附、分配、離子交換或其他親和作用的差異為依據(jù)而建立起來的各種分離、分析方法稱色譜法?；拘g(shù)語色譜柱—進行色譜分離用的細長管。固定相—管內(nèi)保持固定、起分離作用的填充物?！瞫tationaryphase〕流動相—流經(jīng)固定相的空隙或表面的沖洗劑?！瞞obilephase〕色譜分析法有很多種類，從不同的角度出發(fā)可以有不同的分類方法。

1、按兩相的狀態(tài)分類色譜法中，流動相可以是氣體，也可以是液體，由此可分為氣相色譜法〔GC〕和液相色譜法〔LC〕。固定相既可以是固體，也可以是涂在固體上的液體，由此又可將氣相色譜法和液相色譜法分為氣-液色譜、氣-固色譜、液-固色譜、液-液色譜。二、色譜法分類2、按固定相的形式分類按固定相的狀態(tài)可分為：柱色譜：固定相裝在色譜柱中；紙色譜：利用濾紙作載體，吸附在紙上的水作固定相；薄層色譜：將固體吸附劑在玻璃板或塑料板上制成薄層作固定相。

3、按分離原理分類吸附色譜法：利用吸附劑〔固定相一般是固體〕表面對不同組分吸附能力的差別進行分離的方法；分配色譜法：利用不同組分在兩相間的分配系數(shù)的差別進行分離的方法。離子交換色譜：利用溶液中不同離子與離子交換劑間的交換能力的不同而進行分離的方法?？臻g排斥〔阻〕色譜法：利用多孔性物質(zhì)對不同大小的分子的排阻作用進行分離的方法。色譜法的分離原理就是利用待分離的各種物質(zhì)在流動相合固定相中的分配系數(shù)、吸附能力等親和能力的不同來進行分離的。三、色譜分離的基本原理使用外力使含有樣品的流動相〔氣體、液體〕通過一固定于柱中或平板上、與流動相互不相溶的固定相表面，當流動相中攜帶的混合物流經(jīng)固定相時，混合物中的各組分與固定相發(fā)生相互作用，由于混合物中各組分在性質(zhì)和結(jié)構(gòu)上的差異，與固定相之間產(chǎn)生的作用力的大小、強弱不同，隨著流動相的移動，混合物在兩相間經(jīng)過反復(fù)多次的分配平衡，使得各組分被固定相保留的時間不同，從而按一定次序由固定相中先后流出。與適當?shù)闹髾z測方法結(jié)合，實現(xiàn)混合物中各組分的分離與檢測。三、氣相色譜法的特點1、分離效能高2、快速3、靈敏度高、樣品用量少4、不足---固體試樣不能直接測定，需要標準樣品作對照，對試樣的要求較高〔既要易揮發(fā)又要熱穩(wěn)定性好〕。四、色譜法的發(fā)展趨勢多機聯(lián)用、計算機化、專家處理系統(tǒng)。第二節(jié)氣相色譜儀的基本組成7890氣相色譜儀7890單檢測器系列色譜儀7890II雙氣路色譜儀氣相色譜儀主要由氣路系統(tǒng)、進樣系統(tǒng)、分離系統(tǒng)、檢測系統(tǒng)和記錄系統(tǒng)組成。氣路系統(tǒng)主要是指〔分離前〕載氣連續(xù)運行的密閉通道。作用——獲得純凈、流速穩(wěn)定的載氣。組成——包括壓力計、流量計及氣體凈化裝置。A載氣----要求化學惰性，不與有關(guān)物質(zhì)反應(yīng)。載氣的選擇除了要求考慮對柱效的影響外，還要與分析對象和所用的檢測器相配。H2，N2，He，Ar等，載氣的選擇主要由檢測器性質(zhì)及分離要求決定。B凈化器----提高載氣純度，多為分子篩和活性碳管的串聯(lián)，可除去水、氧氣以及其它雜質(zhì)。C穩(wěn)壓恒流裝置----壓力表和流量計一、氣路系統(tǒng)壓力表：多為兩級壓力指示：第一級，鋼瓶壓力指示(總是高于常壓。對填充柱：10-50psi；對開口毛細管柱：1-25psi)；第二級，柱頭壓力指示。流量計：在柱頭前使用轉(zhuǎn)子流量計，但不太準確。通常在柱后，以皂膜流量計測流速，許多現(xiàn)代儀器裝置有電子流量計，并以計算機控制其流速保持不變。進樣系統(tǒng)包括進樣器和氣化室常以微量注射器(穿過隔膜墊)或六通閥進樣，即將液體樣品定量地注入氣化室。汽化室溫度比樣品成分的最高沸點高約30-60℃;

