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關(guān)于專題三胚胎工程一輪復(fù)習(xí)第一頁,共五十一頁,2022年,8月28日胚胎工程的建立一.胚胎移植技術(shù)的研究胚胎移植技術(shù)成為許多胚胎工程不可缺少的基礎(chǔ)環(huán)節(jié)。二.胚胎移植技術(shù)的成功和應(yīng)用帶動和加速了體外受精技術(shù)的研究。三.胚胎移植和體外受精使胚胎分割、性別鑒定、體細(xì)胞克隆、轉(zhuǎn)基因胚胎、胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)等技術(shù)應(yīng)運(yùn)而生。第二頁,共五十一頁,2022年,8月28日知識網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建:胚胎工程胚胎工程的應(yīng)用胚胎移植胚胎分割基本程序移植的生理學(xué)基礎(chǔ)體外受精和早期胚胎培養(yǎng)試管動物技術(shù)體外受精早期胚胎培養(yǎng)體內(nèi)受精和早期胚胎發(fā)育精子的發(fā)生卵子的發(fā)生受精早期胚胎發(fā)育胚胎干細(xì)胞第三頁,共五十一頁,2022年,8月28日一、體內(nèi)受精和早期胚胎發(fā)育(一)、精子和卵子的發(fā)生(二)、受精(三)、胚胎發(fā)育第四頁,共五十一頁,2022年,8月28日(一)1、精子的發(fā)生1)、場所:2)、時期:3)、過程:睪丸(的曲細(xì)精管)從初情期開始直到生殖功能衰退發(fā)生的過程大體可分為三個階段第五頁,共五十一頁,2022年,8月28日精原細(xì)胞有絲分裂初級精母細(xì)胞次級精母細(xì)胞精子細(xì)胞精子MⅠ第一階段第二階段第三階段MⅡ精子發(fā)生的過程多個精原細(xì)胞染色體復(fù)制變形第六頁,共五十一頁,2022年,8月28日第七頁,共五十一頁,2022年,8月28日精子細(xì)胞變形中的主要變化:1.細(xì)胞核——2.高爾基體——3.中心體——4.線粒體——5.細(xì)胞內(nèi)其他物質(zhì)——精子頭的主要部分頭部的頂體精子的尾線粒體鞘(尾的基部)原生質(zhì)滴(球狀,最后脫落)第八頁,共五十一頁,2022年,8月28日2.卵子的發(fā)生1)發(fā)生部位:卵巢2)時間:胚胎性別分化以后直至生殖機(jī)能衰退減數(shù)第一次分裂在雌性動物排卵前后完成;減數(shù)第二次分裂在精子和卵子結(jié)合的過程中完成。第九頁,共五十一頁,2022年,8月28日卵泡=卵泡細(xì)胞+初級卵母細(xì)胞卵子=次(初)級卵母細(xì)胞+透明帶+放射冠排卵=卵子從卵泡中排出第十頁,共五十一頁,2022年,8月28日卵原細(xì)胞有絲分裂多個卵原細(xì)胞染色體復(fù)制初級卵母細(xì)胞MⅠ第一極體次級卵母細(xì)胞兩個第二極體第二極體卵子退化消失(3、卵子發(fā)生過程MⅡ排卵前后完成在受精過程完成被卵泡細(xì)胞包圍,形成卵泡胎兒期完成第十一頁,共五十一頁,2022年,8月28日誤點(diǎn)警示:1、一個卵泡中一般能形成一個成熟的卵子。2、排卵是指卵子從卵泡中排出而不是指卵泡從卵巢中排出。3、剛排出的卵子尚未完全成熟,一般僅完成減數(shù)第一次分裂,需要在輸卵管內(nèi)進(jìn)一步成熟。第十二頁,共五十一頁,2022年,8月28日(二)受精1、受精部位:2、受精標(biāo)志:在卵黃膜和透明帶的間隙可以觀察到兩個極體時。輸卵管第十三頁,共五十一頁,2022年,8月28日受精階段:1)精子穿越放射冠和透明帶
