藥物分析 第12章甾體激素類藥物的分析課件

第十二章甾體激素類藥物的分析TheanalysisofSteroidHormoneDrugs基本結(jié)構(gòu)：環(huán)戊烷并多氫菲ABCD12345678910111213141516171819分類：甾體激素腎上腺皮質(zhì)激素性激素雄性激素及蛋白同化激素孕激素雌激素代表藥物有：

可的松氫化可的松人工合成藥物：

地塞米松氫化可的松結(jié)構(gòu)的基礎(chǔ)上1，2位間引入一個(gè)雙鍵，9位上引入-F，16位上引入-CH3

氫化潑尼松在氫化可的松結(jié)構(gòu)的基礎(chǔ)上1，2位間引入一個(gè)雙鍵結(jié)構(gòu)特點(diǎn)：ⅰ．含有21個(gè)Cⅱ．A環(huán)：4-3-酮結(jié)構(gòu)（,-不飽和酮）ⅲ．17位：-醇酮基，有還原性。ⅳ．其它：10位、13位-甲基，11位羥基、羰基等人工合成品：1、2位間有雙鍵，6位，9位引入鹵素，16位或16位引入甲基，16位引入羥基等。2．雄性激素及蛋白同化激素睪丸素的衍生物

蛋白同化激素在睪丸素基礎(chǔ)上結(jié)構(gòu)修飾得到，如苯丙酸諾龍3．孕激素黃體酮4．雌激素

雌二醇、炔雌醇及衍生物

雌酮結(jié)構(gòu)特點(diǎn)：?。?8個(gè)Cⅱ．A環(huán)：苯環(huán)，3位上有酚羥基，10位無(wú)甲基ⅲ．17位：羥基、乙炔基供分析官能團(tuán)：A環(huán)的酚羥基及17位的羥基口服避孕藥，如炔諾酮、異炔諾酮、安宮黃體酮等A環(huán)有4-3-酮結(jié)構(gòu)；有的第17位有羥基和乙炔基；第10位無(wú)甲基。小結(jié)甾體激素碳原子數(shù)A環(huán)17位取代基腎上腺皮質(zhì)激素214-3-酮-醇酮基雄性激素194-3-酮-OH-CH3孕激素214-3-酮甲酮基雌激素18苯環(huán)C3-酚OH-OH-C≡CH二、鑒別試驗(yàn)（一）與強(qiáng)酸的呈色反應(yīng)甾體激素類藥物呈色H2SO4H3PO4HClO4HCl（母核）(二)官能團(tuán)的反應(yīng)腎上腺皮質(zhì)激素藥物呈色四氮唑鹽OHˉ1C17

