水質(zhì)丙烯酰胺的測定高效液相色譜-質(zhì)譜質(zhì)譜法

《水質(zhì)丙烯酰胺的測定固相萃取-高效液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法》

編制說明（送審稿）《水質(zhì)丙烯酰胺的測定高效液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法》

標(biāo)準(zhǔn)編制組2012年10月TOC\o"1-5"\h\z\o"CurrentDocument"1項目背景 1\o"CurrentDocument"任務(wù)來源 1\o"CurrentDocument"工作過程 12標(biāo)準(zhǔn)制訂的必要性分析 1\o"CurrentDocument"丙烯酰胺的環(huán)境危害 1\o"CurrentDocument"相關(guān)環(huán)保標(biāo)準(zhǔn)和環(huán)保工作的需要 2\o"CurrentDocument"新建標(biāo)準(zhǔn)方法的優(yōu)勢 2\o"CurrentDocument"3國內(nèi)外相關(guān)分析方法實施情況與存在問題 2\o"CurrentDocument"4標(biāo)準(zhǔn)制訂的基本原則和技術(shù)路線 3\o"CurrentDocument"標(biāo)準(zhǔn)制訂的基本原則 3\o"CurrentDocument"標(biāo)準(zhǔn)的適應(yīng)范圍和主要技術(shù)內(nèi)容 3\o"CurrentDocument"標(biāo)準(zhǔn)制訂的技術(shù)路線 3\o"CurrentDocument"5方法研究報告 5\o"CurrentDocument"方法研究的目的 5\o"CurrentDocument"方法原理 5\o"CurrentDocument"試劑和材料 5\o"CurrentDocument"儀器和設(shè)備 6\o"CurrentDocument"樣品 6\o"CurrentDocument"分析步驟 7\o"CurrentDocument"結(jié)果計算與表述 9\o"CurrentDocument"檢出限、精密度和準(zhǔn)確度 10\o"CurrentDocument"質(zhì)量保證和質(zhì)量控制 12\o"CurrentDocument"6方法驗證 12\o"CurrentDocument"方法驗證方案 13\o"CurrentDocument"方法驗證過程 13\o"CurrentDocument"7標(biāo)準(zhǔn)主要技術(shù)內(nèi)容的解釋 13\o"CurrentDocument"8對實施本標(biāo)準(zhǔn)的建議 149質(zhì)量保證和質(zhì)量控制 14\o"CurrentDocument"空白 14\o"CurrentDocument"加標(biāo) 14\o"CurrentDocument"平行樣 14\o"CurrentDocument"校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)點 14\o"CurrentDocument"10參考文獻(xiàn) 14《水質(zhì)丙烯酰胺的測定高效液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法》

編制說明.項目背景任務(wù)來源《水質(zhì)丙烯酰胺的測定高效液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法》標(biāo)準(zhǔn)的制定工作，是按照陜西省質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局陜質(zhì)監(jiān)標(biāo)【2011】第6號文《關(guān)于下達(dá)2011年第一批地方標(biāo)準(zhǔn)修制訂計劃的通知》規(guī)定起草的，由陜西省環(huán)境監(jiān)測中心站負(fù)責(zé)制定，項目計劃編號為25號。