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生物安全柜的選擇、使用及維護(hù)演示文稿第一頁(yè),共四十三頁(yè)。(優(yōu)選)生物安全柜的選擇、使用及維護(hù)第二頁(yè),共四十三頁(yè)。目的掌握生物安全柜的選擇、放置、使用和維護(hù)熟悉生物安全柜的檢測(cè)方法第三頁(yè),共四十三頁(yè)。需要解決的六個(gè)問(wèn)題為什么選擇生物安全柜?選擇什么樣的生物安全柜?怎樣放置生物安全柜?怎樣使用生物安全柜?怎樣維護(hù)生物安全柜?怎樣檢測(cè)生物安全柜?第四頁(yè),共四十三頁(yè)。選擇生物安全柜的理由工作對(duì)象具有生物危害原代培養(yǎng)物、菌毒種以及診斷性標(biāo)本等-------具有潛在感染性的實(shí)驗(yàn)材料屬于《人間傳染的病原微生物名錄》中第一、二、三和四類微生物第五頁(yè),共四十三頁(yè)。人間傳染的病原微生物名錄第六頁(yè),共四十三頁(yè)。類與級(jí)對(duì)應(yīng)表------GB19489-2004《實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求》第一類第二類第三類第四類第七頁(yè),共四十三頁(yè)。選擇生物安全柜的理由容易產(chǎn)生氣溶膠的工作行為對(duì)液體或半流體進(jìn)行搖動(dòng)、傾注或攪拌操作時(shí),將液體滴加到固體表面上或另一種液體中時(shí),在對(duì)瓊脂板劃線接種、用吸管接種細(xì)胞培養(yǎng)瓶,采用多道加樣器將感染性試劑的混懸液轉(zhuǎn)移到微量培養(yǎng)板中,對(duì)感染性物質(zhì)進(jìn)行勻漿及渦旋振蕩,對(duì)感染性液體進(jìn)行離心,進(jìn)行動(dòng)物操作時(shí)。第八頁(yè),共四十三頁(yè)。選擇生物安全柜的理由生物安全柜能夠阻止工作中所產(chǎn)生的氣溶膠對(duì)外環(huán)境或者操作者本身產(chǎn)生危害,還可以減少樣本之間由于氣溶膠產(chǎn)生的交叉污染。第九頁(yè),共四十三頁(yè)。生物安全柜基本工作原理定向氣流:風(fēng)幕HEPA濾器:
一種一次性使用,框架內(nèi)有多重褶迭的干性過(guò)濾材料的過(guò)濾器,對(duì)0.3微米氣溶膠的過(guò)濾效能達(dá)到99.97%。保證排出氣體和內(nèi)循環(huán)氣體的無(wú)菌狀態(tài)。第十頁(yè),共四十三頁(yè)。生物安全柜的選擇要素:樣品的生物危害第一、二、三和四類病原微生物保護(hù)樣品I級(jí)生物安全柜不保護(hù)樣品其他是否涉及到揮發(fā)性、放射性核素或化學(xué)品第十一頁(yè),共四十三頁(yè)。生物安全柜的選擇(一)生物安全柜進(jìn)風(fēng)面速率(m/s)氣流百分?jǐn)?shù)排風(fēng)系統(tǒng)重新循環(huán)部分排出部分I級(jí)0.360100硬管Ⅱ級(jí)A1型0.38~0.517030排到房間或套管連接處外排風(fēng)型Ⅱ級(jí)A2型0.517030套管連接處Ⅱ級(jí)B1型0.513070硬管Ⅱ級(jí)B2型0.510100硬管III級(jí)不適用0100硬管第十二頁(yè),共四十三頁(yè)。生物安全柜的選擇(二)生物安全柜保護(hù)類型保護(hù)對(duì)象I級(jí)第二、三和四類病原微生物;揮發(fā)放射性核素/化學(xué)品操作者,環(huán)境Ⅱ級(jí)A1型第二、三和四類病原微生物操作者,環(huán)境和樣品外排風(fēng)型Ⅱ級(jí)A2型第二、三和四類病原微生物;痕量揮發(fā)放射性核素/化學(xué)品操作者,環(huán)境和樣品Ⅱ級(jí)B1型第二、三和四類病原微生物;少量揮發(fā)放射性核素/化學(xué)品操作者,環(huán)境和樣品Ⅱ級(jí)B2型第二、三和四類病原微生物;揮發(fā)放射性核素/化學(xué)品操作者,環(huán)境和樣品III級(jí)第一、二、三和四類病原微生物;揮發(fā)放射性核素/化學(xué)品操作者,環(huán)境和樣品第十三頁(yè),共四十三頁(yè)。II級(jí)A2型生物安全柜室內(nèi)空氣污染的空氣HEPA濾過(guò)的空氣正壓污染空氣第十四頁(yè),共四十三頁(yè)。生物安全柜的選擇(三)生物安全柜的寬度:工作需要;空間費(fèi)用:安全柜本身;運(yùn)輸費(fèi)用;附件費(fèi)用(支架,紫外燈,椅子等);排風(fēng)和送風(fēng)系統(tǒng):風(fēng)機(jī)和管道(II級(jí)B2)認(rèn)證:
