室內(nèi)空氣中細(xì)菌的測(cè)定課件

室內(nèi)空氣中細(xì)菌的測(cè)定——平皿暴露沉降法目的：學(xué)習(xí)和掌握平皿暴露沉降法測(cè)定公共場(chǎng)所空氣中細(xì)菌的總數(shù)。評(píng)價(jià)居室的衛(wèi)生狀況理論依據(jù)和實(shí)際應(yīng)用：室內(nèi)空氣中的微生物主要來(lái)源是人們?cè)谑覂?nèi)的生活和活動(dòng)，使微生物隨飛沫與懸浮顆粒物飛揚(yáng)于空氣中。所以室內(nèi)空氣中的微生物數(shù)量的多少取決于室內(nèi)衛(wèi)生狀況、居住密度、居民健康情況、人們的活動(dòng)情況、室內(nèi)通風(fēng)效果等。居住密度大、活動(dòng)頻繁、通風(fēng)不良時(shí)，細(xì)菌總數(shù)就多。所以它可以代表居室一般衛(wèi)生狀況的意義；三、原理：空氣中附著于塵?；蝻w沫小滴上的細(xì)菌，經(jīng)過(guò)一段時(shí)間，可自然沉降于培養(yǎng)基的表面上，經(jīng)培養(yǎng)后，計(jì)數(shù)其生長(zhǎng)的菌落數(shù)，再按公式推算出每立方米空氣中的細(xì)菌數(shù)。四、實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備：（一）儀器與設(shè)備：高壓蒸汽滅菌器電熱恒溫干燥箱恒溫培養(yǎng)箱電冰箱玻璃平皿及制備培養(yǎng)基用的一般設(shè)備（二）試劑與材料：營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基：（1）成份：蛋白胨10克牛肉浸膏3克氯化鈉5克磷酸二氫鈉1克瓊脂15～20克蒸餾水1000毫升（二）試劑與材料：營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基：（2）制法：將上述成分混合后，加熱溶解。調(diào)節(jié)PH值7.8～8.0。過(guò)濾除去沉渣，分裝于三角燒瓶中，經(jīng)121℃（103kPa）高壓蒸氣滅菌20分鐘，然后傾注適量（15～20毫升）于已滅菌處理的平皿內(nèi)，制成營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板備用。若當(dāng)天不用，應(yīng)置冰箱內(nèi)保存。（二）選擇采樣點(diǎn)的要求：1．采樣點(diǎn)的數(shù)量根據(jù)監(jiān)測(cè)室內(nèi)面積大小和現(xiàn)場(chǎng)情況而確定，以期能正確反映室內(nèi)空氣污染物的水平。原則上小于50㎡的房間應(yīng)設(shè)（1～3）個(gè)點(diǎn)；50㎡～100㎡設(shè)（3～5）個(gè)點(diǎn)；100㎡以上至少設(shè)5個(gè)點(diǎn)。在對(duì)角線上或梅花式均勻分布。

2．采樣點(diǎn)應(yīng)避開(kāi)通風(fēng)口，離墻壁距離應(yīng)大于0.5m。

3．采樣點(diǎn)的高度：原則上與人的呼吸帶高度相一致。相對(duì)高度0.5m～1.5m之間。

六、結(jié)果與計(jì)算：1、奧梅梁斯基公式：100cm2的培養(yǎng)皿讓空氣沉降5分鐘，培養(yǎng)出的細(xì)菌數(shù)相當(dāng)于10升空氣中的細(xì)菌數(shù)。

X=（N×100×100）/лR2

式中：X——每立方米空氣中的細(xì)菌數(shù)N——平板直接計(jì)數(shù)的平均菌落數(shù)R——平皿的底面積半徑（cm）：9cm3、將五個(gè)采樣點(diǎn)的菌落數(shù)平均計(jì)算出室內(nèi)平均的菌落數(shù)。

12345平均細(xì)菌數(shù)（CFU/皿）感應(yīng)式菌落計(jì)數(shù)儀九、評(píng)價(jià)：室內(nèi)空氣中細(xì)菌總數(shù)規(guī)定撞擊法≤4000cfu/m3;沉降法≤45cfu/皿。（室內(nèi)空氣中細(xì)菌總數(shù)衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)GB/T17093-1997）旅店業(yè)衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)GB9663-1996Ⅰ類(lèi)環(huán)境包括層流潔凈手術(shù)室和層流潔凈病房只能采用層流通風(fēng)才能空氣中的微生物減到此標(biāo)準(zhǔn)以下。

Ⅱ類(lèi)環(huán)境包括普通手術(shù)室、產(chǎn)房、嬰兒室、早產(chǎn)兒室、普通保護(hù)性隔離室、供應(yīng)室潔凈區(qū)、燒傷病房、重癥監(jiān)護(hù)病房、采用循環(huán)風(fēng)紫外線空氣消毒器或靜電吸附式空氣消毒器，這類(lèi)均為有人房間，必須采用對(duì)人無(wú)毒無(wú)害且可連續(xù)消毒才能使空氣中的微生物減到此標(biāo)準(zhǔn)以下。

Ⅲ類(lèi)環(huán)境包括兒科病房、婦產(chǎn)科檢查室、注射室、換藥室、治療室、供應(yīng)室清潔區(qū)、急診室、化驗(yàn)室、各類(lèi)普通病房室和房間，采用紫外線消毒，化學(xué)消毒劑熏蒸或噴霧消毒。十、注意事項(xiàng)：1.若測(cè)定空氣中的溶血性鏈球菌及綠色鏈球菌，則用血瓊脂平板，其他操作及計(jì)算方法與細(xì)菌總數(shù)測(cè)定方法相同。2.平皿的底面積直徑不宜小于9cm。3.選擇采樣點(diǎn)時(shí)，應(yīng)盡量避開(kāi)空調(diào)、門(mén)窗等氣流變化較大處。整個(gè)采樣過(guò)程中，應(yīng)動(dòng)作輕緩，避免揚(yáng)起灰塵，并要注意