蛋白表達(dá)不同檢測(cè)方式的比較和分析

蛋白表達(dá)不同檢測(cè)方式的比較和分析免疫組化法（immunohistochemistry）原理：免疫組化，是應(yīng)用免疫學(xué)基本原理——抗原抗體反應(yīng)，即抗原與抗體特異性結(jié)合的原理，通過化學(xué)反應(yīng)使標(biāo)記抗體的顯色劑（熒光素、酶、金屬離子、同位素）顯色來確定組織細(xì)胞內(nèi)抗原（多肽和蛋白質(zhì)），對(duì)其進(jìn)行定位、定性及定量的研究，稱為免疫組織化學(xué)技術(shù)（immunohistochemistry）或免疫細(xì)胞化學(xué)技術(shù)（immunocytochemistry）。特點(diǎn)：是融合了免疫學(xué)原理（抗原抗體特異性結(jié)合）和組織學(xué)技術(shù)（組織的取材、固定、包埋、切片、脫蠟、水化等），通過化學(xué)反應(yīng)使標(biāo)記抗體的顯色劑（熒光素、酶、金屬離子、同位素）顯色，來對(duì)組織（細(xì)胞）內(nèi)抗原進(jìn)行定位、定性及定量的研究（主要是定位）。樣本是細(xì)胞或組織，要在顯微鏡下觀察結(jié)果，可能出現(xiàn)膜陽(yáng)性、質(zhì)陽(yáng)性和核陽(yáng)性。蛋白免疫印跡（WesternBlot）原理:蛋白質(zhì)印跡法是將電泳分離后的細(xì)胞或組織總蛋白質(zhì)從凝膠轉(zhuǎn)移到固相支持物NC膜或PVDF膜上，然后用特異性抗體檢測(cè)某特定抗原的一種蛋白質(zhì)檢測(cè)技術(shù)。特點(diǎn)：先要進(jìn)行SDS,然后將分離開的蛋白質(zhì)樣品用電轉(zhuǎn)儀轉(zhuǎn)移到固相載體上,而后利用抗原-抗體-標(biāo)記物顯色來檢測(cè)樣品，可以用于定性和半定量。ELISA檢測(cè)原理：酶聯(lián)免疫吸附劑測(cè)定法，簡(jiǎn)稱酶聯(lián)免疫法，或者ELISA法，它的中心就是讓抗體與酶復(fù)合物結(jié)合，然后通過顯色來檢測(cè)。特點(diǎn)：用到了免疫學(xué)原理和化學(xué)反應(yīng)顯色，待測(cè)的樣品多是血清、血漿、尿液、細(xì)胞或組織培養(yǎng)上清液，因而沒有用到組織包埋、切片等技術(shù)，這是與免疫組化的主要區(qū)別，操作上開始需要將抗原或抗體結(jié)合到固相載體表面，從而使后來形成的抗原-抗體-酶-底物復(fù)合物粘附在載體上，這就是“吸附”的含義。免疫組化和elisa所用到的原理大致相同，只是因?yàn)樗鶛z測(cè)的樣品不同，從而在操作方法上有所不同。Elisa多用于定量分析，其靈敏度非常高。

3種蛋白檢測(cè)水平的比較蛋白檢測(cè)方式免疫組化法Westernblot法ELISA試劑盒法相同點(diǎn)原理：抗體-抗原結(jié)合反應(yīng)不同點(diǎn)樣品類型組織或細(xì)胞組織或細(xì)胞血清、血漿、尿液、細(xì)胞或組織培養(yǎng)上清液分析方式定位、定性及定量的研究（主要是定位，定位敏感性遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于Westernblot法）可以用于定性和半定量，定量較免疫組化法準(zhǔn)確多用于定量分析，其靈敏度非常高觀察結(jié)果免疫組化圖（膜陽(yáng)性、質(zhì)陽(yáng)性和核陽(yáng)性）電泳圖（著色的位置和著色深度）蛋白濃度優(yōu)點(diǎn)特異性強(qiáng)、敏感性高、定位準(zhǔn)確、形態(tài)與功能相結(jié)合分析容量大、敏感度高、特異性強(qiáng)靈敏、特異、簡(jiǎn)單、快速、