克隆動物簡介解析課件

克隆動物簡介

克隆人的思考

盧大儒復旦大學遺傳學研究所克隆動物簡介

克隆人的思考盧大儒1

一.背景知識

1.哺乳動物克隆概念“克隆”一詞來源于希臘語，原意是用與扦插的枝條，也是指無性繁殖。哺乳動物細胞克隆技術，又稱哺乳動物的核移植或無性繁殖技術；它是通過特殊的人工手段（顯微操作，電融合等）對哺乳動物特定發(fā)育階段的核供體（胚胎分裂球或體細胞核），及相應的核受體（去核的受精卵或成熟的卵母細胞）不經(jīng)過有性繁殖過程，進行體外重構并通過重構胚的胚胎移植，從而達到擴繁同基因型哺乳動物種群的目的。一.背景知識

1.哺乳動物22.哺乳動物克隆的研究簡史1938年Spemman提出將胚胎細胞核移入去核卵母細胞的構想。1952年Briggs和King等利用蛙原腸胚以前的細胞核與去核蛙卵構建的重構胚克隆出成蟲。1962年Gurdon用囊胚細胞核移植的方法獲得了可繁殖的爪蟾，并證明成熟蛙已分化的細胞核只能支持發(fā)育到蝌蚪，而不能發(fā)育到成蟲。2.哺乳動物克隆的研究簡史1938年Spemman提出將胚31981年Illmensee和Hoppe報道采用移植技術的到了正常的小鼠，但其結果未被其他實驗室重復出來。1983年McGrath和Solter等利用顯微操作技術與細胞融合技術，創(chuàng)造了全新的核移植方法。1986年Willadsen通過實驗提出了兩個創(chuàng)新的觀念：（1）作為核受體，卵母細胞較受精卵更佳；（2）羊桑椹胚細胞核具有全能性。1981年Illmensee和Hoppe報道采用移植技術的4以后綿羊（1986），牛（1987），兔（1988）和豬（1989）等胚胎細胞克隆動物也相繼獲得了成功。1997年2月，Wilmut等利用綿羊乳腺細胞成功的克隆出體細胞核移植后代，根本動搖了原有的傳統(tǒng)結論，并使哺乳動物克隆技術進入了一個劃時代的新階段。另外，我國哺乳動物克隆技術研究起步較晚了十年。經(jīng)過5年的努力，胚胎卵裂球核移植克隆技術已居世界先進水平。以后綿羊（1986），牛（1987），兔（1988）和豬（15二.哺乳動物體細胞克隆技術研究現(xiàn)狀1997年Wilmut等人克隆了多利羊1998年Wakayama等進行了克隆鼠實驗1998年Cibelli等克隆了轉基因牛1998年Wilmut等人克隆了轉基因羊1998年YokoKato等進行了高成活率的克隆牛工作1999年Vignon用牛皮膚成纖維細胞克隆出牛犢2000年楊向中等解決了克隆動物早衰的問題.二.哺乳動物體細胞克隆技術研究現(xiàn)狀1997年Wilmut等61998年美國成功克隆人類胚胎。2000年英國成功克隆5只豬崽。世界第一頭再克隆牛在日本誕生，克隆它所用的體細胞采自于克隆牛。美國科學家克隆出了第一只非人類的靈長類動物———短尾猴“泰特拉”。

1998年美國成功克隆人類胚胎。7WilmutWilmut8WilmutWilmut9克隆動物簡介解析課件10多利羊及其后代多利羊及其后代11克隆動物簡介解析課件12世界第一頭克隆豬出生在位于美國得克薩斯的A&M大學的獸醫(yī)學院，他們聲稱A&M大學已經(jīng)成為第一個能克隆豬，羊，牛三種不同動物的研究機構世界第一頭克隆豬出生在位于美國得克薩斯的A&M大學的獸醫(yī)學院13多利羊的克隆1997年2月，英國羅斯林研究所的Wilmut等人宣布利用體細胞作為核供體克隆出多利羊，這是世界上第一只沒有父親的哺乳動物。多利產(chǎn)生過程中，移植的是高度分化的體細胞的核，而早些時候的克隆鼠、克隆牛等移植的是尚未分化的由有性生殖過程生產(chǎn)的受精卵分裂而成的裂球的細胞核，兩者之間有著本質的區(qū)別。多利羊的克隆1997年2月，英國羅斯林研究所的Wilmut14克隆動物簡介解析課件15克隆動物簡介解析課件16成功的幾個因素1.細胞周期:血清饑餓策略2.卵母細胞電融合3.科學精神:面對失敗;選題.成功的幾個因素1.細胞周期:血清饑餓策略17克隆動物簡介解析課件18克隆技術的意義

克隆技術標志著用無性繁殖技術復制更高等的動物已完全可能?？寺〖夹g的有利應用主要包括：1.可用來快速、有效繁育優(yōu)良動物品種。2.可用于搶救瀕危動物。3.克隆技術能創(chuàng)造巨大的經(jīng)濟價值，如用其培育轉基因動物,制備基因工程藥物?？寺〖夹g的意義

