【名師面對面】2017高考生物大一輪復(fù)習(xí) 生物技術(shù)實踐 第3講 植物組織培養(yǎng)、DNA技術(shù)及植物有效成分的提取課件（選修1）

選修1生物技術(shù)實踐第3講植物組織培養(yǎng)、DNA技術(shù)及植物有效成分的提取基礎(chǔ)夯實課堂歸納課時作業(yè)考點精研直擊高考選修1生物技術(shù)實踐第3講植物組織培養(yǎng)、DNA技術(shù)及植物有一、植物組織培養(yǎng)1．培養(yǎng)基(1)成分：大量元素、微量元素、有機(jī)成分、______和瓊脂。(2)類型：____________、發(fā)芽培養(yǎng)基和生根培養(yǎng)基。(3)作用：為植物組織或器官生長和發(fā)育提供__________。(4)制備：配制各種母液→配制培養(yǎng)基→______。基礎(chǔ)夯實【知識梳理】

激素MS培養(yǎng)基營養(yǎng)條件滅菌

一、植物組織培養(yǎng)基礎(chǔ)夯實【知識梳理】激素MS培養(yǎng)基營養(yǎng)完整的植株脫分化再分化

完整的植株脫分化再分化3．菊花的組織培養(yǎng)過程(1)影響植物組織培養(yǎng)的主要因素①選材：一般選擇__________植株的莖上部新生的側(cè)枝。②培養(yǎng)基：常用____________，其主要成分有大量元素、微量元素、有機(jī)物，常需要添加______________。未開花MS培養(yǎng)基植物激素

3．菊花的組織培養(yǎng)過程未開花MS培養(yǎng)基植物激素(2)實驗操作過程制備MS固體培養(yǎng)基：配制好的培養(yǎng)基進(jìn)行高壓蒸汽滅菌

外植體消毒：70%的酒精消毒→無菌水清洗→0.1%的氯 化汞溶液消毒→無菌水清洗接種：始終在______________旁進(jìn)行，對接種工具要用 ____________滅菌，將菊花莖段插入培養(yǎng)基中時 注意不要倒插培養(yǎng)與移栽：在18～22℃的__________中培養(yǎng)，得到試 管苗后進(jìn)行移栽酒精燈火焰火焰灼燒無菌箱

(2)實驗操作過程酒精燈火焰火焰灼燒無菌箱4．月季的花藥培養(yǎng)(1)被子植物的花粉發(fā)育過程小孢子母細(xì)胞→______________→__________→雙核期→花粉粒(2)產(chǎn)生花粉植株的兩條途徑(3)影響花藥培養(yǎng)的因素①主要因素：______________和________________。②月季花藥培養(yǎng)一般選擇______期。四分體時期單核期

材料的選擇培養(yǎng)基的組成

單核

4．月季的花藥培養(yǎng)四分體時期單核期材料的選擇培養(yǎng)基的二、植物有效成分的提取1．植物芳香油的提取(1)植物芳香油的主要化學(xué)成分：萜類化合物及其衍生物，具有很強(qiáng)的______性。提取方法有蒸餾、______和萃取等。(2)提取玫瑰精油實驗①原理：______________法。②實驗流程：揮發(fā)壓榨

水蒸氣蒸餾

水蒸氣蒸餾無水Na2SO4

二、植物有效成分的提取揮發(fā)壓榨水蒸氣蒸餾水蒸氣蒸餾(3)提取橘皮精油的實驗①原理：一般用__________法。②實驗流程：石灰水浸泡→漂洗→______→過濾→靜置→再次__________→橘皮油。壓榨壓榨過濾

壓榨壓榨過濾水萃取干燥紙層析水萃取干燥紙層析三、DNA和蛋白質(zhì)技術(shù)1．DNA的粗提取與鑒定(1)提取原理DNA與雜質(zhì)的溶解度不同，DNA與雜質(zhì)對酶、高溫、洗滌劑的__________不同。(2)實驗設(shè)計①材料的選取：選用DNA含量相對______的生物組織，如雞血、菜花、洋蔥等。②破碎細(xì)胞(以雞血為例)：雞血細(xì)胞，加__________，用__________攪拌，用________過濾，收集濾液。耐受性較高蒸餾水玻璃棒紗布

三、DNA和蛋白質(zhì)技術(shù)耐受性較高蒸餾水玻璃棒紗布③去除雜質(zhì)：利用DNA在不同濃度的______________中溶解度不同，通過控制________________的濃度去除雜質(zhì)。④DNA析出：將處理后的溶液過濾，加入與濾液體積相等的、冷卻的__________(體積分?jǐn)?shù)為95%)。(3)DNA的鑒定將DNA溶解在2mol/L的NaCl溶液中，加入4mL的____________，沸水中加熱5min，溶液變成藍(lán)色。NaCl溶液NaCl溶液

酒精溶液二苯胺試劑NaCl溶液NaCl溶液酒精溶液二苯胺試劑熱變性冷卻熱變性冷卻變性90℃復(fù)性55℃左右引物延伸DNA聚合酶

變性90℃復(fù)性55℃左右引物延伸DNA聚合酶血紅蛋白透析小凝膠色譜

血紅蛋白透析小凝膠色譜1．下列有關(guān)植物組織培養(yǎng)的敘述，正確的是()A．愈傷組織是一團(tuán)有特定結(jié)構(gòu)和功能的薄壁細(xì)胞B．二倍體植株的花粉經(jīng)脫分化與再分化后得到穩(wěn)定遺傳的植株C．用人工薄膜將胚狀體、愈傷組織等分別包裝可制成人工種子D．植物耐鹽突變體可通過添加適量NaCl的培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選而獲得【答案】D【自練自測】