進樣要求：L；對毛細管柱分離，體積約為~10-3

L，此時應(yīng)采用六通閥進樣裝置來實現(xiàn)。體積過大或進樣過慢，將導(dǎo)致分離變差(拖尾)。氣化室要求：良好的密閉性。二、進樣系統(tǒng)氣化室進樣系統(tǒng)微量注射器1、色譜柱〔分離柱〕色譜分析的心臟部分。分離柱有填充柱和開管柱(或稱毛細管柱)，由柱管和固定相組成。柱材料包括金屬、玻璃、融熔石英等。三、分離系統(tǒng)分離系統(tǒng)包括色譜柱、柱溫箱〔色譜爐〕、溫控裝置。填充柱----多為U形或螺旋形，內(nèi)徑2~4mm，長1~5m，內(nèi)填固定相；開管柱----分為涂壁、多孔層和涂載體開管柱。內(nèi)徑，長達幾十至幾百m。通常彎成直徑10~30cm的螺旋狀。開管柱因滲透性好、傳質(zhì)快，因而分離效率高(n可達106)、分析速度快、樣品用量小。2、柱溫箱〔色譜爐〕設(shè)置色譜爐是為了提高適宜的柱溫，柱溫是影響分離的最重要的因素，其變化應(yīng)小±0.x℃。選擇柱溫主要是考慮樣品待測物沸點和對分離的要求。柱溫通常要等于或略高于樣品的平均沸點(分析時間20-30min)；對寬沸程的樣品，應(yīng)使用程序升溫方法。3、控溫系統(tǒng)包括對三個部分的控溫，即氣化室、柱箱和檢測器?？販胤绞剑汉銣睾统绦蛏郎?。溫度選擇：在介紹儀器組成時給出，此處略。溫度控制是否準確、升、降溫速度是否快速是市售色譜儀器的最重要指標之一。恒溫：45℃程序升溫：30-180℃恒溫：145℃溫度低，分離效果較好，但分析時間長程序升溫，分離效果好，且分析時間短溫度高，分析時間短，但分離效果差程序升溫與恒溫對分離的影響比較1、檢測器——將各分離組分及其濃度變化用電信號顯示出來，以便進行定性或定量分析的裝置。檢測器有多種型號。四、檢測系統(tǒng)2、常用氣相色譜檢測器1〕熱導(dǎo)池檢測器---TCD〔Thermalconductivitydetector)2〕氫火焰離子化檢測器---FID〔Hydrogenflameionizationdetector)3〕電子捕獲檢測器---ECD〔Electroncapturedetector〕4〕火焰光度檢測器---FPD〔Flamephotometricdetector〕TCD的工作原理---由于不同氣態(tài)物質(zhì)所具有的熱傳導(dǎo)系數(shù)不同，當它們到達處于恒溫下的熱敏元件〔如Pt,Au,W,半導(dǎo)體〕時，其電阻將發(fā)生變化，將引起的電阻變化通過某種方式轉(zhuǎn)化為可以記錄的電壓信號，從而實現(xiàn)其檢測功能。特點：此檢測器幾乎對所有可揮發(fā)的有機和無機物質(zhì)均能響應(yīng)。但靈敏度較低，被測樣品的濃度不得低于萬分之一。屬非破壞性檢測器。FID的工作原理含碳有機物在H2-Air火焰中燃燒產(chǎn)生碎片離子，在電場作用下形成離子流，根據(jù)離子流產(chǎn)生的電信號強度，檢測被色譜柱分離的組分。FID的結(jié)構(gòu)主體為離子室，內(nèi)有石英噴嘴、發(fā)射極(極化極，此圖中為火焰頂端)和收集極。FID特點：1〕靈敏度高(～10-9g/g)；2〕線性范圍寬(～107數(shù)量級)；3〕噪聲低；4〕耐用且易于使用；特點：體積小，靈敏度高，死體積小，應(yīng)答時間快，但對部分物質(zhì)如H2、O2、N2、CO、CO2、NO、NO2、CS2、H2O等無響應(yīng)。屬破壞性檢測器。電子捕獲檢測器(ECD〕Electroncapturedetector，ECD主要對含有較大電負性原子的化合物響應(yīng)。它特別適合于環(huán)境樣品中鹵代農(nóng)藥和多氯聯(lián)苯等微量污染物的分析。ECD的結(jié)構(gòu)ECD的原理及工作過程---從色譜柱流出的載氣(N2或Ar)被ECD內(nèi)腔中的放射源電離，形成次級離子和電子(此時電子減速)，在電場作用下，離子和電子發(fā)生遷移而形成電流(基流)。當含較大電負性有機物被載氣帶入ECD內(nèi)時，將捕獲已形成的低速自由電子，生成負離子并與載氣正離子復(fù)合成中性分子，此時，基流下降形成“倒峰〞。氣相色譜檢測器的性能及有關(guān)術(shù)語理想的檢測器應(yīng)具有的條件：1〕適合的靈敏度：對一些組分十分靈敏，而對其它那么不，其間相差達107倍；2〕穩(wěn)定、重現(xiàn)性好；3〕線性范圍寬，可達幾個數(shù)量級；4〕可在室溫到400℃下使用；5〕響應(yīng)時間短，且不受流速影響；6〕可靠性好、使用方便、對無經(jīng)驗者來說足夠安全；7〕對所有待測物的響應(yīng)相似或可以預(yù)測這種響應(yīng)；8〕選擇性好；9〕不破壞樣品。但任何檢測器都不可能同時滿足上述所有要求。五、記錄處理系統(tǒng)能自動記錄由檢測器輸出的信號，也稱為記錄儀〔積分儀〕。要求：有可變的滿標量程；滿標響應(yīng)時間短；紙速均勻可調(diào)；有增益和阻尼控制。1、進行氣相色譜法分析時，載氣〔一般用氮氣或氫氣〕由高壓鋼瓶供給，經(jīng)減壓閥減壓后，載氣進入凈化管干燥凈化，然后由穩(wěn)壓閥控制載氣的流量和壓力，并由流量計顯示載氣進入柱之前的流量后，以穩(wěn)定的壓力進入氣化室、色譜柱、檢測器后放空。氣相色譜法分析的過程2、當氣化室中注入樣品時，樣品立即被氣化并被載氣帶入色譜柱進行分離。分離后的各組分，先后流出色譜柱進入檢測器，檢測器將其濃度信號轉(zhuǎn)變成電信號，再經(jīng)放大器放大后在記錄器上顯示出來，就得到了色譜的流出曲線。3、利用色譜流出曲線上的色譜峰就可以進行定性、定量分析。這就是氣相色譜法分析的過程。色譜流出曲線

