中藥新藥臨床前毒理學(xué)評價(jià)

中藥新藥臨床前

毒理學(xué)評價(jià)主要內(nèi)容定義任務(wù)及目的毒性作用類別相關(guān)測定數(shù)據(jù)新藥臨床前毒理學(xué)毒理學(xué)定義毒理學(xué)：是研究毒性物質(zhì)對機(jī)體的有害作用及其發(fā)生、機(jī)制、結(jié)果以及危害因素的科學(xué)。主要用于對外源性物質(zhì)的安全性評價(jià)和危險(xiǎn)性評估。早期毒理學(xué)：研究不同毒物的使用，著重毒物對機(jī)體的急性危害或致死作用現(xiàn)代毒理學(xué)：研究在特定情況下，生命有機(jī)體接觸化學(xué)、生物或物理物質(zhì)產(chǎn)生有害作用（毒性）的科學(xué)。藥物毒理學(xué)：是研究藥物對生命有機(jī)體有害作用的科學(xué)，用于新藥臨床前安全性評價(jià)、臨床試驗(yàn)及臨床合理用藥。

任務(wù)及目的藥物毒理學(xué)的任務(wù)：包括臨床毒理學(xué)、新藥臨床試驗(yàn)、藥物流行病學(xué)研究的任務(wù)。藥物毒理學(xué)的基本目的：?認(rèn)識并掌握藥物的毒性作用，為臨床安全用藥提供科學(xué)依據(jù)；?以在用藥過程中避免或減輕這些有毒作用的發(fā)生。毒性作用類別藥物不良反應(yīng)（adversereaction)：凡是不符合用藥目的并為病人帶來不適或痛苦的有害反應(yīng)統(tǒng)稱為藥物不良反應(yīng)。包括：副反應(yīng)、后遺效應(yīng)、停藥反應(yīng)、毒性反應(yīng)、變態(tài)反應(yīng)、特異質(zhì)反應(yīng)、致癌性、致畸性、致突變性；毒性作用類別藥物不良反應(yīng)副反應(yīng)后遺效應(yīng)停藥反應(yīng)毒性反應(yīng)變態(tài)反應(yīng)特異質(zhì)反應(yīng)毒性作用致癌性致畸性致突變性藥源性疾病毒性作用類別1、毒性反應(yīng)(toxicreaction)在治療劑量下不出現(xiàn)，僅在劑量過大、用藥時(shí)間過長或體內(nèi)藥物蓄積過多時(shí)才出現(xiàn)的反應(yīng)。2、變態(tài)反應(yīng)(allergicreaction)機(jī)體對藥物的不正常免疫反應(yīng)，非肽類藥物作為半抗原與機(jī)體蛋白結(jié)合后，經(jīng)過敏化過程而發(fā)生的反應(yīng)。

特點(diǎn)：因藥因人而異，與藥物效應(yīng)及劑量無關(guān)，用藥理拮抗藥解救無效。毒性作用類別3、特異質(zhì)反應(yīng)（idiosyncrasy）

用藥者有先天性遺傳異常，對某些藥物反應(yīng)特別敏感，出現(xiàn)的反應(yīng)性質(zhì)可能與常人不同。藥理遺傳異常所致。

特點(diǎn)：與藥物的固有藥理作用基本一致、嚴(yán)重程度與劑量成比例。4、致癌性（carcinogenesis）

屬于長期用藥產(chǎn)生的毒性，包括遺傳毒性致癌物、非遺傳毒性致癌物。（可以是遲發(fā)效應(yīng)）毒性作用類別5、生殖毒性和發(fā)育毒性（(reproductiveanddevelopmentaltoxicity）生殖毒性：針對育齡人群，用藥后對生殖系統(tǒng)及與生育相關(guān)的神經(jīng)或內(nèi)分泌系統(tǒng)產(chǎn)生的毒性。發(fā)育毒性：關(guān)注藥物對胚胎的影響，特別是藥物的致畸毒性。多代生殖毒性評價(jià)：涉及藥物對子代生殖系統(tǒng)的影響。毒性作用類別6、致突變與遺傳毒性(mutagenesisandgenetictoxicity)