1．下列有關(guān)植物組織培養(yǎng)的敘述，正確的是()【自練自測】【解析】在普通培養(yǎng)基中添加適量的NaCl，制成選擇培養(yǎng)基，可用來篩選植物耐鹽突變體，故選項D正確；愈傷組織的細(xì)胞排列疏松而無規(guī)則，是一種高度液泡化的呈無定形狀態(tài)的薄壁細(xì)胞；二倍體植株的花粉經(jīng)離體培養(yǎng)后得到單倍體植株，該單倍體高度不育，不能穩(wěn)定遺傳；用人工薄膜將胚狀體等進(jìn)行包裝可制成人工種子，愈傷組織不能作為制作人工種子的材料，故選項A、B、C錯誤?！久麕熋鎸γ妗?017高考生物大一輪復(fù)習(xí)生物技術(shù)實踐第3講植物組織培養(yǎng)、DNA技術(shù)及植物有效成分的提取課件（選修1）2．(2015年江蘇南京三模)下列有關(guān)DNA粗提取與鑒定的實驗敘述，正確的是()A．酵母、菜花和豬的成熟紅細(xì)胞都可作為提取DNA的材料B．DNA在NaCl溶液中的溶解度隨其溶液濃度增大而增大C．在溶有DNA的濾液中加入嫩肉粉，可分解其中的雜質(zhì)蛋白D．鑒定DNA時，應(yīng)將絲狀物直接加入到二苯胺試劑中進(jìn)行沸水浴【答案】C2．(2015年江蘇南京三模)下列有關(guān)DNA粗提取與鑒定的實【解析】理論上只要含有DNA的生物組織均可作為該實驗的材料，因此酵母和菜花均可作為提取DNA的材料，但哺乳動物成熟紅細(xì)胞無細(xì)胞核，即沒有足夠的DNA，不能作為提取DNA的材料，A錯誤；DNA在2mol/LNaCl溶液中溶解度最大，高于或低于此濃度其溶解度均降低，B錯誤；嫩肉粉含有蛋白酶，故在溶有DNA的濾液中加入嫩肉粉，可分解其中的雜質(zhì)蛋白，C正確；鑒定DNA時，不能將絲狀物直接加入到二苯胺試劑中進(jìn)行沸水浴，應(yīng)將絲狀物先溶解再放入二苯胺試劑檢測，D錯誤?！久麕熋鎸γ妗?017高考生物大一輪復(fù)習(xí)生物技術(shù)實踐第3講植物組織培養(yǎng)、DNA技術(shù)及植物有效成分的提取課件（選修1）3．標(biāo)準(zhǔn)的PCR過程一般分為變性、復(fù)性、延伸三大步，這三大步需要的溫度依次是()A．94℃、55℃、72℃B．72℃、55℃、94℃C．55℃、94℃、72℃D．80℃、55℃、72℃【答案】A【解析】當(dāng)溫度上升到90℃或以上(90～96℃)時，雙鏈DNA解旋為單鏈，稱之為變性；當(dāng)溫度下降到50℃左右(40～60℃)時，兩種引物通過堿基互補(bǔ)配對與兩條單鏈DNA結(jié)合；當(dāng)溫度上升到72℃(70～75℃)時，溶液中的四種脫氧核苷酸在TaqDNA聚合酶的作用下，根據(jù)堿基互補(bǔ)配對原則合成新的DNA鏈，稱為延伸。3．標(biāo)準(zhǔn)的PCR過程一般分為變性、復(fù)性、延伸三大步，這三大步4．下列有關(guān)“血紅蛋白提取和分離”的敘述中，正確的是()A．用蒸餾水進(jìn)行紅細(xì)胞的洗滌，其目的是使紅細(xì)胞漲破B．將血紅蛋白溶液進(jìn)行透析，其目的是去除相對分子質(zhì)量較大的雜質(zhì)C．血紅蛋白釋放時加入有機(jī)溶劑，其目的是使血紅蛋白溶于有機(jī)溶劑D．整個過程不斷用磷酸緩沖液處理，是為了維持血紅蛋白的結(jié)構(gòu)和活性【答案】D4．下列有關(guān)“血紅蛋白提取和分離”的敘述中，正確的是()【解析】應(yīng)用生理鹽水洗滌，目的是去除雜蛋白，以利于后續(xù)步驟的分離純化；血紅蛋白為大分子，透析的目的是為了除去小分子物質(zhì)；血紅蛋白釋放時加入有機(jī)溶劑，其目的是溶解磷脂，加速血紅蛋白的釋放。【名師面對面】2017高考生物大一輪復(fù)習(xí)生物技術(shù)實踐第3講植物組織培養(yǎng)、DNA技術(shù)及植物有效成分的提取課件（選修1）5．在玫瑰精油的提取和胡蘿卜素的提取過程中共有的操作是()A．紙層析 B．水浴加熱C．過濾 D．加入NaCl【答案】C【解析】紙層析法用于胡蘿卜素的鑒定；水浴加熱用于胡蘿卜素的萃??；在玫瑰精油的提取和胡蘿卜素的提取過程中都要用到過濾；在玫瑰精油的提取中加入NaCl使油水分層?！久麕熋鎸γ妗?017高考生物大一輪復(fù)習(xí)生物技術(shù)實踐第3講植物組織培養(yǎng)、DNA技術(shù)及植物有效成分的提取課件（選修1）1．MS培養(yǎng)基的主要成分及作用：考點精研植物組織培養(yǎng)的過程及條件成分作用大量元素提供植物細(xì)胞生活所必需的無機(jī)鹽微量元素提供植物細(xì)胞生活所必需的無機(jī)鹽蔗糖提供碳源，調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的滲透壓植物激素調(diào)節(jié)作用，啟動細(xì)胞分裂、脫分化和再分化的關(guān)鍵氨基酸、維生素等小分子有機(jī)物滿足離體細(xì)胞在正常代謝途徑受一定影響后所產(chǎn)生的特殊營養(yǎng)需求1．MS培養(yǎng)基的主要成分及作用：考點精研植物組織培養(yǎng)的過程及2．植物組織培養(yǎng)技術(shù)和花藥離體培養(yǎng)技術(shù)的比較項目植物組織培養(yǎng)花藥離體培養(yǎng)相同點理論依據(jù)植物細(xì)胞的全能性基本過程脫分化→再分化影響因素選材、營養(yǎng)、激素、溫度、pH、光照等不同點外植體體細(xì)胞生殖細(xì)胞(花粉粒)生殖方式無性生殖有性生殖培養(yǎng)結(jié)果正常植株單倍體植株可育性可育高度不育，秋水仙素處理后可育操作流程制備培養(yǎng)基→外植體消毒→接種→培養(yǎng)→移栽→栽培選材→材料的消毒→接種和培養(yǎng)→篩選和誘導(dǎo)→移栽→栽培選育2．植物組織培養(yǎng)技術(shù)和花藥離體培養(yǎng)技術(shù)的比較項目植物組織培養(yǎng)3．植物激素：在配制好的MS培養(yǎng)基中，常常需要添加植物激素。其中生長素和細(xì)胞分裂素是啟動細(xì)胞分裂、脫分化和再分化的關(guān)鍵性激素。植物激素的濃度、使用的先后順序以及用量的比例等，都會影響實驗結(jié)果。①按照不同的順序使用這兩類激素，會得到不同的實驗結(jié)果(如下表)：使用順序?qū)嶒灲Y(jié)果先使用生長素，后使用細(xì)胞分裂素有利于細(xì)胞分裂，但細(xì)胞不分化先使用細(xì)胞分裂素，后使用生長素細(xì)胞既分裂又分化同時使用分化頻率提高3．植物激素：在配制好的MS培養(yǎng)基中，常常需要添加植物激素?！久麕熋鎸γ妗?017高考生物大一輪復(fù)習(xí)生物技術(shù)實踐第3講植物組織培養(yǎng)、DNA技術(shù)及植物有效成分的提取課件（選修1）