試樣中各組分經(jīng)色譜柱分離后，按先后次序經(jīng)過檢測器時，檢測器就將流動相中各組分濃度變化轉(zhuǎn)變?yōu)橄鄳?yīng)的電信號，由記錄儀所記錄下的信號——時間曲線或信號——流動相體積曲線。一、氣相色譜術(shù)語第三節(jié)氣相色譜的基本理論1、基線在實驗條件下，色譜柱后僅有純流動相進入檢測器時的流出曲線稱為基線。基線在穩(wěn)定的條件下應(yīng)是一條水平的直線。它的平直與否可反應(yīng)出實驗條件的穩(wěn)定情況。2、色譜峰檢測器響應(yīng)信號隨時間變化的峰形曲線。3、峰高〔h〕色譜峰頂點與基線的距離叫峰高。4、峰底寬度〔W〕從峰兩邊拐點作切線與基線相交的截距。5、峰面積色譜峰與峰底基線所圍成區(qū)域的面積叫峰面積。6、半峰寬〔W1/2〕峰高一半處的寬度。7、保留時間〔tR〕試樣從進樣到出現(xiàn)峰極大值時的時間。它包括組份隨流動相通過柱子的時間tM〔死時間〕和組份在固定相中滯留的時間。8、死時間〔tM〕不與固定相作用的物質(zhì)從進樣到出現(xiàn)峰極大值時的時間，它與色譜柱的空隙體積成正比。由于該物質(zhì)不與固定相作用，因此，其流速與流動相的流速相近。據(jù)tM可求出流動相平均流速。9、調(diào)整時間某組份的保留時間扣除死時間后的保留時間，它是組份在固定相中的滯留時間。