藥物損傷遺傳物質(zhì)而發(fā)生突變作用，產(chǎn)生對人類本身（致癌毒性）及后代的影響（致畸毒性）。相關(guān)關(guān)測測定定數(shù)數(shù)據(jù)據(jù)量效效關(guān)關(guān)系系：藥藥物物的的毒毒性性效效應(yīng)應(yīng)與與劑劑量量在在一一定定范范圍圍內(nèi)內(nèi)成成比比例例，，稱稱為為量量效效關(guān)關(guān)系系。。量反反應(yīng)應(yīng)：毒毒性性效效應(yīng)應(yīng)的的強(qiáng)強(qiáng)弱弱呈呈連連續(xù)續(xù)增增減減的的量量變變，，稱稱為為量量反反應(yīng)應(yīng)。。例例：：心心率率快快慢慢等等。。質(zhì)反應(yīng)：毒性效效應(yīng)以全全或無、、陰性或或陽性等等表示，，稱為質(zhì)質(zhì)反應(yīng)。。例：死死亡與生生存、驚驚厥與不不驚厥。。相關(guān)測定定數(shù)據(jù)最大無毒毒性反應(yīng)應(yīng)劑量（noobservedadverseeffectlevel,NOAEL)：指受受試物在在一定時(shí)時(shí)間內(nèi)，，按一定定方式與與機(jī)體接接觸，用用靈敏的的現(xiàn)代檢檢測方法法和觀察察指標(biāo)未未發(fā)現(xiàn)損損害作用用的最高高劑量最小毒性性反應(yīng)劑劑量：出現(xiàn)毒毒性反應(yīng)應(yīng)的最小小劑量最大耐受受量（maximaltolerancedose，MTD）：不引引起受試試動(dòng)物死死亡的最最高劑量量相關(guān)測定定數(shù)據(jù)最小致死死劑量（minimallethaldose，MLD）：引起起個(gè)別受受試動(dòng)物物出現(xiàn)死死亡的劑劑量半數(shù)有效效量（medianeffectivedose,ED50）：能引引起50%的動(dòng)物或或?qū)嶒?yàn)標(biāo)標(biāo)本產(chǎn)生生反應(yīng)的的濃度或或劑量。。半數(shù)致死死量（medianlethaldose,LD50）：能能引起50%的動(dòng)物死死亡的濃濃度或劑劑量。相關(guān)測定定數(shù)據(jù)治療指數(shù)數(shù)：TI=LD50/ED50藥物實(shí)驗(yàn)驗(yàn)動(dòng)物的的LD50和ED50的比值稱稱為治療療指數(shù)（（therapeuticindex,TI），用以以表示藥藥物的安安全性。。安全范圍圍（marginofsafety）：ED99~LD1（或ED95~LD5）之間的的距離。。值越大大越安全全。有效量曲曲線和致致死量曲曲線的斜斜率不一一樣時(shí)，，以TI評價(jià)藥物物的安全全性并不不可靠。。新藥臨床床前毒理理學(xué)涉及全身身毒性和和局部毒毒性研究究。是為為新藥臨臨床用藥藥的安全全性提供供試驗(yàn)依依據(jù)，并并為臨床床毒副反反應(yīng)監(jiān)測測提供重重要信息息。