考查植物組織培養(yǎng)和花藥離體培1．(2016年黑龍江鶴壁期末)月季的花藥培養(yǎng)過程的難點之一是材料的選擇，下列有關(guān)材料選擇的敘述中正確的是()A．從花藥來看，應(yīng)當(dāng)選擇盛花期的花藥B．從花粉來看，應(yīng)當(dāng)選擇小孢子四分體期的花粉C．從花蕾來看，應(yīng)當(dāng)選擇略微開放的花蕾D．從檢測花粉的實驗方法看，應(yīng)該用顯微鏡觀察已染色的花粉樣品臨時裝片【答案】D 考查植物組織培養(yǎng)和花藥離體培【解析】從花藥來看，應(yīng)當(dāng)選擇初花期的花藥，A錯誤；從花粉來看，應(yīng)當(dāng)選擇單核期的花粉，B錯誤；從花蕾來看，應(yīng)當(dāng)選擇完全未開放的花蕾，C錯誤；用已染色的花粉樣品作臨時裝片，才能觀察到細(xì)胞核的位置，以確定花粉發(fā)育的時期，D正確?！久麕熋鎸γ妗?017高考生物大一輪復(fù)習(xí)生物技術(shù)實踐第3講植物組織培養(yǎng)、DNA技術(shù)及植物有效成分的提取課件（選修1）2．植物的花藥培養(yǎng)在育種上有特殊的意義。植物組織培養(yǎng)可用于無病毒植株及細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)等方面。請回答相關(guān)問題：(1)利用月季的花藥離體培養(yǎng)產(chǎn)生單倍體時，選材非常重要。一般來說，在______________期花藥培養(yǎng)的成功率最高。為了選擇該期的花藥，通常選擇________________的花蕾。確定花粉發(fā)育時期最常用的方法有__________法，但是對于花粉細(xì)胞核不易著色的植物，需采用________________法，該法能將花粉細(xì)胞核染成__________色。(2)若要進(jìn)行蘭花無病毒植株的培育，首先選擇蘭花的____________________作為外植體。從外植體到無病毒植株試管苗，要人為控制細(xì)胞的__________和__________過程。2．植物的花藥培養(yǎng)在育種上有特殊的意義。植物組織培養(yǎng)可用于無(3)進(jìn)行組織培養(yǎng)需配制MS培養(yǎng)基，在該培養(yǎng)基中常需要添加__________、__________等激素。植物激素的用量比例應(yīng)為____________________，有利于根的分化。(4)不同植物的組織培養(yǎng)除需營養(yǎng)和激素外，_____________________________________等外界條件也很重要。(5)無菌技術(shù)也是成功誘導(dǎo)出花粉植株的重要因素，下列各項中使用化學(xué)藥劑進(jìn)行消毒的是__________，采用灼燒方法進(jìn)行滅菌的是__________。(填序號)①培養(yǎng)皿②培養(yǎng)基③實驗操作者的雙手④三角錐形瓶⑤接種環(huán)⑥花蕾(3)進(jìn)行組織培養(yǎng)需配制MS培養(yǎng)基，在該培養(yǎng)基中常需要添加_【答案】(1)單核靠邊完全未開放醋酸洋紅焙花青—鉻礬藍(lán)黑(2)莖尖分生組織脫分化(或去分化)再分化(3)生長素細(xì)胞分裂素(兩空順序可以顛倒)生長素多于細(xì)胞分裂素(4)pH、溫度、光照(5)③⑥⑤【名師面對面】2017高考生物大一輪復(fù)習(xí)生物技術(shù)實踐第3講植物組織培養(yǎng)、DNA技術(shù)及植物有效成分的提取課件（選修1）【解析】(1)早期的花藥比后期的更容易培養(yǎng)成功。一般來說，在單核期，細(xì)胞核由中央移向細(xì)胞一側(cè)的時期，花藥培養(yǎng)成功率最高。該時期的花藥通常存在于完全未開放的花蕾中。(2)根尖、莖尖約0～0.1mm區(qū)域中幾乎不含病毒。病毒通過維管系統(tǒng)移動，而分生組織中不存在維管系統(tǒng)，且莖尖分生組織中，代謝活力高，在競爭中病毒復(fù)制處于劣勢。(3)生長素與細(xì)胞分裂素等植物激素可調(diào)節(jié)脫分化和再分化。當(dāng)生長素含量高于細(xì)胞分裂素含量時，利于生根。(4)植物培養(yǎng)時，除需要營養(yǎng)、激素外，還需要適宜的溫度、pH和光照等。(5)對實驗器具進(jìn)行滅菌處理，對實驗過程中的具有生物活性的材料或用具進(jìn)行消毒處理?！窘馕觥?1)早期的花藥比后期的更容易培養(yǎng)成功。一般來說，在1．植物有效成分的提取的三種方法比較植物有效成分的提取提取方法水蒸氣蒸餾法壓榨法有機(jī)溶劑萃取法實驗原理利用水蒸氣將揮發(fā)性較強(qiáng)的植物芳香油攜帶出來通過機(jī)械加壓，壓榨出果皮中的芳香油使芳香油溶解在有機(jī)溶劑中，蒸發(fā)溶劑獲得芳香油方法步驟①水蒸氣蒸餾②分離油層③除水過濾①石灰水浸泡、漂洗②壓榨、過濾、靜置③再次過濾①粉碎、干燥②萃取、過濾③濃縮1．植物有效成分的提取的三種方法比較植物有效成分的提取提取提取方法水蒸氣蒸餾法壓榨法有機(jī)溶劑萃取法適用范圍適用于提取玫瑰油、薄荷油等揮發(fā)性強(qiáng)的芳香油適用于柑橘、檸檬等易焦糊原料的提取適用范圍廣，要求原料的顆粒要盡可能細(xì)小，能充分浸泡在有機(jī)溶劑中優(yōu)點簡單易行，便于分離生產(chǎn)成本低，易保持原料原有的結(jié)構(gòu)和功能出油率高，易分離局限性水中蒸餾會導(dǎo)致原料焦糊和有效成分水解等問題分離較為困難，出油率相對較低使用的有機(jī)溶劑處理不當(dāng)會影響芳香油的質(zhì)量提取水蒸氣蒸餾法壓榨法有機(jī)溶劑適用適用于提取玫瑰油、薄荷油等2．植物有效成分提取過程的注意事項(1)在玫瑰精油的提取過程中，加入NaCl的目的是增加水層的密度，有利于玫瑰油與水分層，加入無水Na2SO4的目的是吸收精油中殘留的水分。(2)在提取橘皮精油時，為了提高出油率，需要將柑橘皮干燥去水，并用石灰水浸泡，浸泡時間為10h以上。橘皮要浸透，這樣壓榨時不會滑脫，且出油率高，過濾時不會堵塞篩眼?！久麕熋鎸γ妗?017高考生物大一輪復(fù)習(xí)生物技術(shù)實踐第3講植物組織培養(yǎng)、DNA技術(shù)及植物有效成分的提取課件（選修1）(3)在胡蘿卜素的提取中，原料顆粒的大小、緊密程度、含水量、萃取的溫度和時間等條件也能影響萃取。因此在萃取的過程中，要先將胡蘿卜進(jìn)行粉碎和干燥，使之與萃取劑充分接觸，提高溶解度?！久麕熋鎸γ妗?017高考生物大一輪復(fù)習(xí)生物技術(shù)實踐第3講植物組織培養(yǎng)、DNA技術(shù)及植物有效成分的提取課件（選修1）

考查植物有效成分的提取1．(2016年河南洛陽期末)在植物有效成分的提取過程中，下列有關(guān)敘述錯誤的是()A．蒸餾法是利用水將芳香油溶解下來，再把水蒸發(fā)掉，剩余的就是芳香油B．壓榨法是通過機(jī)械加壓，可壓榨出果皮中的芳香油C．萃取法是使芳香油溶解在溶劑后通過蒸發(fā)就可獲得芳香油D．蒸餾法適用于提取玫瑰油、薄荷油等揮發(fā)性強(qiáng)的芳香油【答案】A 考查植物有效成分的提取【解析】蒸餾法是利用水蒸氣將揮發(fā)性較強(qiáng)的芳香油攜帶出來，形成油水混合物，冷卻后可以分層，將芳香油分離出來，A錯誤；壓榨法是通過機(jī)械加壓，將原料中的芳香油擠壓出來，B正確；萃取法是將粉碎、干燥的植物原料用有機(jī)溶劑浸泡，使芳香油溶解在有機(jī)溶劑中，之后再通過蒸餾裝置蒸發(fā)出有機(jī)溶劑，剩下的就是要提取的物質(zhì)，C正確；蒸餾法適用于提取玫瑰油、薄荷油等揮發(fā)性強(qiáng)的芳香油，D正確?！久麕熋鎸γ妗?017高考生物大一輪復(fù)習(xí)生物技術(shù)實踐第3講植物組織培養(yǎng)、DNA技術(shù)及植物有效成分的提取課件（選修1）2．回答下列有關(guān)植物有效成分提取的問題：(1)從胡蘿卜中提取胡蘿卜素時，通常在萃取前要將胡蘿卜粉碎和__________，以提高萃取效率。鑒定萃取物中是否含有胡蘿卜素時，通?？刹捎胈_________法，在鑒定的過程中需要用______________作為對照。(2)用水蒸氣蒸餾法提取薄荷油時，在油水混合物中加入氯化鈉的作用是__________________________，分離出的油層中加入無水硫酸鈉的作用是____________________，除去固體硫酸鈉的常用方法是__________?！久麕熋鎸γ妗?017高考生物大一輪復(fù)習(xí)生物技術(shù)實踐第3講植物組織培養(yǎng)、DNA技術(shù)及植物有效成分的提取課件（選修1）(3)橘皮精油的有效成分在用水蒸氣蒸餾時會發(fā)生部分水解，使用水中蒸餾法又會產(chǎn)生__________的問題，所以一般采用__________法?！敬鸢浮?1)干燥紙層析標(biāo)準(zhǔn)樣品(2)有利于油層和水層的分離除去少量的水過濾(3)原料焦糊壓榨【名師面對面】2017高考生物大一輪復(fù)習(xí)生物技術(shù)實踐第3講植物組織培養(yǎng)、DNA技術(shù)及植物有效成分的提取課件（選修1）【解析】(1)為提高萃取效率，從胡蘿卜中提取胡蘿卜素時，需要在萃取前將胡蘿卜粉碎和干燥。通常采用紙層析法鑒定萃取物中是否含有胡蘿卜素，在鑒定的過程中需要用標(biāo)準(zhǔn)樣品作為對照。(2)水蒸氣蒸餾法提取薄荷油時，為使油層和水層分離，需在油水混合物中加入氯化鈉；分離出的油層中加入無水硫酸鈉的作用是除去少量的水；除去固體硫酸鈉的常用方法是過濾。(3)由于橘皮精油的有效成分在用水蒸氣蒸餾時會發(fā)生部分水解，使用水中蒸餾法又會產(chǎn)生原料焦糊的問題，所以一般采用壓榨法提取橘皮精油。【名師面對面】2017高考生物大一輪復(fù)習(xí)生物技術(shù)實踐第3講植物組織培養(yǎng)、DNA技術(shù)及植物有效成分的提取課件（選修1）1．PCR的反應(yīng)過程DNA和蛋白質(zhì)技術(shù)、DNA的粗提取和鑒定1．PCR的反應(yīng)過程DNA和蛋白質(zhì)技術(shù)、DNA的粗提取和鑒定2．細(xì)胞內(nèi)DNA復(fù)制與PCR技術(shù)比較細(xì)胞內(nèi)DNA復(fù)制PCR不同點解旋在解旋酶作用下邊解旋邊復(fù)制80～100℃高溫解旋，雙鏈分開酶DNA解旋酶、DNA聚合酶TaqDNA聚合酶引物RNA單鏈DNA或RNA溫度體內(nèi)溫和條件高溫相同點①需提供DNA復(fù)制的模板②四種脫氧核苷酸做原料③子鏈延伸的方向都是從5′端到3′端④都需要酶的催化2．細(xì)胞內(nèi)DNA復(fù)制與PCR技術(shù)比較細(xì)胞內(nèi)DNA復(fù)制PCR不3．血紅蛋白的分離方法(1)凝膠色譜法蛋白質(zhì)比較相對分子質(zhì)量大相對分子質(zhì)量小凝膠內(nèi)部不能進(jìn)入能進(jìn)入運動方式垂直向下垂直向下和無規(guī)則擴(kuò)散運動經(jīng)過路程較短較長洗脫次序先流出后流出3．血紅蛋白的分離方法蛋白質(zhì)比較相對分子質(zhì)量大相對分子質(zhì)量小(2)電泳法①含義：帶電粒子在電場作用下發(fā)生遷移過程。②原理：利用了待分離樣品中各種分子帶電性質(zhì)的差異和分子本身大小、形狀不同，使帶電分子產(chǎn)生不同的遷移速度，從而實現(xiàn)樣品中各種分子的分離。【名師面對面】2017高考生物大一輪復(fù)習(xí)生物技術(shù)實踐第3講植物組織培養(yǎng)、DNA技術(shù)及植物有效成分的提取課件（選修1）特別提醒——(1)引物是指能夠與DNA母鏈的一段堿基序列互補(bǔ)配對的一小段DNA或RNA。(2)DNA聚合酶只能特異地復(fù)制處于兩個引物之間的DNA序列，使這段固定長度的序列呈指數(shù)擴(kuò)增。(3)血紅蛋白的分離一般用SDS—聚丙烯酰胺凝膠電泳法，可以用來測定蛋白質(zhì)的相對分子質(zhì)量，即對血紅蛋白進(jìn)行純度鑒定。特別提醒——(1)引物是指能夠與DNA母鏈的一段堿基序列互補(bǔ)4．分離DNA、分離蛋白質(zhì)與PCR技術(shù)的比較項目分離DNAPCR技術(shù)分離蛋白質(zhì)實驗原理DNA在不同濃度NaCl溶液中溶解度不同，且不溶于冷酒精利用DNA熱變性原理體外擴(kuò)增DNA依據(jù)相對分子質(zhì)量的大小不同來分離蛋白質(zhì)實驗過程選取材料→破碎細(xì)胞釋放DNA→除去雜質(zhì)→DNA析出與鑒定變性→復(fù)性→延伸樣品處理→凝膠色譜操作實驗結(jié)果獲得較純凈的DNA獲得大量DNA相對分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì)得以分離實驗意義為DNA研究打下基礎(chǔ)解決了DNA研究中材料不足的問題為蛋白質(zhì)的研究和利用提供了原材料4．分離DNA、分離蛋白質(zhì)與PCR技術(shù)的比較項目分離DNAP5．分離DNA實驗中4次過濾的比較項目第一次過濾第二次過濾第三次過濾第四次過濾濾液中含DNA的核物質(zhì)DNA溶于0.14mol/LNaCl溶液的雜質(zhì)溶于冷酒精的雜質(zhì)紗布上細(xì)胞膜、核膜等殘片不溶于2mol/LNaCl溶液的雜質(zhì)DNADNA過濾前加入的物質(zhì)蒸餾水NaCl溶液蒸餾水體積分?jǐn)?shù)為95%的冷酒精過濾的目的去除細(xì)胞膜、核膜等雜質(zhì)去除溶于2mol/LNaCl的雜質(zhì)去除溶于0.14mol/LNaCl溶液的雜質(zhì)去除溶于95%冷酒精的雜質(zhì)5．分離DNA實驗中4次過濾的比較項目第一次過濾第二次過濾第