工作過程標(biāo)準(zhǔn)制定任務(wù)下達(dá)后，陜西省環(huán)境監(jiān)測中心站立即成立了標(biāo)準(zhǔn)編制組。編制組在查閱國內(nèi)外相關(guān)文獻(xiàn)、標(biāo)準(zhǔn)的基礎(chǔ)上，制定實施方案，進行開題論證。按照方案，進行了方法的條件優(yōu)化實驗，確定方法藍(lán)本，然后在實驗室內(nèi)和實驗室間進行方法的驗證實驗，最后，根據(jù)驗證結(jié)果，完成標(biāo)準(zhǔn)（征求意見稿）的編制。2.標(biāo)準(zhǔn)制訂的必要性分析丙烯酰胺的環(huán)境危害丙烯酰胺，分子式：C3H5NO,分子量為71.08,為白色結(jié)晶固體，無氣味，熔點：84.5℃，飽和蒸汽壓：0.21Kpa（84.5℃）。溶于水、乙醇、乙醚、丙酮等，但不溶于苯。丙烯酰胺是聚丙烯酰胺的單體，聚丙烯酰胺是一種水溶性高分子聚合物，主要應(yīng)用于水的凈化處理方面。據(jù)統(tǒng)計，在發(fā)達(dá)國家水處理應(yīng)用方面，美國占聚丙烯酰胺總用量的36%、西歐占35%、日本占49%；近年來，聚丙烯酰胺在我國水處理方面應(yīng)用也越來越廣泛，雖然聚丙烯酰胺被認(rèn)為是無毒的，但其單體的毒性卻是被肯定的；丙烯酰胺已被國家癌癥中4（IARC）列為W類致癌物，急性毒性實驗證明丙烯酰胺有神經(jīng)毒性、生殖、發(fā)育毒性，動物實驗證明丙烯酰胺可導(dǎo)致遺傳物質(zhì)的改變和癌癥的發(fā)生。在飲用水和地表水中，丙烯酰胺主要來源于使用有丙烯酰胺單體殘留的聚丙烯酰胺絮凝劑。所以水中丙烯酰胺的分析是環(huán)境分析中的一項重要內(nèi)容。相關(guān)環(huán)保標(biāo)準(zhǔn)和環(huán)保工作的需要由于丙烯酰胺對環(huán)境的危害較大，它已被我國列入水中優(yōu)先控制的污染物。我國的《地表水環(huán)境質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)》（GB3838-2002）規(guī)定丙烯酰胺的標(biāo)準(zhǔn)限值為0.0005mg/L。在環(huán)境分析中還沒有建立相關(guān)的國家及地方標(biāo)準(zhǔn)分析方法。因此，建立快速、靈敏的水中丙烯酰胺的監(jiān)測分析方法，對了解水環(huán)境的質(zhì)量，保護水質(zhì)環(huán)境安全，保障公眾飲水安全，對人群健康的影響具有重要的意義。新建標(biāo)準(zhǔn)方法的優(yōu)勢HPLC-MS/MS分析水樣中的丙烯酰胺，其優(yōu)勢是：（1）提高了分析效率。由于取樣量少，大大縮短了分析時間。（2）定性準(zhǔn)確，在不能完全將干擾物質(zhì)分離的情況下仍可以準(zhǔn)確定性定量，掃描方式可以選擇多反應(yīng)監(jiān)測（MRM）；抗干擾能力非常強。（3）檢出限更低，三重四級桿質(zhì)譜具有非常高的靈敏度，因此，檢出限可達(dá)0.008口g/L,而GC方法檢出限為0.15口g/L（取樣量100ml水），HPLC方法檢出限為0.1口g/L（取樣量300mL）。.國內(nèi)外相關(guān)分析方法實施情況與存在問題關(guān)于水中丙烯酰胺的測定，國外多采用氣相色譜法、高效液相色譜法等方法進行測定；如美國EPA8032A用氣相色譜法，前處理采用澳化衍生-液液萃取。EPA8316采用高效液相色譜法，但其主要檢測對象為除水外的其它基質(zhì)，而且方法檢出限高達(dá)10口g/L。國內(nèi)關(guān)于水中丙烯酰胺的測定主要是氣相色譜法，氣相色譜-質(zhì)譜法。《生活飲用水衛(wèi)生規(guī)范》（中華人民共和國衛(wèi)生部2001）中，采用澳化衍生■液液萃取-氣相色譜法測定飲用水中的丙烯酰胺；中華人民共和國出入境檢驗檢疫行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)《食品中丙烯酰胺的測定方法同位素內(nèi)標(biāo)法》（SN/T2096-2008）中使用氣相色譜儀-質(zhì)譜法。