臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控課件-2

臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心李金明臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心李金明臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控概念不清不知道具體怎么做不會(huì)寫室內(nèi)質(zhì)控的SOP不知道如何選擇室內(nèi)質(zhì)控物不會(huì)分析室內(nèi)質(zhì)控的結(jié)果臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控概念不清臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控責(zé)任人不清。質(zhì)控物的來源及濃度不清或不全，并且通常沒有說明陰性質(zhì)控物的來源。有些是自制，但制備方法不規(guī)范，沒有任何的質(zhì)量檢驗(yàn)，定量結(jié)果沒有溯源性。沒有明確所選用的質(zhì)控方法。對(duì)前20次的測(cè)定的室內(nèi)質(zhì)控沒有解決方法。沒有明確的失控判斷標(biāo)準(zhǔn)，只是做了一些失控的含糊敘述。并且一般都沒有陰性失控的判斷方法。沒有失控后的分析及處理措施。臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控責(zé)任人不清。臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控由實(shí)驗(yàn)室工作人員，采取一定的方法和步驟，連續(xù)評(píng)價(jià)本實(shí)驗(yàn)室工作的可靠性程度，旨在監(jiān)測(cè)和控制本實(shí)驗(yàn)室工作的精密度，提高本室常規(guī)工作中批內(nèi)、批間樣本檢驗(yàn)的一致性，以確定測(cè)定結(jié)果是否可靠、可否發(fā)出報(bào)告的一項(xiàng)工作?？筛爬?(1)執(zhí)行者：實(shí)驗(yàn)室技術(shù)人員；(2)目的：監(jiān)測(cè)實(shí)驗(yàn)室測(cè)定的重復(fù)性；(3)功能：決定了當(dāng)批測(cè)定的有效性，報(bào)告可否發(fā)出。是對(duì)實(shí)驗(yàn)室測(cè)定的即時(shí)性評(píng)價(jià)。

臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控由實(shí)驗(yàn)室工作人員，采取一定的方法和臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控主要包括三個(gè)方面：（1）測(cè)定前的質(zhì)量控制；（2）統(tǒng)計(jì)學(xué)質(zhì)量控制；（3）質(zhì)量控制的評(píng)價(jià)。臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控主要包括三個(gè)方面：臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控實(shí)驗(yàn)室設(shè)施、儀器設(shè)備及管理理想的試劑和操作方法人員培訓(xùn)

臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控實(shí)驗(yàn)室設(shè)施、儀器設(shè)備及管理臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控實(shí)驗(yàn)室空間及工作流程的設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)室環(huán)境條件的控制：溫濕度控制設(shè)備、穩(wěn)壓或不間斷電源臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控實(shí)驗(yàn)室空間及工作流程的設(shè)計(jì)理想的PCR實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)A產(chǎn)物分析區(qū)空氣流向空氣流向空氣流向空氣流向緩沖間緩沖間緩沖間專用走廊工作流向擴(kuò)增區(qū)標(biāo)本制備區(qū)試劑準(zhǔn)備區(qū)理想的PCR實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)A產(chǎn)物分析區(qū)空氣流向空氣流向空氣流向空產(chǎn)物分析區(qū)空氣流向空氣流向空氣流向空氣流向緩沖間緩沖間緩沖間專用走廊工作流向擴(kuò)增區(qū)標(biāo)本制備區(qū)試劑準(zhǔn)備區(qū)理想的PCR實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)B產(chǎn)物分析區(qū)空氣流向空氣流向空氣流向空氣流向緩沖間緩沖間緩沖間臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控各區(qū)獨(dú)立注意風(fēng)向因地制宜方便工作“十六字口訣”臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控各區(qū)獨(dú)立“十六字口訣”產(chǎn)物分析區(qū)空氣流向空氣流向空氣流向空氣流向緩沖間緩沖間緩沖間專用走廊工作流向擴(kuò)增區(qū)標(biāo)本制備區(qū)試劑準(zhǔn)備區(qū)傳遞窗傳遞窗傳遞窗產(chǎn)物分析區(qū)空氣流向空氣流向空氣流向空氣流向緩沖間緩沖間緩沖間臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控“無基因”概念實(shí)驗(yàn)室要有嚴(yán)格的人員進(jìn)入限制和程序使用合格的試劑和消耗品臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控“無基因”概念臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控臨床標(biāo)本中存在的大量待測(cè)微生物科研中得到的質(zhì)粒克隆以前分析研究的特定微生物大量存在于實(shí)驗(yàn)環(huán)境中的特定微生物以前擴(kuò)增產(chǎn)物的殘留污染。這也是PCR實(shí)驗(yàn)室最容易產(chǎn)生的將造成假陽性的“污染”。

臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控臨床標(biāo)本中存在的大量待測(cè)微生物臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控實(shí)驗(yàn)室的嚴(yán)格分區(qū)及工作程序的嚴(yán)格遵守