新藥臨床床前毒理理學(xué)目的意義局限性申報(bào)資料料評價(jià)程序序新藥臨床床前毒理理學(xué)研究究目的毒性劑量量ToxicDose安全劑量量范圍Safetymargin毒性反應(yīng)應(yīng)Toxicreaction:性質(zhì)、程程度、量量毒關(guān)系系、產(chǎn)生生、達(dá)峰峰、持續(xù)續(xù)時(shí)間及及反復(fù)產(chǎn)產(chǎn)生毒性性反應(yīng)時(shí)時(shí)間、遲遲發(fā)性、、蓄積性性、耐受受性尋找毒性性反應(yīng)靶靶器官TargetOrgan毒性反應(yīng)應(yīng)是否可可逆Reversibility解毒或解救救措施Antidote確保臨床用用藥安全(重點(diǎn)監(jiān)測指指標(biāo))新藥臨床前前毒理學(xué)研研究意義（1）通過動(dòng)物物實(shí)驗(yàn)以確確立：出現(xiàn)現(xiàn)毒性反應(yīng)應(yīng)的癥狀、、程度、劑劑量、時(shí)間間、靶器官官以及損傷傷的可逆性性；安全劑劑量及安全全范圍。（2）通過上述述資料的獲獲得，達(dá)到到預(yù)測人類類臨床用藥藥的可能毒毒性，并制制定防治措措施；同時(shí)時(shí)推算臨床床研究的安安全參考劑劑量和安全全范圍的目目的。新藥臨床前前評價(jià)局限限性1、種屬差異異：假陽性性或假陰性性2、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物物數(shù)量有限限3、健康狀態(tài)態(tài)不同4、研究方法法的局限藥理毒理研研究申報(bào)資資料藥理毒理研研究資料綜綜述，主要要藥效學(xué)試試驗(yàn)，一般般藥理試驗(yàn)驗(yàn)，急性毒毒性試驗(yàn)，，長期毒性性試驗(yàn)，過過敏性、溶溶血性、刺刺激性等特特殊安全性性研究，復(fù)復(fù)方制劑中中多成分的的相互影響響試驗(yàn)、致致突變試驗(yàn)驗(yàn)，生殖毒毒性試驗(yàn)，，致癌試驗(yàn)驗(yàn)，依賴性性試驗(yàn)，動(dòng)動(dòng)物藥代動(dòng)動(dòng)力學(xué)試驗(yàn)驗(yàn)。藥物毒性臨臨床前評價(jià)價(jià)程序1、急性毒性性試驗(yàn)(acute)2、長期毒性性試驗(yàn)(chronic)3、特殊毒性性試驗(yàn)(遺傳、生殖殖、致癌)4、其它毒性性試驗(yàn)(過敏、刺激激etc.)急性毒性試試驗(yàn)1、闡明藥物物毒性作用用及強(qiáng)度、、計(jì)算相對對毒性參數(shù)數(shù)相對毒性參參數(shù)：治療指數(shù)TI=LD50/ED50越小越有效效安全系數(shù)SF=LD5/ED95可靠或確實(shí)實(shí)安全系數(shù)數(shù)CSF=LD1/ED99安全范圍SM=(LD1/ED99-1)X100%越大越安全全LD5基本無害量量ED95基本有效量量LD1肯定無害量量ED99肯定有效量量急性毒性試試驗(yàn)2、了解毒性性靶器官3、為長毒、、特殊毒性性試驗(yàn)劑量量設(shè)計(jì)：很很多實(shí)驗(yàn)參參考LD50,主要藥效學(xué)學(xué)劑量限度度、一般藥藥理學(xué)和藥藥動(dòng)學(xué)劑量量設(shè)計(jì)也要要參考急性性毒性的LD50;短期致癌試試驗(yàn)高劑量量=MTD4、為Ⅰ期臨臨床試驗