分析方法學(xué)驗(yàn)證及確認(rèn)管理規(guī)程

分析方法學(xué)驗(yàn)證及確認(rèn)管理規(guī)程分析方法學(xué)驗(yàn)證及確認(rèn)管理規(guī)程分析方法學(xué)驗(yàn)證及確認(rèn)管理規(guī)程資料僅供參考文件編號(hào)：2022年4月分析方法學(xué)驗(yàn)證及確認(rèn)管理規(guī)程版本號(hào)：A修改號(hào)：1頁次：1.0審核：批準(zhǔn):發(fā)布日期：質(zhì)量管理標(biāo)準(zhǔn)部門：質(zhì)量部標(biāo)題：分析方法學(xué)驗(yàn)證及確認(rèn)管理規(guī)程起草人：日期：審核人：日期：批準(zhǔn)人：日期：編號(hào)：JSMS-QC-020-00前版編號(hào)：新增頁數(shù)：9執(zhí)行日期：2014年8月1日下次審核日期：2016年8月1日頒發(fā)部門：質(zhì)量部目的:制定分析方法學(xué)驗(yàn)證及確認(rèn)的管理規(guī)程。2.范圍:適用于分析方法學(xué)的驗(yàn)證及確認(rèn)。3.責(zé)任:QC檢測(cè)員，QC主管。4.內(nèi)容：方法驗(yàn)證方法驗(yàn)證就是根據(jù)檢驗(yàn)項(xiàng)米的要求，預(yù)先設(shè)置一定的驗(yàn)證內(nèi)容和驗(yàn)證標(biāo)準(zhǔn)要求，并通過設(shè)計(jì)合理的試驗(yàn)來驗(yàn)證所采用的分析方法是都符合檢驗(yàn)項(xiàng)目的要求。方法驗(yàn)證的一般原則通常情況下，分析方法需進(jìn)行方法驗(yàn)證。對(duì)于僅需按照實(shí)驗(yàn)室日常測(cè)試操作步驟即可測(cè)定的檢驗(yàn)項(xiàng)目不需要進(jìn)行驗(yàn)證，如外觀、崩解時(shí)限、密度、重量、pH值、灰分、裝量等。方法學(xué)驗(yàn)證的內(nèi)容應(yīng)根據(jù)檢驗(yàn)項(xiàng)目的要求，結(jié)合所采用分析方法的特點(diǎn)確定。同一分析方法用于不同的檢驗(yàn)項(xiàng)目會(huì)有不同的驗(yàn)證要求。需要驗(yàn)證的檢驗(yàn)項(xiàng)目檢驗(yàn)項(xiàng)目是為控制藥品質(zhì)量，保證藥品安全有效而設(shè)定的測(cè)試項(xiàng)目，根據(jù)檢驗(yàn)項(xiàng)目的設(shè)定目的和驗(yàn)證內(nèi)容的不同要求，需驗(yàn)證的檢驗(yàn)項(xiàng)目分為四類：1.鑒別試驗(yàn)；2.雜質(zhì)的限度檢查；3.雜質(zhì)的定量測(cè)定；4.含量測(cè)定，包含原料藥或制劑中有效成分的含量，制劑中其他成分（如防腐劑等）的含量，溶出度與釋放度等檢查中的溶出量。以及含量均勻度。除此之外還有一些物理項(xiàng)目的檢測(cè)如粒徑分布、旋光度、熔點(diǎn)和硬度，其要求與其他檢驗(yàn)項(xiàng)目有所不同，通常其分析方法驗(yàn)證應(yīng)有不同的要求。鑒別的目的在于判定被分析物是目標(biāo)化合物，而非其他物質(zhì)。用于鑒別的分析方法要求具有較強(qiáng)的專屬性和耐用性。雜質(zhì)檢查主要用于控制主成分意外的雜質(zhì)，如無機(jī)雜質(zhì)、有機(jī)雜質(zhì)等。雜質(zhì)檢查分為限度檢查和定量測(cè)定這兩部分。用于限度檢查的分析方法驗(yàn)證側(cè)重專屬性、檢測(cè)限和耐用性。用于定量測(cè)定的分析方法驗(yàn)證強(qiáng)調(diào)專屬性、準(zhǔn)確度、精確度、線性、范圍、定量限和耐用性。含量測(cè)定對(duì)準(zhǔn)確度要求較高，因此所采用的分析方法要求具有一定的專屬性、準(zhǔn)確度和線性要求?！