考查PCR技術(shù)和蛋白質(zhì)技術(shù)1．多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR技術(shù))是體外酶促合成特異DNA片段的一種方法，由高溫變性、低溫退火及適溫延伸等幾步反應(yīng)組成一個周期，循環(huán)進(jìn)行，使目的DNA得以迅速擴(kuò)增，其簡要過程如圖所示。下列關(guān)于PCR技術(shù)敘述不正確的是() 考查PCR技術(shù)和蛋白質(zhì)技術(shù)A．PCR技術(shù)是在實驗室中以少量DNA制備大量DNA的技術(shù)B．反應(yīng)中新合成的DNA又可以作為下一輪反應(yīng)的模板C．PCR技術(shù)中以核糖核苷酸為原料，以指數(shù)方式擴(kuò)增D．應(yīng)用PCR技術(shù)與探針雜交技術(shù)可以檢測基因突變【答案】C【解析】PCR技術(shù)是人工擴(kuò)增DNA的方法，原料是脫氧核苷酸而不是核糖核苷酸?！久麕熋鎸γ妗?017高考生物大一輪復(fù)習(xí)生物技術(shù)實踐第3講植物組織培養(yǎng)、DNA技術(shù)及植物有效成分的提取課件（選修1）2．(2015年四川重點中學(xué)模擬)如圖為凝膠色譜法分離蛋白質(zhì)示意圖和SDS－聚丙烯酰胺凝膠電泳示意圖。據(jù)圖分析不正確的是()2．(2015年四川重點中學(xué)模擬)如圖為凝膠色譜法分離蛋白質(zhì)A．在裝填圖甲中凝膠色譜柱時一旦發(fā)現(xiàn)柱內(nèi)有氣泡存在，就需要重裝B．圖甲中大分子蛋白質(zhì)因阻力大而移動慢，所以最后從層析柱中流出來C．圖乙中凝膠中加入的SDS可以使蛋白質(zhì)在電泳時遷移速率完全取決于分子大小D．洗脫時，如果紅色區(qū)帶均勻一致的移動，說明色譜柱制作成功【答案】B【名師面對面】2017高考生物大一輪復(fù)習(xí)生物技術(shù)實踐第3講植物組織培養(yǎng)、DNA技術(shù)及植物有效成分的提取課件（選修1）【解析】在裝填凝膠色譜柱時，凝膠裝填在色譜柱內(nèi)要均勻，不能有氣泡存在，因為氣泡會影響蛋白質(zhì)洗脫的次序，A正確；圖甲中大分子蛋白質(zhì)因不容易進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道，故路程短，移動速度快，所以最先從層析柱中流出來，B錯誤；SDS－聚丙烯酰胺凝膠電泳的遷移速率完全取決于分子大小，因此圖乙中凝膠加入的SDS可以使蛋白質(zhì)遷移速率完全取決于分子大小，C正確；洗脫時，如果紅色區(qū)帶均勻一致的移動，說明色譜柱制作成功，D正確?！久麕熋鎸γ妗?017高考生物大一輪復(fù)習(xí)生物技術(shù)實踐第3講植物組織培養(yǎng)、DNA技術(shù)及植物有效成分的提取課件（選修1）