穩(wěn)定、易于自動(dòng)化操作及節(jié)省實(shí)驗(yàn)經(jīng)費(fèi)應(yīng)用范圍⑴惡性腫瘤的診斷與鑒別診斷；⑵確定轉(zhuǎn)移性惡性腫瘤的原發(fā)部位；⑶對(duì)某類腫瘤進(jìn)行進(jìn)步的病理分型；⑷軟組織腫瘤的治療一般需根據(jù)正確的組織學(xué)分類，因其種類多、組織形態(tài)相像，有時(shí)難以區(qū)分其組織來源，應(yīng)用多種標(biāo)志進(jìn)行免疫組化研究對(duì)軟組織腫瘤的診斷是不可缺少的；⑸發(fā)現(xiàn)微小轉(zhuǎn)移灶，有助于臨床治療方案的確定，包括手術(shù)范圍的確定。⑹為臨床提供治療方案的選擇。是檢測(cè)蛋白質(zhì)特性、表達(dá)與分布的一種最常用的方法。⑴組織抗原的定性定量檢測(cè)；⑵多肽分子的質(zhì)里測(cè)定；⑶病毒的抗體（或抗原）檢測(cè)；⑷疾病早期診斷是分泌性蛋白檢測(cè)首選方法之一。⑴免疫酶染色各種細(xì)胞內(nèi)成份的定位；⑵研究抗酶抗體的合成；⑶顯現(xiàn)微量的免疫沉淀反應(yīng)。⑷定量檢測(cè)體液中抗原或抗體成份。【多種病原微生物所引起的傳染病、寄生蟲病及非傳染病等方面的免疫診斷】各組檢測(cè)方法之間的差別及特點(diǎn)：以下是western和ELISA的區(qū)別:westernblotting可以看到特異性的條帶，但是定量比較煩ELISA可以直接讀出濃度，但是如果抗體有非特異性結(jié)合，那得到的數(shù)值就不可信。WB只能半定量，但是可以檢測(cè)細(xì)胞膜蛋白，這點(diǎn)ELISA做不到ELISA可用定量方法檢測(cè)蛋白，也就是說可以觀察不同濃度刺激物對(duì)目的蛋白的影響WB所檢測(cè)的一般是抗原，而ELISA抗原抗體都可以檢測(cè)。WB所檢測(cè)的抗原可以知道其分子量的大小，或是否是多聚體、降解產(chǎn)物等，一句話，WB可以確定所用抗體是與那種蛋白起作用的；而ELISA無能為力。WB所適用的一抗一般是線性位點(diǎn)的，ELISA線性或構(gòu)象型抗體都可以使用。從另一個(gè)意義上講，WB可以做抗體是線性位點(diǎn)還是構(gòu)象型位點(diǎn)的補(bǔ)充判定，而ELISA不行。WB一次處理量就是一塊膠版，10-20個(gè)樣品最多了。ELISA—塊96孔板一次可以處理96個(gè)樣本，可以設(shè)置多個(gè)復(fù)孔、對(duì)照、梯度樣等來提高檢測(cè)的可信度。WB操作常見的非特異性條帶，膜本底差，顯色不好等缺點(diǎn)在ELISA上表現(xiàn)得要好得多。MMF9和CB:…厲■■■"■卞」《HMGB1、MMP-9和CEA在非小細(xì)胞肺癌組織中的表達(dá)及臨床意義》中英文實(shí)例分析：一、免疫組化（免疫組化圖一陽(yáng)性表達(dá)率）1.3免疫組化法檢測(cè)肺癌組織及正常肺組織中HMGB1和MWP-9的表達(dá)及臨床意義材料和方鍛組織標(biāo)本選擇W0-2012年在我院診斷的經(jīng)T-術(shù)町除的L畀例＜男67例,女33例.鱗酗11例，腺刑刃例.大細(xì)胞餅3例，綏腺鴉4例*1 ][期悄例*川IVJtH5a例）非小細(xì)胞肺癌想嗇石蠟組織標(biāo)本用丁免疫組侶A檢測(cè)仙佃「我中50例（特肌制"女w例，嶙彌沏例?|甌蜒M例，大細(xì)胞袒I例?鱗腺梶2例訓(xùn)時(shí)檢測(cè)WMFy麗例擁倉(cāng)對(duì)常爼織作為討釀加躺患占竹期劉!艮內(nèi)科學(xué)?通過手術(shù)中切除腫海大小、謝內(nèi)湫巴站轉(zhuǎn)移情況以履內(nèi)科査悴、腳部、顱睢CT.腹部超尹、廿打揭確宦臨床分期.