克隆技術標志著用無性繁殖技術復制更高等的動物194.為醫(yī)學研究提供有利手段。(1).為科研提供特殊實驗動物模型，如各種遺傳性疾病動物模型，為藥物治療和基因治療提供動物實驗依據(jù).(2).研究復雜多基因疾病中,環(huán)境因素對基因的影響.(3).解決不孕患者的痛苦.(4).人的治療克隆還可作為組織工程和器官移植取之不盡的源泉。4.為醫(yī)學研究提供有利手段。20克隆動物簡介解析課件21克隆大熊貓中國科學院動物研究所研究員陳大元在克隆羊之后率先提出了克隆大熊貓的設想.他領導的小組將大熊貓的體細胞植入去核后的兔卵細胞中，成功地培育出了大熊貓的早期胚胎?？寺〈笮茇垖儆诋惙N克隆,困難較大,從卵母細胞,胚胎移植等和傳統(tǒng)的克隆相差較大,難度較高.克隆大熊貓中國科學院動物研究所研究員陳大元在克隆羊22干細胞與治療性克隆通過體細胞克隆,可望獲得具有全能性的干細胞:誘導分化為特定的組織,可以直接用于疾病治療,如胰島細胞,成肌細胞,成纖維細胞,神經(jīng)元細胞,骨髓造血細胞等.誘導分化為器官的胚芽,與動物克隆相結合,在動物身體內生長出人的器官.干細胞與治療性克隆通過體細胞克隆,可望獲得具有全能性的干細胞23治療性克隆---骨髓移植不再艱難目前,骨髓移植和器官移植一方面面臨供體來源缺乏,另外一方面,需要進行嚴格的配型,因此治療性克隆為疾病的治療提供了一條嶄新的思路.英國劍橋大學威康生物開發(fā)和癌癥研究所曾預言，如果容許克隆人的胚胎，他們在3年內能夠利用克隆技術培養(yǎng)骨髓以挽救白血病患者的生命.治療性克隆---骨髓移植不再艱難目前,骨髓移植和24克隆動物的相關問題1.克隆動物存在缺陷.克隆動物存在缺陷而且死亡的比例很高。例如，美國夏威夷大學的研究表明，克隆鼠成年后患肥胖癥與早期胚胎階段的細胞缺陷有關。目前，人們已克隆出了200多只克隆鼠。但是科學家發(fā)現(xiàn)，有些品種的克隆鼠長大后全都變得體型較大，而另一些品種的克隆鼠則只有部分患肥胖癥，其它則體態(tài)正常?？寺游锏南嚓P問題1.克隆動物存在缺陷.克隆動物存在252.克隆動物的壽命問題由于染色體端粒長度和細胞分裂的次數(shù)相關,成年體細胞端粒較短,因而可能影響到克隆動物的壽命.據(jù)說,多利克隆羊已經(jīng)過早地衰老了.最近,著名美籍華人科學家、美國康涅狄格大學教授楊向中用一頭１３歲老母牛的體細胞成功克隆出１０頭牛犢，這１０頭克隆牛犢無早衰現(xiàn)象，從而打消了科學界迄今存在的用成年動物克隆后代可能會未老先衰的疑慮。2.克隆動物的壽命問題26楊向中通過對染色體端粒長度的分析證明，供體老母牛的體細胞端粒很短，經(jīng)長期培育后變得更短，而經(jīng)體細胞克隆出生的１０頭老母牛后代，卻同自然有性生育的同齡后代一樣，都具有正常的端粒長度。對能使端粒加長的端粒酶進行分析，發(fā)現(xiàn)體細胞克隆的胚胎與正常受精的胚胎端粒酶含量沒有差別。這證明，老年動物體細胞染色體端粒經(jīng)過克隆后，可以在胚胎發(fā)育過程中加長，使細胞端?；謴偷脚c正常生殖的后代完全一樣的長度。楊向中通過對染色體端粒長度的分析證明，供體老母牛的體27美國一生物科技公司在六只克隆牛身上發(fā)現(xiàn)了抗衰老的現(xiàn)象。他們發(fā)現(xiàn)這六只牛的細胞染色體端粒,遠較同齡正常牛的端粒長,這表示六只復制乳牛比實際年齡要年輕得多﹐似乎出現(xiàn)了反老還童的現(xiàn)象?？茖W家相信﹐他們所采用的復制技術可拖慢甚至逆轉細胞的衰老過程。這項研究將可應用到醫(yī)學上造福人類﹐甚至發(fā)展出幫助人類大大延長壽命﹑甚至長生不老等爭議性技術。美國一生物科技公司在六只克隆牛身上發(fā)現(xiàn)了抗衰老的現(xiàn)象。他們發(fā)28日本農(nóng)業(yè)技術研究所發(fā)表的資料說，它與有關單位合作，取得了３頭克隆牛的白血球和精子的端粒體，把它們的長短與其“父親”絲福號種牛進行了比較，結果發(fā)現(xiàn)克隆牛及其后代的端粒體與普通牛并沒有實質性的差別。一般認為，生殖系統(tǒng)細胞端粒體的長短是由端粒酶決定的，日本科學家的研究結果表明，克隆牛的端粒酶同樣沒有什么異常。日本農(nóng)業(yè)技術研究所發(fā)表的資料說，它與有關單位合作，取29克隆生物的鑒定1.外形2.蛋白同工酶3.微衛(wèi)星DNA遺傳標記4.全基因組比較5.基因組印跡的比較6.線粒體DNA的比較克隆生物的鑒定1.外形30克隆的全能性