tR?=tR–tM

保留時間為色譜定性依據(jù)。但同一組份的保留時間與流速有關(guān)，因此有時需用保留體積來表示保留值。1〕保留體積：從進樣至被測組分出現(xiàn)最大濃度時流動相通過的體積，VR。2〕死體積：色譜柱管內(nèi)存在固定相顆粒間空隙、色譜儀管路和連接頭間空隙和檢測器間隙。忽略后兩項時，不被固定相滯留的組分，從進樣至出現(xiàn)濃度最大值時流動相通過的體積稱為死體積(deadvolume)，VM?！睩c為柱尾載氣體積流量即流速〕VM=tMFc3〕調(diào)整體積：扣除死體積后的保留體積。VR?=VR–VM或VR?=tR?Fc10、相對保留值〔relativeretention〕在相同的操作條件下，待測組分與參比組分的調(diào)整保留值之比，用ri,s表示。色譜流出曲線的意義

色譜峰數(shù)=樣品中單組份的最少個數(shù)；色譜保留值——定性依據(jù)；色譜峰高或面積——定量依據(jù)；色譜保留值或區(qū)域?qū)挾取V柱分離效能評價指標；色譜峰間距——固定相或流動相選擇是否合適的依據(jù)。色譜分析的目的是將樣品中各組分彼此分離，組分要達到完全分離，兩峰間的距離必須足夠遠，兩峰間的距離是由組分在兩相間的分配系數(shù)決定的，即與色譜過程的熱力學性質(zhì)有關(guān)。但當兩峰間雖有一定距離，如果每個峰都很寬，以致彼此重疊，還是不能分開。這些峰的寬或窄是由組分在色譜柱中傳質(zhì)和擴散行為決定的，即與色譜過程的動力學性質(zhì)有關(guān)。因此，要從熱力學和動力學〔流體力學〕兩方面來研究色譜行為。二、色譜分離的基本原理1、分配系數(shù)(K)如前所述，分配色譜的分離是基于樣品組分在固定相和流動相之間反復(fù)多次地分配過程，而吸附色譜的分離是基于反復(fù)多次地吸附一脫附過程。這種分離過程經(jīng)常用樣品分子在兩相間的分配來描述，而描述這種分配的參數(shù)稱為分配系數(shù)。它是指在一定溫度和壓力下，組分在固定相和流動相之間分配達平衡時的濃度之比值，即K只與固定相和溫度有關(guān)，與兩相體積、柱管特性和所用儀器無關(guān)分配系數(shù)K的討論試樣一定時，K主要取決于固定相性質(zhì)。在一定條件下，各種物質(zhì)的K是不同的。K較小的組分在色譜分析中每次分配后在氣相中的濃度較大，因此較早流出色譜柱。K較大的組分每次分配后在氣相中濃度較小，因此較晚流出色譜柱。當分配次數(shù)足夠多時，就能將具有不同K的組分分開。所以，我們可以認為，氣相色譜法是利用不同的物質(zhì)具有不同的K而進行分離的。而K的不同那么是由于各組分在固定相中的溶解度〔對氣-液色譜〕或吸附能力〔對氣-固色譜〕不同而造成的。2、分配比在一定溫度和壓力下，組份在兩相間的分配達平衡時，分配在固定相和流動相中的質(zhì)量〔物質(zhì)的量〕比，稱為分配比。它反映了組分在柱中的遷移速率。又稱保留因子、容量因子或容量比。其中Vm—流動相的體積Vs—固定相體積K與k的關(guān)系：稱為相比，它也是反映色譜柱柱型特點的參數(shù)，即對特定的色譜柱，其空隙體積〔流動相體積〕與固定相體積〔吸附劑表面容量〕之比是固定的。對填充柱，=6~35；對毛細管柱，=50~1500。分配比k的求算：k也等于組分的校正保留時間與死時間的比值因此，k可通過實驗測得。由此可知，k可表示出組分在柱中停留時間的長短。k越大，停留時間也就越長。k=(tR-tM)/tM=tR’/tM1、塔板理論描述色譜柱中組分在兩相間的分配狀況及評價色譜柱的分離效能的一種半經(jīng)驗式的理論。塔板理論將一根色譜柱當作一個由許多塔板組成的精餾塔，用塔板概念來描述組分在柱中的分配行為。塔板是從精餾中借用的，是一種半經(jīng)驗理論，但它成功地解釋了色譜流出曲線呈正態(tài)分布。二、色譜分離的基本理論組分在每個塔板的流動相和固定相間進行分配，達成一次分配平衡。然后隨著流動相按一個塔板、一個塔板的方式向前移動。經(jīng)過多次分配平衡后，分配系數(shù)小的組分，先離開蒸餾塔〔色譜柱〕，分配系數(shù)大的組分后離開蒸餾塔〔色譜柱〕，從而使分配系數(shù)不同的組分彼此得到分離。當n=5時，即5個塔板體積的流動相進入柱中時，組分就開始從柱口流出。并且呈現(xiàn)先小后大的情況。