(yàn)起起始劑量選選擇：細(xì)胞胞毒類抗癌癌藥，I期臨床起始始劑量=1/10LD505、為臨床毒毒副反應(yīng)監(jiān)監(jiān)護(hù)提供參參考：中毒毒癥狀,起始、持續(xù)續(xù)、恢復(fù)時(shí)時(shí)間；中毒毒靶器官；；對抗試驗(yàn)驗(yàn)為臨床急急救提供依依據(jù)急性毒性試試驗(yàn)基本原則:執(zhí)行GLP具體問題具具體分析隨機(jī)、對照照、重復(fù)動(dòng)物:獲得盡量多多信息前提提下，使用用盡量少動(dòng)動(dòng)物嚙齒類---小鼠或大鼠鼠非嚙齒齒類---犬或猴二種動(dòng)物(嚙齒類及非非嚙齒類)小鼠18-22g;大鼠120-150g;犬用成年犬犬初始體重不不應(yīng)超過或或低于平均均體重的20%♀♂各半急性毒性試試驗(yàn)受試物:工藝穩(wěn)穩(wěn)定、、符合臨臨床用用質(zhì)量量標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)標(biāo)明名名稱、、來源源、批批號、、含量量（或或規(guī)格格）、、保存存條件件及配配制方方法等等，附附質(zhì)檢檢報(bào)告告輔料、、溶劑劑、試試劑等等應(yīng)標(biāo)標(biāo)明批批號、、規(guī)格格和生生產(chǎn)廠廠家，，符合合試驗(yàn)驗(yàn)要求求例如：：原料藥藥臨床擬擬用劑劑型復(fù)方制制劑：：復(fù)方方+拆方(增毒？？新毒毒？)易降解解：含含降解解產(chǎn)物物量最最高的的受試試物進(jìn)進(jìn)行急急毒試試驗(yàn)，，并與與臨床床樣品品的急急毒試試驗(yàn)結(jié)結(jié)果比比較急性毒毒性試試驗(yàn)給藥途途徑：：臨床擬擬用途途徑+原型藥藥物較較完全全進(jìn)入入循環(huán)環(huán)途徑徑（如如靜脈脈注射射）嚙齒類類ig給藥前前應(yīng)禁禁食12h，不禁禁水劑量和和分組組給藥劑劑量：：未見見毒性性量嚴(yán)重毒毒性量量設(shè)空白白和/或溶媒媒（輔輔料））對照照小動(dòng)物物4-6個(gè)劑量量組,組距0.65-0.85,求LD50大動(dòng)物物可用用50%等量遞遞升法法(近似致致死劑劑量法法),求出ALD和MTD，不必必達(dá)到到致死死量急性毒毒性試試驗(yàn)給藥容容積：不等濃濃度等等容量量給藥藥動(dòng)物給藥途徑給藥量小鼠ig0.2-1.0ml/10giv、ip、sc0.1-0.5ml/10g大鼠ig1.0-2.0ml/100giv、ip、sc0.5-1.0ml/100g靜脈注注射(iv)；腹腔腔注射射(ip)；口服服(po)；皮下下注射射(sc)；灌胃胃(ig)急性毒毒性試試驗(yàn)觀察指指標(biāo)及及時(shí)間間藥后4h內(nèi)詳觀觀,后每天天上下下午各各一,觀察≥≥14d記錄毒毒性反反應(yīng)、、死亡亡情況況,中毒癥癥狀、、發(fā)生生時(shí)間間、持持續(xù)時(shí)時(shí)間、、嚴(yán)重重程度度、恢恢復(fù)期期及動(dòng)動(dòng)物最最短、、最長長死亡亡時(shí)間間其它指指標(biāo)：：一般般指標(biāo)標(biāo)、體體重變變化等等急性毒毒性試試驗(yàn)急性毒毒性研研究的的一般般觀察察和指指征觀察可能涉及的器官、組織、系統(tǒng)Ⅰ.