吨袊?guó)藥典》2010年版中規(guī)定了不同的檢驗(yàn)項(xiàng)目需要驗(yàn)證不同的內(nèi)容，詳見表一：表一驗(yàn)證項(xiàng)目和驗(yàn)證內(nèi)容驗(yàn)證內(nèi)容檢驗(yàn)項(xiàng)目鑒別雜質(zhì)測(cè)定含量測(cè)定定量限度準(zhǔn)確度否是否是精密度重復(fù)性否是否是中間精密度否是*否是*專屬性**是是是是檢測(cè)限否是***是否定量限否是否否線性否是否是范圍否是否是耐用性是是是是備注：1.*：已有重現(xiàn)性驗(yàn)證，不需驗(yàn)證中間精密度；2.**：如一種方法不夠?qū)?，可由其他分析方法予以補(bǔ)充；3.***：視具體情況予以驗(yàn)證；4.“是”代表該項(xiàng)內(nèi)容需要驗(yàn)證，“否”代表該項(xiàng)內(nèi)容不需要驗(yàn)證。方法驗(yàn)證內(nèi)容準(zhǔn)確度準(zhǔn)確度系指用該方法測(cè)定的結(jié)果與真實(shí)值或參考值接近的程度。一般用回收率表示。準(zhǔn)確度應(yīng)在規(guī)定的范圍內(nèi)測(cè)試。（1）驗(yàn)證方法準(zhǔn)確度應(yīng)在規(guī)定的范圍內(nèi)建立，至少用9個(gè)測(cè)定結(jié)果進(jìn)行評(píng)價(jià)。例如，設(shè)計(jì)3個(gè)不同濃度，每個(gè)濃度各分別制備3份供試品溶液，進(jìn)行測(cè)定。準(zhǔn)確度是定量測(cè)定的必要條件，因此含量測(cè)定、雜質(zhì)定量測(cè)定均需驗(yàn)證準(zhǔn)確度。原料藥與制劑所用的具體方法見表二。表二準(zhǔn)確度驗(yàn)證方法檢驗(yàn)項(xiàng)目原料藥制劑備注含量測(cè)定方法1：用已知純度的對(duì)照品或供試品進(jìn)行測(cè)定方法2：用本法所得結(jié)果與已知準(zhǔn)確的另一方法測(cè)定結(jié)果進(jìn)行比較方法1：用含已知被測(cè)物的各組分混合物進(jìn)行測(cè)定方法：如不能得到制劑的全部組分，可向制劑中加入已知量的被測(cè)物進(jìn)行測(cè)定方法3：用本法所得的結(jié)果與已知準(zhǔn)確度的另一方法測(cè)定的結(jié)果進(jìn)行比較如該分析方法已經(jīng)測(cè)試并求出精密度、線性和專屬性，在準(zhǔn)確度也可推薦的情況下，準(zhǔn)確度可不必再做雜質(zhì)的定量測(cè)定方法1：可向原料藥或制劑中加入已知量雜質(zhì)進(jìn)行測(cè)定方法2：如果不能得到雜質(zhì)或降解產(chǎn)物，可用本法測(cè)定結(jié)果與另一成熟的方法進(jìn)行比較，如藥典方法或經(jīng)過驗(yàn)證的方法在不能測(cè)得雜質(zhì)降解產(chǎn)物的響應(yīng)因子或不能測(cè)得對(duì)應(yīng)原料藥的響應(yīng)因子。應(yīng)明確單個(gè)雜質(zhì)的雜質(zhì)總量詳單與主成分的重量比（%）或面積比（%）例如：測(cè)定含量的準(zhǔn)確度，按標(biāo)示的80%，100%和120%配制三個(gè)濃度的溶液，每個(gè)濃度各分別制備3份供試品溶液，進(jìn)行測(cè)定。根據(jù)測(cè)定結(jié)果與配制濃度計(jì)算出平均回收率以及相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差。（2）數(shù)據(jù)要求需報(bào)告已知加入量的回收率（%），或測(cè)定結(jié)果平均值與真實(shí)值之差及相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差或可信限。精密度精密度系指在規(guī)定的測(cè)試條件下，同一均勻供試品，經(jīng)多次取樣測(cè)定所得結(jié)果之間的接近程度。