動物克隆本質是遺傳物質的復制.但是,目前的克隆生物雖然在功能上具備了無性繁殖的可能性,但是,尚未提供足夠的證據(jù)證明是遺傳物質真正的克隆.(1).卵母細胞線粒體DNA的作用;(2)卵母細胞中RNA的逆轉錄插入對核基因組的影響;(3).供體核基因組DNA在分化過程中的變異.基因重排,缺失,擴增等.(4).基因組印記現(xiàn)象在哺乳動物的發(fā)育中普遍存在，基因組印記與動物克隆技術的成功及不足有何關系值得深入研究.(5).卵母細胞殘留DNA的影響克隆的全能性動物克隆本質是遺傳物質的復制.但是,目前的31生物克隆的理論問題多利羊克隆成功證明了哺乳動物細胞具有全能性的觀點,核移植實驗表明,卵母細胞的細胞質對于體細胞的去分化具有重要作用,體現(xiàn)了核質相互作用的重要性

這種存在與卵母細胞中的因子是什么?是如何啟動體細胞基因組DNA的重新編程的?

如果揭示了重新編程因子的作用,體細胞的克隆還需要細胞核移植嗎?生物克隆的理論問題多利羊克隆成功證明了哺乳動物細胞32研究的切入點動物克隆需要電刺激,化學誘導,引起細胞信號傳導中蛋白修飾的變化,構想改變,最終調控基因的表達,因此,在最早期的編程因子研究中,蛋白質組學研究具有獨到之處.植物全能性可以誘導的特性用于研究植物去分化編程因子可以借鑒.研究的切入點動物克隆需要電刺激,化學誘導,引起33生物進化與克隆克隆本質上屬于無性繁殖.在生物進化中,無性繁殖是低等的,變異的能力和適應性較差.因此,生物克隆只能局限在特定的研究范圍內,絕對不能因為某個品種的優(yōu)良而大加推廣.克隆大熊貓,老虎并不能改變他們被自然界淘汰的命運.吸取優(yōu)質品種單一的教訓(如瘋牛病).生物進化與克隆克隆本質上屬于無性繁殖.在生物進化34我國克隆動物的研究我國在60年代,童弟周對金魚、鯽魚進行細胞核移植.近年來，我國已經(jīng)能克隆老鼠、兔子、山羊、牛、豬等哺乳動物。就克隆的動物種類來說，是絕大多數(shù)國家無法比擬的。目前我國在克隆技術方面水平比較高的研究單位有中國農(nóng)科院畜牧所、中科院發(fā)育生物學研究所、西北農(nóng)大畜牧所、江蘇農(nóng)科院畜牧所、廣西農(nóng)業(yè)大學等。我國克隆動物的研究我國在60年代,童弟周對金魚、鯽魚進行細胞351999年10月15日，我國也是世界上首例的體細胞克隆羊由中科院發(fā)育生物所與揚州大學合作在江蘇省揚州市誕生，至今已存活2年。另外，西北農(nóng)大也于今年6月先后誕生2只成年體細胞克隆山羊——元元和陽陽12001年上海轉基因中心體細胞克隆山羊誕生.其它胎兒細胞,胚胎細胞的克隆動物就不一一枚舉了.1999年10月15日，我國也是世界上首例的體細胞克36克隆動物簡介解析課件37克隆人的倫理學問題，生物克隆也使“克隆人”在理論上更具有了現(xiàn)實性，這也是克隆技術引起廣泛爭議的原因所在。多利羊誕生之后，不少西方國家及政界首腦對這一事件作出了反應。總的來講，多數(shù)國家的政府反應強烈，嚴格禁止對人類使用克隆技術。我國前衛(wèi)生部部長陳敏章表示中國反對克隆人的試驗?？寺∪说膫惱韺W問題，生物克隆也使“克隆人”在理論上更具有了381.如果對克隆動物技術的沒有限制，克隆人的研究禁令在技術層面上是毫無意義的。目前,美國,英國等對治療性克隆的研究開綠燈,表明克隆人的研究實際上已經(jīng)開始.我國也將治療性克隆研究作為國家973重大項目支持…...2.有關克隆人的問題在科學界早已是老生常談。實際上，自從戈登的研究問世以來，科學家們早已預見到“克隆人”及其可能產(chǎn)生的社會、倫理方面的后果。1.如果對克隆動物技術的沒有限制，克隆人的研究禁令在技術層39克隆人的倫理思考多利羊的出現(xiàn)，標志著又一技術發(fā)明開始造福于人類，表明新的技術發(fā)明增加了人類駕馭自然的力量，同時也增加了責任與義務。然而,克隆人研究面臨的是一片反對聲.反對復制人者所提的論點，大多是認為有太多不可預知的危險、無法控制的變化，承擔不起失敗的代價，但是,我們不可以因噎廢食，不可為了反對而夸大危險程度.克隆人的倫理思考多利羊的出現(xiàn)，標志著又一技術發(fā)明開始造福于人40一．破壞人格同一性有人以為這種人工生殖技術會破壞人類的人格同一性。顯然，這是一種誤解。即使一個人與其復制品的基因相同，那只表示他們的外貌及其他生理特徵很相似，就像一般的孿生兄弟姐妹那樣，卻并不表示他們的思想(人格)相同.我們所謂的“自己”其實是被環(huán)境塑造出來的?？寺∪伺c核供體是獨立的兩個人。如果能了解這一點，資本家與政治人物就不會想要利用復制人來延續(xù)自己的生命了；"基因決定不了一切"。(雙胞胎)一．破壞人格同一性有人以為這種人工生殖技術會破壞人類的41二．破壞固有的倫常關系復制人的養(yǎng)育責任是誰？復制人長大以后是否告知其出身？誰是他的父母？人權、社會地位、法律身分如何定義？令傳統(tǒng)的親子關系產(chǎn)生變化，產(chǎn)生了一些新問題,促成更多的單親家庭，甚至是同性戀家庭。然而，固有的倫常關系的改變與復制人沒有必然聯(lián)系，單親家庭與同性戀家庭已開始出現(xiàn)，我們也已經(jīng)寬容同性戀的存在人類社會本來就是不斷發(fā)展的,從母系社會看今天的家庭又如何能夠接受呢?(同性戀)二．破壞固有的倫常關系復制人的養(yǎng)育責任是誰？復制人長大以42三．生靈涂炭研究復制人類的最初階段，將會有許多胚胎因研究失敗而被犧牲生命。這涉及什么是生命，什么是人的看法；這可以墮胎的問題相提并論。隨意殺人固然是不道德的，但如果胚胎尚不是人，為了醫(yī)學研究或活動犧牲它們便不算濫殺無辜。當然，胚胎的發(fā)展有好幾個階段，在它最初形成的階段，它的道德地位與細胞等無大不同，但到了后來的階段，尤其當它成了有意識的胎兒時，我們當然不能隨意殺害它。我們?yōu)榱酸t(yī)療難道不進行動物實驗嗎?三．生靈涂炭研究復制人類的最初階段，將會有許多胚胎43四．滑坡理論持滑坡理論的人認為，一旦允許復制人的活動，那么，其他類似的，對人類社會有大災害的人類基因工程活動也不可避免地逐一被允許，而這種趨勢一旦開始，就象落于滑坡上,后果是不堪設想的。我們總沒有道理面對一切事情，統(tǒng)統(tǒng)看成可以將滑坡理論應用于其上，從而一早就將它看成是洪水猛獸。這樣的話，我們什么事情也不可以做?？寺∪搜芯繎摼褪抡撌?不能隨意延伸,因為量變導致質變.(因噎廢食)四．滑坡理論持滑坡理論的人認為，一旦允許復制人的活動，44五．扮演上帝