化學(xué)方法：實(shí)驗(yàn)臺(tái)面可使用10％的次氯酸鈉（漂白劑）清洗；有些物品比如放置擴(kuò)增反應(yīng)管的盤必須從污染區(qū)轉(zhuǎn)回到清潔區(qū)時(shí)，在轉(zhuǎn)回之前，應(yīng)將其置于2％~10％的次氯酸鈉溶液中過夜，并充分沖洗。紫外照射：實(shí)驗(yàn)臺(tái)面、儀器設(shè)備、實(shí)驗(yàn)室空間UNG臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控實(shí)驗(yàn)室的嚴(yán)格分區(qū)及工作程序的嚴(yán)格遵臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控PCR儀、離心機(jī)、加樣器、恒溫設(shè)備等應(yīng)建立技術(shù)檔案，并定期維護(hù);PCR儀、加樣器、恒溫設(shè)備應(yīng)定期進(jìn)行校準(zhǔn)臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控核酸提取或標(biāo)本處理方法的抗干擾能力（能否有效地去掉PCR抑制物）測(cè)定下限(Detectionlimit)（定性測(cè)定）測(cè)定準(zhǔn)確性和線性范圍批內(nèi)變異和批間變異試劑批間的一致性有否污染其他：外包裝、試劑的完整性、有效期、說明書等臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控核酸提取或標(biāo)本處理方法的抗干擾能力臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控按照試劑盒說明書操作即可嗎?操作中影響測(cè)定結(jié)果的關(guān)鍵環(huán)節(jié)寫出具有可操作性的SOP臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控培訓(xùn)所涉及的范圍:儀器設(shè)備使用、維護(hù)和校準(zhǔn)；試劑、方法原理；質(zhì)量管理體系；相關(guān)法律法規(guī)、相關(guān)領(lǐng)域的新技術(shù)、新理念和新進(jìn)展；實(shí)驗(yàn)操作技能等。如何培訓(xùn)：講座、討論、自學(xué)和參加培訓(xùn)班等。培訓(xùn)的評(píng)估：書面考試、實(shí)驗(yàn)考核、討論心得、論文、綜述等。臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控培訓(xùn)所涉及的范圍:儀器設(shè)備使用、維臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控質(zhì)控物濃度的選擇每次（批）測(cè)定質(zhì)控物的數(shù)量及放置質(zhì)控規(guī)則Levey-Jennings質(zhì)控圖方法“即刻法”質(zhì)控方法“假陽性”的統(tǒng)計(jì)質(zhì)控方法臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控質(zhì)控物濃度的選擇臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控定量測(cè)定：測(cè)定線性范圍內(nèi)的高、中、低三種濃度定性測(cè)定：接近方法測(cè)定下限的濃度陰性質(zhì)控物臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控定量測(cè)定：測(cè)定線性范圍內(nèi)的高、中、臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控標(biāo)本數(shù)量如小于30，弱陽性和陰性質(zhì)控各1份，標(biāo)本數(shù)量增加，質(zhì)控物數(shù)量相應(yīng)按比例增加均勻分散于臨床標(biāo)本中，與臨床標(biāo)本一同處理（核酸提?。U(kuò)增時(shí)的排列順序，可排于標(biāo)準(zhǔn)品或校準(zhǔn)品之后，臨床樣本之前。但在擴(kuò)增儀中的位置，不應(yīng)永久性的固定的在一個(gè)孔，而應(yīng)在每次擴(kuò)增檢測(cè)時(shí)，進(jìn)行相應(yīng)的順延，以使在一定的時(shí)間內(nèi)，可以盡可能的監(jiān)測(cè)每一個(gè)孔的擴(kuò)增有效性。臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控標(biāo)本數(shù)量如小于30，弱陽性和陰性質(zhì)臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控陰性原血清樣本實(shí)驗(yàn)過程中帶入的空管僅含擴(kuò)增反應(yīng)混合液的管臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控陰性原血清樣本臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控監(jiān)測(cè)實(shí)驗(yàn)室的以前擴(kuò)增產(chǎn)物的“污染”由實(shí)驗(yàn)操作所致的標(biāo)本間的交叉污染。具體地說，如強(qiáng)陽性標(biāo)本氣溶膠經(jīng)加樣器所致的污染、強(qiáng)陽性標(biāo)本經(jīng)操作者的手所致的污染、使用翻蓋離心管核酸提取時(shí)在較高溫孵育時(shí)蓋子崩開等擴(kuò)增反應(yīng)試劑的污染。

臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控監(jiān)測(cè)實(shí)驗(yàn)室的以前擴(kuò)增產(chǎn)物的“污染”臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控監(jiān)測(cè)核酸提取過程中的實(shí)驗(yàn)室“污染”的存在（在整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程中，開口放置于核酸提取的操作臺(tái)面區(qū)域內(nèi)，最后以水為基質(zhì)，進(jìn)行擴(kuò)增

）臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控監(jiān)測(cè)核酸提取過程中的實(shí)驗(yàn)室“污染”臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控監(jiān)測(cè)試劑的“污染”臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控監(jiān)測(cè)試劑的“污染”臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控質(zhì)控規(guī)則的表達(dá)方式質(zhì)控規(guī)則的功能常用質(zhì)控規(guī)則的符號(hào)及定義

臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控質(zhì)控規(guī)則的表達(dá)方式臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控通常質(zhì)控規(guī)則以符號(hào)AL來表示，其中A為質(zhì)控測(cè)定中超出質(zhì)量控制限的測(cè)定值的個(gè)數(shù)，L為控制限，通常用均值或均值±1～3SD來表示。當(dāng)質(zhì)控測(cè)定值超出控制限L時(shí)，即可將該批測(cè)定判為失控。常用的13S質(zhì)控規(guī)則，其中1為原式中的A，3s為原式中的L，表示均值±3s，其確切的含義為：在質(zhì)控測(cè)定值中，如果有一個(gè)測(cè)定值超出均值±3s范圍，即可將該批測(cè)定判為失控。臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控通常質(zhì)控規(guī)則以符號(hào)AL來表示，其中臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控簡(jiǎn)單地說就是用于判斷測(cè)定批的失控還是在控。臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控簡(jiǎn)單地說就是用于判斷測(cè)定批的失控還臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控符號(hào)