以上是當塔板數(shù)為5時的情況，出現(xiàn)的峰形不對稱，這是由于塔板數(shù)太少的原因。當塔板數(shù)大于50時，峰形就是對稱的。在實際色譜柱中，n值很大〔約為106～109〕，所以色譜峰一般為正態(tài)分布。上述例子說明：分離效能的大小主要與塔板的數(shù)目有關(guān)，塔板數(shù)越多，分離效能越高。色譜柱的塔板數(shù)可以用理論塔板數(shù)和有效塔板數(shù)來表示。1〕理論塔板數(shù)n色譜柱的理論塔板數(shù)可由下式計算：式中：tR為某組分的保留時間；W1/2為某組分色譜峰的半寬度；W為色譜峰的峰底寬度。由式可知：柱子的理論塔板數(shù)與峰寬和保留時間有關(guān)。保留時間越大，峰越窄，理論塔板數(shù)就越多，柱效能也就越高。對于一個柱長固定為L的柱子，其理論塔板高度H為對于每一個塔板的高度，它越小，也表示分離效能越高。2〕理論塔板高度H組分在柱內(nèi)每達成一次分配平衡所需要的柱長。3〕有效塔板數(shù)n有效和有效塔板高度H有效在以上計算理論塔板數(shù)的式子中使用的是保留時間，它包括了死時間，它與組分在柱內(nèi)的分配無關(guān)，因此不能真正反映色譜柱的柱效。為此，引入了有效塔板數(shù)的概念。同理有效塔板高度為：有效2、速率理論——范弟姆特(VanDeemter)方程式速率理論認為，單個組分粒子在色譜柱內(nèi)固定相和流動相間要發(fā)生千萬次轉(zhuǎn)移，加上分子擴散和運動途徑等因素，它在柱內(nèi)的運動是高度不規(guī)那么的，是隨機的，在柱中隨流動相前進的速度是不均一的。速率理論是在塔板理論的基礎(chǔ)上，給出了影響塔板高度的因素：u為流動相線速度；A，B，C為常數(shù)，其中A—分別表示渦流擴散系數(shù)；B—分子擴散系數(shù)；C—傳質(zhì)阻力系數(shù)〔包括液相和固相傳質(zhì)阻力系數(shù)〕。該式從動力學角度很好地解釋了影響板高〔柱效〕的各種因素，任何減少方程右邊三項數(shù)值的方法，都可降低H，從而提高柱效?！?〕渦流擴散項(A)在填充柱中，由于受到固定相顆粒的阻礙，組份在遷移過程中隨流動相不斷改變方向，形成紊亂的“渦流〞：因填充物顆粒大小及填充的不均勻性——同一組分運行路線長短不同——流出時間不同——峰形展寬。展寬程度以A表示：A=2dp其中dp—填充物平均直徑；—填充不均勻因子。可見，使用細粒的固定相并填充均勻可減小A，可提高柱效。對于空心毛細管柱，無渦流擴散，即A=0?！?〕分子擴散項(B/u)縱向分子擴散是由于濃度梯度引起的。當樣品被注入色譜柱時，它呈“塞子〞狀分布。隨著流動相的推進，“塞子〞因濃度梯度而向前后自發(fā)地擴散，使譜峰展寬。其大小為B=2D—稱為彎曲因子，它表示固定相幾何形狀對自由分子擴散的阻礙情況；D—組分在流動相中的擴散系數(shù)。組份為氣體或液體時，分別以Dg或Dl表示；〔3〕傳質(zhì)阻力項(Cu)因傳質(zhì)阻力的存在，使分配不能“瞬間〞達至平衡，因此產(chǎn)生峰形展寬。氣相色譜以氣體為流動相，液相色譜以液體為流動相，二者傳質(zhì)過程不完全相同。三、色譜柱的分離度相鄰兩色譜峰保留值之差與兩組分色譜峰底寬度平均值之比，用R表示。分離度可以用來作為衡量色譜峰分離效能的指標。①分離效果差，柱效低，選擇性〔〕低②完全分離，柱效高，峰窄，選擇性〔〕低③完全分離，選擇性〔〕增加，柱效低，峰寬④完全分離，柱效高，選擇性〔〕好對于峰形對稱且滿足正態(tài)分布的色譜峰：R=1,分離程度為98%；R=1.5，分離程度可達99.7%。所以R=1.5時，可認為兩色譜峰已完全分開。第四節(jié)氣相色譜定性和定量分析用物對照是基于在一定操作條件下，各組分保留時間是一定值的原理。具體做法：1〕分別以試樣和標準物進樣分析——各自的色譜圖；2〕對照：如果試樣中某峰的保留時間和標樣中某峰重合，那么可初步確定試樣中含有該物質(zhì)。一、定性分析1、利用物對照法定性適合含多組分試樣的分析極性固定相用保留值定性要求兩次進樣條件完全一致，這是比較困難的。而用ri,s定性，那么只要溫度一定即可。具體做法：在樣品和標準物中分別加入同一種基準物s，將樣品的ri,s和標準物的ri,s相比較來確定樣品中是否含有i組分。3、