前處理采用石墨化碳黑層析柱凈化，凈化液中的丙烯酰胺經(jīng)澳水衍生化后，用同位素標(biāo)記的內(nèi)標(biāo)法，氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀檢測。以上GC和GC-MS測定丙烯酰胺，一般都需要經(jīng)過繁瑣的澳化衍生-液液萃取過程，測定周期長，復(fù)雜的前處理過程也造成方法精密度、準(zhǔn)確度等性能不穩(wěn)定；HPLC方法，定性能力差，檢出限高。.標(biāo)準(zhǔn)制訂的基本原則和技術(shù)路線標(biāo)準(zhǔn)制訂的基本原則（1）方法檢出限和測定范圍滿足《地表水環(huán)境質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)》（GB3838-2002）等相關(guān)環(huán)保標(biāo)準(zhǔn)和環(huán)保工作的要求。（2）方法準(zhǔn)確可靠、滿足各項方法特性指標(biāo)的要求。（3）方法具有普遍適用性，易于推廣使用。（4）標(biāo)準(zhǔn)的格式按照《環(huán)境監(jiān)測分析方法標(biāo)準(zhǔn)制修訂技術(shù)導(dǎo)則》（HJ/T168-2010）、《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)的結(jié)構(gòu)和編寫》（GB/T1.1-2009）的要求制定。標(biāo)準(zhǔn)的適用范圍和主要技術(shù)內(nèi)容（1）本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了測定地表水及飲用水中丙烯酰胺的固相萃取-高效液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法的范圍、方法原理、試劑和材料、儀器和設(shè)備、樣品、分析步驟、結(jié)果計算、準(zhǔn)確度和精密度、質(zhì)量保證和質(zhì)量控制。（2）本標(biāo)準(zhǔn)采用高效液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法，側(cè)重儀器分析條件的建立以及質(zhì)量保證和質(zhì)量控制，同時兼顧便捷、準(zhǔn)確的可操作性。標(biāo)準(zhǔn)制訂的技術(shù)路線本標(biāo)準(zhǔn)的制訂是在查閱國內(nèi)外相關(guān)文獻(xiàn)的基礎(chǔ)上，制定實驗方案，進行實驗室內(nèi)的條件優(yōu)化實驗、驗證試驗后，編制標(biāo)準(zhǔn)的草稿，再通過實驗室間的驗證試驗，完成標(biāo)準(zhǔn)（征求意見稿）的編制。通過在全省進行標(biāo)準(zhǔn)征求意見稿的意見征求、匯總、修訂，完成標(biāo)準(zhǔn)送審稿的編制。陜西省質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局組織專家對標(biāo)準(zhǔn)送審稿進行評審，標(biāo)準(zhǔn)編制組根據(jù)評審意見，進行修改完善，最后形成標(biāo)準(zhǔn)報批稿。技術(shù)路線圖見下圖。標(biāo)準(zhǔn)管理部門下達(dá)制訂計劃成立標(biāo)準(zhǔn)編制組標(biāo)準(zhǔn)編制組進行文獻(xiàn)調(diào)研標(biāo)準(zhǔn)編制組通過初步實驗完善和確定實驗方案開題論證，確定方法驗證技術(shù)路線和疑難問題解決途徑進行實驗室內(nèi)驗證，完善實驗方案標(biāo)準(zhǔn)主編單位按要求選擇驗證實驗室，開展實驗室間驗證工作標(biāo)準(zhǔn)編制組編寫標(biāo)準(zhǔn)征求意見稿及編制說明標(biāo)準(zhǔn)編制組對征求的意見進行匯總，形成送審稿及編制說明送審稿經(jīng)審查合格后，提交報批稿及編制說明報批稿經(jīng)審查合格后標(biāo)準(zhǔn)管理部門進行批準(zhǔn)、編號、發(fā)布.