頂體反應(yīng)使頂體內(nèi)的酶釋放出來并溶解放射冠內(nèi)的卵丘細(xì)胞
透明帶反應(yīng)是防止多精入卵受精的第一道屏障2)精子進(jìn)入卵黃膜
卵黃膜封閉作用是防止多精入卵受精的第二道屏障3)原核形成:雄原核形成和雌原核形成4)配子結(jié)合:雌雄原核融合形成合子(受精卵)第十四頁,共五十一頁,2022年,8月28日3、過程受精前的準(zhǔn)備階段受精階段精子獲能(在雌性動物生殖道)卵子獲能(達(dá)到減數(shù)第二次分裂中期時才具備與精子受精的能力)第十五頁,共五十一頁,2022年,8月28日放射冠(卵丘細(xì)胞)透明帶卵黃膜細(xì)胞核第一極體發(fā)生頂體反應(yīng),穿越放射冠第十六頁,共五十一頁,2022年,8月28日
穿過透明帶發(fā)生透明帶反應(yīng)第十七頁,共五十一頁,2022年,8月28日
精子進(jìn)入卵子后,其細(xì)胞核變大到和卵子細(xì)胞核相似,精子細(xì)胞核(雄原核)和卵子細(xì)胞核(雌原核)同時向細(xì)胞中部靠攏,并相互融合成一個細(xì)胞核,這時稱受精卵。形成受精卵:第十八頁,共五十一頁,2022年,8月28日精、卵相遇頂體反應(yīng)頂體酶釋放頂體酶溶解透明帶接觸透明帶穿越放射冠溶解卵丘細(xì)胞(放射冠)穿越透明帶接觸卵黃膜產(chǎn)生透明帶反應(yīng)形成第一道屏障(作用
)精子被微絨毛抱合精子外膜與卵黃膜融合精子進(jìn)入卵第十九頁,共五十一頁,2022年,8月28日精子進(jìn)入卵后變化①變化②變化③產(chǎn)生卵黃膜封閉作用形成第二道屏障(作用)尾部脫離核膜破裂形成雄原核形成雌原核激活卵子完成減數(shù)第二次分裂,排出第二極體發(fā)育移動接觸合并形成受精卵第二十頁,共五十一頁,2022年,8月28日誤點(diǎn)警示:1、成熟的精子無受精能力,需要在生殖道內(nèi)獲能后方能受精。2、動物排出的卵子并未成熟,只有達(dá)到減數(shù)第二次分裂中期時,才具備受精能力。3、受精卵的遺傳物質(zhì)中,核遺傳物質(zhì)一半來自精子,一半來自卵子,質(zhì)遺傳物質(zhì)幾乎全來自卵子。第二十一頁,共五十一頁,2022年,8月28日4.意義
維持每種生物前后代體細(xì)胞中染色體數(shù)目的恒定;對于生物的遺傳和變異十分重要。第二十二頁,共五十一頁,2022年,8月28日(三)胚胎發(fā)育受精卵2細(xì)胞4細(xì)胞8細(xì)胞桑葚胚第二十三頁,共五十一頁,2022年,8月28日受精卵卵裂期桑椹胚囊胚(內(nèi)含囊胚腔)原腸胚(內(nèi)含原腸腔)胎兒形成由具有全能性細(xì)胞構(gòu)成,細(xì)胞數(shù)在32個左右,排列緊密,形似桑椹內(nèi)細(xì)胞團(tuán):發(fā)育成胎兒各組織滋養(yǎng)層細(xì)胞:發(fā)育成胎膜和胎盤:最初發(fā)育在輸卵管進(jìn)行有絲分裂1、胚胎發(fā)育過程一孔:胚孔二腔:擴(kuò)大的原腸腔,縮小的囊胚腔三胚層:外胚層,中胚層,內(nèi)胚層第二十四頁,共五十一頁,2022年,8月28日內(nèi)細(xì)胞團(tuán):發(fā)育成胎兒各組織滋養(yǎng)層細(xì)胞:發(fā)育成胎膜和胎盤囊胚(內(nèi)含囊胚腔)(開始分化)第二十五頁,共五十一頁,2022年,8月28日一孔:胚孔二腔:擴(kuò)大的原腸腔,縮小的囊胚腔三胚層:外胚層,中胚層,內(nèi)胚層原腸胚(內(nèi)含原腸腔)第二十六頁,共五十一頁,2022年,8月28日誤點(diǎn)警示:1、發(fā)育中的細(xì)胞分裂均為有絲分裂,原腸胚階段是個體發(fā)育中分化程度最高的階段,但要注意細(xì)胞分化貫穿整個個體發(fā)育過程中。