這種觀點是部分神學家所喜歡運用的，在應用倫理學中亦并不陌生。歷史上教會曾經(jīng)對新科技，新知識加以排斥，以古老自以為是的神學見解壓抑科技研究，日后淪為笑柄。神在歷史中沒有對于人類的科技發(fā)明，作出超自然的干預，但人必須承擔闖禍的后果。人類已經(jīng)扮演的上帝角色還少嗎?五．扮演上帝

這種觀點是部分神學家所喜歡運用的，在應用45六．違反自然定律有人以為符合自然定律才是道德的，違反自然定律則是不道德的。由于復制人活動是人工的而非自然的生殖方法，因此，它是不道德的。這種觀點很有問題，因為它將自然與道德混為一談。事實上，符合自然定律不一定是道德的，不符合自然定律的也不一定就不道德.如果一個人因自然欲望而強奸女性，他的行為道德嗎?基因工程藥物及汽車等，雖不合乎自然，但卻往往被應用于道德的用途。

六．違反自然定律有人以為符合自然定律才是道德的，違反自46七．遺傳多樣性的減少兩個遺傳因子相近的人(譬如兩兄妹)交配而繁殖后代，后者的生理質素會變得低劣。有人便以此為據(jù)，推論社會上復制人越多，則人類的遺傳因子上的多樣性便會越少，下一代的生理質素便會每況愈下。所以，為了后代，我們便應及早禁止復制人的產(chǎn)生。總體上,克隆人的誕生會導致生物遺傳多樣性的減少,但是,事實并非那么危言聳聽,這個論點亦可商榷。七．遺傳多樣性的減少兩個遺傳因子相近的人(譬如兩兄妹)47首先，克隆人沒有必然產(chǎn)生致病基因,如果有過高的基因突變頻率,這表明克隆技術不成熟.相反,克隆技術亦可將一些先天殘疾因子在胚胎中剔除，從而提高人的生理質素。其次，在理論上雖然復制人越多，人類的基因的種類越少，但實際上復制人的數(shù)目是否會增加到那種地步，可能性是很低的，這必須預設社會上許多人濫用了這種技術。體外受孕、體外受精、試管嬰兒等技術今天已可算相當普及,情況如何呢?首先，克隆人沒有必然產(chǎn)生致病基因,如果有過高的基因突48八．出現(xiàn)新類型的罪惡還有，人們也可預見有了復制人技術后，新類型罪惡亦會隨之出現(xiàn)。人們可以設想：詭計多端的罪犯犯事后會以復制人頂罪、新納粹分子欲復制出多個如希特勒般的狂魔以統(tǒng)治世界、商人會將社會精英的細胞和復制人當商品去售賣、智力正常的人想復制智力較低的人作為奴隸等。這些不是克隆人的本身問題,而只是濫用了復制人技術的可能壞后果.八．出現(xiàn)新類型的罪惡還有，人們也可預見有了復制人技術后，49隨著人類科技的不斷發(fā)達，新的類型的罪惡亦層出不窮，這是科技進步的代價。我們不能說由于有被濫用的可能性而完全放棄新科技發(fā)展。較明智的做法，是對新科技的應用作出適當?shù)谋O(jiān)管和控制。(水能載舟,亦能覆舟)

