本科生實驗講解課件

實驗一培養(yǎng)基的制作、目的要求了解培養(yǎng)基的配制原理,掌握培養(yǎng)基的制備方法。二、基本原理在植物病理學(xué)研究工作中經(jīng)常要使用各種不同的培養(yǎng)基。培養(yǎng)基是按照生物生長繁殖所需要的各種營養(yǎng)用人工方法配制而成的營養(yǎng)基質(zhì)。在植物病理學(xué)研究中,最常用培養(yǎng)基有馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)基,主要用于分離培養(yǎng)病原真菌。在培養(yǎng)基配令令?令令制完之后,必須經(jīng)過滅菌,以便徹底殺死其中原有的一切微生物。實驗一培養(yǎng)基的制作1、材料、試劑與儀器1.材料馬鈴薯。2.試劑葡萄糖、瓊脂等。3.儀器與用品高壓蒸汽滅菌鍋、pH試紙(或酸度計)、試管、鋁鍋、攪拌棒、三角瓶、燒杯、漏斗、量筒、紗布、棉花、天平等四、操作步驟PDA培養(yǎng)基(馬鈴著葡萄糖培養(yǎng)基)配方去皮馬鈴著200g;葡萄糖20g;瓊脂15~20g;蒸餾水1000mnd自然pH,在PDA培養(yǎng)基配方中也可用蔗糖代替葡萄糖,這樣配制的培養(yǎng)基也稱為PSA培養(yǎng)基。、材料、試劑與儀器21.稱量:去皮馬鈴薯200g,葡萄糖20g,瓊脂15-20g。提示瓊脂加入的量取決于瓊脂的質(zhì)量,質(zhì)量好的15g就夠了,質(zhì)量差的應(yīng)適當(dāng)増加。另外,在夏天氣溫較高時,適當(dāng)增加用量。2.將馬鈴薯切成小塊,放入鍋中,加水1000mnl,煮沸30min。用紗布濾去馬鈴薯殘渣。3.將馬鈴薯濾液放回鍋中,加λ瓊脂,加熱熔化。提示在瓊脂融化的過程中,需要用玻璃棒不斷攪拌,并控制火力不要使培養(yǎng)基溢出或燒焦。4.加入葡萄糖。葡萄糖容溶解后,加入適量的水以補(bǔ)充加熱過程中損失的水分,定容至1000ml提示通常在制作培養(yǎng)基的鍋內(nèi)用紅藍(lán)鉛筆標(biāo)記出不同體積的刻度,如1000ml,2000m1等,在定容時直接將水加至已標(biāo)記的刻度即可。1.稱量:去皮馬鈴薯200g,葡萄糖20g,瓊脂15-20g35.分裝根據(jù)不同的實驗?zāi)康?可將配制的培養(yǎng)基分裝于試管內(nèi)或三角瓶內(nèi)。分裝試管,其量為管高的1/5,滅菌后制成斜面。分裝三角瓶的容量以不超過三角瓶容積之一半為宜。6.封口在管口或瓶口用塑料膜封口。也可以用棉塞,心要用未脫脂的經(jīng)彈松的棉花,棉塞可過濾空氣,防止雜菌侵入并可減緩培養(yǎng)基水分的蒸發(fā),故在植物病理學(xué)研究工作中普遍使用。7.包扎加塞后,將試管用線繩捆好,再在棉塞外包層牛皮紙,以防止滅菌時冷凝水潤濕棉塞,其外再用道線繩扎好。用記號筆注明培養(yǎng)基名稱、配制日期、令令?令令組別、制作人等。5.分裝根據(jù)不同的實驗?zāi)康?可將配制的培養(yǎng)基分裝48.滅菌將培養(yǎng)基以0.1Mpa,121C,高壓蒸氣滅菌2mino9.擱置斜面將滅菌的試管培養(yǎng)基冷至50C左右,將試管口端擱在玻棒或其他合適高度的器具上,擱置的斜面長度以不超過試管總長的一半為宜。培養(yǎng)基經(jīng)滅菌后,必須放在37℃溫箱培養(yǎng)24h,無菌生長者方可使用邕爸爸aa五、所需時間流程培養(yǎng)基配制高壓滅菌培養(yǎng)觀察六、實驗作業(yè)各組上交按計劃制備的培養(yǎng)基。