I.3；2M用13.2-1非小！ffl船薛癌中仙卿的班達(dá)HMGB4MMlP-4|!W67初女1?4h2D522?43人出胞務(wù)31M期4ZsiHMGB4MMlP-4|!W67初女1?4h2D522?43人出胞務(wù)31M期4Zsim-hiU!542i⑨井疣爼駅和不簾蛆級(jí)的比軟man在肺JSSfl捉中"主痊衷達(dá)于曲就中，細(xì)腿林中為少■農(nóng)走.山剛開曲細(xì)也中"宵門創(chuàng)黑達(dá)呈朝性，陽(yáng)性牢角時(shí)例標(biāo)嘴正第細(xì)損，廿讒例袁広卒UHrt..恨祖免力:歸.眾，^<0.05?石虢計(jì)學(xué)童叟.ftf也也C.用#訕即血住ftl舞itf^itfj左達(dá)”Vd畀為FMUI衣4JS組悅折衣肚.血屯:％HUCUJ在廉呷1卜,京'葉無絨的我達(dá).②不冏嘉理關(guān)型無蛙#*理們時(shí)HOIAW!?和鴨痊的厳達(dá)刻性串戀打比⑦凰果炭現(xiàn)，庚占何兀険訐擺捋壽”?序尿幅用井刖伯豈桿HU；m我這抽虞的代較SS例I」h[Vf0中有柞佻HHCBI養(yǎng)迭凰陽(yáng)性，陽(yáng)tt^X151-0t.律側(cè)】-H組腮煒冇時(shí)的蠱姑昱愀雀，陽(yáng)性審為即，1和再卄比戦PUQ.OE,扌.統(tǒng)計(jì)學(xué)總咒.說目]HHG3I壺達(dá)與卑卡臨床分刪Mti匚相關(guān)*非小鄒賄肺J?中剛PT的卷鈣我幻通過免疫粗憶檢測(cè)前條肺癌爼欽型燥30例桶考Eflta^HHr-9的農(nóng)達(dá).給杲顯示*同阿帥癌蛆媒中.有駅例我達(dá)毘閉th陽(yáng)性牢為了雅，3Q例屋旁正常蛆紈有丁刮滾達(dá)呈陽(yáng)禺陽(yáng)性率為貉珈P<0.0&,育統(tǒng)計(jì)他九眇D、E、F.圖孔為牝卩峠也膽癌粗故的表達(dá)，圖怩齒卿A9越屈坦繪的表達(dá)'悝廿詢帶1T常帥坦星的農(nóng)迭.■*??■'■-'■”. ■二］F:I!■*??■'■-'■”. ■二］F:I!*ELb-、\4■'■P- 「F.? ._;:、',■<ajr* j*總事+1：\ LF '1畑a也”鼻威?」片*『比*1 .n.<<1-；(? 屮FftUIH**J-J仁1瞅Hl?tfL"由尿15_11佛憂忸?.Itp-Sfi-Hm-4fft^1*■.E：劇P"l<雲(yún)4丸年升H電lhd4lQFiVM'-^fiifR i"1-2lastern-blct廉測(cè)毎靳H肺癌組粗況?f旁正當(dāng)腦詛瓢申MGfil1.211這樸帥劇繪橫胖逡怖的非小魚1INJ肺癌加首，年黔在和芯曲，館19的hiJ['^.均為201K年卜3月吐苛喝丈學(xué)附屬撫皚曲并料住屈泊#的煙常腳恥4術(shù)切賒輪粗勞2□投稼亦正常腦畑塊「弧坯腫他型建I以上》.標(biāo)本at-7orwft用.122QU刃陽(yáng)配SJKtiffi沮奴以座噸務(wù)正常冕織通址梅！itg)ulotteSitHJKB1S白農(nóng)達(dá).帥瘠殂疾和嗨栄更常爼織卜馬刖備蛋向棗達(dá)為割為0.需土(1.!2.<1-21+0.72,射癌蔚A(chǔ)MKBl的址廿崔達(dá)明莖AJT配對(duì)止常胖ffl^t41.7,p<0L(H>Uftf2.；i*瑯乂屮3辭患苕的臨冰他斌為：(I)'H.30甘，低甘化廉癌：仃同1N盼內(nèi)沁咳坤巴翱稅⑵*■騙扒儒那凋曲禾見特歙⑶點(diǎn) S?fEncrn負(fù)說林mm酬措匹"黒啊雌射対.屮曲化型總，冋側(cè)他門洌匕綃轉(zhuǎn)移.三、ELISA