克隆人研究需要的是規(guī)范,而不是禁令!隨著人類科技的不斷發(fā)達，新的類型的罪惡亦層出不窮，這50治療性克隆克隆生物胚胎細胞具有全能分化的能力患者身體器官,組長損傷能否再生?思路之一:取出細胞,細胞核移植,胚胎發(fā)育,定向分化,擴大培養(yǎng)取出細胞定向分化;體內原位再生治療性克隆克隆生物胚胎細胞具有全能分化的能力51研究進展

軟骨組織工程骨組織工程皮膚組織工程肝臟組織工程神經(jīng)系統(tǒng)組織工程其他...趨勢：單一向復合研究進展軟骨組織工程趨勢：單一向復合52克隆動物簡介解析課件53克隆動物簡介解析課件54人能夠真正克隆嗎?克隆羊帶來的一個重要話題是人能夠真正克隆嗎?牛頓,愛恩斯坦,達爾文能夠再生嗎?夢露,鄧麗君會不會再現(xiàn)?甚至象希特勒這樣的戰(zhàn)爭狂人會不會重新發(fā)動戰(zhàn)爭?人是具有生物屬性和社會屬性雙重性.基因克隆的全面可能性人的生活環(huán)境和所接受的教育,學習,工作等環(huán)境是無法克隆的.人類的基因表達受到環(huán)境因素的重要影響.人能夠真正克隆嗎?克隆羊帶來的一個重要話題是人能55克隆人正向你走來克隆人在這個世界進入新世紀之后似乎正款款向人類走來,意美權威科學家相繼宣布攜手共同展開克隆人的努力，英國政府也解除了克隆人類最初級胚胎的禁令，從而打開了一個神秘的克隆人的禁區(qū)。怕自己被贗品取代？請注冊你的DNA一美科學家稱將在2個月內克隆完人類胚胎,意大利科學家：我要制造完美的克隆嬰兒,女記者走進克隆人實驗室查出驚人內幕,三位“瘋子科學家”執(zhí)意要開始克隆人

克隆人正向你走來克隆人在這個世界進入新世紀之后似乎正款56克隆動物簡介解析課件573X!3X!58克隆動物簡介

克隆人的思考

盧大儒復旦大學遺傳學研究所克隆動物簡介

克隆人的思考盧大儒59

一.背景知識

1.哺乳動物克隆概念“克隆”一詞來源于希臘語，原意是用與扦插的枝條，也是指無性繁殖。哺乳動物細胞克隆技術，又稱哺乳動物的核移植或無性繁殖技術；它是通過特殊的人工手段（顯微操作，電融合等）對哺乳動物特定發(fā)育階段的核供體（胚胎分裂球或體細胞核），及相應的核受體（去核的受精卵或成熟的卵母細胞）不經(jīng)過有性繁殖過程，進行體外重構并通過重構胚的胚胎移植，從而達到擴繁同基因型哺乳動物種群的目的。一.背景知識

1.哺乳動物602.哺乳動物克隆的研究簡史1938年Spemman提出將胚胎細胞核移入去核卵母細胞的構想。1952年Briggs和King等利用蛙原腸胚以前的細胞核與去核蛙卵構建的重構胚克隆出成蟲。1962年Gurdon用囊胚細胞核移植的方法獲得了可繁殖的爪蟾，并證明成熟蛙已分化的細胞核只能支持發(fā)育到蝌蚪，而不能發(fā)育到成蟲。2.哺乳動物克隆的研究簡史1938年Spemman提出將胚611981年Illmensee和Hoppe報道采用移植技術的到了正常的小鼠，但其結果未被其他實驗室重復出來。1983年McGrath和Solter等利用顯微操作技術與細胞融合技術，創(chuàng)造了全新的核移植方法。1986年Willadsen通過實驗提出了兩個創(chuàng)新的觀念：（1）作為核受體，卵母細胞較受精卵更佳；（2）羊桑椹胚細胞核具有全能性。1981年Illmensee和Hoppe報道采用移植技術的62以后綿羊（1986），牛（1987），兔（1988）和豬（1989）等胚胎細胞克隆動物也相繼獲得了成功。1997年2月，Wilmut等利用綿羊乳腺細胞成功的克隆出體細胞核移植后代，根本動搖了原有的傳統(tǒng)結論，并使哺乳動物克隆技術進入了一個劃時代的新階段。另外，我國哺乳動物克隆技術研究起步較晚了十年。經(jīng)過5年的努力，胚胎卵裂球核移植克隆技術已居世界先進水平。以后綿羊（1986），牛（1987），兔（1988）和豬（163二.哺乳動物體細胞克隆技術研究現(xiàn)狀1997年Wilmut等人克隆了多利羊1998年Wakayama等進行了克隆鼠實驗1998年Cibelli等克隆了轉基因牛1998年Wilmut等人克隆了轉基因羊1998年YokoKato等進行了高成活率的克隆牛工作1999年Vignon用牛皮膚成纖維細胞克隆出牛犢2000年楊向中等解決了克隆動物早衰的問題.二.哺乳動物體細胞克隆技術研究現(xiàn)狀1997年Wilmut等641998年美國成功克隆人類胚胎。2000年英國成功克隆5只豬崽。世界第一頭再克隆牛在日本誕生，克隆它所用的體細胞采自于克隆牛。美國科學家克隆出了第一只非人類的靈長類動物———短尾猴“泰特拉”。