精密度一般用偏差、標(biāo)準(zhǔn)偏差或相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差表示。精密度與準(zhǔn)確度不同。精密度體現(xiàn)了多次重復(fù)測(cè)定同一被分析物時(shí)各測(cè)定值之間的接近程度，但它不能表達(dá)與已建立的真實(shí)值或者參考值之間的符合程度，后者由準(zhǔn)確度來測(cè)定。通過一系列的測(cè)定值，可以得到良好的精密度，但是由于所用分析方法存在的偏差，所得的平均值不一定與真實(shí)值或參考值相符，在這種狀況下，需要修改方法以消除偏差。（1）驗(yàn)證方法精密度可從重復(fù)性、中間精密度、重現(xiàn)性三個(gè)層次考察。詳見表三。表三精密度驗(yàn)證方法名稱定義驗(yàn)證方法重復(fù)性在相同條件下，由同一個(gè)分析人員測(cè)定所得結(jié)果的精密度成為重復(fù)性在規(guī)定范圍內(nèi)，至少用9個(gè)測(cè)定結(jié)果進(jìn)行評(píng)價(jià)。例如，設(shè)計(jì)3個(gè)不同濃度，每個(gè)濃度各分別制備3份供試品溶液或?qū)⑾喈?dāng)于100%濃度水平的供試品溶液，用至少測(cè)定6次的結(jié)果進(jìn)行評(píng)價(jià)中間精密度在同一實(shí)驗(yàn)室，不同時(shí)間由不同分析人員用不同設(shè)備測(cè)定結(jié)果之間的精密度，成為中間精密度為考察隨機(jī)變動(dòng)因素對(duì)精密度的影響，應(yīng)設(shè)計(jì)方案進(jìn)行中間精密度試驗(yàn)。變動(dòng)因素為不同日期、不同分析人員，不同設(shè)備重現(xiàn)性不同實(shí)驗(yàn)室之間由不同分析人員測(cè)定結(jié)果之間的精密度，成為重現(xiàn)性法定標(biāo)準(zhǔn)采用的分析方法或在不同實(shí)驗(yàn)室之間進(jìn)行方法轉(zhuǎn)移時(shí)，應(yīng)進(jìn)行重現(xiàn)性試驗(yàn)。例如建立藥典分析方法時(shí)，通過協(xié)同檢驗(yàn)得出重現(xiàn)性結(jié)果。協(xié)同檢驗(yàn)的目的、過程和重現(xiàn)性結(jié)果均應(yīng)記載在起草說明中，應(yīng)注意重現(xiàn)性試驗(yàn)用的樣品本身的質(zhì)量均勻性和貯存運(yùn)輸中的環(huán)境影響因素，以免影響重現(xiàn)性結(jié)果（2）數(shù)據(jù)要求 均應(yīng)報(bào)告標(biāo)準(zhǔn)偏差、相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差和可信限。專屬性專屬性系指在其他成分（如：雜質(zhì)、降解產(chǎn)物、輔料等）可能存在下，采用的方法能正確測(cè)定出被測(cè)物的特性。通常，鑒別反應(yīng)、雜質(zhì)檢查、含量測(cè)定均應(yīng)考察其專屬性。如一種方法不夠?qū)?，可由其他分析方法予以補(bǔ)充。例如檢測(cè)具有旋光特性的活性物質(zhì)，除采用非手性薄層色譜法或高效液相色譜法外，還應(yīng)增加旋光度的檢查。驗(yàn)證方法見表四。表四專屬性驗(yàn)證方法檢驗(yàn)項(xiàng)目概述驗(yàn)證方法備注鑒別試驗(yàn)鑒別試驗(yàn)用于確認(rèn)被測(cè)成分符合其特征專屬性要求證明其能與可能共存的物質(zhì)或結(jié)構(gòu)相似化合物區(qū)分含被測(cè)成分的供試品呈正反應(yīng)，而不含被測(cè)成分的供試品以及結(jié)構(gòu)相似或組分中對(duì)與藥品，輔料不得干擾其有效成分的鑒別雜質(zhì)測(cè)定（包括限度檢查和定量測(cè)定）作為純度檢查，所采用的分析方法應(yīng)確?？