據(jù)相對保留值ri,s

定性4、

利用加入純物質(zhì)增加峰高的方法定性通過在樣品中加入標準物，看試樣中哪個峰增加來確定。2、利用絕對保留值定性適合兩種物質(zhì)的比較1、定量分析的依據(jù)GC分析是根據(jù)檢測器對待測物的響應(yīng)信號〔峰高或峰面積〕與待測物的量成正比的原理進行定量的。即：mi=fiAi因此必須準確測定峰高h或峰面積A。二、定量分析峰高h的測量h峰面積的計算1、對稱峰

峰高h與半峰寬的積；

實際A=1.065hW1/2；2、不對稱峰

峰高與平均峰寬的積：A=1/2h(W+W)在同一分析中，只能使用同一種近似測量的方法。1〕外標法〔標準曲線法〕取純物質(zhì)配制得到一系列不同濃度的標準溶液，分別取一定體積的標準溶液注入色譜儀，得到相應(yīng)的色譜峰，根據(jù)Ai〔面積〕對Xi〔濃度〕作圖得標準曲線。外標法適于日常分析和大批量同類樣品分析；但進樣量和操作條件必須嚴格控制。2、定量分析方法2〕內(nèi)標法準確稱取樣品m，加入一定量的某純物質(zhì)作內(nèi)標物ms，然后進行色譜分析。根據(jù)待測組分和內(nèi)標物的峰面積及內(nèi)標物的重量就可求得待測組分的含量：3〕歸一化法要求試樣中所有n個組分全部流出色譜柱，并全部出峰！那么其中組分i的含量為：f為校正因子；A為其峰面積。此法簡單、準確，操作條件影響小。但應(yīng)用不多。因為不知道試樣有多少組分？應(yīng)該出多少峰才叫全部出峰？例：用氣相色譜法〔TCD〕分析鹵代烴混合物。在同樣條件下，測得標準樣和未知樣數(shù)據(jù)如下表，求未知試樣中各組分的質(zhì)量百分含量。組分標準樣未知樣進樣量（g）峰面積（標尺單位）m2峰面積（標尺單位）m2氯乙烷氯丙烷氯戊烷氯庚烷0.400.400.400.40110.0112.287.378.482.3無峰125.2180.0解：未知樣總量：m=0.2993+0.5737+0.9184g氯戊烷%=32.03%氯庚烷%=51.27%二、載氣及其流速的選擇第五節(jié)氣相色譜條件的選擇一、色譜柱的選擇柱長增加，R增大，但分析時間延長，填充柱通常為1～3m。確保分離效率的前提下，盡量選擇較短的分離柱。內(nèi)徑增大，增加分離的試樣量，但縱向擴散路徑增加，柱效降低，填充柱內(nèi)徑一般為3～6mm。N27~10cm/sH210~12cm/s三、柱溫的選擇柱溫對分離效果和分析速度產(chǎn)生影響。