七、思考題1為什么有的培養(yǎng)基要調(diào)pH值,有的可以不調(diào)2加壓蒸氣滅菌為什比干熱滅菌所要求的溫度低、時間短?3.想一想,試一試,將幾只試管包扎在一起比較牢固?8.滅菌將培養(yǎng)基以0.1Mpa,121C,高壓蒸氣滅菌2mi5實驗三植物病害的調(diào)查通過植物病害的調(diào)查,了解植物病害種類、分布和發(fā)生情況,是掌握病害的發(fā)生發(fā)展規(guī)律,開展病害防治的基礎(chǔ)工作。通過調(diào)查研究,才能制定防治策略,提出切合實際,行之有效的防治方法與適當(dāng)?shù)姆乐芜m期。防治前了解情況才能做到心中有數(shù),防治后調(diào)查可以檢查防治效果及存在問題。實驗三植物病害的調(diào)查6、目的要求了解植物病害田間取樣的各種方法和掌握調(diào)查病情的方法,學(xué)會計算發(fā)病率和病情指數(shù),以及進(jìn)一步估計因病造成的損失等。、材料和用具大棚蔬菜病害;筆記本、鉛筆、米尺。、內(nèi)容與方法病害調(diào)查可分為一般調(diào)查和重點調(diào)查兩類,根據(jù)調(diào)查目的不同,再決定調(diào)查的方法令令?令令、目的要求73.1一般調(diào)查當(dāng)一個地區(qū)有關(guān)病害發(fā)生情況的資料很少可先進(jìn)行一般調(diào)查,主要是了解病害的分布和發(fā)病程度,調(diào)查的面要廣,并且要有代表性。3.2重點調(diào)查經(jīng)過一般調(diào)查發(fā)現(xiàn)的重要病害,可作為重點調(diào)查的對象,深入了解它的分布,發(fā)病率、損失率、生邕爸爸aa態(tài)環(huán)境和防治效果等。重點調(diào)查的次數(shù)要多一些,發(fā)病率的計算也要求比較準(zhǔn)確。3.3植物病害田間調(diào)查的時間和次數(shù):根據(jù)調(diào)查目的來確定。34取樣的方法與數(shù)量(1)棋盤式:(2)對角線取樣法(3)平行線跳躍式取樣法(抽行式):3.1一般調(diào)查當(dāng)一個地區(qū)有關(guān)病害發(fā)生情況的資料很少8四、作業(yè)將你所調(diào)查的病害資料列表。調(diào)查地點調(diào)查日期調(diào)查人病害名稱發(fā)病率*第一田第二田第三田第四田第五田平均黃瓜白粉病黃瓜霜霉病黃瓜角斑病番茄白粉病番茄灰霉病番茄葉霉病番茄晚疫病番茄早疫病茄子灰霉病茄子綿疫病其他*重要病害記載發(fā)病率,次要病害和很少發(fā)現(xiàn)的病害記載有無四、作業(yè)將你所調(diào)查的病害資料列表。9實驗三病害標(biāo)本的采集及病原菌的分離分離材料的選擇對分離培養(yǎng)的成敗有著決定的影響,因為在感病植物受害部位的外部,有多種腐生菌,為減少腐生茵的污染,分離所用的病害材料應(yīng)盡可能新鮮,并且最好在病健交接處選材取樣。病、健交接處,除材料新鮮,污染的可能性小外,病原茵的生活力強(qiáng)、比較活躍,容易分離成功。令令?令令實驗三病害標(biāo)本的采集及病原菌的分離10本科生實驗講解課件11本科生實驗講解課件12本科生實驗講解課件13本科生實驗講解課件14本科生實驗講解課件15本科生實驗講解課件16本科生實驗講解課件17本科生實驗講解課件18本科生實驗講解課件19本科生實驗講解課件20本科生實驗講解課件21本科生實驗講解課件22本科生實驗講解課件23本科生實驗講解課件24本科生實驗講解課件25本科生實驗講解課件26本科生實驗講解課件27本科生實驗講解課件28本科生實驗講解課件29本科生實驗講解課件30本科生實驗講解課件31本科生實驗講解課件32本科生實驗講解課件33本科生實驗講解課件34本科生實驗講解課件35本科生實驗講解課件36本科生實驗講解課件37本科生實驗講解課件38本科生實驗講解課件39本科生實驗講解課件40實驗一培養(yǎng)基的制作、目的要求了解培養(yǎng)基的配制原理,掌握培養(yǎng)基的制備方法。