衛(wèi)生樣品的采集與處理_第1頁(yè)
衛(wèi)生樣品的采集與處理_第2頁(yè)
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關(guān)于衛(wèi)生樣品的采集與處理第一頁(yè),共四十三頁(yè),2022年,8月28日2022/12/19樣品的采集和保存

樣品的預(yù)處理*

分析方法的選擇及試樣的測(cè)定

分析數(shù)據(jù)的處理

分析報(bào)告的撰寫(xiě)衛(wèi)生分析工作的第一步:樣品的采集衛(wèi)生樣品分析的一般程序:影響結(jié)果準(zhǔn)確度第二頁(yè),共四十三頁(yè),2022年,8月28日2022/12/19第一節(jié)樣品的采取和保存總體:分析對(duì)象的全體一、幾個(gè)基本概念樣品:從總體中抽出部分個(gè)體,代表全部待分析物料的平均組成。采樣目的:獲得能代表全部待分析總體平均組成的樣品。采樣:按一定規(guī)則,從總體中抽取分析樣品的過(guò)程。第三頁(yè),共四十三頁(yè),2022年,8月28日2022/12/19二、樣品采集的原則代表性、典型性和適時(shí)性1.代表性采集的樣品必須能充分代表被分析總體的性質(zhì)2.典型性根據(jù)檢測(cè)目的,采集的樣品必須能充分說(shuō)明此目的的典型樣品3.適時(shí)性某些樣品的采集要有嚴(yán)格的時(shí)間概念第四頁(yè),共四十三頁(yè),2022年,8月28日2022/12/19非典時(shí)期的支原體與衣原體之爭(zhēng)