1998年美國成功克隆人類胚胎。65WilmutWilmut66WilmutWilmut67克隆動物簡介解析課件68多利羊及其后代多利羊及其后代69克隆動物簡介解析課件70世界第一頭克隆豬出生在位于美國得克薩斯的A&M大學的獸醫(yī)學院，他們聲稱A&M大學已經(jīng)成為第一個能克隆豬，羊，牛三種不同動物的研究機構世界第一頭克隆豬出生在位于美國得克薩斯的A&M大學的獸醫(yī)學院71多利羊的克隆1997年2月，英國羅斯林研究所的Wilmut等人宣布利用體細胞作為核供體克隆出多利羊，這是世界上第一只沒有父親的哺乳動物。多利產(chǎn)生過程中，移植的是高度分化的體細胞的核，而早些時候的克隆鼠、克隆牛等移植的是尚未分化的由有性生殖過程生產(chǎn)的受精卵分裂而成的裂球的細胞核，兩者之間有著本質的區(qū)別。多利羊的克隆1997年2月，英國羅斯林研究所的Wilmut72克隆動物簡介解析課件73克隆動物簡介解析課件74成功的幾個因素1.細胞周期:血清饑餓策略2.卵母細胞電融合3.科學精神:面對失敗;選題.成功的幾個因素1.細胞周期:血清饑餓策略75克隆動物簡介解析課件76克隆技術的意義

克隆技術標志著用無性繁殖技術復制更高等的動物已完全可能?？寺〖夹g的有利應用主要包括：1.可用來快速、有效繁育優(yōu)良動物品種。2.可用于搶救瀕危動物。3.克隆技術能創(chuàng)造巨大的經(jīng)濟價值，如用其培育轉基因動物,制備基因工程藥物?？寺〖夹g的意義

克隆技術標志著用無性繁殖技術復制更高等的動物774.為醫(yī)學研究提供有利手段。(1).為科研提供特殊實驗動物模型，如各種遺傳性疾病動物模型，為藥物治療和基因治療提供動物實驗依據(jù).(2).研究復雜多基因疾病中,環(huán)境因素對基因的影響.(3).解決不孕患者的痛苦.(4).人的治療克隆還可作為組織工程和器官移植取之不盡的源泉。4.為醫(yī)學研究提供有利手段。78克隆動物簡介解析課件79克隆大熊貓中國科學院動物研究所研究員陳大元在克隆羊之后率先提出了克隆大熊貓的設想.他領導的小組將大熊貓的體細胞植入去核后的兔卵細胞中，成功地培育出了大熊貓的早期胚胎。克隆大熊貓屬于異種克隆,困難較大,從卵母細胞,胚胎移植等和傳統(tǒng)的克隆相差較大,難度較高.克隆大熊貓中國科學院動物研究所研究員陳大元在克隆羊80干細胞與治療性克隆通過體細胞克隆,可望獲得具有全能性的干細胞:誘導分化為特定的組織,可以直接用于疾病治療,如胰島細胞,成肌細胞,成纖維細胞,神經(jīng)元細胞,骨髓造血細胞等.誘導分化為器官的胚芽,與動物克隆相結合,在動物身體內生長出人的器官.干細胞與治療性克隆通過體細胞克隆,可望獲得具有全能性的干細胞81治療性克隆---骨髓移植不再艱難目前,骨髓移植和器官移植一方面面臨供體來源缺乏,另外一方面,需要進行嚴格的配型,因此治療性克隆為疾病的治療提供了一條嶄新的思路.英國劍橋大學威康生物開發(fā)和癌癥研究所曾預言，如果容許克隆人的胚胎，他們在3年內能夠利用克隆技術培養(yǎng)骨髓以挽救白血病患者的生命.治療性克隆---骨髓移植不再艱難目前,骨髓移植和82克隆動物的相關問題1.克隆動物存在缺陷.克隆動物存在缺陷而且死亡的比例很高。例如，美國夏威夷大學的研究表明，克隆鼠成年后患肥胖癥與早期胚胎階段的細胞缺陷有關。目前，人們已克隆出了200多只克隆鼠。但是科學家發(fā)現(xiàn)，有些品種的克隆鼠長大后全都變得體型較大，而另一些品種的克隆鼠則只有部分患肥胖癥，其它則體態(tài)正常。克隆動物的相關問題1.克隆動物存在缺陷.克隆動物存在832.克隆動物的壽命問題由于染色體端粒長度和細胞分裂的次數(shù)相關,成年體細胞端粒較短,因而可能影響到克隆動物的壽命.據(jù)說,多利克隆羊已經(jīng)過早地衰老了.最近,著名美籍華人科學家、美國康涅狄格大學教授楊向中用一頭１３歲老母牛的體細胞成功克隆出１０頭牛犢，這１０頭克隆牛犢無早衰現(xiàn)象，從而打消了科學界迄今存在的用成年動物克隆后代可能會未老先衰的疑慮。2.克隆動物的壽命問題84楊向中通過對染色體端粒長度的分析證明，供體老母牛的體細胞端粒很短，經(jīng)長期培育后變得更短，而經(jīng)體細胞克隆出生的１０頭老母牛后代，卻同自然有性生育的同齡后代一樣，都具有正常的端粒長度。對能使端粒加長的端粒酶進行分析，發(fā)現(xiàn)體細胞克隆的胚胎與正常受精的胚胎端粒酶含量沒有差別。這證明，老年動物體細胞染色體端粒經(jīng)過克隆后，可以在胚胎發(fā)育過程中加長，使細胞端粒恢復到與正常生殖的后代完全一樣的長度。楊向中通過對染色體端粒長度的分析證明，供體老母牛的體85美國一生物科技公司在六只克隆牛身上發(fā)現(xiàn)了抗衰老的現(xiàn)象。他們發(fā)現(xiàn)這六只牛的細胞染色體端粒,遠較同齡正常牛的端粒長,這表示六只復制乳牛比實際年齡要年輕得多﹐似乎出現(xiàn)了反老還童的現(xiàn)象?？茖W家相信﹐他們所采用的復制技術可拖慢甚至逆轉細胞的衰老過程。這項研究將可應用到醫(yī)學上造福人類﹐甚至發(fā)展出幫助人類大大延長壽命﹑甚至長生不老等爭議性技術。美國一生物科技公司在六只克隆牛身上發(fā)現(xiàn)了抗衰老的現(xiàn)象。他們發(fā)86日本農(nóng)業(yè)技術研究所發(fā)表的資料說，它與有關單位合作，取得了３頭克隆牛的白血球和精子的端粒體，把它們的長短與其“父親”絲福號種牛進行了比較，結果發(fā)現(xiàn)克隆牛及其后代的端粒體與普通牛并沒有實質性的差別。一般認為，生殖系統(tǒng)細胞端粒體的長短是由端粒酶決定的，日本科學家的研究結果表明，克隆牛的端粒酶同樣沒有什么異常。日本農(nóng)業(yè)技術研究所發(fā)表的資料說，它與有關單位合作，取87克隆生物的鑒定1.外形2.蛋白同工酶3.微衛(wèi)星DNA遺傳標記4.全基因組比較5.基因組印跡的比較6.線粒體DNA的比較克隆生物的鑒定1.外形88克隆的全能性