鼻孔呼吸阻塞，呼吸頻率和深度改變，體表顏色改變CNS，感官，神經(jīng)肌肉等Ⅱ.運(yùn)動(dòng)功能：運(yùn)動(dòng)頻率和特點(diǎn)的改變CNS，感官，神經(jīng)肌肉等Ⅲ.驚厥(抽搐)：隨意肌明顯的無意識收縮或驚厥性收縮CNS,呼吸衰竭,神經(jīng)肌肉,自主神經(jīng)Ⅳ.反射感官，神經(jīng)肌肉Ⅴ.眼檢指征自主神經(jīng)；出血，感染Ⅵ.心血管指征自主神經(jīng),CNS,心輸出量降低等Ⅶ.唾液分泌自主神經(jīng)Ⅷ.豎毛自主神經(jīng)Ⅸ.痛覺喪失感官，CNSⅩ.肌張力自主神經(jīng)等Ⅺ.胃腸指征自主神經(jīng)，胃腸動(dòng)力等Ⅻ.皮膚刺激性，炎癥，過敏等急性毒毒性試試驗(yàn)結(jié)果處理理：實(shí)驗(yàn)資料料用Bliss法計(jì)算LD50。必要時(shí)時(shí)求不同同性別LD50劑量－反反應(yīng)、時(shí)時(shí)間－反反應(yīng)關(guān)系系反應(yīng)可能能涉及組組織、器器官或系系統(tǒng)肉眼病變變和組織織病檢，，初步判判斷毒性性靶器官官病檢報(bào)告告應(yīng)附：：病檢者者簽名+單位蓋章章+病理照片片確定NOAEL、MTD、ALDetc，初步判判斷受試試物的安安全范圍圍急性毒性性試驗(yàn)綜合評價(jià)價(jià)判斷反應(yīng)應(yīng)與藥物物作用相相關(guān)性：：時(shí)間、發(fā)發(fā)生率、、劑量-反應(yīng)關(guān)系系動(dòng)物種屬屬及背景景數(shù)據(jù)病理學(xué)檢檢查結(jié)果果同類藥物物特點(diǎn)安全范圍圍、毒性性嚴(yán)重程程度及可可恢復(fù)性性毒性作用用靶器官官毒性可能能涉及部部位大體解剖剖和組織織病理學(xué)學(xué)檢查結(jié)結(jié)果長期毒性性試驗(yàn)第一階段段（1）兩種品品系、35天染毒、、毒性量量效曲線線，推薦薦臨床使使用途徑徑；（2）器官毒毒性試驗(yàn)驗(yàn)、死亡亡情況、、體重變變化、血血液學(xué)、、臨床生生化學(xué)、、組織學(xué)學(xué)檢查；；（3）致突變變活性第第二階段段篩選；；（4）生殖毒毒性試驗(yàn)驗(yàn)；（5）受試動(dòng)動(dòng)物的藥藥代動(dòng)力力學(xué)研究究；（6）行為試試驗(yàn)；（7）協(xié)同、、增效、、拮抗作作用。長期毒性性試驗(yàn)第二階段段（1）動(dòng)物長長期毒性性試驗(yàn)（（半年以以上）；；（2）哺乳類類動(dòng)物致致突變試試驗(yàn)；（3）嚙齒類類動(dòng)物2年至癌試試驗(yàn)；（4）人類藥藥代動(dòng)力力學(xué)試驗(yàn)驗(yàn)；（5）人類臨臨床試驗(yàn)驗(yàn)；（6）短期和和長期用用藥的流流行病學(xué)學(xué)資料。。長期毒性性試驗(yàn)基本原則則執(zhí)行GLP整體性研究結(jié)果果與其它它藥理毒毒理試驗(yàn)驗(yàn)互為印印證、說說明和補(bǔ)補(bǔ)充具體問題題具體分分析隨機(jī)、對對照、重重復(fù)長期毒性性試驗(yàn)動(dòng)物invitro體系篩選選實(shí)驗(yàn)動(dòng)動(dòng)物種屬屬或品系系理想動(dòng)物物對受試物物生物轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