柱溫降低，分離度增加柱溫升高，柱效增大使用時除了考慮最高溫度和最低溫度外，以比試樣中各組分的平均沸點低20-30℃為宜；寬沸程混合物，選用程序升溫法。

最高溫度：固定液最高使用溫度最低溫度：一般必須高于固定液的熔點四、進樣條件的選擇1、氣化溫度選擇在選擇的氣化溫度下，應(yīng)能使樣品瞬間氣化而不分解。溫度高以于柱溫30-70℃為宜。2、進樣量μL，氣體0.1-10mL。3、進樣速度進樣速度必須很快，速度慢易產(chǎn)生脫尾的現(xiàn)象。第六節(jié)氣相色譜儀的維護與保養(yǎng)一、氣路系統(tǒng)二、進樣系統(tǒng)三、色譜柱的維護四、檢測系統(tǒng)五、溫度控制系統(tǒng)六、信號記錄系統(tǒng)ILOQTVY#%*-0358adgilnqsvxACFHKMPSUXZ$&)+2479cehjmpruwzBEGJLOQTVY!%(-1368bdgilnqtvyADFIKNPSUXZ$*)0257acfhkmpruxzCEHJMORTWY!%(+1469begjloqtvyBDGILNQSVX#$*)0358adfiknpsuxzCFHKMPRUWZ!&(+1479cehjmortwyBDGJLOQTVY#%*-0358adgilnqsvxACFHKMPSUXZ$&)+2479cehkmpruwzBEGJLOQTWY!%(-1368bdgiloqtvyADFIKNPSUX#$*)0257acfhkmpsuxzCEHJMORTWY!&(+1469begjloqtwyBDGILNQSVX#$*-0358adfiknpsuxACFHKMPRUWZ!&(+1479cehjmortwyBDGJLOQTVY#%*-0358bdgilnqsvxACFHKNPSUXZ$&)+2479cfhkmpruwzBEGJLORTWY!%(-1368bdgjloqtvyADFIKNPSVX#$*)0257acfhknpsuxzCEHJMORTWZ!&(+1469begjlortwyBDGILNQSVX#$*-0358adfiknpsuxACFHKMPRUWZ!&(+2479cehjmortwyBEGJLOQTVY##$*)0257acfiknpsuxzCEHJMORUWZ!&(+1469begjmortwyBDGILNQSVY#%*-0358adfiknpsvxACFHKMPRUWZ!&)+2479cehjmortwzBEGJLOQTVY#%*-1368bdgilnqsvxADFIKNPSUXZ$&)+257acfhkmpruwzBEHJMORTWY!%(-1369begjloqtvyADFILNQSVX#$*)0257adfiknpsuxzCEHJMPRUWZ!&(+1469begjmortwyBDGILNQSVY#%*-0358adfiknqsvxACFHKMPRUWZ$&)+2479cehjmoruwzBEGJLOQTVY#%(-1368bdgilnqsvyADFIKNPSUXZ$&)0257acfhkmpruwzCEHJMORTWY!%(-1469begjloqtvyADGILNQSVX#$*)0257adfiknpsuxzCEHJMPRUWZ!&(+1469behjmortwyBDGILNQTVY#%*-0358adfilnqsvxACFHKMPRUXZ$&)+2479cehjmpruwzBEGJLOQTVY!%(-1368bdgilnqtvyADFIKNPSUXZ$*)0257acfhkmpruwzCEHJMORTWY!%(-1469begjloqtvyADGILNQSVX#$*)0258adfiknpsuxzCEHKMPRUWZ!&(+1469cehjmortwyBDGILOQTVY#%*-0358adgfhkmpsuxzCEHJMORTWY!%(+1469begjloqtvyBDGILNQSVX#$*)0358adfiknpsuxzCFHKMPRUWZ!&(+1479cehjmortwyBDGJLOQTVY#%*-0358bdgilnqsvxACFHKNPSUXZ$&)+2479cfhkmpruwzBEGJLORTWY!%(-1368bdgjloqtvyADFIKNPSUX#$*)0257acfhkmpsuxzCEHJMORTWY!&(+1469begjloqtwyBDGILNQSVX#$*-0358adfiknpsuxACFHKMPRUWZ!