定義12S

一個(gè)質(zhì)控測(cè)定值超出±2s控制限。13S

一個(gè)質(zhì)控測(cè)定值超出±3s控制限。22S

兩個(gè)連續(xù)的質(zhì)控測(cè)定值同時(shí)超出+2s或－2s控制限。R4S

同一批測(cè)定中，兩個(gè)不同濃度質(zhì)控物的測(cè)定值之間的差值超出4s控制限。41S

四個(gè)連續(xù)的質(zhì)控測(cè)定值同時(shí)超出+1s或－1s控制限。7T

七個(gè)連續(xù)的質(zhì)控測(cè)定值呈現(xiàn)一個(gè)向上或向下的趨勢(shì)變化。10X

十個(gè)連續(xù)的質(zhì)控測(cè)定值同時(shí)處于均值（）的同一側(cè)。臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控符號(hào)臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控也稱Shewhart質(zhì)控圖，是由美國的Shewhart于1924年首先提出，并用于工業(yè)產(chǎn)品的質(zhì)量控制。二十世紀(jì)五十年代初，Levey-Jennings將其引入臨床檢驗(yàn)的質(zhì)量控制。經(jīng)Henry和Segalove的改良，即為目前常用的Levey-Jennings質(zhì)控圖。臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控也稱Shewhart質(zhì)控圖，是由美臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控穩(wěn)定條件下，在20個(gè)IQC結(jié)果中不應(yīng)有多于1個(gè)結(jié)果超過2SD（95.5%可信限）限度；在1000個(gè)測(cè)定結(jié)果中超過3SD（99.7%可信限）的結(jié)果不多于3個(gè)。如以±3s為失控限，假失控的概率為0.3%。臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控穩(wěn)定條件下，在20個(gè)IQC結(jié)果中不臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控“即刻法”質(zhì)控方法的實(shí)質(zhì)是一種統(tǒng)計(jì)學(xué)方法，即Grubs異常值取舍法；只要有3個(gè)以上的數(shù)據(jù)即可決定是否有異常值的存在。臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控“即刻法”質(zhì)控方法的實(shí)質(zhì)是一種統(tǒng)計(jì)臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控基于日常檢驗(yàn)的陽性率比值(呈正態(tài)分布)直接概率計(jì)算方法（不呈正態(tài)分布）臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控基于日常檢驗(yàn)的陽性率比值(呈正態(tài)分臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控半Levey-Jennings質(zhì)控圖法臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控半Levey-Jennings質(zhì)控臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控當(dāng)陰性質(zhì)控樣本為陽性時(shí),不管陽性率測(cè)定比值為何，均為失控，所有陽性標(biāo)本須重新測(cè)定，并增加一倍陰性質(zhì)控樣本。如果陰性質(zhì)控樣本為陰性，某次測(cè)定陽性比值超出+3SD,則為失控,為1+3S規(guī)則。本次結(jié)果陰性結(jié)果根據(jù)陽性質(zhì)控樣本的情況,決定是否可以發(fā)出,所有陽性樣本結(jié)果不能發(fā)出，需查找出現(xiàn)陽性率增高的原因，并在增加一倍陰性質(zhì)控樣本的情況下重新檢測(cè)。臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控當(dāng)陰性質(zhì)控樣本為陽性時(shí),不管陽性率臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控曲線向上漂移：提示出現(xiàn)污染，污染可能是由于某一天操作上的失誤導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)室被污染如標(biāo)本泄漏，產(chǎn)物泄漏，試劑被污染等向上的趨勢(shì)性變化：可能存在累積性的產(chǎn)物污染，實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增產(chǎn)物逐漸累積，從而使病人結(jié)果的陽性率逐漸增高。此時(shí)實(shí)驗(yàn)室需要進(jìn)行徹底清潔。臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控曲線向上漂移：提示出現(xiàn)污染，污染可臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控按統(tǒng)計(jì)學(xué)規(guī)律，一個(gè)事件發(fā)生的概率小于5%被稱為小概率事件，即發(fā)生的可能性很小。當(dāng)一個(gè)小概率事件發(fā)生時(shí)，則可能有誤差存在，有必要對(duì)其發(fā)生的原因進(jìn)行分析。對(duì)每天的日常病人結(jié)果中陽性率出現(xiàn)的概率進(jìn)行計(jì)算，如果這種結(jié)果出現(xiàn)的概率小于5%時(shí)，則可判為失控。臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控按統(tǒng)計(jì)學(xué)規(guī)律，一個(gè)事件發(fā)生的概率小臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控在一個(gè)實(shí)驗(yàn)室中某檢測(cè)項(xiàng)目結(jié)果的陽性率為p,計(jì)算在n個(gè)血液樣本中有k個(gè)陽性結(jié)果的概率。根據(jù)二項(xiàng)式分布的概率計(jì)算公式如下：

P(X=k)=n!/[k!(n-k)!]pk(1-p)n-k(1)

其中n為當(dāng)次實(shí)驗(yàn)檢測(cè)標(biāo)本數(shù)，k為陽性個(gè)數(shù)，p為陽性率。P(X=k)5%為失控。此時(shí)，陰性標(biāo)本可以發(fā)出報(bào)告，所有陽性標(biāo)本在查清原因后重做。臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控在一個(gè)實(shí)驗(yàn)室中某檢測(cè)項(xiàng)目結(jié)果的陽性臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控如果一個(gè)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)HBVDNA，平常病人結(jié)果的陽性率為10%，即p=0.1,在某一次檢測(cè)25個(gè)樣本出現(xiàn)6個(gè)陽性結(jié)果，19個(gè)陰性結(jié)果，則檢測(cè)過程中是存在污染的可能性可通過下述方法計(jì)算。即計(jì)算在25個(gè)樣本中出現(xiàn)6個(gè)或6個(gè)以上陽性結(jié)果的概率，此時(shí)的概率為1-（獲得0個(gè)或1個(gè)或2個(gè)或3個(gè)或4個(gè)或多5個(gè)陽性結(jié)果的概率）即：1-[P(0)+P(1)+P(2)+P(3)+P(4)]=1-[(1-0.1)25+25(1-0.1)240.1+300(1-0.1)230.12+2300(1-0.1)220.13+12650(1-0.1)210.14+53130(1-0.1)200.15]=0.0334則在這個(gè)實(shí)驗(yàn)室一次檢測(cè)25個(gè)標(biāo)本獲得6個(gè)或6個(gè)以上陽性結(jié)果的概率為3.34%，小于5%，屬于小概率事件，即發(fā)生的可能性很小，可能有污染所致假陽性結(jié)果的可能。臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控如果一個(gè)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)HBVDNA，臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控在血液篩查檢測(cè)中，許多實(shí)驗(yàn)室或檢測(cè)項(xiàng)目如HCVRNA、CT、結(jié)核桿菌、淋球菌的陽性結(jié)果率均較低，這時(shí)雖然可以使用公式（1）計(jì)算概率，但如果標(biāo)本量很大，使用泊松分布來估計(jì)二項(xiàng)式分布是一種更為簡(jiǎn)便的方法。。根據(jù)泊松分布，可使用下式計(jì)算概率：