方法研究報告方法研究的目的(1)本標(biāo)準(zhǔn)適用于地表水和飲用水中丙烯酰胺的測定。(2)通過本標(biāo)準(zhǔn)的制訂，使該監(jiān)測方法的檢出限、精密度、準(zhǔn)確度等滿足地表水及飲用水等環(huán)境質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)中對丙烯酰胺的測定要求。我國的《地表水環(huán)境質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)》(GB3838-2002)規(guī)定丙烯酰胺的標(biāo)準(zhǔn)限值為0.0005mg/L。制訂后的標(biāo)準(zhǔn)中，按《環(huán)境監(jiān)測分析方法標(biāo)準(zhǔn)制修訂技術(shù)導(dǎo)則》(HJ168-2010)附錄A要求測定方法檢出限，丙烯酰胺的檢出限為0.008Hg/L,以4倍檢出限作為測定下限，測定下限為0.032ug/L,測定下限可滿足環(huán)境質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)對丙烯酰胺的監(jiān)測要求。方法原理本方法采用Sep-PakAC2-Plus固相萃取小柱對水樣中的痕量丙烯酰胺進行富集，使用甲醇洗脫，洗脫液濃縮至剛干為宜，迅速加1mL超純水定容，過PTFE一次性濾膜后，目標(biāo)物經(jīng)過HPLC分離進入三重四級桿質(zhì)譜檢測器，定性定量分析。試劑和材料除非另有說明，分析時均使用符合國家標(biāo)準(zhǔn)的HPLC-MS專用試劑和高純水。甲醇HPLC級。甲酸HPLC-MS專用。0.45um一次性PTFE微孔濾膜水系。固相萃取小柱SampliQC18ODS500mg/6mL固相萃取小柱；Oasis(R)HLB6cc(150mg)固相萃取小柱；Sep-PakAC2-Plus固相萃取小柱。丙烯酰胺標(biāo)準(zhǔn)溶液，P=1000.0mg/L市售有證丙烯酰胺標(biāo)準(zhǔn)溶液，濃度為P=1000.0mg/L,介質(zhì)為甲醇，在4℃冰箱中保存。丙烯酰胺標(biāo)準(zhǔn)貯備溶液，P=1.0mg/L準(zhǔn)確吸取丙烯酰胺標(biāo)準(zhǔn)溶液（5.3.5）100HL于100mL容量瓶中，用純水稀釋至標(biāo)線，在4℃冰箱中保存。儀器和設(shè)備高效液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜聯(lián)用儀（三重四極桿質(zhì)譜）。色譜柱的選用。選用反相ODS柱即十八烷基硅烷化學(xué)鍵合相色譜柱，規(guī)格150mm（柱長）義2.1mm（內(nèi)徑），5.0Hm（粒徑）。樣品樣品采集及保存樣品應(yīng)采集在棕色玻璃容器中。采樣前用待測水樣將樣品瓶清洗2?3次。采樣后，水樣應(yīng)充滿樣品瓶并加蓋密封，置于4℃冰箱內(nèi)避光保存。樣品制備關(guān)于取樣量的選擇由于HPLC-MS/MS具有極低的檢出限，因此取用10mL水樣進行固相萃取等前處理步驟，即滿足定性定量要求。固相萃取條件的優(yōu)化飲用水及地表水中的丙烯酰胺采用直接進樣法就能滿足分析需要，但實驗發(fā)現(xiàn)，大部分地表水及飲用水對丙烯酰胺具有基質(zhì)抑制效應(yīng)，加標(biāo)回收率僅能達(dá)到50%左右；而且隨著加標(biāo)濃度增大抑制效應(yīng)越明顯；因此，如果不考慮基質(zhì)抑制作用，就會大大低估水中丙烯酰胺的濃度，故需要考慮固相萃取法對樣品進行前處理。固相萃取小柱及洗脫溶液選擇A.固相萃取小柱的選擇本實驗采用SampliQC18ODS500mg/6mL,Oasis（R）HLB6cc（150mg）,Sep-PakAC2-Plus三種固相萃取小柱（5.3.5）,先用10mL甲醇（5.3.2）,再用10mL水對其活化，留5mL水浸泡固相萃取小柱15min后上樣過柱富集，小柱吹干后，用10mL甲醇（5.3.2）洗脫，洗脫液氮吹至干，力D1mL超純水定容，過0.45um一次性微孔濾膜（5.3.4）過濾，上機測定。