考查DNA的粗提取和鑒定1．(2016年黑龍江齊齊哈爾期中)“DNA的粗提取和鑒定”實驗中的三次過濾：(1)過濾用蒸餾水稀釋過的雞血細(xì)胞液(2)過濾含黏稠物的0.14mol/LNaCl溶液(3)過濾溶解有DNA的2mol/LNaCl溶液 考查DNA的粗提取和鑒定以上三次過濾分別為了獲得()A．含核物質(zhì)的濾液、紗布上的黏稠物、含DNA的濾液B．含核物質(zhì)的濾液、濾液中DNA黏稠物、含DNA的濾液C．含核物質(zhì)的濾液、濾液中DNA黏稠物、紗布上的DNAD．含較純的DNA濾液、紗布上的黏稠物、含DNA的濾液【答案】A【名師面對面】2017高考生物大一輪復(fù)習(xí)生物技術(shù)實踐第3講植物組織培養(yǎng)、DNA技術(shù)及植物有效成分的提取課件（選修1）【解析】(1)過濾用蒸餾水稀釋過的雞血細(xì)胞液，目的是為了獲得含有核物質(zhì)的濾液；(2)DNA在0.14mol/LNaCl溶液中的溶解度最低，因此過濾含粘稠物的0.14mol/LNaCl溶液的目的是獲得紗布上的粘稠物；(3)DNA在2mol/LNaCl溶液中的溶解度最高，因此過濾溶解有DNA的2mol/LNaCl溶液的目的是獲得含DNA的濾液。【名師面對面】2017高考生物大一輪復(fù)習(xí)生物技術(shù)實踐第3講植物組織培養(yǎng)、DNA技術(shù)及植物有效成分的提取課件（選修1）2．“DNA的粗提取與鑒定”實驗中，操作正確的是()A．取制備好的雞血細(xì)胞液5～10mL注入燒杯中，迅速加入物質(zhì)的量濃度為0.14mol/L的NaCl溶液20mL，同時用玻璃棒沿同一方向快速攪拌5min，可使血細(xì)胞破裂，釋放出DNAB．整個DNA提取過程中，兩次加蒸餾水的目的都是為了降低溶液中NaCl的濃度，使DNA分子的溶解度達(dá)到最低，析出DNA分子C．整個DNA提取操作中，兩次加入2mol/L的NaCl溶液，目的都是使DNA盡可能多地溶解在NaCl溶液中2．“DNA的粗提取與鑒定”實驗中，操作正確的是()D．DNA鑒定操作中，只要向溶有DNA的NaCl溶液中加入4mL的二苯胺試劑，即可出現(xiàn)藍(lán)色【答案】C【解析】取制備好的雞血細(xì)胞液注入燒杯中，迅速加入蒸餾水并用玻璃棒沿同一方向攪拌，使血細(xì)胞破裂，將DNA釋放出來；整個DNA提取過程中，使用兩次蒸餾水，第一次是使血細(xì)胞吸水漲破，釋放DNA，第二次是用來稀釋NaCl溶液，使DNA析出；在DNA鑒定操作中，DNA遇二苯胺試劑呈藍(lán)色需在沸水浴條件下完成。D．DNA鑒定操作中，只要向溶有DNA的NaCl溶液中加入4【答案】①二苯胺②蒸餾③壓榨④萃取課堂歸納【網(wǎng)控全局】

【答案】①二苯胺②蒸餾③壓榨④萃取課堂歸納【網(wǎng)控全局】1．植物組織培養(yǎng)的4個方面：(1)理論基礎(chǔ)：全能性。(2)基本過程：包括脫分化和再分化。(3)培養(yǎng)基的制備：誘導(dǎo)愈傷組織的固體培養(yǎng)基，分裝后要進(jìn)行滅菌。接種前，要對外植體進(jìn)行消毒。(4)植物激素的影響：組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基中必須加入生長素和細(xì)胞分裂素，兩種激素的使用順序和濃度配比將影響組織培養(yǎng)過程中的細(xì)胞分裂和分化?！疽谆毂孛鳌?．植物組織培養(yǎng)的4個方面：【易混必明】2．DNA的粗提取與鑒定：(1)DNA的溶解性：DNA在0.14mol/LNaCl溶液中的溶解度最?。籇NA不溶于酒精溶液，而某些蛋白質(zhì)則溶于酒精溶液，據(jù)此也可使DNA和蛋白質(zhì)分離。(2)DNA的耐受性：DNA對酶、高溫和洗滌劑都具有較好的耐受性。(3)DNA的鑒定：DNA在沸水浴的條件下，遇二苯胺會被染成藍(lán)色?！久麕熋鎸γ妗?017高考生物大一輪復(fù)習(xí)生物技術(shù)實踐第3講植物組織培養(yǎng)、DNA技術(shù)及植物有效成分的提取課件（選修1）3．植物有效成分的提?。?1)植物芳香油的提取方法：壓榨法、蒸餾法和萃取法等。(2)芳香油的性質(zhì)：不溶于水，易溶于有機(jī)溶劑，因此可用有機(jī)溶劑作為提取劑來提取芳香油。(3)胡蘿卜素的性質(zhì)：是橘黃色結(jié)晶，從胡蘿卜中提取胡蘿卜素，常用親脂(水不溶)性有機(jī)溶劑(或有機(jī)溶劑)作萃取劑。(4)胡蘿卜素的提取方法：萃取法。(5)胡蘿卜素的鑒定：紙層析法，在鑒定過程中需要用標(biāo)準(zhǔn)樣品對照。3．植物有效成分的提?。褐睋舾呖贾睋舾呖颊n時作業(yè)課時作業(yè)謝謝觀看謝謝觀看選修1生物技術(shù)實踐第3講植物組織培養(yǎng)、DNA技術(shù)及植物有效成分的提取基礎(chǔ)夯實課堂歸納課時作業(yè)考點精研直擊高考選修1生物技術(shù)實踐第3講植物組織培養(yǎng)、DNA技術(shù)及植物有一、植物組織培養(yǎng)1．培養(yǎng)基(1)成分：大量元素、微量元素、有機(jī)成分、______和瓊脂。(2)類型：____________、發(fā)芽培養(yǎng)基和生根培養(yǎng)基。(3)作用：為植物組織或器官生長和發(fā)育提供__________。(4)制備：配制各種母液→配制培養(yǎng)基→______?；A(chǔ)夯實【知識梳理】

激素MS培養(yǎng)基營養(yǎng)條件滅菌

一、植物組織培養(yǎng)基礎(chǔ)夯實【知識梳理】激素MS培養(yǎng)基營養(yǎng)完整的植株脫分化再分化

完整的植株脫分化再分化3．菊花的組織培養(yǎng)過程(1)影響植物組織培養(yǎng)的主要因素①選材：一般選擇__________植株的莖上部新生的側(cè)枝。②培養(yǎng)基：常用____________，其主要成分有大量元素、微量元素、有機(jī)物，常需要添加______________。未開花MS培養(yǎng)基植物激素

3．菊花的組織培養(yǎng)過程未開花MS培養(yǎng)基植物激素(2)實驗操作過程制備MS固體培養(yǎng)基：配制好的培養(yǎng)基進(jìn)行高壓蒸汽滅菌

外植體消毒：70%的酒精消毒→無菌水清洗→0.1%的氯 化汞溶液消毒→無菌水清洗接種：始終在______________旁進(jìn)行，對接種工具要用 ____________滅菌，將菊花莖段插入培養(yǎng)基中時 注意不要倒插培養(yǎng)與移栽：在18～22℃的__________中培養(yǎng)，得到試 管苗后進(jìn)行移栽酒精燈火焰火焰灼燒無菌箱

(2)實驗操作過程酒精燈火焰火焰灼燒無菌箱4．月季的花藥培養(yǎng)(1)被子植物的花粉發(fā)育過程小孢子母細(xì)胞→______________→__________→雙核期→花粉粒(2)產(chǎn)生花粉植株的兩條途徑(3)影響花藥培養(yǎng)的因素①主要因素：______________和________________。②月季花藥培養(yǎng)一般選擇______期。四分體時期單核期

材料的選擇培養(yǎng)基的組成

單核

4．月季的花藥培養(yǎng)四分體時期單核期材料的選擇培養(yǎng)基的二、植物有效成分的提取1．植物芳香油的提取(1)植物芳香油的主要化學(xué)成分：萜類化合物及其衍生物，具有很強(qiáng)的______性。提取方法有蒸餾、______和萃取等。(2)提取玫瑰精油實驗①原理：______________法。②實驗流程：揮發(fā)壓榨

水蒸氣蒸餾

水蒸氣蒸餾無水Na2SO4

二、植物有效成分的提取揮發(fā)壓榨水蒸氣蒸餾水蒸氣蒸餾(3)提取橘皮精油的實驗①原理：一般用__________法。②實驗流程：石灰水浸泡→漂洗→______→過濾→靜置→再次__________→橘皮油。壓榨壓榨過濾

壓榨壓榨過濾水萃取干燥紙層析水萃取干燥紙層析三、DNA和蛋白質(zhì)技術(shù)1．DNA的粗提取與鑒定(1)提取原理DNA與雜質(zhì)的溶解度不同，DNA與雜質(zhì)對酶、高溫、洗滌劑的__________不同。(2)實驗設(shè)計①材料的選?。哼x用DNA含量相對______的生物組織，如雞血、菜花、洋蔥等。②破碎細(xì)胞(以雞血為例)：雞血細(xì)胞，加__________，用__________攪拌，用________過濾，收集濾液。耐受性較高蒸餾水玻璃棒紗布

三、DNA和蛋白質(zhì)技術(shù)耐受性較高蒸餾水玻璃棒紗布③去除雜質(zhì)：利用DNA在不同濃度的______________中溶解度不同，通過控制________________的濃度去除雜質(zhì)。④DNA析出：將處理后的溶液過濾，加入與濾液體積相等的、冷卻的__________(體積分?jǐn)?shù)為95%)。(3)DNA的鑒定將DNA溶解在2mol/L的NaCl溶液中，加入4mL的____________，沸水中加熱5min，溶液變成藍(lán)色。NaCl溶液NaCl溶液