動物克隆本質是遺傳物質的復制.但是,目前的克隆生物雖然在功能上具備了無性繁殖的可能性,但是,尚未提供足夠的證據(jù)證明是遺傳物質真正的克隆.(1).卵母細胞線粒體DNA的作用;(2)卵母細胞中RNA的逆轉錄插入對核基因組的影響;(3).供體核基因組DNA在分化過程中的變異.基因重排,缺失,擴增等.(4).基因組印記現(xiàn)象在哺乳動物的發(fā)育中普遍存在，基因組印記與動物克隆技術的成功及不足有何關系值得深入研究.(5).卵母細胞殘留DNA的影響克隆的全能性動物克隆本質是遺傳物質的復制.但是,目前的89生物克隆的理論問題多利羊克隆成功證明了哺乳動物細胞具有全能性的觀點,核移植實驗表明,卵母細胞的細胞質對于體細胞的去分化具有重要作用,體現(xiàn)了核質相互作用的重要性

這種存在與卵母細胞中的因子是什么?是如何啟動體細胞基因組DNA的重新編程的?

如果揭示了重新編程因子的作用,體細胞的克隆還需要細胞核移植嗎?生物克隆的理論問題多利羊克隆成功證明了哺乳動物細胞90研究的切入點動物克隆需要電刺激,化學誘導,引起細胞信號傳導中蛋白修飾的變化,構想改變,最終調控基因的表達,因此,在最早期的編程因子研究中,蛋白質組學研究具有獨到之處.植物全能性可以誘導的特性用于研究植物去分化編程因子可以借鑒.研究的切入點動物克隆需要電刺激,化學誘導,引起91生物進化與克隆克隆本質上屬于無性繁殖.在生物進化中,無性繁殖是低等的,變異的能力和適應性較差.因此,生物克隆只能局限在特定的研究范圍內,絕對不能因為某個品種的優(yōu)良而大加推廣.克隆大熊貓,老虎并不能改變他們被自然界淘汰的命運.吸取優(yōu)質品種單一的教訓(如瘋牛病).生物進化與克隆克隆本質上屬于無性繁殖.在生物進化92我國克隆動物的研究我國在60年代,童弟周對金魚、鯽魚進行細胞核移植.近年來，我國已經(jīng)能克隆老鼠、兔子、山羊、牛、豬等哺乳動物。就克隆的動物種類來說，是絕大多數(shù)國家無法比擬的。目前我國在克隆技術方面水平比較高的研究單位有中國農(nóng)科院畜牧所、中科院發(fā)育生物學研究所、西北農(nóng)大畜牧所、江蘇農(nóng)科院畜牧所、廣西農(nóng)業(yè)大學等。我國克隆動物的研究我國在60年代,童弟周對金魚、鯽魚進行細胞931999年10月15日，我國也是世界上首例的體細胞克隆羊由中科院發(fā)育生物所與揚州大學合作在江蘇省揚州市誕生，至今已存活2年。另外，西北農(nóng)大也于今年6月先后誕生2只成年體細胞克隆山羊——元元和陽陽12001年上海轉基因中心體細胞克隆山羊誕生.其它胎兒細胞,胚胎細胞的克隆動物就不一一枚舉了.1999年10月15日，我國也是世界上首例的體細胞克94克隆動物簡介解析課件95克隆人的倫理學問題，生物克隆也使“克隆人”在理論上更具有了現(xiàn)實性，這也是克隆技術引起廣泛爭議的原因所在。多利羊誕生之后，不少西方國家及政界首腦對這一事件作出了反應。總的來講，多數(shù)國家的政府反應強烈，嚴格禁止對人類使用克隆技術。我國前衛(wèi)生部部長陳敏章表示中國反對克隆人的試驗?？寺∪说膫惱韺W問題，生物克隆也使“克隆人”在理論上更具有了961.如果對克隆動物技術的沒有限制，克隆人的研究禁令在技術層面上是毫無意義的。目前,美國,英國等對治療性克隆的研究開綠燈,表明克隆人的研究實際上已經(jīng)開始.我國也將治療性克隆研究作為國家973重大項目支持…...2.有關克隆人的問題在科學界早已是老生常談。實際上，自從戈登的研究問世以來，科學家們早已預見到“克隆人”及其可能產(chǎn)生的社會、倫理方面的后果。