2、桑椹胚以前的細(xì)胞均未分化,細(xì)胞全能性高,是胚胎分割的最佳時期3、桑椹胚到囊胚的發(fā)育過程中,細(xì)胞開始分化,但其全能性仍很高,也可用于胚胎分割第二十七頁,共五十一頁,2022年,8月28日例:研究表明,大多數(shù)動物如蛙的受精卵在卵裂期隨著卵裂的進(jìn)行胚胎的體積并不增大,但胚胎細(xì)胞核的總質(zhì)量與細(xì)胞質(zhì)的總質(zhì)量(核/質(zhì))比值卻發(fā)生變化。下列符合卵裂期核質(zhì)質(zhì)量比值變化趨勢的示意圖是()ACDBACDA第二十八頁,共五十一頁,2022年,8月28日二、體外受精和早期胚胎培養(yǎng)(一)、試管動物技術(shù)(二)、體外受精(三)、早期胚胎培養(yǎng)第二十九頁,共五十一頁,2022年,8月28日
是指通過人工操作使卵子和精子在體外條件下成熟和受精,并通過培養(yǎng)發(fā)育成早期胚胎后,再經(jīng)移植產(chǎn)生后代的技術(shù)。(一)試管動物技術(shù)第三十頁,共五十一頁,2022年,8月28日1982年世界首例試管牛犢問世實現(xiàn)良種??焖俅罅糠敝呈紫纫龅氖?/p>
和
的培養(yǎng)。體外受精早期胚胎第三十一頁,共五十一頁,2022年,8月28日1.卵母細(xì)胞的采集和培養(yǎng)(1)卵細(xì)胞的采集:
a小型動物如小鼠、兔,以及家畜豬、羊等注射促性腺激素,使其超數(shù)排卵,從輸卵管中沖取卵子,直接與獲能的精子在體外受精。
b大家畜或大型動物,如牛,采用的主要方法:從屠宰場已屠宰母畜的卵巢中采集卵母細(xì)胞,也可以借助超聲波(B超)探測儀、內(nèi)窺鏡或腹腔鏡等工具確定卵泡位置,直接從活體動物中吸取泡卵液(連同卵母細(xì)胞)取出,在體外進(jìn)行人工培養(yǎng),使其成熟。第三十二頁,共五十一頁,2022年,8月28日2.精子的收集和獲能收集精子的方法有:假陰道法手握法電刺激法第三十三頁,共五十一頁,2022年,8月28日在體外受精前,要對精子進(jìn)行獲能處理。通常采用的體外獲能方法有培養(yǎng)法和化學(xué)誘導(dǎo)法兩種。對于嚙齒動物、家兔和豬的精子,一般采用培養(yǎng)法;對于牛、羊等家畜的精子常用化學(xué)法。培養(yǎng)法:精子在獲能液中獲能?;瘜W(xué)誘導(dǎo)法:精子一定濃度的肝素或鈣離子載體A23187溶液中,用化學(xué)藥物誘導(dǎo)獲能。第三十四頁,共五十一頁,2022年,8月28日3.受精獲能的精子和培養(yǎng)成熟的卵子,一般情況下在獲能溶液或?qū)S檬芫芤褐型瓿墒芫^程。第三十五頁,共五十一頁,2022年,8月28日發(fā)育培養(yǎng)液:(兩鹽、兩素、兩酸、水和血清等)無機(jī)鹽、有機(jī)鹽、維生素、激素、氨基酸、核苷酸以及水、動物血清等。