P(X=k)=(np)ke-np/k!(2)

P(X=k)5%為失控。此時(shí)，陰性標(biāo)本可以發(fā)出報(bào)告，所有陽性標(biāo)本在查清原因后重做。臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控在血液篩查檢測(cè)中，許多實(shí)驗(yàn)室或檢測(cè)臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控一個(gè)實(shí)驗(yàn)室中，某項(xiàng)目每次檢測(cè)結(jié)果的陽性率約為2%，則在100個(gè)樣本中出現(xiàn)8個(gè)陽性結(jié)果的概率。根據(jù)泊松分布，可使用公式（2）計(jì)算概率，此時(shí)n=100,p=0.02,k=8,np=2代入公式（2）計(jì)算得

P(X=10)=28e-2/8!=0.0009。臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控一個(gè)實(shí)驗(yàn)室中，某項(xiàng)目每次檢測(cè)結(jié)果的臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控如果所有陽性結(jié)果的出現(xiàn)是連續(xù)性的，則可能存在標(biāo)本間的交叉污染，即陽性樣本污染了它鄰近的陰性樣本，這種情況的概率計(jì)算公式如下：

P=(n-r+1)/[n!/r!(n-r)!]（3）其中n為當(dāng)次實(shí)驗(yàn)檢測(cè)標(biāo)本數(shù)，r為連續(xù)出現(xiàn)陽性的個(gè)數(shù)。當(dāng)某次實(shí)際測(cè)定標(biāo)本連續(xù)陽性的概率大于所計(jì)算的概率，則判為失控。陰性標(biāo)本結(jié)果可以發(fā)出，陽性標(biāo)本要考慮標(biāo)本間交叉污染的問題。臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控如果所有陽性結(jié)果的出現(xiàn)是連續(xù)性的，臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控如在一次檢測(cè)100個(gè)標(biāo)本的HBVDNA檢測(cè)中，所有兩個(gè)陽性結(jié)果連續(xù)出現(xiàn)的概率為：

P=(100-2+1)/[100!/2!(100-2)!]=99/4950=0.02概率為2.0%。

因此，如在100個(gè)標(biāo)本中，連續(xù)出現(xiàn)兩個(gè)為陽性次數(shù)有3次，即概率為3.0%，則為失控。而在一次檢測(cè)100個(gè)標(biāo)本，所有三個(gè)陽性結(jié)果連續(xù)出現(xiàn)的概率為：

P=(100-3+1)/[100!/3!(100-3)!]=98/161700=0.0006概率為0.06%。

因此，如果如在100個(gè)標(biāo)本中，連續(xù)出現(xiàn)三個(gè)為陽性次數(shù)有1次，即概率為1.0%，為失控。臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控如在一次檢測(cè)100個(gè)標(biāo)本的HBV臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控IQC是一個(gè)集體活動(dòng)，不光是對(duì)實(shí)驗(yàn)室一次測(cè)定的有效性的判斷，也反應(yīng)了實(shí)驗(yàn)室測(cè)定趨勢(shì)的變化。IQC的失控不能做為處罰的依據(jù)，應(yīng)建設(shè)性的找出失控的原因，針對(duì)其采取措施加以改進(jìn)。對(duì)IQC應(yīng)定期進(jìn)行評(píng)價(jià)。臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控IQC是一個(gè)集體活動(dòng)，不光是對(duì)實(shí)驗(yàn)臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控核酸提取中的隨機(jī)誤差。如核酸提取中的丟失、有機(jī)溶劑的去除不徹底、標(biāo)本中擴(kuò)增抑制物的殘留、所用耗材如離心管有PCR抑制物等。儀器的問題。如擴(kuò)增儀孔間溫度的不均一性、孔內(nèi)溫度與所示溫度的不一致性等。試劑的問題。如Taq酶和/或逆轉(zhuǎn)錄酶的失活、探針的純度及標(biāo)記效率和核酸提取試劑的效率等。臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控核酸提取中的隨機(jī)誤差。如核酸提取中陽性質(zhì)控樣本測(cè)定結(jié)果偏低或?yàn)殛幮越Y(jié)果偏低陰性臨床標(biāo)本中無強(qiáng)陽性臨床標(biāo)本中有較強(qiáng)陽性臨床標(biāo)本中有陽性臨床標(biāo)本全為陰性觀察臨床標(biāo)本情況所用離心管含抑制物Taq酶活性降低核酸提取試劑效率低更換進(jìn)口離心管更換Taq酶再檢測(cè)更換核酸提取試劑所有標(biāo)本重新檢測(cè)核酸提取中靶核酸丟失核酸提取中抑抑物殘留核酸提取試劑混入擴(kuò)增儀孔間溫度差異隨機(jī)誤差檢測(cè)質(zhì)控樣本及3~5份已知陽性樣本質(zhì)控樣本測(cè)定正常且陽性樣本有些值增加質(zhì)控及已知陽性樣本測(cè)定仍異常按系統(tǒng)誤差途徑分析重新提取或已知濃度DNA在同一孔內(nèi)擴(kuò)增結(jié)果正常結(jié)果仍低進(jìn)行擴(kuò)增儀孔溫度校準(zhǔn)后再檢測(cè)Taq酶或逆轉(zhuǎn)錄酶失活陽性質(zhì)控樣本測(cè)定結(jié)果偏低或?yàn)殛幮越Y(jié)果偏低陰性臨床標(biāo)本中無強(qiáng)陽臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控純化核酸標(biāo)本重復(fù)雙份測(cè)定稀釋標(biāo)本使用“內(nèi)質(zhì)控”（InternalControl,IC)臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控純化核酸臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控?cái)U(kuò)增產(chǎn)物的“污染”臨床標(biāo)本的核酸提取過程中發(fā)生的標(biāo)本間的交叉“污染”臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控?cái)U(kuò)增產(chǎn)物的“污染”陰性質(zhì)控樣本測(cè)定為陽性臨床標(biāo)本亦全為陽性臨床標(biāo)本中有陽性也有陰性擴(kuò)增產(chǎn)物“污染”試劑“污染”同時(shí)檢測(cè)的標(biāo)本情況擴(kuò)增產(chǎn)物輕度“污染”標(biāo)本間交叉“污染”3~5空管室內(nèi)靜置5~8份水樣本檢測(cè)試劑直接擴(kuò)增檢測(cè)驗(yàn)證驗(yàn)證5~8份水樣本檢測(cè)暫停日常檢驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)室清潔、通風(fēng)更換試劑措施有陽性，則確認(rèn)有實(shí)驗(yàn)室“污染”無陽性，說明為標(biāo)本交叉“污染”改善操作措施陰性質(zhì)控樣本測(cè)定為陽性臨床標(biāo)本亦全為陽性臨床標(biāo)本中有陽性也有臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控嚴(yán)格的實(shí)驗(yàn)室分區(qū)使用帶“濾芯”的吸頭設(shè)立“陰性”質(zhì)控（與標(biāo)本同時(shí)處理）使用防“污染”（含UNG）的PCR試劑臨床“假陽性”問題：病原微生物如結(jié)核桿菌、淋球菌等經(jīng)藥物治療后已死亡，但PCR仍可為陽性，故治療結(jié)束后至少兩周內(nèi)不宜做PCR檢測(cè)。臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控嚴(yán)格的實(shí)驗(yàn)室分區(qū)臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控IQC可能測(cè)不出的誤差