–

α–醇酮基還原性A.呈色反應(yīng)腎上腺皮質(zhì)激素藥物Cu2O↓橙紅色堿性酒石酸銅B.沉淀反應(yīng)Ag↓黑色氨制硝酸銀異煙腙（黃色）睪酮黃體酮異煙雙腙（黃色）黃體酮藍(lán)紫色亞硝基鐵氰化鈉其他甾體淡橙色不顯色黃體酮藍(lán)紫色茜素氟藍(lán)藍(lán)紫色F-雌激素類藥物紅色偶氮染料重氮苯磺酸5.酚羥基含炔基的甾體激素銀鹽沉淀硝酸銀6.乙炔基↓炔雌醇白△KOH(三)制備衍生物測(cè)定m.p.△△香（四）水解產(chǎn)物的反應(yīng)特臭特臭△４-3-酮240nm苯環(huán)280nm（五）UV法3300～3000cm-13000～2700cm-11900～1650cm-11650～1450cm-11000～650cm-1（六）IR法3750～3300cm-1ν醋酸可的松結(jié)構(gòu)特征：△4–3–酮、C17–OHC20–酮基、C11–酮基、醋酸酯1630cm-1ν3420cm-亞甲基、角甲基吸收帶1750cm-11232cm-11052cm-1結(jié)構(gòu)特征：△4–3–酮、C17–OHC17–乙炔基炔諾酮1650cm-1ν3300cm-3270cm-1ν1615cm-1結(jié)構(gòu)特征：酚羥基、C17–OHC17–乙炔基炔雌醇1505cm-1ν3505cm-3300cm-1ν1590cm-13610cm-ν酚羥基醇羥基1615cm-1苯環(huán)的骨架振動(dòng)（七）TLC法主要用于甾體激素類藥物制劑的鑒別方法：對(duì)照品法要求供試品溶液所顯主斑點(diǎn)的顏色和位置與對(duì)照品溶液的主斑點(diǎn)相同。炔諾酮TLC圖（八）HPLC法主要用于甾體激素類藥物制劑的鑒別（如：醋酸曲安奈德軟膏、醋酸氟輕松軟膏）方法：對(duì)照品法要求在含量測(cè)定項(xiàng)下記錄的色譜圖中，供試品峰的tR與對(duì)照品峰的tR一致。三、雜質(zhì)檢查（一）其他甾體定義與標(biāo)示藥物結(jié)構(gòu)不同的甾體化合物都稱為“其他甾體”特點(diǎn)（1）可能存在多個(gè)甾體雜質(zhì)（2）結(jié)構(gòu)類似2.來(lái)源原料、中間體、異構(gòu)體、降解產(chǎn)物4.方法（具有一定分離能力）TLC法（高低濃度對(duì)比法）HPLC法（類似高低濃度對(duì)比法）（1）TLC法（高低濃度對(duì)比法）判定方法：規(guī)定雜質(zhì)斑點(diǎn)數(shù)目規(guī)定雜質(zhì)斑點(diǎn)顏色特點(diǎn)：（1）簡(jiǎn)便易行，不需特殊的儀器；（2）不需對(duì)照品；（3）只能控制單個(gè)雜質(zhì)的限量；（4）要求雜質(zhì)與主成分的顯色靈敏度接近。（2）HPLC法（高低濃度對(duì)比法）判定方法：規(guī)定雜質(zhì)峰數(shù)目規(guī)定雜質(zhì)峰面積特點(diǎn)：（1）需特殊的儀器；（2）不需對(duì)照品；（3）可以控制雜質(zhì)的總量；

（二）游離磷酸地塞米松磷酸鈉氫化可的松磷酸鈉倍他米松磷酸鈉氫化潑尼松磷酸鈉（三）甲醇和丙酮（四）雌酮原理Zimmermann反應(yīng)堿性KOH乙醇高純度硒四、來(lái)源合成中用二氧化硒(SeO2)脫氫劇毒原理方法四、含量測(cè)定（一）UV法△４-3-酮240nm（±）腎上腺皮質(zhì)激素雄性激素和蛋白同化激素孕激素苯環(huán)280nm（±）雌激素（二）反應(yīng)分光光度法1.適用于非分光光度活性藥物2.使待測(cè)組分光譜位移，避免干擾3.增加測(cè)定靈敏度4.增加選擇性弱、非分光光度活性藥物強(qiáng)分光光度活性藥物化學(xué)反應(yīng)