蓹z出被分許物中雜質(zhì)的含量測(cè)定，如有關(guān)物質(zhì)、重金屬、有機(jī)溶劑等。因此雜質(zhì)檢查要求分析方法有一定的專屬性方法1：在雜質(zhì)可獲得的情況下，可向試驗(yàn)中加入一定量的雜質(zhì)，考察雜質(zhì)與共存物質(zhì)能得到分離和檢出，并具有適當(dāng)?shù)臏?zhǔn)確度與精密度方法2：在雜質(zhì)或降解產(chǎn)物不恩能獲得的情況下，專屬性可通過測(cè)定含有雜質(zhì)或降解產(chǎn)物的試樣，與另一個(gè)已驗(yàn)證的方法或藥典方法比較結(jié)果?；?qū)υ嚇佑脧?qiáng)光照射、高溫、高濕、酸（堿）水解或氧化的方法進(jìn)行加速破壞，以研究可能的降解產(chǎn)物和降解途徑，并比較破壞前后檢出的雜質(zhì)個(gè)數(shù)。必要時(shí)可采用二極管陣列檢測(cè)和質(zhì)譜檢測(cè)，進(jìn)行峰純度檢查色譜法和其他分離方法，應(yīng)附代表性圖譜，以說明方法的專屬性，并應(yīng)標(biāo)明諸成分在途中的位置，色譜法的分離度應(yīng)符合要求含量測(cè)定含量測(cè)定的目的是得到試樣中被分析物的含量測(cè)定或效價(jià)準(zhǔn)確結(jié)果方法1：在雜質(zhì)可獲得的情況下，可向試樣中加入雜質(zhì)或輔料，考察測(cè)定結(jié)果是否受干擾，并可與未知雜質(zhì)和輔料的試樣比較測(cè)定結(jié)果。方法2：在雜質(zhì)或降解產(chǎn)物不能獲得的情況下，專屬性可通過測(cè)定含有雜質(zhì)或降解產(chǎn)物的試樣，與另一個(gè)已驗(yàn)證的方法或藥典方法比較結(jié)果?；?qū)υ嚇佑脧?qiáng)光照射、高溫、高濕、酸（堿）水解或氧化的方法進(jìn)行加速破壞，用兩種方法進(jìn)行含量測(cè)定，比較測(cè)定結(jié)果。必要時(shí)可采用二極管陣列檢測(cè)和質(zhì)譜檢測(cè)進(jìn)行峰純度檢查，證明含量測(cè)定成分的色譜峰中不包含其他成分檢測(cè)限檢測(cè)限（LOD或DL）系指試驗(yàn)中的被測(cè)物能夠被檢測(cè)出的最低量。藥品的雜質(zhì)測(cè)定，應(yīng)通過測(cè)試確定方法的檢測(cè)限。（1）驗(yàn)證方法（表五）表五雜質(zhì)測(cè)定檢測(cè)限驗(yàn)證方法檢測(cè)項(xiàng)目驗(yàn)證方法雜質(zhì)測(cè)定方法1：非儀器分析目視法用已知濃度的被測(cè)物，試驗(yàn)出能被可靠地檢測(cè)出的最低濃度或量方法2：信噪比法用于能顯示基線噪音的分析方法，即把已知低濃度試樣測(cè)出的信號(hào)與空白樣品測(cè)出的信號(hào)進(jìn)行比較，計(jì)算出能被可靠地檢測(cè)出的最低濃度或量。一般以信噪比為3:1或2:1時(shí)相應(yīng)濃度或注入儀器的量確定檢測(cè)限（2）數(shù)據(jù)要求應(yīng)附測(cè)試圖譜，說明測(cè)試過程和檢測(cè)限結(jié)果。定量限定量限（LOQ或QL）系指試樣中的被測(cè)物能夠被定量測(cè)定的最低量，其被測(cè)結(jié)果應(yīng)具有一定的準(zhǔn)確度和精密度。雜質(zhì)和降解產(chǎn)物用定量測(cè)定方法研究時(shí)，應(yīng)確定方法的定量限。（1）驗(yàn)證方法（表六）表六雜質(zhì)定量測(cè)定驗(yàn)證方法檢驗(yàn)項(xiàng)目驗(yàn)證方法雜質(zhì)定量測(cè)定信噪比法：一般以信噪比為10:1時(shí)相應(yīng)濃度或注入儀器的量確定定量限線性線性是指在設(shè)計(jì)的測(cè)定范圍內(nèi)，檢測(cè)結(jié)果與試樣中被測(cè)物的濃度直接呈正比關(guān)系的程度。