紫花苜蓿種帶細(xì)菌及其致病性

紫花苜蓿種細(xì)菌及其致性紫花苜蓿(Medicagosativa)我國最主要的豆科栽培牧草,健康的種子是優(yōu)質(zhì)高產(chǎn)的保證。本研究以美國、加拿大和中國甘肅等收獲的個紫花苜蓿種樣為材料,研究了其種帶細(xì)菌的多樣性及其作用；明確紫花苜蓿芽期細(xì)菌性病害種類和病原；探討了這些致病細(xì)菌的環(huán)境適應(yīng)力測定了病原菌的寄主范圍以及侵染循環(huán)途徑,旨在為紫花苜蓿種傳病害的防治提供基礎(chǔ)資料。所獲主要結(jié)果如下：1、紫花苜蓿種帶細(xì)菌多樣性。從供試種樣中分離得到382株細(xì)菌分離物,其中19種細(xì)菌分離物為優(yōu)勢種群。結(jié)合常規(guī)表型特征、和16S鑒定方法,確定了該19種優(yōu)勢菌株分屬于9個屬18種細(xì)菌,其中革蘭氏陰性菌屬10種,革蘭氏陽性菌屬8種。其中11種為國際首次報(bào)道,分別為東方假單胞菌Pseudomonasorientalis)2Ap1、簡單芽孢桿菌(Bacillussimplex)ARI、萎蔫芽孢桿菌(Bacillusatrophaeus)BF、桃色歐文氏菌(Erwiniapersicind)1Cp2、多粘類芽孢桿菌(Paenibacilluspolymyxd)3Cp1、玫瑰色考克氏菌Kocuriarosed)1fF6、中間蒼白桿菌(Ochrobactrumintermedium)Gp1短小芽孢桿菌(Bacilluspumilus)1gF2、成晶節(jié)桿(Arthrobactercrystallopoietes)HT7、根際蒼白桿菌(Ochrobactrumrhizosphaerae)和陰溝腸桿菌(Enterobactercloacae)YZ-DS1。18種為國內(nèi)首次報(bào)道,除以上11種外,另有7種分別是成團(tuán)泛菌(Pantoeaagglomerans)1Ap1、成團(tuán)腸桿菌(Enterobacteragglomerans)1Bp1、熒光假單胞菌生物型I(PseudomonasfluorescensBiovarⅠ)3Bp3、蠟狀芽孢桿菌(Bacillusanthracis)Fp、阪崎腸桿菌(Enterobactersakazakii)1gF3,熒光假

單胞菌生物型Ⅳ(PseudomonasfluorescensBiovarⅣ)2Hp1和枯草芽孢桿菌(Bacillussubtilis)HT17。2、紫花苜蓿種帶細(xì)菌的致病性。采用浸種接種法,以阿爾岡金品種的紫花苜蓿為材料,分別接種上述19種優(yōu)勢菌種。發(fā)現(xiàn)桃色歐文氏菌、成團(tuán)泛菌、成團(tuán)腸桿菌陰溝腸桿菌YZ-DS1、中間蒼白桿菌Gp1和根際蒼白桿菌等6個菌種有致病作用。與未接種的對照相比,發(fā)芽率降低4.61%-28.5%,種子萎蔫和腐爛率為25%-50%等。進(jìn)一步的研究發(fā)現(xiàn)桃色歐文氏菌、成團(tuán)泛菌和陰溝腸桿菌等三種病原分別引致苜蓿芽細(xì)菌性萎蔫病蓿細(xì)菌性種子壞死病和苜蓿芽細(xì)菌性腐爛病。研究還發(fā)現(xiàn)多粘類芽孢桿菌和枯草芽孢桿菌HT17對苜蓿生長有促進(jìn)。3、桃色歐文氏菌的生物學(xué)特性。研究發(fā)現(xiàn),該菌的的生長溫度為～40℃,最適生長溫度為28℃培養(yǎng)基中PEG6000含量0g/l～500g/l的范圍內(nèi),其生長量隨的添加量而降低,但能耐受PEG6000含量400g/l的較低水勢；桃色歐文氏菌在12h光暗交替條件下生長量最高(OD600=1.753),全日照條件下生長量次之OD600=1.543),而全黑暗條件下生長最差(OD600=1.223).該菌耐范圍4～10,pH7.0時生長量最高。0.5%NaCl有利其的生長,最高能耐受3%NaCl量,不能在4%NaCl含量下生長。麥芽糖萄糖糖油和果糖等5種碳源可作為選擇性培養(yǎng)基的碳源。大豆蛋白胨為的選擇性培養(yǎng)基的氮源。而醋酸銨和磺胺分別是不利碳源和氮源。4、桃色歐文氏菌的傳播。本研究國際首次證實(shí)了在盆栽條件下桃色歐文氏菌能引起成株紫花苜蓿致病,發(fā)病率為100%。其可能通過水源、土壤和種子傳播。通過懸浮液浸種或澆芽及噴霧接種,證實(shí)其可以通過自然孔口入侵紫花苜,

引起莖干葉片花朵和豆莢壞死以及種子呈現(xiàn)水漬狀病變一旦病原菌進(jìn)入植株體內(nèi),其可運(yùn)動到植株的根際、莖干、葉圍、花朵最后至種子上得以保存。待條件合適將再次隨播種種子侵染。、桃色歐文氏菌的寄主范圍。人工接種條件下,該菌可侵11種豆類作物12種豆科牧草,包括紫花苜蓿、豌豆(Pisumsativum)、菜豆(Phaseolusvulgari)、大豆(Glycinemax)紅豆(Vignaangularis),豇豆(V.unguiculata)、綠豆(V.radiate)、蠶豆Viciafaba)、扁豆(Dolichoslablab)、小扁豆(Lensculinaris)、花生(Arachishypogaea)、棉豆(Phaseoluslunatus)、紅豆草Onobrychisviciaefolia)、沙打旺(Astragalusadsurgens)三葉Trifoliumrepens)三葉T.pretense)、箭筈豌豆(Viciasativa)、野豌豆V.sepiuni)、歪頭菜V.