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第十六章DNA的生物中心法則半保留DNA聚合酶片段中心法則A0042201.movDNA聚合酶DNA
的關(guān)鍵酶底物;dATP,dGTP,dCTP,dTTP鎂離子參與引物摸扳DNA5′→3′方向聚合
DNA具有5′→3′
3′→5′方向的外切DNA聚合酶Ⅰ型1957年發(fā)現(xiàn)
100公斤細(xì)菌中得到500毫克純酶全酶:單鏈;109kD;含1個(gè)Zn;蛋白酶可分解為1大和1小兩部分大片段:具有5′→3′聚合3′→5′外切小片段具有5′→3′外切大腸桿菌DNA
聚合酶DNA
聚合酶有三種DNA
鏈的聚合酶是Ⅲ型修復(fù)DNA的酶是Ⅰ型(單鏈多肽)Ⅱ型作用可能參與DNA的修復(fù)DNA
聚合酶Ⅲ型發(fā)揮作用時(shí)是二聚體,每個(gè)單體由10個(gè)不同亞基組成DNA聚合酶III:DNA連接酶DNA雙鏈中缺口處5'磷酸和3'羥基共價(jià)連接動(dòng)物需要ATP大腸桿菌需要NADH解開(kāi)DNA螺旋有關(guān)的酶和蛋白質(zhì)Rep
解鏈酶HDP
螺旋降穩(wěn)蛋白拓?fù)錁?gòu)酶引物酶DNA的起點(diǎn)叉終點(diǎn)半不連續(xù)片斷的起始大腸桿菌起點(diǎn)為ori
C,
245bp構(gòu)成其序列和控制元件在細(xì)菌分保守關(guān)鍵序列;三個(gè)13
bp序列和四個(gè)
9
bp的序列起點(diǎn)重視大約20—40個(gè)Dna
A
蛋白各自帶一個(gè)ATP結(jié)合在四個(gè)9
bp的序列上(位點(diǎn)),DNA纏繞其上,形成復(fù)合物。HU蛋白與DNA結(jié)合,促使雙鏈DNA彎曲。受其影響三個(gè)富含AT
的13
bp序列被變性,稱(chēng)為開(kāi)鏈復(fù)合物。
Dna
B在Dna
C的協(xié)助下結(jié)合與解鏈區(qū)。DnaB借助水解ATP產(chǎn)生的能量,5'→3'方向解開(kāi)
DNA的雙鏈。E.
coli
起始需要的蛋白延長(zhǎng)前導(dǎo)鏈后隨鏈片段半不連續(xù)叉的終止片段的起終止位點(diǎn)位于前一個(gè)始位點(diǎn)引物切除(DNA聚合酶I)另一個(gè) 片段3’OH處(DNA聚合酶I)DNA連接酶連接缺口新DNAA0002701.mov真核細(xì)胞DNA的與原核生物DNA
的基本機(jī)制一致差別:前導(dǎo)鏈和后隨鏈真核生物DNA的酶不同真核生物引物酶與聚合酶相連,原核中引物酶與解旋酶相連c.真核
是多起點(diǎn),原核生物為單一起點(diǎn).逆轉(zhuǎn)錄RNA指導(dǎo)下的DNAA0215301.movA0215301.movDNA的突變突變(Mutation)定義點(diǎn)突變(轉(zhuǎn)換和巔換)或缺失突變(移碼突變)誘發(fā)突變及誘變劑堿基類(lèi)似物,堿基的修飾劑,嵌入
,紫外線等DNA損傷與修復(fù)物理,化學(xué),紫外線等因素造成DNA的損傷。生物體在進(jìn)化過(guò)程中獲得的一種保護(hù)功能,使損傷的DNA得到修復(fù)。DNA的修復(fù)錯(cuò)配修復(fù)光修復(fù)切除修復(fù)(重組修復(fù)(前修復(fù))后修復(fù))應(yīng)急反應(yīng)和易錯(cuò)修復(fù)錯(cuò)配修復(fù)(Mismatch
Repair)SOS修復(fù)誘導(dǎo)產(chǎn)生校對(duì)功能差的DNA聚合酶大腸桿菌參與錯(cuò)配修復(fù)系統(tǒng)☆大腸桿菌參與錯(cuò)配修復(fù)系統(tǒng)的蛋白質(zhì)至少12種。☆
Mut
S
二聚體識(shí)別并
結(jié)合錯(cuò)配堿基部位→
Mut
L與Mut
S
二聚體結(jié)合→復(fù)合體沿DNA雙鏈向兩個(gè)方向移動(dòng),直至遇到GATC
,ATP水解供能。
Mut
H核酸內(nèi)切酶與復(fù)合體結(jié)合,將
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