腎上腺皮質(zhì)激素類C17-α－醇酮基強(qiáng)還原性1.原理OH-[還原]四氮唑比色法[O]OH-分子重排三苯甲瓚↓深紅氯化三苯四氮唑（TTC）紅四氮唑（RT）藍(lán)四氮唑（BT）雙甲瓚（暗藍(lán)）2.方法ChPTTC（RT）BPTTC（RT）USPBT對(duì)照品法40～45′暗3.討論（1）基團(tuán)對(duì)反應(yīng)速度的影響C11=O＞C11－OHC21－OH＞C21-酯C16無(wú)論何種取代基ν↓（2）溶劑、水分的影響含水量＞5%→ν↓含水10%→A↓10%含水30%→幾無(wú)反應(yīng)—無(wú)醛無(wú)水乙醇醛→A↑—無(wú)水乙醇（3）O2與光線的影響反應(yīng)過(guò)程反應(yīng)產(chǎn)物怕光→避光、快速O2影響顏色強(qiáng)度和穩(wěn)定性→隔絕空氣、快速、充N2（4）堿的種類及加入順序反應(yīng)應(yīng)在強(qiáng)堿性（pH13.75）條件下進(jìn)行以氫氧化四甲基銨的結(jié)果最佳加入順序：（5）溫度與時(shí)間t℃↑→ν↑→甲瓚分解↑→%↓ChP25℃40～45′BP30℃1h4.特點(diǎn)：缺點(diǎn)影響因素太多優(yōu)點(diǎn)測(cè)定結(jié)果能指示藥品的穩(wěn)定性（氧化及降解產(chǎn)物無(wú)此反應(yīng)）腎上腺皮質(zhì)激素、雄性激素和蛋白同化激素、孕激素C3－酮基1.原理HCl（縮合）異煙肼比色法異煙腙（黃色）2.方法暗45′對(duì)照品法3.討論反應(yīng)速度（1）C3=O＞C17=O、C20=OC11=O不反應(yīng)反應(yīng)專屬性C3－酮基（2）溶劑的選擇異煙肼鹽酸鹽→甲醇、乙醇無(wú)水甲醇無(wú)水乙醇（3）水分、O2與光線的影響含水量↑→腙水解↑→A↓→%↓不揮發(fā)溶劑、不吸收水分時(shí)→O2與光線無(wú)影響酸、異煙肼的量(3)鹽酸:異煙肼=2:1樣品:異煙肼=1:8→ν↑酸度↑→異煙肼鹽↓酸度↓→A↓溫度(4)t℃↑→ν↑1.原理λmax=465λmax=515雌激素Kober反應(yīng)比色法△△雌二醇-3-甲醚λmax=465λmax=515（三）HPLC法USP、BP、JP均采用RP－HPLC（大多內(nèi)標(biāo)法）特點(diǎn)用樣量少，靈敏度高，分離效果好，測(cè)定速度快（甾體激素類藥物常含有結(jié)構(gòu)相似的其他甾體雜質(zhì)，對(duì)利用結(jié)構(gòu)特征設(shè)計(jì)的比色法有干擾）112．甾體激素類藥物的結(jié)構(gòu)中能和四氮唑鹽發(fā)生顯色反應(yīng)的基團(tuán)()A.酚羥基B.活潑次甲基C.甲酮基D.C17-α-醇酮基E.酮基用異煙肼比色法測(cè)定甾體激素藥物含量時(shí)，其溶液的環(huán)境是()A．強(qiáng)酸性B．中性C．強(qiáng)堿性D．弱堿性E．以上都不對(duì)DA問題31～35A．維生素B1B．醋酸地塞米松C．兩者皆是D．兩者皆不是31.異煙肼比色法()32.硫色素反應(yīng)()33.紫外分光光度法()34.羥肟酸鐵反應(yīng)()可用于氫化可的松鑒別的試劑有()A．氨制硝酸銀B．異煙肼C．紅四氮唑D．硫酸E．重氮苯磺酸75．可用于甾體激體類藥物的測(cè)定方法有A．高效液相色譜法B．四氮唑鹽法C．紫外分光光度法D．異煙肼比色法E．Kober反應(yīng)比色法能與亞硝基鐵氰化鈉反應(yīng)生成蘭紫色的藥物是A．雌二醇B．黃體酮C．醋酸可的松D．苯丙酸諾龍E．以上都不對(duì)113．異煙肼比色法測(cè)定甾體激素類藥物時(shí)，藥物的呈色基團(tuán)是A.酮基B.酚羥基C.活潑次甲基D.炔基E.甾體母核99：90.四氮唑比色法可用于下列哪個(gè)藥物的含量測(cè)定A.可的松B.睪丸素C.雌二醇D.炔雌醇E.黃體酮95：[116—120]可適用的藥物：A.可的松B.雌二醇C.兩者均可D.兩者均不可116．亞硝酸鈉滴定法117．高效液相色譜法118．能與羰基試劑縮合119．可用Kober反應(yīng)比色法測(cè)定120．可用四氮唑比色法測(cè)定114．Kober反應(yīng)是A.雌性激素與硫酸乙醇共熱呈色B.皮質(zhì)激素與硫酸一乙醇共熱呈色C.雌性激素與硫酸－乙醇共熱呈色，用水或稀硫酸稀釋后加熱顏色改變D.維生素A與無(wú)水三氯化銻的無(wú)醇氯仿溶液呈色E.異丙嗪于酸性條件下與鈀離子呈色96：139.黃體酮在酸性溶液中可與下列哪些試劑反應(yīng)呈色A.2,4-二硝基苯肼B.三氯化鐵C.硫酸苯肼