酒精溶液二苯胺試劑NaCl溶液NaCl溶液酒精溶液二苯胺試劑熱變性冷卻熱變性冷卻變性90℃復(fù)性55℃左右引物延伸DNA聚合酶

變性90℃復(fù)性55℃左右引物延伸DNA聚合酶血紅蛋白透析小凝膠色譜

血紅蛋白透析小凝膠色譜1．下列有關(guān)植物組織培養(yǎng)的敘述，正確的是()A．愈傷組織是一團(tuán)有特定結(jié)構(gòu)和功能的薄壁細(xì)胞B．二倍體植株的花粉經(jīng)脫分化與再分化后得到穩(wěn)定遺傳的植株C．用人工薄膜將胚狀體、愈傷組織等分別包裝可制成人工種子D．植物耐鹽突變體可通過添加適量NaCl的培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選而獲得【答案】D【自練自測】

1．下列有關(guān)植物組織培養(yǎng)的敘述，正確的是()【自練自測】【解析】在普通培養(yǎng)基中添加適量的NaCl，制成選擇培養(yǎng)基，可用來篩選植物耐鹽突變體，故選項D正確；愈傷組織的細(xì)胞排列疏松而無規(guī)則，是一種高度液泡化的呈無定形狀態(tài)的薄壁細(xì)胞；二倍體植株的花粉經(jīng)離體培養(yǎng)后得到單倍體植株，該單倍體高度不育，不能穩(wěn)定遺傳；用人工薄膜將胚狀體等進(jìn)行包裝可制成人工種子，愈傷組織不能作為制作人工種子的材料，故選項A、B、C錯誤。【名師面對面】2017高考生物大一輪復(fù)習(xí)生物技術(shù)實踐第3講植物組織培養(yǎng)、DNA技術(shù)及植物有效成分的提取課件（選修1）2．(2015年江蘇南京三模)下列有關(guān)DNA粗提取與鑒定的實驗敘述，正確的是()A．酵母、菜花和豬的成熟紅細(xì)胞都可作為提取DNA的材料B．DNA在NaCl溶液中的溶解度隨其溶液濃度增大而增大C．在溶有DNA的濾液中加入嫩肉粉，可分解其中的雜質(zhì)蛋白D．鑒定DNA時，應(yīng)將絲狀物直接加入到二苯胺試劑中進(jìn)行沸水浴【答案】C2．(2015年江蘇南京三模)下列有關(guān)DNA粗提取與鑒定的實【解析】理論上只要含有DNA的生物組織均可作為該實驗的材料，因此酵母和菜花均可作為提取DNA的材料，但哺乳動物成熟紅細(xì)胞無細(xì)胞核，即沒有足夠的DNA，不能作為提取DNA的材料，A錯誤；DNA在2mol/LNaCl溶液中溶解度最大，高于或低于此濃度其溶解度均降低，B錯誤；嫩肉粉含有蛋白酶，故在溶有DNA的濾液中加入嫩肉粉，可分解其中的雜質(zhì)蛋白，C正確；鑒定DNA時，不能將絲狀物直接加入到二苯胺試劑中進(jìn)行沸水浴，應(yīng)將絲狀物先溶解再放入二苯胺試劑檢測，D錯誤?！久麕熋鎸γ妗?017高考生物大一輪復(fù)習(xí)生物技術(shù)實踐第3講植物組織培養(yǎng)、DNA技術(shù)及植物有效成分的提取課件（選修1）3．標(biāo)準(zhǔn)的PCR過程一般分為變性、復(fù)性、延伸三大步，這三大步需要的溫度依次是()A．94℃、55℃、72℃B．72℃、55℃、94℃C．55℃、94℃、72℃D．80℃、55℃、72℃【答案】A【解析】當(dāng)溫度上升到90℃或以上(90～96℃)時，雙鏈DNA解旋為單鏈，稱之為變性；當(dāng)溫度下降到50℃左右(40～60℃)時，兩種引物通過堿基互補(bǔ)配對與兩條單鏈DNA結(jié)合；當(dāng)溫度上升到72℃(70～75℃)時，溶液中的四種脫氧核苷酸在TaqDNA聚合酶的作用下，根據(jù)堿基互補(bǔ)配對原則合成新的DNA鏈，稱為延伸。3．標(biāo)準(zhǔn)的PCR過程一般分為變性、復(fù)性、延伸三大步，這三大步4．下列有關(guān)“血紅蛋白提取和分離”的敘述中，正確的是()A．用蒸餾水進(jìn)行紅細(xì)胞的洗滌，其目的是使紅細(xì)胞漲破B．將血紅蛋白溶液進(jìn)行透析，其目的是去除相對分子質(zhì)量較大的雜質(zhì)C．血紅蛋白釋放時加入有機(jī)溶劑，其目的是使血紅蛋白溶于有機(jī)溶劑D．整個過程不斷用磷酸緩沖液處理，是為了維持血紅蛋白的結(jié)構(gòu)和活性【答案】D4．下列有關(guān)“血紅蛋白提取和分離”的敘述中，正確的是()【解析】應(yīng)用生理鹽水洗滌，目的是去除雜蛋白，以利于后續(xù)步驟的分離純化；血紅蛋白為大分子，透析的目的是為了除去小分子物質(zhì)；血紅蛋白釋放時加入有機(jī)溶劑，其目的是溶解磷脂，加速血紅蛋白的釋放?！久麕熋鎸γ妗?017高考生物大一輪復(fù)習(xí)生物技術(shù)實踐第3講植物組織培養(yǎng)、DNA技術(shù)及植物有效成分的提取課件（選修1）5．在玫瑰精油的提取和胡蘿卜素的提取過程中共有的操作是()A．紙層析 B．水浴加熱C．過濾 D．加入NaCl【答案】C【解析】紙層析法用于胡蘿卜素的鑒定；水浴加熱用于胡蘿卜素的萃??；在玫瑰精油的提取和胡蘿卜素的提取過程中都要用到過濾；在玫瑰精油的提取中加入NaCl使油水分層?！久麕熋鎸γ妗?017高考生物大一輪復(fù)習(xí)生物技術(shù)實踐第3講植物組織培養(yǎng)、DNA技術(shù)及植物有效成分的提取課件（選修1）1．MS培養(yǎng)基的主要成分及作用：考點精研植物組織培養(yǎng)的過程及條件成分作用大量元素提供植物細(xì)胞生活所必需的無機(jī)鹽微量元素提供植物細(xì)胞生活所必需的無機(jī)鹽蔗糖提供碳源，調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的滲透壓植物激素調(diào)節(jié)作用，啟動細(xì)胞分裂、脫分化和再分化的關(guān)鍵氨基酸、維生素等小分子有機(jī)物滿足離體細(xì)胞在正常代謝途徑受一定影響后所產(chǎn)生的特殊營養(yǎng)需求1．MS培養(yǎng)基的主要成分及作用：考點精研植物組織培養(yǎng)的過程及2．植物組織培養(yǎng)技術(shù)和花藥離體培養(yǎng)技術(shù)的比較項目植物組織培養(yǎng)花藥離體培養(yǎng)相同點理論依據(jù)植物細(xì)胞的全能性基本過程脫分化→再分化影響因素選材、營養(yǎng)、激素、溫度、pH、光照等不同點外植體體細(xì)胞生殖細(xì)胞(花粉粒)生殖方式無性生殖有性生殖培養(yǎng)結(jié)果正常植株單倍體植株可育性可育高度不育，秋水仙素處理后可育操作流程制備培養(yǎng)基→外植體消毒→接種→培養(yǎng)→移栽→栽培選材→材料的消毒→接種和培養(yǎng)→篩選和誘導(dǎo)→移栽→栽培選育2．植物組織培養(yǎng)技術(shù)和花藥離體培養(yǎng)技術(shù)的比較項目植物組織培養(yǎng)3．植物激素：在配制好的MS培養(yǎng)基中，常常需要添加植物激素。其中生長素和細(xì)胞分裂素是啟動細(xì)胞分裂、脫分化和再分化的關(guān)鍵性激素。植物激素的濃度、使用的先后順序以及用量的比例等，都會影響實驗結(jié)果。①按照不同的順序使用這兩類激素，會得到不同的實驗結(jié)果(如下表)：使用順序?qū)嶒灲Y(jié)果先使用生長素，后使用細(xì)胞分裂素有利于細(xì)胞分裂，但細(xì)胞不分化先使用細(xì)胞分裂素，后使用生長素細(xì)胞既分裂又分化同時使用分化頻率提高3．植物激素：在配制好的MS培養(yǎng)基中，常常需要添加植物激素?！久麕熋鎸γ妗?017高考生物大一輪復(fù)習(xí)生物技術(shù)實踐第3講植物組織培養(yǎng)、DNA技術(shù)及植物有效成分的提取課件（選修1）