測(cè)定前

測(cè)定中

測(cè)定后

樣本鑒定不對(duì)樣本吸取不對(duì)結(jié)果記錄錯(cuò)誤

樣本貯存中變質(zhì)試劑加入不對(duì)此類誤差的發(fā)生率在不同的實(shí)驗(yàn)室有所不同，一般要求小于

0.1%，且應(yīng)均衡地分布于測(cè)定前、測(cè)定中和測(cè)定后的不同階段。

臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控IQC可能測(cè)不出的誤差臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心李金明臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心李金明臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控概念不清不知道具體怎么做不會(huì)寫室內(nèi)質(zhì)控的SOP不知道如何選擇室內(nèi)質(zhì)控物不會(huì)分析室內(nèi)質(zhì)控的結(jié)果臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控概念不清臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控責(zé)任人不清。質(zhì)控物的來源及濃度不清或不全，并且通常沒有說明陰性質(zhì)控物的來源。有些是自制，但制備方法不規(guī)范，沒有任何的質(zhì)量檢驗(yàn)，定量結(jié)果沒有溯源性。沒有明確所選用的質(zhì)控方法。對(duì)前20次的測(cè)定的室內(nèi)質(zhì)控沒有解決方法。沒有明確的失控判斷標(biāo)準(zhǔn)，只是做了一些失控的含糊敘述。并且一般都沒有陰性失控的判斷方法。沒有失控后的分析及處理措施。臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控責(zé)任人不清。臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控由實(shí)驗(yàn)室工作人員，采取一定的方法和步驟，連續(xù)評(píng)價(jià)本實(shí)驗(yàn)室工作的可靠性程度，旨在監(jiān)測(cè)和控制本實(shí)驗(yàn)室工作的精密度，提高本室常規(guī)工作中批內(nèi)、批間樣本檢驗(yàn)的一致性，以確定測(cè)定結(jié)果是否可靠、可否發(fā)出報(bào)告的一項(xiàng)工作?？筛爬?(1)執(zhí)行者：實(shí)驗(yàn)室技術(shù)人員；(2)目的：監(jiān)測(cè)實(shí)驗(yàn)室測(cè)定的重復(fù)性；(3)功能：決定了當(dāng)批測(cè)定的有效性，報(bào)告可否發(fā)出。是對(duì)實(shí)驗(yàn)室測(cè)定的即時(shí)性評(píng)價(jià)。

臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控由實(shí)驗(yàn)室工作人員，采取一定的方法和臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控主要包括三個(gè)方面：（1）測(cè)定前的質(zhì)量控制；（2）統(tǒng)計(jì)學(xué)質(zhì)量控制；（3）質(zhì)量控制的評(píng)價(jià)。臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控主要包括三個(gè)方面：臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控實(shí)驗(yàn)室設(shè)施、儀器設(shè)備及管理理想的試劑和操作方法人員培訓(xùn)

臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控實(shí)驗(yàn)室設(shè)施、儀器設(shè)備及管理臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控實(shí)驗(yàn)室空間及工作流程的設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)室環(huán)境條件的控制：溫濕度控制設(shè)備、穩(wěn)壓或不間斷電源臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控實(shí)驗(yàn)室空間及工作流程的設(shè)計(jì)理想的PCR實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)A產(chǎn)物分析區(qū)空氣流向空氣流向空氣流向空氣流向緩沖間緩沖間緩沖間專用走廊工作流向擴(kuò)增區(qū)標(biāo)本制備區(qū)試劑準(zhǔn)備區(qū)理想的PCR實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)A產(chǎn)物分析區(qū)空氣流向空氣流向空氣流向空產(chǎn)物分析區(qū)空氣流向空氣流向空氣流向空氣流向緩沖間緩沖間緩沖間專用走廊工作流向擴(kuò)增區(qū)標(biāo)本制備區(qū)試劑準(zhǔn)備區(qū)理想的PCR實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)B產(chǎn)物分析區(qū)空氣流向空氣流向空氣流向空氣流向緩沖間緩沖間緩沖間臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控各區(qū)獨(dú)立注意風(fēng)向因地制宜方便工作“十六字口訣”臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控各區(qū)獨(dú)立“十六字口訣”產(chǎn)物分析區(qū)空氣流向空氣流向空氣流向空氣流向緩沖間緩沖間緩沖間專用走廊工作流向擴(kuò)增區(qū)標(biāo)本制備區(qū)試劑準(zhǔn)備區(qū)傳遞窗傳遞窗傳遞窗產(chǎn)物分析區(qū)空氣流向空氣流向空氣流向空氣流向緩沖間緩沖間緩沖間臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控“無基因”概念實(shí)驗(yàn)室要有嚴(yán)格的人員進(jìn)入限制和程序使用合格的試劑和消耗品臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控“無基因”概念臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控臨床標(biāo)本中存在的大量待測(cè)微生物科研中得到的質(zhì)?？寺∫郧胺治鲅芯康奶囟ㄎ⑸锎罅看嬖谟趯?shí)驗(yàn)環(huán)境中的特定微生物以前擴(kuò)增產(chǎn)物的殘留污染。這也是PCR實(shí)驗(yàn)室最容易產(chǎn)生的將造成假陽性的“污染”。

臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控臨床標(biāo)本中存在的大量待測(cè)微生物臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控實(shí)驗(yàn)室的嚴(yán)格分區(qū)及工作程序的嚴(yán)格遵守

化學(xué)方法：實(shí)驗(yàn)臺(tái)面可使用10％的次氯酸鈉（漂白劑）清洗；有些物品比如放置擴(kuò)增反應(yīng)管的盤必須從污染區(qū)轉(zhuǎn)回到清潔區(qū)時(shí)，在轉(zhuǎn)回之前，應(yīng)將其置于2％~10％的次氯酸鈉溶液中過夜，并充分沖洗。紫外照射：實(shí)驗(yàn)臺(tái)面、儀器設(shè)備、實(shí)驗(yàn)室空間UNG臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控實(shí)驗(yàn)室的嚴(yán)格分區(qū)及工作程序的嚴(yán)格遵臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控PCR儀、離心機(jī)、加樣器、恒溫設(shè)備等應(yīng)建立技術(shù)檔案，并定期維護(hù);PCR儀、加樣器、恒溫設(shè)備應(yīng)定期進(jìn)行校準(zhǔn)臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控核酸提取或標(biāo)本處理方法的抗干擾能力（能否有效地去掉PCR抑制物）測(cè)定下限(Detectionlimit)（定性測(cè)定）測(cè)定準(zhǔn)確性和線性范圍批內(nèi)變異和批間變異試劑批間的一致性有否污染其他：外包裝、試劑的完整性、有效期、說明書等臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控核酸提取或標(biāo)本處理方法的抗干擾能力臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控按照試劑盒說明書操作即可嗎?操作中影響測(cè)定結(jié)果的關(guān)鍵環(huán)節(jié)寫出具有可操作性的SOP臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控培訓(xùn)所涉及的范圍:儀器設(shè)備使用、維護(hù)和校準(zhǔn)；試劑、方法原理；質(zhì)量管理體系；相關(guān)法律法規(guī)、相關(guān)領(lǐng)域的新技術(shù)、新理念和新進(jìn)展；實(shí)驗(yàn)操作技能等。如何培訓(xùn)：講座、討論、自學(xué)和參加培訓(xùn)班等。培訓(xùn)的評(píng)估：書面考試、實(shí)驗(yàn)考核、討論心得、論文、綜述等。臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控培訓(xùn)所涉及的范圍:儀器設(shè)備使用、維臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控質(zhì)控物濃度的選擇每次（批）測(cè)定質(zhì)控物的數(shù)量及放置質(zhì)控規(guī)則Levey-Jennings質(zhì)控圖方法“即刻法”質(zhì)控方法“假陽性”的統(tǒng)計(jì)質(zhì)控方法臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控質(zhì)控物濃度的選擇臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控定量測(cè)定：測(cè)定線性范圍內(nèi)的高、中、低三種濃度定性測(cè)定：接近方法測(cè)定下限的濃度陰性質(zhì)控物臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控定量測(cè)定：測(cè)定線性范圍內(nèi)的高、中、臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控標(biāo)本數(shù)量如小于30，弱陽性和陰性質(zhì)控各1份，標(biāo)本數(shù)量增加，質(zhì)控物數(shù)量相應(yīng)按比例增加均勻分散于臨床標(biāo)本中，與臨床標(biāo)本一同處理（核酸提?。U(kuò)增時(shí)的排列順序，可排于標(biāo)準(zhǔn)品或校準(zhǔn)品之后，臨床樣本之前。但在擴(kuò)增儀中的位置，不應(yīng)永久性的固定的在一個(gè)孔，而應(yīng)在每次擴(kuò)增檢測(cè)時(shí)，進(jìn)行相應(yīng)的順延，以使在一定的時(shí)間內(nèi)，可以盡可能的監(jiān)測(cè)每一個(gè)孔的擴(kuò)增有效性。臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控標(biāo)本數(shù)量如小于30，弱陽性和陰性質(zhì)臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控陰性原血清樣本實(shí)驗(yàn)過程中帶入的空管僅含擴(kuò)增反應(yīng)混合液的管臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控陰性原血清樣本臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控監(jiān)測(cè)實(shí)驗(yàn)室的以前擴(kuò)增產(chǎn)物的“污染”由實(shí)驗(yàn)操作所致的標(biāo)本間的交叉污染。具體地說，如強(qiáng)陽性標(biāo)本氣溶膠經(jīng)加樣器所致的污染、強(qiáng)陽性標(biāo)本經(jīng)操作者的手所致的污染、使用翻蓋離心管核酸提取時(shí)在較高溫孵育時(shí)蓋子崩開等擴(kuò)增反應(yīng)試劑的污染。

臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控監(jiān)測(cè)實(shí)驗(yàn)室的以前擴(kuò)增產(chǎn)物的“污染”臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控監(jiān)測(cè)核酸提取過程中的實(shí)驗(yàn)室“污染”的存在（在整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程中，開口放置于核酸提取的操作臺(tái)面區(qū)域內(nèi)，最后以水為基質(zhì)，進(jìn)行擴(kuò)增

）臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控監(jiān)測(cè)核酸提取過程中的實(shí)驗(yàn)室“污染”臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控監(jiān)測(cè)試劑的“污染”臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控監(jiān)測(cè)試劑的“污染”臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控質(zhì)控規(guī)則的表達(dá)方式質(zhì)控規(guī)則的功能常用質(zhì)控規(guī)則的符號(hào)及定義

臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控質(zhì)控規(guī)則的表達(dá)方式臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控通常質(zhì)控規(guī)則以符號(hào)AL來表示，其中A為質(zhì)控測(cè)定中超出質(zhì)量控制限的測(cè)定值的個(gè)數(shù)，L為控制限，通常用均值或均值±1～3SD來表示。當(dāng)質(zhì)控測(cè)定值超出控制限L時(shí)，即可將該批測(cè)定判為失控。常用的13S質(zhì)控規(guī)則，其中1為原式中的A，3s為原式中的L，表示均值±3s，其確切的含義為：在質(zhì)控測(cè)定值中，如果有一個(gè)測(cè)定值超出均值±3s范圍，即可將該批測(cè)定判為失控。臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控通常質(zhì)控規(guī)則以符號(hào)AL來表示，其中臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控簡(jiǎn)單地說就是用于判斷測(cè)定批的失控還是在控。臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控簡(jiǎn)單地說就是用于判斷測(cè)定批的失控還臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控符號(hào)

定義12S

一個(gè)質(zhì)控測(cè)定值超出±2s控制限。13S

一個(gè)質(zhì)控測(cè)定值超出±3s控制限。22S

兩個(gè)連續(xù)的質(zhì)控測(cè)定值同時(shí)超出+2s或－2s控制限。R4S

同一批測(cè)定中，兩個(gè)不同濃度質(zhì)控物的測(cè)定值之間的差值超出4s控制限。41S

四個(gè)連續(xù)的質(zhì)控測(cè)定值同時(shí)超出+1s或－1s控制限。7T

七個(gè)連續(xù)的質(zhì)控測(cè)定值呈現(xiàn)一個(gè)向上或向下的趨勢(shì)變化。10X

十個(gè)連續(xù)的質(zhì)控測(cè)定值同時(shí)處于均值（）的同一側(cè)。臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控符號(hào)臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控也稱Shewhart質(zhì)控圖，是由美國的Shewhart于1924年首先提出，并用于工業(yè)產(chǎn)品的質(zhì)量控制。二十世紀(jì)五十年代初，Levey-Jennings將其引入臨床檢驗(yàn)的質(zhì)量控制。經(jīng)Henry和Segalove的改良，即為目前常用的Levey-Jennings質(zhì)控圖。臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控也稱Shewhart質(zhì)控圖，是由美臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控穩(wěn)定條件下，在20個(gè)IQC結(jié)果中不應(yīng)有多于1個(gè)結(jié)果超過2SD（95.5%可信限）限度；在1000個(gè)測(cè)定結(jié)果中超過3SD（99.7%可信限）的結(jié)果不多于3個(gè)。如以±3s為失控限，假失控的概率為0.3%。臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控穩(wěn)定條件下，在20個(gè)IQC結(jié)果中不臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控“即刻法”質(zhì)控方法的實(shí)質(zhì)是一種統(tǒng)計(jì)學(xué)方法，即Grubs異常值取舍法；只要有3個(gè)以上的數(shù)據(jù)即可決定是否有異常值的存在。臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控“即刻法”質(zhì)控方法的實(shí)質(zhì)是一種統(tǒng)計(jì)臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控基于日常檢驗(yàn)的陽性率比值(呈正態(tài)分布)直接概率計(jì)算方法（不呈正態(tài)分布）臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控基于日常檢驗(yàn)的陽性率比值(呈正態(tài)分臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控半Levey-Jennings質(zhì)控圖法臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控半Levey-Jennings質(zhì)控臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控當(dāng)陰性質(zhì)控樣本為陽性時(shí),不管陽性率測(cè)定比值為何，均為失控，所有陽性標(biāo)本須重新測(cè)定，并增加一倍陰性質(zhì)控樣本。如果陰性質(zhì)控樣本為陰性，某次測(cè)定陽性比值超出+3SD,則為失控,為1+3S規(guī)則。本次結(jié)果陰性結(jié)果根據(jù)陽性質(zhì)控樣本的情況,決定是否可以發(fā)出,所有陽性樣本結(jié)果不能發(fā)出，需查找出現(xiàn)陽性率增高的原因，并在增加一倍陰性質(zhì)控樣本的情況下重新檢測(cè)。臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控當(dāng)陰性質(zhì)控樣本為陽性時(shí),不管陽性率臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控曲線向上漂移：提示出現(xiàn)污染，污染可能是由于某一天操作上的失誤導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)室被污染如標(biāo)本泄漏，產(chǎn)物泄漏，試劑被污染等向上的趨勢(shì)性變化：可能存在累積性的產(chǎn)物污染，實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增產(chǎn)物逐漸累積，從而使病人結(jié)果的陽性率逐漸增高。此時(shí)實(shí)驗(yàn)室需要進(jìn)行徹底清潔。臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控曲線向上漂移：提示出現(xiàn)污染，污染可臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控按統(tǒng)計(jì)學(xué)規(guī)律，一個(gè)事件發(fā)生的概率小于5%被稱為小概率事件，即發(fā)生的可能性很小。當(dāng)一個(gè)小概率事件發(fā)生時(shí)，則可能有誤差存在，有必要對(duì)其發(fā)生的原因進(jìn)行分析。對(duì)每天的日常病人結(jié)果中陽性率出現(xiàn)的概率進(jìn)行計(jì)算，如果這種結(jié)果出現(xiàn)的概率小于5%時(shí)，則可判為失控。臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控按統(tǒng)計(jì)學(xué)規(guī)律，一個(gè)事件發(fā)生的概率小臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控在一個(gè)實(shí)驗(yàn)室中某檢測(cè)項(xiàng)目結(jié)果的陽性率為p,計(jì)算在n個(gè)血液樣本中有k個(gè)陽性結(jié)果的概率。根據(jù)二項(xiàng)式分布的概率計(jì)算公式如下：