當(dāng)廣東開(kāi)始非典流行時(shí),國(guó)內(nèi)權(quán)威機(jī)構(gòu)報(bào)道非典是由“衣原體”導(dǎo)致的時(shí)候,我的第一個(gè)反應(yīng)是懷疑。但基于以下理由覺(jué)得迷惑:一、依據(jù)明顯缺乏科學(xué)性:醫(yī)學(xué)研究絕對(duì)不是這樣的,僅僅從幾個(gè)尸解病人的標(biāo)本中發(fā)現(xiàn)衣原體“包涵體”(在細(xì)胞漿或細(xì)胞核內(nèi)形成的具有一定形態(tài)的病變結(jié)構(gòu))就倉(cāng)促下結(jié)論是違背科學(xué)精神的。二、治療效果:如果非典真的是衣原體造成的,那就一點(diǎn)也不可怕了。因?yàn)橹灰_使用抗菌素,衣原體感染是可以控制的。當(dāng)時(shí)那么多國(guó)內(nèi)甚至國(guó)際一流的專(zhuān)家會(huì)不考慮到這個(gè)?第五頁(yè),共四十三頁(yè),2022年,8月28日2022/12/19后來(lái)的發(fā)展證實(shí)了我的看法,相信國(guó)內(nèi)很多醫(yī)務(wù)人員也經(jīng)歷過(guò)和我一樣的疑惑。那么,為什么在非典的病人標(biāo)本上會(huì)發(fā)現(xiàn)衣原體“包涵體”呢?這其實(shí)是病原學(xué)研究時(shí),最基本的需要分辨的,即“宿主”還是“過(guò)客”這一最基本的問(wèn)題。“宿主”是指病原體是造成疾病的病因;“過(guò)客”是指病原體只是在疾病出現(xiàn)后,由于環(huán)境的改變,適合它在此繁殖,即上面文章中所說(shuō)的“繼發(fā)感染”。具體到上述的在非典的病人標(biāo)本上會(huì)發(fā)現(xiàn)衣原體“包涵體”的原因是這樣:非典病人受到冠狀病毒的侵犯后,肺部環(huán)境發(fā)生了巨大的變化。原來(lái)衣原體無(wú)法生存的地方變成衣原體生長(zhǎng)的“沃土”,從而出現(xiàn)了繼發(fā)衣原體感染。第六頁(yè),共四十三頁(yè),2022年,8月28日2022/12/19三、各類(lèi)樣品的采集方法(一)空氣大氣監(jiān)測(cè)工作場(chǎng)所空氣中有害成分監(jiān)測(cè)室內(nèi)空氣質(zhì)量監(jiān)測(cè)公共場(chǎng)所空氣質(zhì)量監(jiān)測(cè)樣品的采集方法直接采集濃縮采集第七頁(yè),共四十三頁(yè),2022年,8月28日2022/12/191.直接采集法容器預(yù)先抽真空,在現(xiàn)場(chǎng)采集樣品;或通過(guò)采樣泵將氣體樣品直接引進(jìn)容器。2.濃縮采集法(富集法)空氣樣品中待測(cè)組分濃度較低時(shí),使用此法。溶液吸收法固體吸收劑阻留法濾紙濾膜阻留法冷阱收集法第八頁(yè),共四十三頁(yè),2022年,8月28日2022/12/193.采樣裝置收集器流量計(jì)采樣動(dòng)力基本組成(二)水見(jiàn)書(shū)p10第九頁(yè),共四十三頁(yè),2022年,8月28日2022/12/19(三)食品檢測(cè)項(xiàng)目營(yíng)養(yǎng)成分功效成分鮮度添加劑污染物取樣方法隨機(jī)取樣系統(tǒng)取樣指定代表性樣品第十頁(yè),共四十三頁(yè),2022年,8月28日2022/12/19小龍蝦致肌溶解肌溶解(rhabdomyolysis)是當(dāng)肌肉受傷時(shí),肌肉中的一種叫做肌球素(Myoglobin)的蛋白質(zhì)被釋放出來(lái),進(jìn)入血液循環(huán)系統(tǒng)。這種蛋白質(zhì)在腎臟會(huì)被過(guò)濾,并可能被分解成有毒物質(zhì),危害腎臟,這可能就是為啥我們會(huì)看到醬油尿。第十一頁(yè),共四十三頁(yè),2022年,8月28日2022/12/19造成肌溶解的原因有很多,常見(jiàn)的是酗酒、外傷、癲癇、機(jī)體過(guò)勞、肌肉缺血性萎縮、遺傳原因等等,但某些藥物也可能造成這種病,幾乎每個(gè)地方都提到的是降膽固醇藥statins、可卡因、安非他明、海洛因,等等。第十二頁(yè),共四十三頁(yè),2022年,8月28日2022/12/19龍蝦中毒引發(fā)的肌肉損傷和肌紅蛋白血癥有如下可能原因:

1)龍蝦被重金屬污染,

2)龍蝦被某種細(xì)菌污染,

3)龍蝦中還有某種化學(xué)物質(zhì)能抑制線粒體的功能,具體原因等待衛(wèi)生部的調(diào)查。第十三頁(yè),共四十三頁(yè),2022年,8月28日2022/12/19(四)生物材料生物材料:人或動(dòng)物的體液、排泄物、分泌物和臟器等1.血包括:全血、血漿和血清采樣部位:手指血、耳垂血和靜脈血保存方法:置于聚四氟乙烯、聚乙烯或硬質(zhì)玻璃管中密塞,4℃下保存,長(zhǎng)期保存在-20℃。第十四頁(yè),共四十三頁(yè),2022年,8月28日2022/12/192.尿取樣方法24小時(shí)混合尿晨尿某時(shí)間的一次尿采樣儀器:聚乙烯瓶或用硝酸溶液浸泡過(guò)的玻璃瓶3.毛發(fā)取樣方法:枕部距頭皮2cm左右的發(fā)段4.組織取樣:肝、腎、肺等臟器,冷凍保存第十五頁(yè),共四十三頁(yè),2022年,8月28日2022/12/19第二節(jié)樣品的處理一、樣品處理的目的和要求1.樣品處理的目的①使被測(cè)組分從復(fù)雜樣品中分離出來(lái),制成可被測(cè)定的形式。④可通過(guò)衍生化使難測(cè)定物質(zhì)轉(zhuǎn)化為易于測(cè)定的物質(zhì)形式②去除干擾測(cè)定的物質(zhì)③必要時(shí)進(jìn)行濃縮富集第十六頁(yè),共四十三頁(yè),2022年,8月28日2022/12/192.樣品處理的要求①必須使樣品分解完全,回收率足夠高②不能引入干擾測(cè)定的物質(zhì)和待測(cè)物質(zhì)③方法簡(jiǎn)單易行,速度快二、樣品溶液的制備方法1.溶解法水溶法酸浸出法堿浸出法有機(jī)溶劑浸出法第十七頁(yè),共四十三頁(yè),2022年,8月28日2022/12/192.分解法低溫灰化法(高頻等離子體技術(shù))高溫灰化法(450-550℃)硝酸-硫酸法硝酸-高氯酸(H2O2)法硝酸-硫酸-高氯酸法密封加壓消化法干灰化法濕消化法微波溶樣法部分分解法第十八頁(yè),共四十三頁(yè),2022年,8月28日2022/12/19三、常用的分離與富集方法問(wèn)題的提出實(shí)際樣品的復(fù)雜性干擾的消除控制實(shí)驗(yàn)條件使用掩蔽劑分離分析方法靈敏度的局限性滿足對(duì)靈敏度的要求選擇靈敏度高的方法富集第十九頁(yè),共四十三頁(yè),2022年,8月28日2022/12/19例:海水中U(IV)的測(cè)定C=1~3g/L難以測(cè)定富集為C=100~200

g/L可以測(cè)定分離效果干擾成分減少至不再干擾待測(cè)組分有效回收第二十頁(yè),共四十三頁(yè),2022年,8月28日2022/12/19分離效果的好壞用回收率衡量常量組分,含量

>1%,回收率>99%

以上微量組分,含量

<0.01%,回收率>95%

或更低第二十一頁(yè),共四十三頁(yè),2022年,8月28日2022/12/19常用分離方法沉淀與共沉淀分離法溶劑萃取分離法固相萃取與微萃取法色譜分超臨界流體萃取法揮發(fā)和蒸餾分離法膜分離法第二十二頁(yè),共四十三頁(yè),2022年,8月28日2022/12/19(一)溶劑萃取分離法在含有被分離物質(zhì)的水溶液中,加入萃取劑和與水不相混溶的有機(jī)溶劑,振蕩,利用物質(zhì)在兩相中的分配不同的性質(zhì),使一些組分進(jìn)入有機(jī)相中,使另一些組分仍留在水相中,從而達(dá)到分離的目的。第二十三頁(yè),共四十三頁(yè),2022年,8月28日2022/12/191.萃取分離的基本原理物質(zhì)親水性疏水性離子型化合物極性共價(jià)鍵化合物弱極性或非極性相互轉(zhuǎn)換萃取分離的實(shí)質(zhì)將待萃取組分由親水性轉(zhuǎn)化為疏水性,使其萃入有機(jī)相中。例.8-羥基喹啉-CHCl3對(duì)Al3+的萃取萃取的反過(guò)程(將組分從有機(jī)溶液中萃取到水溶液中)。反萃取第二十四頁(yè),共四十三頁(yè),2022年,8月28日2022/12/19例.8-羥基喹啉-CHCl3對(duì)Al3+

的萃取3親水疏水溶于CHCl38-羥基喹啉CHCl3萃取劑溶劑水合離子的正電性被中和,親水的水分子被疏水有機(jī)大分子取代第二十五頁(yè),共四十三頁(yè),2022年,8月28日2022/12/19(1)分配系數(shù)有機(jī)溶劑從水相中萃取溶質(zhì)A,若A在兩相中的存在形態(tài)相同,平衡時(shí),在有機(jī)相的濃度為[A]o,水相的濃度為[A]w之比,用KD表示。A(w)A(o)萃取平衡分配定律第二十六頁(yè),共四十三頁(yè),2022年,8月28日2022/12/19(2)分配比