)化與人人體相近近對受試物物敏感已有大量量歷史對對照數(shù)據(jù)據(jù)二種動(dòng)物物，嚙齒齒類首選選大鼠，，非嚙齒齒類用Beagle犬,必要時(shí)用用猴、豬豬等符合等級級要求來源、品品系、遺遺傳背景景清楚，，有動(dòng)物物質(zhì)量合合格證大鼠6-9w，Beagle犬6-12m,體重CV≤20％♂♀各半半必要時(shí)，，可用疾疾病模型型動(dòng)物進(jìn)進(jìn)行試驗(yàn)驗(yàn)Duration≥≥6m,naturaldeath(rat:1y-15%,1.5y-50%,2y-70-80%)長期毒性性試驗(yàn)給藥途徑徑與臨床用用藥途徑徑一致臨床iv,大鼠給藥藥＞1月，ip代替im或sc應(yīng)變換注注射部位位必要時(shí)改改變給藥藥途徑但但應(yīng)說明明原因分組三個(gè)給藥藥組,單位：mg(ml,IU)/kg或/m2不等濃度度等容量量給藥低劑量組組－高于于有效劑劑量，不不出現(xiàn)毒毒性中劑量組組－輕微微或中等等度毒性性高劑量組組－明顯顯/嚴(yán)重毒性性，或個(gè)個(gè)別動(dòng)物物死亡空白對照照－溶媒媒或賦形形劑溶媒或賦賦形劑有有毒性時(shí)時(shí)則增加加正常對對照組陽性對照照長期毒性試試驗(yàn)測試次數(shù)能反映動(dòng)態(tài)態(tài)變化一般行為、、食量每天天觀察記錄錄大鼠體重每每周一次大動(dòng)物生理理指標(biāo)每半半月一次大動(dòng)物ECGⅡ?qū)?lián)，給給藥前、給給藥期間、、停藥及恢恢復(fù)期均要要檢測發(fā)現(xiàn)有陽性性指標(biāo)應(yīng)加加大觀察密密度綜合評價(jià)長長毒結(jié)果結(jié)合藥學(xué)，，藥理學(xué)、、PK、TK和其它毒理理學(xué)研究(+臨床研究)，綜合評價(jià)價(jià)找到：不良良反應(yīng)(T&D&R)、毒性靶器器官(O)、安全范圍圍(S)、臨床需重重點(diǎn)檢測指指標(biāo)()及臨床監(jiān)護(hù)護(hù)或解救措措施(A)特殊毒性試試驗(yàn)研究是否會(huì)會(huì)引起畸胎胎、腫瘤，，對遺傳物物質(zhì)是否有有損傷等；；特殊毒性性試驗(yàn)存在在著種屬差差異性致突變試驗(yàn)驗(yàn)(遺傳毒性試試驗(yàn))生殖毒性試試驗(yàn)致癌試驗(yàn)特殊毒性試試驗(yàn)致突變試驗(yàn)驗(yàn)微生物回復(fù)復(fù)試驗(yàn)(Ames試驗(yàn)）哺乳動(dòng)物培培養(yǎng)細(xì)胞基基因突變試試驗(yàn)果蠅伴性隱隱性致死試試驗(yàn)染色體畸變變試驗(yàn)嚙齒動(dòng)物顯顯性致死試試驗(yàn)精原細(xì)胞染染色體畸變變試驗(yàn)動(dòng)物微核試試驗(yàn)程序外DNA合成(UDS)試驗(yàn)SOS顯色試驗(yàn)特殊毒性試試驗(yàn)生殖毒性試試驗(yàn)一般生殖毒毒性試驗(yàn)致畸敏感期期毒性試驗(yàn)驗(yàn)圍產(chǎn)期毒性性試驗(yàn)致癌試驗(yàn)短期致癌試試驗(yàn)哺乳動(dòng)物培培養(yǎng)細(xì)胞惡惡性轉(zhuǎn)化試試驗(yàn)小鼠肺腫瘤瘤誘發(fā)短期期試驗(yàn)長期致癌試試驗(yàn)特殊毒性試試驗(yàn)其他試驗(yàn)