第二部分非小細(xì)胞肺癌患者血清H腮餉和GEA的水平及兩者的2.1材斡和方注相關(guān)分析2.1材斡和方注52i.U桶豐坍興坤聲均率自jo址翌竝商左i.U桶豐坍興坤聲均率自jo址翌竝商左atna曉的話側(cè)非小訊購(gòu)卄將更占c膽矚：A8^rU#?IM.犬細(xì)圍胖糅I憫,]E-WVi朋樣W'憫，i-]l 年岳在燈疔壬盹聲2問，辛鈿酣痕爭(zhēng)，蟲73惻》,mfl■■宮留翅fit殊陽(yáng)剋節(jié)，克壯竹頤芯擔(dān)超関H站檢硏造.番RH內(nèi)斟特.曲対冉科査距南軌懵射ICT*Varii皿FCktdn(viAJD'^iiuk)10VT3?.t7加亡IjrirmeEniSD)那遽7D.66粗幣常.M劃寺旗￡痕卜強(qiáng)期昇.finmCLC.fl[!liiiFlT，tEUXB農(nóng)斑俎聲，怦打琳卽班丁術(shù)中牌迄杲瑚丈小.刑內(nèi)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)性情況來理建塔碗叮期”喘電展延空亞”甘血細(xì)】”離￡■■諜#于YOT?”ffl^fJMUlJIlMCBlACEA,T]*U*2手束帝撐的恵乩 ?tOlffiiLlflIlHiEWCHAt32駅副舟對(duì)鹼苦兄有亂肢建戢右為*心.年齡在他憂至“蟲上何「平齡齡疽歲.另皿営，女I*2.ZI菁■■卜刪誡加癌唐脅血渣CM.EIKil朮半月整廣對(duì)議營(yíng)比較flJiSGLC*^Ljl^?JS<rt^iflLZ2,l!MGBL*平的也就顯;ii,N3CLC出我11播「肚取平審技高于盤廉對(duì)卅吉.1^.K±SJ? L.^tncEin^'nJ..PIGOh：I4SU￡SirftjtHKBL水平剛*崗『起J?對(duì)應(yīng)若.廿別旳J-UJ土flLE啊.無慢姓疾悄爭(zhēng)口試蛆護(hù)劉車實(shí)整知梢啊.無慢姓疾悄爭(zhēng)口試蛆護(hù)劉車實(shí)整知梢冋魚「筮弭艸說書.耳研猊吳醫(yī)院世用蚤員盤lit準(zhǔn).1-11試刑和論即佛林儀購(gòu)冃高取華朱電于英;41監(jiān)廿地崔宜眼公祗人曲岡hj.esaotraiui談珂】M刊點(diǎn)"CtAHLT3A（幕國(guó)腌D舍旳》U；啊曲+Hi嗚忌若(沖1話)maulSDji^i'niLniewiiSD,m^nLPCEAlt.3^226pgoiHMGBL2.01^0&SPBJ05nt/nl.2.0T+fli65ng/?L忡爼臨??Jt農(nóng)JttgtiaMCEa.raGuj27.2片苯27.2片苯j(luò)fi”対勃HHM；*：峪1：低水爭(zhēng)fiftjp駅I.2.3不同的昨粗網(wǎng)血ItH細(xì)1和血木平為「瀘生芋術(shù)対也購(gòu)幗肌刃的蚩響，犯忙枕眞丁FlP1B-G為「瀘生芋術(shù)対也購(gòu)幗肌刃的蚩響，犯忙枕眞丁FlP1B-G術(shù)前.術(shù)方帥IDK3L和CEA水平*蠟果顯示,圖5蟲it血水平強(qiáng).毎止L.4flFB/l?L}tfi.fl±1.5Tnjyni.jWJdfff OS},XJ^lTlSHlKAIJjC^(J.12朮腸FT”)m.co>也￡Dir曹'idI.nfi^lrt*?!}RLt￡U罔DJ密ikJ.fCEA停06-W1J*MMHMCiHIZ6WtD.7H2.12*0.54：P^O.OSiffJ鑒睪持眉■壽曲?HKUl未甲:tM54)K^AiC3LU3r3.?3nir/iij!B#t^&.OSd.』，黑4RffJ51別荷膿餐iiA扯Ifl瘵處擊的皿常mI和r同朮半粋科井析”皓嘏雄罠”小冃的韋裁霑IMiflCEAXjH3^4J'l.5tK世琶Hl禍CEX曲T?版刊患患苦?S^SI^；iS.2±^45nff/nJ..&.6±L.62n^WL懊機(jī)0?*皿iflIMG?】水平在F同的歌理美塑盂統(tǒng)計(jì)手莖別h臨St!血緊堪煉著分別為；3-IS±C.W<J..3.23±a^m/iiL(DO.05).腺搭[el06)犠琮(n=7l>nK3&srS.ll；-nr^fmLp:CEA19.U3.455.6L1.?2P<0.0iHMGBJlGfcO.72J.2J±O.?8F卻血雄示?!、姑冊(cè)理姿巾丁沖:FA.IMRIf-*n平同 W0H1申1CEA乖平51帖1蜩1flJUiAX平書：能時(shí)iftbK51帖1蜩1flJUiAX平書：能時(shí)iftbK甘VSPifflAJS町術(shù)叫，11!-師底魁尿、I-[1HfiJSSJi直瞬17LA木f廿劃為：JF.T3tlL2nK/mLt.&±f.^tk^L.",115.irEJVJfiA^s1-1】Nfl.0需血胡FMI水平甘甥出3.ijtlhtanE^2.ft5Tfyt/iJ.[*電啦*見：SGtlL-JVMl?rK7|nKsn^SD^/mLIIIJfl冊(cè)N)mmjiiSO,血mHPICEAi?.7L*-i.ii3L43hm：0aiI.JJitkSS2的k打An^fCfA.IBKRJ4C41Z!.5ft*Hat?€FA水平胯接性労祈對(duì)血摘；啊1^KEfizk平非KH-KSUnft孟分折，射觀5t^.t-D.^l.FD.SM.Elpone.0130839.pd