考查植物組織培養(yǎng)和花藥離體培1．(2016年黑龍江鶴壁期末)月季的花藥培養(yǎng)過程的難點之一是材料的選擇，下列有關(guān)材料選擇的敘述中正確的是()A．從花藥來看，應(yīng)當(dāng)選擇盛花期的花藥B．從花粉來看，應(yīng)當(dāng)選擇小孢子四分體期的花粉C．從花蕾來看，應(yīng)當(dāng)選擇略微開放的花蕾D．從檢測花粉的實驗方法看，應(yīng)該用顯微鏡觀察已染色的花粉樣品臨時裝片【答案】D 考查植物組織培養(yǎng)和花藥離體培【解析】從花藥來看，應(yīng)當(dāng)選擇初花期的花藥，A錯誤；從花粉來看，應(yīng)當(dāng)選擇單核期的花粉，B錯誤；從花蕾來看，應(yīng)當(dāng)選擇完全未開放的花蕾，C錯誤；用已染色的花粉樣品作臨時裝片，才能觀察到細(xì)胞核的位置，以確定花粉發(fā)育的時期，D正確。【名師面對面】2017高考生物大一輪復(fù)習(xí)生物技術(shù)實踐第3講植物組織培養(yǎng)、DNA技術(shù)及植物有效成分的提取課件（選修1）2．植物的花藥培養(yǎng)在育種上有特殊的意義。植物組織培養(yǎng)可用于無病毒植株及細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)等方面。請回答相關(guān)問題：(1)利用月季的花藥離體培養(yǎng)產(chǎn)生單倍體時，選材非常重要。一般來說，在______________期花藥培養(yǎng)的成功率最高。為了選擇該期的花藥，通常選擇________________的花蕾。確定花粉發(fā)育時期最常用的方法有__________法，但是對于花粉細(xì)胞核不易著色的植物，需采用________________法，該法能將花粉細(xì)胞核染成__________色。(2)若要進(jìn)行蘭花無病毒植株的培育，首先選擇蘭花的____________________作為外植體。從外植體到無病毒植株試管苗，要人為控制細(xì)胞的__________和__________過程。2．植物的花藥培養(yǎng)在育種上有特殊的意義。植物組織培養(yǎng)可用于無(3)進(jìn)行組織培養(yǎng)需配制MS培養(yǎng)基，在該培養(yǎng)基中常需要添加__________、__________等激素。植物激素的用量比例應(yīng)為____________________，有利于根的分化。(4)不同植物的組織培養(yǎng)除需營養(yǎng)和激素外，_____________________________________等外界條件也很重要。(5)無菌技術(shù)也是成功誘導(dǎo)出花粉植株的重要因素，下列各項中使用化學(xué)藥劑進(jìn)行消毒的是__________，采用灼燒方法進(jìn)行滅菌的是__________。(填序號)①培養(yǎng)皿②培養(yǎng)基③實驗操作者的雙手④三角錐形瓶⑤接種環(huán)⑥花蕾(3)進(jìn)行組織培養(yǎng)需配制MS培養(yǎng)基，在該培養(yǎng)基中常需要添加_【答案】(1)單核靠邊完全未開放醋酸洋紅焙花青—鉻礬藍(lán)黑(2)莖尖分生組織脫分化(或去分化)再分化(3)生長素細(xì)胞分裂素(兩空順序可以顛倒)生長素多于細(xì)胞分裂素(4)pH、溫度、光照(5)③⑥⑤【名師面對面】2017高考生物大一輪復(fù)習(xí)生物技術(shù)實踐第3講植物組織培養(yǎng)、DNA技術(shù)及植物有效成分的提取課件（選修1）【解析】(1)早期的花藥比后期的更容易培養(yǎng)成功。一般來說，在單核期，細(xì)胞核由中央移向細(xì)胞一側(cè)的時期，花藥培養(yǎng)成功率最高。該時期的花藥通常存在于完全未開放的花蕾中。(2)根尖、莖尖約0～0.1mm區(qū)域中幾乎不含病毒。病毒通過維管系統(tǒng)移動，而分生組織中不存在維管系統(tǒng)，且莖尖分生組織中，代謝活力高，在競爭中病毒復(fù)制處于劣勢。(3)生長素與細(xì)胞分裂素等植物激素可調(diào)節(jié)脫分化和再分化。當(dāng)生長素含量高于細(xì)胞分裂素含量時，利于生根。(4)植物培養(yǎng)時，除需要營養(yǎng)、激素外，還需要適宜的溫度、pH和光照等。(5)對實驗器具進(jìn)行滅菌處理，對實驗過程中的具有生物活性的材料或用具進(jìn)行消毒處理?！窘馕觥?1)早期的花藥比后期的更容易培養(yǎng)成功。一般來說，在1．植物有效成分的提取的三種方法比較植物有效成分的提取提取方法水蒸氣蒸餾法壓榨法有機(jī)溶劑萃取法實驗原理利用水蒸氣將揮發(fā)性較強(qiáng)的植物芳香油攜帶出來通過機(jī)械加壓，壓榨出果皮中的芳香油使芳香油溶解在有機(jī)溶劑中，蒸發(fā)溶劑獲得芳香油方法步驟①水蒸氣蒸餾②分離油層③除水過濾①石灰水浸泡、漂洗②壓榨、過濾、靜置③再次過濾①粉碎、干燥②萃取、過濾③濃縮1．植物有效成分的提取的三種方法比較植物有效成分的提取提取提取方法水蒸氣蒸餾法壓榨法有機(jī)溶劑萃取法適用范圍適用于提取玫瑰油、薄荷油等揮發(fā)性強(qiáng)的芳香油適用于柑橘、檸檬等易焦糊原料的提取適用范圍廣，要求原料的顆粒要盡可能細(xì)小，能充分浸泡在有機(jī)溶劑中優(yōu)點簡單易行，便于分離生產(chǎn)成本低，易保持原料原有的結(jié)構(gòu)和功能出油率高，易分離局限性水中蒸餾會導(dǎo)致原料焦糊和有效成分水解等問題分離較為困難，出油率相對較低使用的有機(jī)溶劑處理不當(dāng)會影響芳香油的質(zhì)量提取水蒸氣蒸餾法壓榨法有機(jī)溶劑適用適用于提取玫瑰油、薄荷油等2．植物有效成分提取過程的注意事項(1)在玫瑰精油的提取過程中，加入NaCl的目的是增加水層的密度，有利于玫瑰油與水分層，加入無水Na2SO4的目的是吸收精油中殘留的水分。(2)在提取橘皮精油時，為了提高出油率，需要將柑橘皮干燥去水，并用石灰水浸泡，浸泡時間為10h以上。橘皮要浸透，這樣壓榨時不會滑脫，且出油率高，過濾時不會堵塞篩眼。【名師面對面】2017高考生物大一輪復(fù)習(xí)生物技術(shù)實踐第3講植物組織培養(yǎng)、DNA技術(shù)及植物有效成分的提取課件（選修1）(3)在胡蘿卜素的提取中，原料顆粒的大小、緊密程度、含水量、萃取的溫度和時間等條件也能影響萃取。因此在萃取的過程中，要先將胡蘿卜進(jìn)行粉碎和干燥，使之與萃取劑充分接觸，提高溶解度?！久麕熋鎸γ妗?017高考生物大一輪復(fù)習(xí)生物技術(shù)實踐第3講植物組織培養(yǎng)、DNA技術(shù)及植物有效成分的提取課件（選修1）