從萃取效果來看，用Sep-PakAC2-Plus柱萃取樣品加標(biāo)回收率能達(dá)到70%以上，而其它兩種都低于5%。因此本實驗選擇Sep-PakAC2-Plus萃取小柱，見表1。表1不同萃取小柱對加標(biāo)水樣的回收率比較小柱規(guī)格C18HLBAC2丙烯酰胺加標(biāo)回收率5%?7%10%?15%70%?95%B.洗脫液用量的選擇分別用2mL、4mL、6mL、8mL、10mL、12mL、15mL的甲醇對富集的目標(biāo)物進行洗脫，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，隨著洗脫液用量的增加回收率越高，當(dāng)洗脫液用量大于10mL時，回收率達(dá)到最高，且相差不大，為了節(jié)約氮吹時間，提高效率并保證回收率，本實驗洗脫劑用量選擇為10mL。5.6分析步驟有關(guān)色譜-質(zhì)譜條件流動相條件選擇分別使用水-甲醇、5mmol/L乙酸銨水溶液-甲醇、5mmol/L乙酸銨-0.1%甲酸水溶液-甲醇、0.1%甲酸水溶液-甲醇等做流動相，發(fā)現(xiàn)用0.1%甲酸水溶液-甲醇梯度洗脫，靈敏度高，峰對稱性好，見標(biāo)準(zhǔn)色譜圖1,流動相梯度洗脫程序見表1。丙烯酰胺的保留時間為1.63min。

圖1丙烯酰胺標(biāo)準(zhǔn)溶液色譜圖表2流動相梯度洗脫程序時間(min)流速(UL/min)0.1%甲酸溶液（％）甲醇（％）0.004009910.404009912.5040040602.514009915.00400991質(zhì)譜條件優(yōu)化離子化模式：電噴霧電離正離子模式（ESI+）；質(zhì)譜掃描方式：多反應(yīng)監(jiān)測（MRM），母離子（Parent）（m/z）:72.375 子離子（Product）（m/z）:55.487碰撞能量（CollisionEnergy）:11V 管狀透鏡電壓（Tubelens）:65V鞘氣（Sheathgas）：35psi 輔助氣（Auxiliarygas）:10arb毛細(xì)管溫度￡2口］廿2rTemperature）：350℃分辨率（FWHM）：0.70。蒸發(fā)器溫度（VaporizerTemperature）:450℃極性：正噴霧電壓（SprayVoltage）（V）:3500進樣量選擇由于質(zhì)譜為質(zhì)量型檢測器，進樣量越大，響應(yīng)值越高，因此，加大進樣量能最大限度的提高方法檢出限，但進樣量過大會加大色譜峰的拖尾;分別選擇5uL、10uL、25uL、50uL、100HL進樣量上機測定，實驗證明，50uL進樣量響應(yīng)值高，且峰對稱性好，而進樣100HL時，峰拖尾嚴(yán)重。因此，進樣量選擇50uL。5.6.2標(biāo)準(zhǔn)曲線建立將丙烯酰胺標(biāo)準(zhǔn)貯備液（5.3.6）用甲醇（5.3.2）逐級稀釋，最后用純水配制濃度分別為0.2、0.5、1.0、2.0、4.0、8.0、16、制Hg/L的使用液，以峰面積對濃度作線性回歸分析，回歸方程見表3,標(biāo)準(zhǔn)曲線見圖2。表3丙烯酰胺標(biāo)準(zhǔn)曲線測定編號12345678濃度（ug/L）0.20.51.02.04.08.016.020.0峰面積13033356617633314409329755856698311337411499140線性方程Y=73414X-3617線性相關(guān)系數(shù)r=0.99965.6.3每次分析前用中間濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液作常規(guī)校準(zhǔn)試驗和空白試驗：采用和樣品分析相同的試劑和步驟，制備全程序空白溶液，并做為日常的質(zhì)控手段。結(jié)果計算與表述制定的標(biāo)準(zhǔn)中采用以樣品的保留時間和標(biāo)樣的保留時間相比及特征離子來定性。