二、基本原理在植物病理學(xué)研究工作中經(jīng)常要使用各種不同的培養(yǎng)基。培養(yǎng)基是按照生物生長繁殖所需要的各種營養(yǎng)用人工方法配制而成的營養(yǎng)基質(zhì)。在植物病理學(xué)研究中,最常用培養(yǎng)基有馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)基,主要用于分離培養(yǎng)病原真菌。在培養(yǎng)基配令令?令令制完之后,必須經(jīng)過滅菌,以便徹底殺死其中原有的一切微生物。實驗一培養(yǎng)基的制作41、材料、試劑與儀器1.材料馬鈴薯。2.試劑葡萄糖、瓊脂等。3.儀器與用品高壓蒸汽滅菌鍋、pH試紙(或酸度計)、試管、鋁鍋、攪拌棒、三角瓶、燒杯、漏斗、量筒、紗布、棉花、天平等四、操作步驟PDA培養(yǎng)基(馬鈴著葡萄糖培養(yǎng)基)配方去皮馬鈴著200g;葡萄糖20g;瓊脂15~20g;蒸餾水1000mnd自然pH,在PDA培養(yǎng)基配方中也可用蔗糖代替葡萄糖,這樣配制的培養(yǎng)基也稱為PSA培養(yǎng)基。、材料、試劑與儀器421.稱量:去皮馬鈴薯200g,葡萄糖20g,瓊脂15-20g。提示瓊脂加入的量取決于瓊脂的質(zhì)量,質(zhì)量好的15g就夠了,質(zhì)量差的應(yīng)適當(dāng)増加。另外,在夏天氣溫較高時,適當(dāng)增加用量。2.將馬鈴薯切成小塊,放入鍋中,加水1000mnl,煮沸30min。用紗布濾去馬鈴薯殘渣。3.將馬鈴薯濾液放回鍋中,加λ瓊脂,加熱熔化。提示在瓊脂融化的過程中,需要用玻璃棒不斷攪拌,并控制火力不要使培養(yǎng)基溢出或燒焦。4.加入葡萄糖。葡萄糖容溶解后,加入適量的水以補(bǔ)充加熱過程中損失的水分,定容至1000ml提示通常在制作培養(yǎng)基的鍋內(nèi)用紅藍(lán)鉛筆標(biāo)記出不同體積的刻度,如1000ml,2000m1等,在定容時直接將水加至已標(biāo)記的刻度即可。1.稱量:去皮馬鈴薯200g,葡萄糖20g,瓊脂15-20g435.分裝根據(jù)不同的實驗?zāi)康?可將配制的培養(yǎng)基分裝于試管內(nèi)或三角瓶內(nèi)。分裝試管,其量為管高的1/5,滅菌后制成斜面。分裝三角瓶的容量以不超過三角瓶容積之一半為宜。6.封口在管口或瓶口用塑料膜封口。也可以用棉塞,心要用未脫脂的經(jīng)彈松的棉花,棉塞可過濾空氣,防止雜菌侵入并可減緩培養(yǎng)基水分的蒸發(fā),故在植物病理學(xué)研究工作中普遍使用。7.包扎加塞后,將試管用線繩捆好,再在棉塞外包層牛皮紙,以防止滅菌時冷凝水潤濕棉塞,其外再用道線繩扎好。用記號筆注明培養(yǎng)基名稱、配制日期、令令?令令組別、制作人等。5.分裝根據(jù)不同的實驗?zāi)康?可將配制的培養(yǎng)基分裝448.滅菌將培養(yǎng)基以0.1Mpa,121C,高壓蒸氣滅菌2mino9.擱置斜面將滅菌的試管培養(yǎng)基冷至50C左右,將試管口端擱在玻棒或其他合適高度的器具上,擱置的斜面長度以不超過試管總長的一半為宜。