&(+2479cehjmortwyBEGJLOQTVY#%*-0368bdgilnqsvxACFIKNPSUXZ$&)+247acfhkmpruwzBEGJLORTWY!%(-1368bdgjloqtvyADFIKNPSVX#$*)0257acfhknpsuxzCEHJMORTWZ!&(+1469begjlortwyBDGILNQSVX#%*-0358adfiknpsvxACFHKMPRUWZ!&)+2479cehjmortwzBEGJLOQTVY#%*-1368bdgilnqsvxACFIKNPORUWZ!&(+1469begjmortwyBDGILNQSVY#%*-0358adfiknqsvxACFHKMPRUWZ$&)+2479cehjmoruwzBEGJLOQTVY#%(-1368bdgilnqsvyADFIKNPSUXZ$&)+257acfhkmpruwzBEHJMORTWY!%(-1369begjloqtvyADFILNQSVX#$*)0257adfiknpsuxzCEHJMPRUWZ!&(+1469behjmortwyBDGILNQTVY#%*-0358adfilnqsvxACFHKMPRUXZ$&)+2479cehjmpruwzBEGJLOQTVY#%(-1368bdgilnqsvyADFIKNPSUXZ$&)0257acfhkmpruwzCEHJMORTWY!%(-1469begjloqtvyADGILNQSVX#$*)0258adfiknpsuxzCEHKMPRUWZ!&(+1469cehjmortwyBDGILOQTVY#%*-0358adfilnqsvxACCEHJMORTWY!%(+1469begjloqtvyBDGILNQSVX#$*)0358adfiknpsuxzCFHKMPRUWZ!&(+1479cehjmortwyBDGJLOQTVY#%*-0358bdgilnqsvxACFHKMPSUXZ$&)+2479cehkmpruwzBEGJLOQTWY!%(-1368bdgiloqtvyADFIKNPSUX#$*)0257acfhkmpsuxzCEHJMORTWY!&(+1469begjloqtwyBDGILNQSVX#$*-0358adfiknpsuxACFHKMPRUWZ!&(+2479cehjmortwyBDGJLOQTVY#%*-0358bdgilnqsvxACFHKNPSUXZ$&)(+1469begjlortwyBDGILNQSVX#%*-0358adfiknpsvxACFHKMPRUWZ!&)+2479cehjmortwzBEGJLOQTVY#%*-0368bdgilnqsvxACFIKNPSUXZ$&)+247acfhkmpruwzBEGJMORTWY!%(-1368begjloqtvyADFIKNQSVX#$*)0257acfiknpsuxzCEHJMORUWZ!&(+1469begjmortwyBDGILNQSVY#%*-0358adfiknqsvxACFHKMPRUWZ!&)+2479cbegjloqtvyADFILNQSVX#$*)0257adfiknpsuxzCEHJMPRUWZ!&(+1469behjmortwyBDGILNQTVY#%*-0358adfilnqsvxACFHKMPRUXZ$&)+2479cehjmoruwzBEGJLOQTVY#%(-1368bdgilnqsvyADFIKNPSUXZ$&)0257acfhkmpruwzCEHJMORTWY!%(-1469begjloqtvyADGILNQSVX#$*)0258adfiknpsuxzCEHKMPRUWZ!&(+1469cehjmortwyBDGILOQTVY#%*-0358adfilnqsvxACFHKMPRUXZ$&)(+1469begjloqtvyBDGILNQSVX#$*)0358adfiknpsuxzCFHKMPRUWZ!&(+1479cehjmortwyBDGJLOQTVY#%*-0358bdgilnqsvxACFHKMPSUXZ$&)+2479cehkmpruwzBEGJLOQTWY!%(-1368bdgiloqtvyADFIKNPSUX#$*)0257acfhkmpsuxzCEHJMORTWY!&(+1469begjloqtwyBDGILNQSVX#$*-0358adfiknpsuxACFHKMPRUWZ!&(+1479cehjmortwyBDGJLOQTVY#%*-0358bdgilnqsvxACFHKNPSUXZ$&)+21469begjlortwyBDGILN