線性是定量測(cè)定的基礎(chǔ)，涉及定量測(cè)定的項(xiàng)目，如雜質(zhì)定量測(cè)定和含量測(cè)定均需驗(yàn)證線性。（1）驗(yàn)證方法應(yīng)在規(guī)定的測(cè)定范圍內(nèi)測(cè)定線性關(guān)系?？捎靡毁A備液經(jīng)精密稀釋，或分別精密稱樣，制備一系列供試樣品的方法進(jìn)行測(cè)定，至少制備5個(gè)濃度的供試樣品每個(gè)濃度各一份，每份供試樣品測(cè)定3次，以測(cè)得的響應(yīng)信號(hào)作為被測(cè)物濃度的函數(shù)作圖，觀察是否呈線性，用最小二乘法進(jìn)行線性回歸。必要時(shí)，響應(yīng)信號(hào)可經(jīng)數(shù)字轉(zhuǎn)換，再進(jìn)行線性回歸計(jì)算。（2）數(shù)據(jù)要求應(yīng)列出回歸方程、相關(guān)系數(shù)和線形圖。范圍范圍系指能夠達(dá)到一定的精密度、準(zhǔn)確度和線性，測(cè)試方法使用的高低限濃度或量的區(qū)間。范圍應(yīng)根據(jù)分析方法的具體應(yīng)用和線性、準(zhǔn)確度、精密度結(jié)果和要求確定，要求見線性內(nèi)容。耐用性耐用性系指測(cè)定條件有小的變動(dòng)時(shí)，測(cè)定結(jié)果不收影響的承受程度，為使方法可用于常規(guī)檢驗(yàn)提供依據(jù)。方法確認(rèn)適用范圍適用于：物料和產(chǎn)品中不需要進(jìn)行驗(yàn)證的檢驗(yàn)方法以及藥典方法和其他已驗(yàn)證的法定標(biāo)準(zhǔn)。通過方法確認(rèn)來證明方法在本實(shí)驗(yàn)室條件下的適用性。不適用于：實(shí)驗(yàn)室日常測(cè)試操作步驟不需要進(jìn)行方法確認(rèn)，例如（包括但不限于）干燥失重、熾灼殘?jiān)?。各種濕法化學(xué)步驟如酸值和檢定的儀器方法如pH計(jì)，除非有特殊要求。確認(rèn)方法對(duì)于方法確認(rèn)，通常采用如下兩種方式：方式一：由亮膜檢驗(yàn)人員分別獨(dú)立對(duì)同一批產(chǎn)品進(jìn)行檢驗(yàn)（如可能，使用不同儀器），比較兩人的檢測(cè)結(jié)果來證明方法在本實(shí)驗(yàn)室（人員，分析儀器、試劑等）的適用性。方式二：根據(jù)驗(yàn)證目的和評(píng)估結(jié)果選擇相關(guān)項(xiàng)目進(jìn)行確認(rèn)，如表七（僅供參考）。表七檢驗(yàn)項(xiàng)目確認(rèn)內(nèi)容示例檢驗(yàn)項(xiàng)目準(zhǔn)確度精密度專屬性檢測(cè)限定量限線性范圍耐用性原料藥鑒別（HPLC法）否否可能否否否否否有關(guān)物質(zhì)（HPLC法）否可能是否是否否否含量測(cè)定（HPLC法）否可能可能否否否否否制劑鑒別（HPLC法）否否是否否否否否溶出度可能是是否可能否否否有關(guān)物質(zhì)可能是是否是否否否含量測(cè)定可能是是否否否否否備注：“是”代表該項(xiàng)類容需要確認(rèn)，“否”代表該項(xiàng)內(nèi)容不需要確認(rèn)?！翱赡堋贝碓擁?xiàng)內(nèi)容需根據(jù)實(shí)際情況評(píng)價(jià)確定。方法驗(yàn)證、方法確認(rèn)的管理企業(yè)必須制定方法驗(yàn)證、方法確認(rèn)的操作規(guī)程，應(yīng)涵蓋范圍，方案的起草、審批和批準(zhǔn)，方案的實(shí)施，報(bào)告的起草、審批和批準(zhǔn)，以及文件的管理等方面內(nèi)容。方案的準(zhǔn)備在方法驗(yàn)證、方法確認(rèn)前，必須依據(jù)操作規(guī)程進(jìn)行方案的起草、審批和批準(zhǔn)。對(duì)于方案，有如下要求：詳細(xì)描述被執(zhí)行程序；明確規(guī)定被測(cè)參數(shù)的接