fCurr*sLn^i^riv￡7X1-'JidMHi?-3《ImplicationofLeptin-SignalingProteinsandEpstein-BarrVirusinGastricCarcinomas》一、免疫組化(免疫組化圖一陽(yáng)性表達(dá)率)EthicsStaieme^tAUhumanIisiuespecimenswerudjlaijicddunn^diagib^'licaidth?rapciiEicsurgcrj".Ihepar-likLpjnl^didnoEpraviilcthewritlcnon^cnltopariicipmlcLnlhe-presentstudy.Th.crdrespec-W[52■?fy "<■■■■■<Eiwia^Mdh KUfM￡^-md說吟ibH屮li\c5ludyva&peHbrniifdihe^toredpirdtlnblockscant2ininjEi^utsampleaflErtheand.dlnfihc伯mplc%wert誦“為nyitii屈lietort-lh^^lLidM-Thistfeim訶祖”liv?Kludy Apprdk/cdbpth電EiiKCiluH^nalR赴vum1Boardt>f5etKalNali^nnlLTiHveFSiEyBrtra^meIlofpilji!un<L*rthe-ctindilicnofikeincn^'mimEinn(IMBMn.26209d13/022-MEthicsStaieme^tAUhumanIisiuespecimenswerudjlaijicddunn^diagib^'licaidth?rapciiEicsurgcrj".Ihepar-likLpjnl^didnoEpraviilcthewritlcnon^cnltopariicipmlcLnlhe-presentstudy.Th.crdrespec-W[52■?fy "<■■■■■<Eiwia^Mdh KUfM￡^-md說吟ibH屮li\c5ludyva&peHbrniifdihe^toredpirdtlnblockscant2ininjEi^utsampleaflErtheand.dlnfihc伯mplc%wert誦“為nyitii屈lietort-lh^^lLidM-Thistfeim訶祖”liv?Kludy Apprdk/cdbpth電EiiKCiluH^nalR赴vum1Boardt>f5etKalNali^nnlLTiHveFSiEyBrtra^meIlofpilji!un<L*rthe-ctindilicnofikeincn^'mimEinn(IMBMn.26209d13/022-M20]]屮Wl帰}_TissuemicroarrayAlCciIkhCuikj^kalj￡：t'k>alH'mU[uiill-uimxLhj-J&,uilcuflilcfcpruMzuEdli^i:pulLLviahW蒼dWicilI'romiheindLvidtaldonorblockandtore【1砧lkw\ih2.Qninidiamfirr陽(yáng)劭pijnLhed.-oxtbynirephineappsMtiss,AJHi^iiecor^wcreihesijasertcMin竈fttvrccjptailblockIWmxlitded5?lissutf^re^andoneinkcorethat 2s-.idireclmirker.Alot￡ofslili^utrarrjyblixfc呎聲d*usprepared.Immunohisloch：&mi&?rylinmds&cIkhLLKhcnii?r^*w.^j.-KrfbrnLtJ jnuiLilanulled：iniinurio^iiiTiifr(Veii1dih￡iR^nch.