如果溶質(zhì)A在兩相中存在多種型體,如離解、締合、絡(luò)合、聚合等,則把溶質(zhì)A在兩相中各種型體的濃度之和相比,稱為分配比D。溶質(zhì)在兩相中存在形式完全相同時(shí),D=KD。兩相體積相等時(shí),若D>1,溶質(zhì)進(jìn)入有機(jī)相的量多。在實(shí)際工作中,一般要求D至少大于10。

第二十七頁(yè),共四十三頁(yè),2022年,8月28日2022/12/19(3)萃取率E萃取效率和分配比的關(guān)系是:式中Vw/Vo稱為相比。萃取率由分配比和相比決定第二十八頁(yè),共四十三頁(yè),2022年,8月28日2022/12/19在實(shí)際分離工作中,萃取率E最有意義。最常采用--等體積溶劑進(jìn)行萃取,即相比為1,此時(shí)萃取率可寫(xiě)成:如果D值較小而要得到較高的萃取效率,可以采取連續(xù)多次萃取。一次萃?。篍>90%以上,D>10E>90%以上,D>100第二十九頁(yè),共四十三頁(yè),2022年,8月28日2022/12/19

n次萃取后式中,n為萃取次數(shù),m為被萃取物質(zhì)的總量,mn為經(jīng)n次萃取后留在水相中被萃取物質(zhì)的量,Vw為水相體積,Vo為每次萃取所用有機(jī)溶劑的體積。第三十頁(yè),共四十三頁(yè),2022年,8月28日2022/12/19例2.

用8-羥基喹啉氯仿溶液,于pH=7.0時(shí)從水溶液中萃取La3+,已知它在兩相中的分配比D=43。現(xiàn)取含La3+為lmg·mL-1的水溶液20.00mL,用20.00mL萃取液,計(jì)算一次萃取和分兩次萃?。看?0.00mL)的萃取效率。解:一次萃取第三十一頁(yè),共四十三頁(yè),2022年,8月28日2022/12/19兩次萃取上例結(jié)果說(shuō)明,用同樣數(shù)量的萃取液,分多次萃取比一次萃取的效率高。第三十二頁(yè),共四十三頁(yè),2022年,8月28日2022/12/192.重要的萃取體系根據(jù)組分的性質(zhì)不同,萃取體系分:

用于萃取的有機(jī)溶劑稱為萃取溶劑簡(jiǎn)單分子萃取體系螯合物萃取體系離子締合物萃取體系溶劑化合物萃取體系第三十三頁(yè),共四十三頁(yè),2022年,8月28日2022/12/193.萃取條件的選擇

萃取溶劑的選擇溶液酸度的選擇其它試劑的選擇4.萃取操作第三十四頁(yè),共四十三頁(yè),2022年,8月28日2022/12/19(二)固相萃取法

Solid

phaseextraction,SPE固相萃?。阂?固分離分離載體:一般為硅氧基甲烷,顆粒直徑40-80μm分離原理:

利用樣品中被分離組分與萃取柱中固定相的作用力(吸附、分配和離子交換等)不同而進(jìn)行分離。固相萃取柱第三十五頁(yè),共四十三頁(yè),2022年,8月28日2022/12/19固相萃取裝置:由柱管、篩板和固定相三部分組成第三十六頁(yè),共四十三頁(yè),2022年,8月28日2022/12/19

圖2-3固相萃取過(guò)程四個(gè)步驟:活化裝樣清洗洗脫第三十七頁(yè),共四十三頁(yè),2022年,8月28日2022/12/19選適宜SPE管加入樣品溶液到載體洗滌除去共存物洗脫待分離物質(zhì)潤(rùn)濕載體固相萃取法一般程序?yàn)椋汗滔噍腿≈谌隧?yè),共四十三頁(yè),2022年,8月28日2022/12/19始于1992年,加拿大的JanuszPawliszyn(三)固相微萃取技術(shù)第三十九頁(yè),共四十三頁(yè),2022年,8月28日202

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