1.如果對克隆動物技術的沒有限制，克隆人的研究禁令在技術層97克隆人的倫理思考多利羊的出現(xiàn)，標志著又一技術發(fā)明開始造福于人類，表明新的技術發(fā)明增加了人類駕馭自然的力量，同時也增加了責任與義務。然而,克隆人研究面臨的是一片反對聲.反對復制人者所提的論點，大多是認為有太多不可預知的危險、無法控制的變化，承擔不起失敗的代價，但是,我們不可以因噎廢食，不可為了反對而夸大危險程度.克隆人的倫理思考多利羊的出現(xiàn)，標志著又一技術發(fā)明開始造福于人98一．破壞人格同一性有人以為這種人工生殖技術會破壞人類的人格同一性。顯然，這是一種誤解。即使一個人與其復制品的基因相同，那只表示他們的外貌及其他生理特徵很相似，就像一般的孿生兄弟姐妹那樣，卻并不表示他們的思想(人格)相同.我們所謂的“自己”其實是被環(huán)境塑造出來的?？寺∪伺c核供體是獨立的兩個人。如果能了解這一點，資本家與政治人物就不會想要利用復制人來延續(xù)自己的生命了；"基因決定不了一切"。(雙胞胎)一．破壞人格同一性有人以為這種人工生殖技術會破壞人類的99二．破壞固有的倫常關系復制人的養(yǎng)育責任是誰？復制人長大以后是否告知其出身？誰是他的父母？人權、社會地位、法律身分如何定義？令傳統(tǒng)的親子關系產(chǎn)生變化，產(chǎn)生了一些新問題,促成更多的單親家庭，甚至是同性戀家庭。然而，固有的倫常關系的改變與復制人沒有必然聯(lián)系，單親家庭與同性戀家庭已開始出現(xiàn)，我們也已經(jīng)寬容同性戀的存在人類社會本來就是不斷發(fā)展的,從母系社會看今天的家庭又如何能夠接受呢?(同性戀)二．破壞固有的倫常關系復制人的養(yǎng)育責任是誰？復制人長大以100三．生靈涂炭研究復制人類的最初階段，將會有許多胚胎因研究失敗而被犧牲生命。這涉及什么是生命，什么是人的看法；這可以墮胎的問題相提并論。隨意殺人固然是不道德的，但如果胚胎尚不是人，為了醫(yī)學研究或活動犧牲它們便不算濫殺無辜。當然，胚胎的發(fā)展有好幾個階段，在它最初形成的階段，它的道德地位與細胞等無大不同，但到了后來的階段，尤其當它成了有意識的胎兒時，我們當然不能隨意殺害它。我們?yōu)榱酸t(yī)療難道不進行動物實驗嗎?三．生靈涂炭研究復制人類的最初階段，將會有許多胚胎101四．滑坡理論持滑坡理論的人認為，一旦允許復制人的活動，那么，其他類似的，對人類社會有大災害的人類基因工程活動也不可避免地逐一被允許，而這種趨勢一旦開始，就象落于滑坡上,后果是不堪設想的。我們總沒有道理面對一切事情，統(tǒng)統(tǒng)看成可以將滑坡理論應用于其上，從而一早就將它看成是洪水猛獸。這樣的話，我們什么事情也不可以做。克隆人研究應該就事論事,不能隨意延伸,因為量變導致質變.(因噎廢食)四．滑坡理論持滑坡理論的人認為，一旦允許復制人的活動，102五．扮演上帝

這種觀點是部分神學家所喜歡運用的，在應用倫理學中亦并不陌生。歷史上教會曾經(jīng)對新科技，新知識加以排斥，以古老自以為是的神學見解壓抑科技研究，日后淪為笑柄。神在歷史中沒有對于人類的科技發(fā)明，作出超自然的干預，但人必須承擔闖禍的后果。人類已經(jīng)扮演的上帝角色還少嗎?五．扮演上帝

這種觀點是部分神學家所喜歡運用的，在應用103六．違反自然定律有人以為符合自然定律才是道德的，違反自然定律則是不道德的。由于復制人活動是人工的而非自然的生殖方法，因此，它是不道德的。這種觀點很有問題，因為它將自然與道德混為一談。事實上，符