用作定性的保留時間窗口寬度以當(dāng)天測定標(biāo)樣的實際保留時間變化為基準(zhǔn)。制定的標(biāo)準(zhǔn)中采用外標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)曲線法按式(1)來定量水中丙烯酰胺的濃度。P=(Y-a)V/(KXV) (1)t s式中：P 水樣中丙烯酰胺的濃度，ug/L；Y 水樣中丙烯酰胺的峰面積；a 校準(zhǔn)曲線截距；Vt 洗脫液濃縮定容后的體積，mL；Vs 水樣體積，mL；K 校準(zhǔn)曲線斜率。檢出限、精密度和準(zhǔn)確度檢出限按照《環(huán)境監(jiān)測分析方法標(biāo)準(zhǔn)制修訂技術(shù)導(dǎo)則》(H168-2010)要求，方法分別測定空白加標(biāo)濃度為0.02口g/L的水樣8份，剔除離群值后，統(tǒng)計8份水樣的標(biāo)準(zhǔn)偏差S,此時檢出限MDL=SX2.998。具體數(shù)據(jù)及結(jié)果見表2。表2檢出限測試數(shù)據(jù)平行號試樣0.02ug/L測定結(jié)果(ug/L)10.01520.00830.01440.01450.01260.01370.00980.014平均值乂(ug/L)0.012標(biāo)準(zhǔn)偏差S(ug/L)0.003檢出限0.008-10-

室內(nèi)精密度和準(zhǔn)確度測定(1)精密度測定取某地地表水10mL,各七份，分別加入一定量的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，按樣品步驟進行測定，計算其相對標(biāo)準(zhǔn)偏差，見表3。表3.精密度測試數(shù)據(jù)平行號試樣0.040ug/L2.000ug/L測定結(jié)果(ug/L)10.0361.7620.0351.8430.0321.8140.0311.9150.0321.9060.0341.92平均值乂(ug/L)0.0331.86標(biāo)準(zhǔn)偏差S(ug/L)0.0020.064相對標(biāo)準(zhǔn)偏差(％)6.13.4(2)準(zhǔn)確度測定取兩個不同水樣(飲用水和地表水)，各七份，分別加入一定量的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，按樣品分析步驟測定其回收率，分析結(jié)果見表4。表4實際樣品加標(biāo)測試數(shù)據(jù)平行號實際樣品類型飲用水地表水樣品加標(biāo)樣品回收率(%)樣品加標(biāo)樣品回收率(%)測定結(jié)果(ug/L)10.008ND0.03485.00.008ND1.4773.520.008ND0.03280.00.008ND1.7788.530.008ND0.03280.00.008ND1.5075.040.008ND0.03280.00.008ND1.5376.550.008ND0.03382.50.008ND1.7286.060.008ND0.03177.50.008ND1.6884.0平均值(ug/L)0.008ND0.03280.80.008ND1.6180.6加標(biāo)量(ug/L)0.0402.000測定結(jié)果相對標(biāo)準(zhǔn)偏差「RSD1(%)3.17.9-11-說明:力Xi（1）測定均值X計算公式為：X=i^—n'X1—X）2（2）標(biāo)準(zhǔn)偏差S計算公式為：S=i\n-1S（3）相對標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD計算公式： RSDT=，100%X（4）加標(biāo)回收率二（加標(biāo)試樣測定值-試樣測定值）/加標(biāo)量X100%室間精密度和準(zhǔn)確度測定（1）精密度測定在飲用水中分別加入一定量丙烯酰胺標(biāo)準(zhǔn)溶液制得水樣1和水樣2,由西省環(huán)境監(jiān)測中心站、西安市環(huán)境監(jiān)測站、渭南市環(huán)境監(jiān)測站、寶雞市環(huán)境監(jiān)測站、漢中市環(huán)境監(jiān)測站、商洛市環(huán)境監(jiān)測站等6個實驗室分別對其進行6次測定，水樣1實驗室內(nèi)相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為：5.6%-9.1%,實驗室間相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為：6.3%,重復(fù)性限為：0.006ug/L,再現(xiàn)性限為：0.008ug/L；水樣2實驗室內(nèi)相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為：6.7%-11.7%,實驗室間相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為：2.8%。重復(fù)性限：0.403ug/L,再現(xiàn)性限：0.403ug/L。（2）準(zhǔn)確度測定在飲用水中分別加入一定量丙烯酰胺標(biāo)準(zhǔn)液而制得水樣1和水樣2,由其6個實驗室分別對其進行6次加標(biāo)回收率測定，水樣1加標(biāo)回收率在70.0%-97.5%之間，加標(biāo)回收率最終值為80.8%±9.3%；水樣2加標(biāo)回收率在73.0%-98.0%之間，加標(biāo)回收率最終值為83.0%±4.6%。（實驗數(shù)據(jù)詳見各實驗室驗證報告）質(zhì)量保證和質(zhì)量控制（QA/QC）方法根據(jù)HPLC-MS/MS定性、定量分析特點和分析過程技術(shù)關(guān)鍵點，從空白干擾消除、儀器性能、校準(zhǔn)曲線檢查等幾個方面制訂了質(zhì)量保證和質(zhì)量控制的建議和要求。本次制定的標(biāo)準(zhǔn)，將QA/QC單獨列為方法的一個主要內(nèi)容。.方法驗證-12-方法驗證方案參與方法驗證的實驗室基本情況按照《環(huán)境監(jiān)測分析方法標(biāo)準(zhǔn)制修訂技術(shù)導(dǎo)則》（HJ168）和《國家環(huán)境污染物監(jiān)測方法標(biāo)準(zhǔn)制修訂工作暫行要求》（環(huán)科涵[2009]10號）的要求，組織6家實驗室進行驗證，陜西省環(huán)境監(jiān)測中心站、西安市環(huán)境監(jiān)測站、寶雞市環(huán)境監(jiān)測站、渭南市環(huán)境監(jiān)測站、漢中市環(huán)境監(jiān)測站、商洛市環(huán)境監(jiān)測站。根據(jù)影響方法精密度和準(zhǔn)確度的主要因素和數(shù)理統(tǒng)計學(xué)的要求，編制方法驗證報告，驗證數(shù)據(jù)主要包括精密度、準(zhǔn)確度等。方法驗證方案方法檢出限：按照《環(huán)境監(jiān)測分析方法標(biāo)準(zhǔn)制修訂技術(shù)導(dǎo)則》（H168-2010）要求，方法分別測定空白加標(biāo)濃度為0.02口g/L的水樣8份，剔除離群值后將各自的8次測定結(jié)果計算其標(biāo)準(zhǔn)偏差S,此時檢出限MDL=SX2.998。方法的測定下限：參照HJ168-2010,以4倍方法檢出限確定為本方法目標(biāo)物的測定下限。方法精密度和準(zhǔn)確度：取某地地表水10mL,各六份，分別加入一定量的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，按樣品步驟進行測定，計算其相對標(biāo)準(zhǔn)偏差。加標(biāo)回收率：取10mL水樣各6份，加入標(biāo)準(zhǔn)品使其濃度為0.040Hg/L、2.000Hg/L,進行全程序分析，剔除離群值后將測定結(jié)果分別計算平均值、標(biāo)準(zhǔn)偏差、相對標(biāo)準(zhǔn)偏差、加標(biāo)回收率等。方法驗證過程首先，通過篩選確定方法驗證單位。按照方法驗證方案準(zhǔn)備實驗用品，與驗證單位確定驗證時間。在方法驗證前，參加驗證的人員應(yīng)熟悉和掌握方法原理、操作步驟及流程。方