-MirkXT,^'cjilLiEiiJMuJiL-.dStsEccii^Im-,.TiilmnuAZ,L?SAJdLcuidln^LuLhuiiianulliJmiri&pioiccol.Wcperl^nned\inmu^ohiitcKhcmkalLtainkngEarkpunjcpnn-rttepior,ph-asphor-yhtodSTAT3(pSTATJ),ER^pho^phflfjtaledAkl(p-kkl).mlQR,andHIMalpfu〔：ahk-I).Fourpatholo^isE(EC；S-j35hSHK臥MS匸j thestainingF?*hs.'Ilicoepres-sionsofleplin-&ij!naJingpD3lcinswLrcsuHicL-cnElyhomogmousiniLinnerthaEonetorelissuccanbeconsideredtobertprcwniasivel>l卜i疝mdEheirfsprmionsinpsCnc詢EdiwmawrtupFi眾uhtedinrebliitnIdnormalmtiaisa.^"Ii：J.rreniiindhirfochenikslsTfli^rngfrirkplin缶廚lepiirv-nsq^lorirf^?scored^emdingIc麗色inl^ridtipAtiliivcJy ^umnrcrlkae n^atKrc-(erii-n??flJ,w^tlL(wn-ir-3),mn<9-畔rate'score?2)r.ands-tron^(scomty寸k^c^rcsoi1,2andi5wcr-cihe-nrcclmaftcd.3Jp<Kitn.-c.I'L-cfclJowngKorin^m^diodw-u-app^cd mTO'Rimip^kL.ihcBlained.-ircimsc-alc腫rimdaaciLlicr<5%卜L-i5-10%-2rIQ-50%■3-,.50-75%"4i<759i“3iaad^ttiiiiiii^iihLni-*hyv>drbgroJcd箱帝￡tin[-Lw-eak-￡卜niokrjic-J.^CKing-4,rtic?iMnedirei吟*rviswrtpda$i0,1^O;2.J=L;4=2;5=5ihdftilnin^inEtnsicyas^Oj.I=0;=1;=2;4=>;也述atoulieofe亦o怦》帕施Elnsfly彈Icaiated以ngtlwpemnm眾of此諂用■如z竝泗聃呼：冊(cè)哼耶i忖Smb^ufincEy.邊他律<rfO^wcdisgcrfeed就 1T弼H\^k.4-6戕ard7-9assErc-n^Finally)toilnds^tistkallysignificanticsdls.wcdclintdwc^ktniodcratc.ajndShmj呂U-aLning缶.jk聒ili*?K" ruA-a r_j 1IW.■MAcwUm>me*>hiii曲服！ 肝"<EmH7M&->U0Md■9毗 EE?4 PM些■?K^i>"??■< F*FM “WHE HiWM*!?■呼*w ■再piem-imtitjek.知4kzw#mimp/rv isrr^s E"M PflTti>M|?n： xfunw xan m-w*Iw込 『悶 ll-frin?ri?rM. raiHRhj umw ■mkiMei 巧嚴(yán)rtw^iqpnzJIIMJhhprujaiirk^rirj-nuWW>軽I呻ramw?ionMhMMiRIRm■%**4fpwrw"rxi■47#^MMI'U4*f4n? 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MainoutcomemeasuresThemaincuteome- wereage(days)+weiglm(g),Iicmatncritweightnfevariesi|mg),senirnEe%-e[snfVEGF-ipg/'mL)dnd-cndcthclirt1(n.g.imLlBandtotalIblliide：coiLinrwithdcr^nnmjrticnofprimordial,pr