(三)、胚胎的早期培養(yǎng)胚胎發(fā)育到適宜的階段時,可取出向受體移植或冷凍保存第三十六頁,共五十一頁,2022年,8月28日試管動物與克隆動物的區(qū)別試管動物克隆動物生殖方式技術(shù)手段遺傳規(guī)律有性生殖無性生殖試管動物技術(shù)動物細(xì)胞核移植技術(shù)遵循不遵循第三十七頁,共五十一頁,2022年,8月28日三、胚胎工程的應(yīng)用及前景(一)、胚胎移植(二)、胚胎分割(三)、胚胎干細(xì)胞的培養(yǎng)第三十八頁,共五十一頁,2022年,8月28日(一)、胚胎移植1、概念:將雌性動物的早期胚胎,或者通過其他方式得到的胚胎,移植到同種的、生理狀態(tài)相同的其他雌性動物的體內(nèi),使之發(fā)育為新個體的技術(shù)。2、胚胎移植的生理學(xué)基礎(chǔ)1)供體和受體相同的生理環(huán)境2)早期胚胎處于游離狀態(tài),為胚胎的收集提供了可能3)受體對移入子宮的胚胎基本上不發(fā)生免疫排斥4)胚胎與受體建立正常的聯(lián)系,但遺傳物質(zhì)沒有改變第三十九頁,共五十一頁,2022年,8月28日選擇供體母牛受體母?!诎l(fā)情處理……超數(shù)排卵供體公牛配種沖卵質(zhì)量檢查、培養(yǎng)胚胎移植妊娠檢查分娩(胚胎移植的犢牛)3、胚胎移植的基本程序第四十頁,共五十一頁,2022年,8月28日4、胚胎移植的條件和時間(1)胚胎移植一般應(yīng)在同種的雌性供體和受體之間進(jìn)行。(2)進(jìn)行胚胎移植的供體和受體的生理狀態(tài)要相同。5、胚胎移植的意義
可充分發(fā)揮優(yōu)秀個體的繁殖潛能,縮短繁殖周期,增加一生繁殖的后代數(shù)量第四十一頁,共五十一頁,2022年,8月28日1.概念:采用機(jī)械方法將早期胚胎切割成2等份,4等份或8等份等,經(jīng)移植獲得同卵雙胎或多胎的技術(shù)。2.特點(diǎn):后代具有相同的遺傳物質(zhì)(無性繁殖或克?。?.選擇的胚胎:發(fā)育良好的,形態(tài)正常的桑椹胚或囊胚。4.分割要求:內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割5.存在的問題(二)、胚胎分割第四十二頁,共五十一頁,2022年,8月28日1.概念:簡稱ES或EK細(xì)胞,是由早期胚胎或原始性腺中分離出來的一類細(xì)胞。(三)、胚胎干細(xì)胞的培養(yǎng)2.分類:全能干細(xì)胞、多能干細(xì)胞、專能干細(xì)胞第四十三頁,共五十一頁,2022年,8月28日4.主要用途(1)治療人類的某些頑癥(2)培育出人造組織器官,用于器官移植(3)是研究體外細(xì)胞分化的理想材料3.特點(diǎn):1)形態(tài):體積小,細(xì)胞核大,核仁明顯。2)功能:具有發(fā)育的全能性。可分化為成年動物體內(nèi)任何一種組織細(xì)胞。3)在體外培養(yǎng)的條件下,ES細(xì)胞可以增殖而不發(fā)生分化。對它可以進(jìn)行冷凍保存,也可以進(jìn)行遺傳改造。第四十四頁,共五十一頁,2022年,8月28日本專題中共涉及到了哪些培養(yǎng)液,它們的作用分別是什么?獲能溶液:使精子獲能或精卵結(jié)合完成受精作用一定濃度的肝素或鈣離子載體A23187溶液:使精子獲能專用的受精溶液:完成受精作用發(fā)育培養(yǎng)液:檢查受精狀況和受精卵的發(fā)育能力動物細(xì)胞培養(yǎng)液:培養(yǎng)動物細(xì)胞如卵細(xì)胞第四十五頁,共五十一頁,2022年,8月28日第一處:在課本70頁,超數(shù)排卵法中沖出的卵實質(zhì)是減數(shù)第二次分裂中期的次級卵母細(xì)胞。第二處:在課本77頁,收集胚胎時在母體子宮
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