考查植物有效成分的提取1．(2016年河南洛陽期末)在植物有效成分的提取過程中，下列有關(guān)敘述錯誤的是()A．蒸餾法是利用水將芳香油溶解下來，再把水蒸發(fā)掉，剩余的就是芳香油B．壓榨法是通過機(jī)械加壓，可壓榨出果皮中的芳香油C．萃取法是使芳香油溶解在溶劑后通過蒸發(fā)就可獲得芳香油D．蒸餾法適用于提取玫瑰油、薄荷油等揮發(fā)性強(qiáng)的芳香油【答案】A 考查植物有效成分的提取【解析】蒸餾法是利用水蒸氣將揮發(fā)性較強(qiáng)的芳香油攜帶出來，形成油水混合物，冷卻后可以分層，將芳香油分離出來，A錯誤；壓榨法是通過機(jī)械加壓，將原料中的芳香油擠壓出來，B正確；萃取法是將粉碎、干燥的植物原料用有機(jī)溶劑浸泡，使芳香油溶解在有機(jī)溶劑中，之后再通過蒸餾裝置蒸發(fā)出有機(jī)溶劑，剩下的就是要提取的物質(zhì)，C正確；蒸餾法適用于提取玫瑰油、薄荷油等揮發(fā)性強(qiáng)的芳香油，D正確?！久麕熋鎸γ妗?017高考生物大一輪復(fù)習(xí)生物技術(shù)實踐第3講植物組織培養(yǎng)、DNA技術(shù)及植物有效成分的提取課件（選修1）2．回答下列有關(guān)植物有效成分提取的問題：(1)從胡蘿卜中提取胡蘿卜素時，通常在萃取前要將胡蘿卜粉碎和__________，以提高萃取效率。鑒定萃取物中是否含有胡蘿卜素時，通?？刹捎胈_________法，在鑒定的過程中需要用______________作為對照。(2)用水蒸氣蒸餾法提取薄荷油時，在油水混合物中加入氯化鈉的作用是__________________________，分離出的油層中加入無水硫酸鈉的作用是____________________，除去固體硫酸鈉的常用方法是__________。【名師面對面】2017高考生物大一輪復(fù)習(xí)生物技術(shù)實踐第3講植物組織培養(yǎng)、DNA技術(shù)及植物有效成分的提取課件（選修1）(3)橘皮精油的有效成分在用水蒸氣蒸餾時會發(fā)生部分水解，使用水中蒸餾法又會產(chǎn)生__________的問題，所以一般采用__________法?！敬鸢浮?1)干燥紙層析標(biāo)準(zhǔn)樣品(2)有利于油層和水層的分離除去少量的水過濾(3)原料焦糊壓榨【名師面對面】2017高考生物大一輪復(fù)習(xí)生物技術(shù)實踐第3講植物組織培養(yǎng)、DNA技術(shù)及植物有效成分的提取課件（選修1）【解析】(1)為提高萃取效率，從胡蘿卜中提取胡蘿卜素時，需要在萃取前將胡蘿卜粉碎和干燥。通常采用紙層析法鑒定萃取物中是否含有胡蘿卜素，在鑒定的過程中需要用標(biāo)準(zhǔn)樣品作為對照。(2)水蒸氣蒸餾法提取薄荷油時，為使油層和水層分離，需在油水混合物中加入氯化鈉；分離出的油層中加入無水硫酸鈉的作用是除去少量的水；除去固體硫酸鈉的常用方法是過濾。(3)由于橘皮精油的有效成分在用水蒸氣蒸餾時會發(fā)生部分水解，使用水中蒸餾法又會產(chǎn)生原料焦糊的問題，所以一般采用壓榨法提取橘皮精油?！久麕熋鎸γ妗?017高考生物大一輪復(fù)習(xí)生物技術(shù)實踐第3講植物組織培養(yǎng)、DNA技術(shù)及植物有效成分的提取課件（選修1）1．PCR的反應(yīng)過程DNA和蛋白質(zhì)技術(shù)、DNA的粗提取和鑒定1．PCR的反應(yīng)過程DNA和蛋白質(zhì)技術(shù)、DNA的粗提取和鑒定2．細(xì)胞內(nèi)DNA復(fù)制與PCR技術(shù)比較細(xì)胞內(nèi)DNA復(fù)制PCR不同點解旋在解旋酶作用下邊解旋邊復(fù)制80～100℃高溫解旋，雙鏈分開酶DNA解旋酶、DNA聚合酶TaqDNA聚合酶引物RNA單鏈DNA或RNA溫度體內(nèi)溫和條件高溫相同點①需提供DNA復(fù)制的模板②四種脫氧核苷酸做原料③子鏈延伸的方向都是從5′端到3′端④都需要酶的催化2．細(xì)胞內(nèi)DNA復(fù)制與PCR技術(shù)比較細(xì)胞內(nèi)DNA復(fù)制PCR不3．血紅蛋白的分離方法(1)凝膠色譜法蛋白質(zhì)比較相對分子質(zhì)量大相對分子質(zhì)量小凝膠內(nèi)部不能進(jìn)入能進(jìn)入運動方式垂直向下垂直向下和無規(guī)則擴(kuò)散運動經(jīng)過路程較短較長洗脫次序先流出后流出3．血紅蛋白的分離方法蛋白質(zhì)比較相對分子質(zhì)量大相對分子質(zhì)量小(2)電泳法①含義：帶電粒子在電場作用下發(fā)生遷移過程。②原理：利用了待分離樣品中各種分子帶電性質(zhì)的差異和分子本身大小、形狀不同，使帶電分子產(chǎn)生不同的遷移速度，從而實現(xiàn)樣品中各種分子的分離?！久麕熋鎸γ妗?017高考生物大一輪復(fù)習(xí)生物技術(shù)實踐第3講植物組織培養(yǎng)、DNA技術(shù)及植物有效成分的提取課件（選修1）特別提醒——(1)引物是指能夠與DNA母鏈的一段堿基序列互補(bǔ)配對的一小段DNA或RNA。(2)DNA聚合酶只能特異地復(fù)制處于兩個引物之間的DNA序列，使這段固定長度的序列呈指數(shù)擴(kuò)增。(3)血紅蛋白的分離一般用SDS—聚丙烯酰胺凝膠電泳法，可以用來測定蛋白質(zhì)的相對分子質(zhì)量，即對血紅蛋白進(jìn)行純度鑒定。特別提醒——(1)引物是指能夠與DNA母鏈的一段堿基序列互補(bǔ)4．分離DNA、分離蛋白質(zhì)與PCR技術(shù)的比較項目分離DNAPCR技術(shù)分離蛋白質(zhì)實驗原理DNA在不同濃度NaCl溶液中溶解度不同，且不溶于冷酒精利用DNA熱變性原理體外擴(kuò)增DNA依據(jù)相對分子質(zhì)量的大小不同來分離蛋白質(zhì)實驗過程選取材料→破碎細(xì)胞釋放DNA→除去雜質(zhì)→DNA析出與鑒定變性→復(fù)性→延伸樣品處理→凝膠色譜操作實驗結(jié)果獲得較純凈的DNA獲得大量DNA相對分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì)得以分離實驗意義為DNA研究打下基礎(chǔ)解決了DNA研究中材料不足的問題為蛋白質(zhì)的研究和利用提供了原材料4．分離DNA、分離蛋白質(zhì)與PCR技術(shù)的比較項目分離DNAP5．分離DNA實驗中4次過濾的比較項目第一次過濾第二次過濾第三次過濾第四次過濾濾液中含DNA的核物質(zhì)DNA溶于0.14mol/LNaCl溶液的雜質(zhì)溶于冷酒精的雜質(zhì)紗布上細(xì)胞膜、核膜等殘片不溶于2mol/LNaCl溶液的雜質(zhì)DNADNA過濾前加入的物質(zhì)蒸餾水NaCl溶液蒸餾水體積分?jǐn)?shù)為95%的冷酒精過濾的目的去除細(xì)胞膜、核膜等雜質(zhì)去除溶于2mol/LNaCl的雜質(zhì)去除溶于0.14mol/LNaCl溶液的雜質(zhì)去除溶于95%冷酒精的雜質(zhì)5．分離DNA實驗中4次過濾的比較項目第一次過濾第二次過濾第

考查PCR技術(shù)和蛋白質(zhì)技術(shù)1．多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR技術(shù))是體外酶促合成特異DNA片段的一種方法，由高溫變性、低溫退火及適溫延伸等幾步反應(yīng)組成一個周期，循環(huán)進(jìn)行，使目的DNA得以迅速擴(kuò)增，其簡要過程如圖所示。下列關(guān)于PCR技術(shù)敘述不正確的是() 考查PCR技術(shù)和蛋白質(zhì)技術(shù)A．PCR技術(shù)是在實驗室中以少量DNA制備大量DNA的技術(shù)B．反應(yīng)中新合成的DNA又可以作為下一輪反應(yīng)的模板C．PCR技術(shù)中以核糖核苷酸為原料，以指數(shù)方式擴(kuò)增D．應(yīng)用PCR技術(shù)與探針雜交技術(shù)可以檢測基因突變【答案】C【解析】PCR技術(shù)是人工擴(kuò)增DNA的方法，原料是脫氧核苷