P(X=k)=n!/[k!(n-k)!]pk(1-p)n-k(1)

其中n為當(dāng)次實(shí)驗(yàn)檢測(cè)標(biāo)本數(shù)，k為陽性個(gè)數(shù)，p為陽性率。P(X=k)5%為失控。此時(shí)，陰性標(biāo)本可以發(fā)出報(bào)告，所有陽性標(biāo)本在查清原因后重做。臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控在一個(gè)實(shí)驗(yàn)室中某檢測(cè)項(xiàng)目結(jié)果的陽性臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控如果一個(gè)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)HBVDNA，平常病人結(jié)果的陽性率為10%，即p=0.1,在某一次檢測(cè)25個(gè)樣本出現(xiàn)6個(gè)陽性結(jié)果，19個(gè)陰性結(jié)果，則檢測(cè)過程中是存在污染的可能性可通過下述方法計(jì)算。即計(jì)算在25個(gè)樣本中出現(xiàn)6個(gè)或6個(gè)以上陽性結(jié)果的概率，此時(shí)的概率為1-（獲得0個(gè)或1個(gè)或2個(gè)或3個(gè)或4個(gè)或多5個(gè)陽性結(jié)果的概率）即：1-[P(0)+P(1)+P(2)+P(3)+P(4)]=1-[(1-0.1)25+25(1-0.1)240.1+300(1-0.1)230.12+2300(1-0.1)220.13+12650(1-0.1)210.14+53130(1-0.1)200.15]=0.0334則在這個(gè)實(shí)驗(yàn)室一次檢測(cè)25個(gè)標(biāo)本獲得6個(gè)或6個(gè)以上陽性結(jié)果的概率為3.34%，小于5%，屬于小概率事件，即發(fā)生的可能性很小，可能有污染所致假陽性結(jié)果的可能。臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控如果一個(gè)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)HBVDNA，臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控在血液篩查檢測(cè)中，許多實(shí)驗(yàn)室或檢測(cè)項(xiàng)目如HCVRNA、CT、結(jié)核桿菌、淋球菌的陽性結(jié)果率均較低，這時(shí)雖然可以使用公式（1）計(jì)算概率，但如果標(biāo)本量很大，使用泊松分布來估計(jì)二項(xiàng)式分布是一種更為簡(jiǎn)便的方法。。根據(jù)泊松分布，可使用下式計(jì)算概率：

P(X=k)=(np)ke-np/k!(2)

P(X=k)5%為失控。此時(shí)，陰性標(biāo)本可以發(fā)出報(bào)告，所有陽性標(biāo)本在查清原因后重做。臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控在血液篩查檢測(cè)中，許多實(shí)驗(yàn)室或檢測(cè)臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控一個(gè)實(shí)驗(yàn)室中，某項(xiàng)目每次檢測(cè)結(jié)果的陽性率約為2%，則在100個(gè)樣本中出現(xiàn)8個(gè)陽性結(jié)果的概率。根據(jù)泊松分布，可使用公式（2）計(jì)算概率，此時(shí)n=100,p=0.02,k=8,np=2代入公式（2）計(jì)算得

P(X=10)=28e-2/8!=0.0009。臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控一個(gè)實(shí)驗(yàn)室中，某項(xiàng)目每次檢測(cè)結(jié)果的臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控如果所有陽性結(jié)果的出現(xiàn)是連續(xù)性的，則可能存在標(biāo)本間的交叉污染，即陽性樣本污染了它鄰近的陰性樣本，這種情況的概率計(jì)算公式如下：

P=(n-r+1)/[n!/r!(n-r)!]（3）其中n為當(dāng)次實(shí)驗(yàn)檢測(cè)標(biāo)本數(shù)，r為連續(xù)出現(xiàn)陽性的個(gè)數(shù)。當(dāng)某次實(shí)際測(cè)定標(biāo)本連續(xù)陽性的概率大于所計(jì)算的概率，則判為失控。陰性標(biāo)本結(jié)果可以發(fā)出，陽性標(biāo)本要考慮標(biāo)本間交叉污染的問題。臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控如果所有陽性結(jié)果的出現(xiàn)是連續(xù)性的，臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控如在一次檢測(cè)100個(gè)標(biāo)本的HBVDNA檢測(cè)中，所有兩個(gè)陽性結(jié)果連續(xù)出現(xiàn)的概率為：

P=(100-2+1)/[100!/2!(100-2)!]=99/4950=0.02概率為2.0%。

因此，如在100個(gè)標(biāo)本中，連續(xù)出現(xiàn)兩個(gè)為陽性次數(shù)有3次，即概率為3.0