培養(yǎng)基經(jīng)滅菌后,必須放在37℃溫箱培養(yǎng)24h,無菌生長者方可使用邕爸爸aa五、所需時間流程培養(yǎng)基配制高壓滅菌培養(yǎng)觀察六、實驗作業(yè)各組上交按計劃制備的培養(yǎng)基。七、思考題1為什么有的培養(yǎng)基要調(diào)pH值,有的可以不調(diào)2加壓蒸氣滅菌為什比干熱滅菌所要求的溫度低、時間短?3.想一想,試一試,將幾只試管包扎在一起比較牢固?8.滅菌將培養(yǎng)基以0.1Mpa,121C,高壓蒸氣滅菌2mi45實驗三植物病害的調(diào)查通過植物病害的調(diào)查,了解植物病害種類、分布和發(fā)生情況,是掌握病害的發(fā)生發(fā)展規(guī)律,開展病害防治的基礎(chǔ)工作。通過調(diào)查研究,才能制定防治策略,提出切合實際,行之有效的防治方法與適當(dāng)?shù)姆乐芜m期。防治前了解情況才能做到心中有數(shù),防治后調(diào)查可以檢查防治效果及存在問題。實驗三植物病害的調(diào)查46、目的要求了解植物病害田間取樣的各種方法和掌握調(diào)查病情的方法,學(xué)會計算發(fā)病率和病情指數(shù),以及進(jìn)一步估計因病造成的損失等。、材料和用具大棚蔬菜病害;筆記本、鉛筆、米尺。、內(nèi)容與方法病害調(diào)查可分為一般調(diào)查和重點調(diào)查兩類,根據(jù)調(diào)查目的不同,再決定調(diào)查的方法令令?令令、目的要求473.1一般調(diào)查當(dāng)一個地區(qū)有關(guān)病害發(fā)生情況的資料很少可先進(jìn)行一般調(diào)查,主要是了解病害的分布和發(fā)病程度,調(diào)查的面要廣,并且要有代表性。3.2重點調(diào)查經(jīng)過一般調(diào)查發(fā)現(xiàn)的重要病害,可作為重點調(diào)查的對象,深入了解它的分布,發(fā)病率、損失率、生邕爸爸aa態(tài)環(huán)境和防治效果等。重點調(diào)查的次數(shù)要多一些,發(fā)病率的計算也要求比較準(zhǔn)確。3.3植物病害田間調(diào)查的時間和次數(shù):根據(jù)調(diào)查目的來確定。34取樣的方法與數(shù)量(1)棋盤式:(2)對角線取樣法(3)平行線跳躍式取樣法(抽行式):3.1一般調(diào)查當(dāng)一個地區(qū)有關(guān)病害發(fā)生情況的資料很少48四、作業(yè)將你所調(diào)查的病害資料列表。調(diào)查地點調(diào)查日期調(diào)查人病害名稱發(fā)病率*第一田第二田第三田第四田第五田平均黃瓜白粉病黃瓜霜霉病黃瓜角斑病番茄白粉病番茄灰霉病番茄葉霉病番茄晚疫病番茄早疫病茄子灰霉病茄子綿疫病其他*重要病害記載發(fā)病率,次要病害和很少發(fā)現(xiàn)的病害記載有無四、作業(yè)將你所調(diào)查的病害資料列表。49實驗三病害標(biāo)本的采集及病原菌的分離分離材料的選擇對分離培養(yǎng)的成敗有著決定的影響,因為在感病植物受害部位的外部,有多種腐生菌,為減少腐生茵的污染,分離所用的病害材料應(yīng)盡可能新鮮,并且最好在病健交接處選材取樣。病、健交接處,除材料新鮮,污染的可能性小外,病原茵的生活力強(qiáng)、比較活躍,容易分離成功。令令?令令實驗三病害標(biāo)本的采集及病原菌的分離50本科生實驗講解課件51本科生實驗講解課件52本科生實驗講解課件53本科生實驗講解課件54本科生實驗講解課件55本科生實驗講解課件56本科生實驗講解課件57本科生實驗講解課件58本科生實驗講解課件59本科生實驗講