NSF49美國(guó)EN12469歐洲YY0569-2005中國(guó)第十五頁(yè),共四十三頁(yè)。生物安全柜放置五個(gè)遠(yuǎn)離點(diǎn)(氣流)門(mén)風(fēng)扇空調(diào)開(kāi)著的窗戶人員活動(dòng)頻繁的區(qū)域擺放要求穩(wěn)固的平臺(tái)或支架兩側(cè)、后面和上端留30cmAirRegister設(shè)備首選位置候選位置工作臺(tái)設(shè)備視頻第十六頁(yè),共四十三頁(yè)。反面教材第十七頁(yè),共四十三頁(yè)。生物安全柜的使用要求個(gè)人防護(hù)要求柜內(nèi)物品的擺放紫外燈明火工作前準(zhǔn)備工作中操作及溢出處理工作結(jié)束后處理第十八頁(yè),共四十三頁(yè)。生物安全柜的使用個(gè)人防護(hù)要求:在使用生物安全柜時(shí)必須穿個(gè)人防護(hù)服,戴手套(手套應(yīng)套在隔離衣的外面)最好帶口罩和帽子,根據(jù)需要帶防護(hù)眼罩或者面罩。視頻第十九頁(yè),共四十三頁(yè)。生物安全柜的使用生物安全柜內(nèi)物品擺放原則按照從潔凈區(qū)到污染區(qū)的方向擺放所有物品盡可能放在工作臺(tái)后部將廢棄物袋、盛放廢棄吸管的盤(pán)子以及吸濾瓶等體積較大的物品放在柜內(nèi)某一側(cè)前進(jìn)氣格柵不能被紙、儀器設(shè)備或者其他物品阻擋第二十頁(yè),共四十三頁(yè)。生物安全柜的使用潔凈區(qū)半污染區(qū)污染區(qū)第二十一頁(yè),共四十三頁(yè)。生物安全柜的使用對(duì)紫外燈的三點(diǎn)要求:每周進(jìn)行清潔,除去可能影響殺菌效果的灰塵和污垢每次生物安全柜的認(rèn)證,要檢查紫外線強(qiáng)度,以確保有適當(dāng)?shù)墓獍l(fā)射量房間中有人時(shí)一定要關(guān)閉紫外燈,以保護(hù)眼睛和皮膚,避免因不慎暴露而造成傷害第二十二頁(yè),共四十三頁(yè)。生物安全柜的使用避免使用明火,原因有三:明火可造成生物安全柜的氣流紊亂,干擾氣流模式可損壞HEPA過(guò)濾器處理?yè)]發(fā)性物品和易燃物品時(shí)易造成危險(xiǎn)第二十三頁(yè),共四十三頁(yè)。生物安全柜的使用工作前需要準(zhǔn)備的內(nèi)容:
首先紫外燈照射30分鐘關(guān)紫外燈,打開(kāi)安全柜的日光燈和風(fēng)機(jī),用消毒劑對(duì)生物安全柜的內(nèi)表面進(jìn)行消毒擦拭將實(shí)驗(yàn)中需要用到的物品集中用消毒劑擦拭后放在臺(tái)面相應(yīng)位置上(切記勿阻擋風(fēng)口?。┑却?min,凈化工作區(qū)的空氣污染物視頻第二十四頁(yè),共四十三頁(yè)。生物安全柜的使用工作時(shí)操作規(guī)范:雙臂垂直緩慢進(jìn)入前面的開(kāi)口,在生物安全柜中等待大約一分鐘,以使安全柜調(diào)整完畢后才可對(duì)物品進(jìn)行處理。所有操作應(yīng)在離前窗10cm以外的工作區(qū)進(jìn)行。廢棄物應(yīng)丟棄在生物安全柜內(nèi)的處理容器中視頻第二十五頁(yè),共四十三頁(yè)。生物安全柜的使用操作時(shí)注意事項(xiàng):避免胳膊在前開(kāi)口處快速移動(dòng)和頻繁進(jìn)出。盡量避免污染的物品進(jìn)入潔凈區(qū)。在生物安全柜內(nèi)進(jìn)行操作時(shí),不能進(jìn)行文字工作。盡量減少操作者身后的人員活動(dòng)。視頻第二十六頁(yè),共四十三頁(yè)。生物安全柜的使用溢出處理:
GB19489—2007《實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求》中生物安全柜內(nèi)溢出時(shí)的處理方法滴狀溢出或體積不足1mL的,可簡(jiǎn)單地用消毒劑擦洗。第二十七頁(yè),共四十三頁(yè)。生物安全柜的使用大量溢出,則要做特殊的處理:1、使生物安全柜保持開(kāi)啟狀態(tài)。2、在溢出物上覆蓋浸有消毒劑的吸水材料,作用大約10分鐘以發(fā)揮消毒作用。3、在安全柜內(nèi)對(duì)污染的手套消毒后,脫下手套。如果衣服已經(jīng)污染,也要先脫下消毒。穿戴干凈的手套和衣服作如下進(jìn)一步的清潔工作。第二十八頁(yè),共四十三頁(yè)。生物安全柜的使用4、用消毒劑噴灑或擦拭安全柜內(nèi)壁、工作表面以及前視窗的內(nèi)側(cè)。作用20min后,擦干消毒劑并將擦拭物置于生物危害袋中。5、如果溢出情況需要浸泡接液槽,則不得現(xiàn)場(chǎng)清理接液槽。應(yīng)報(bào)告實(shí)驗(yàn)室主管后采用適當(dāng)?shù)臍怏w消毒方式。第二十九頁(yè),共四十三頁(yè)。生物安全柜的使用6、將所有清理用物品以及防護(hù)服進(jìn)行高壓消毒。用消毒肥皂和水洗手和暴露皮膚。7、立即通知實(shí)驗(yàn)室主管。如果溢出物流入安全柜內(nèi),可能需要對(duì)安全柜進(jìn)行更為廣泛的消毒處理。視頻第三十頁(yè),共四十三頁(yè)。生物安全柜的使用工作結(jié)束后的要求:將安全柜繼續(xù)運(yùn)行至少3min來(lái)完成“凈化”過(guò)程。將柜內(nèi)物品移出前,應(yīng)使用有效的消毒劑擦拭每天實(shí)驗(yàn)結(jié)束后,對(duì)生物安全柜的內(nèi)壁和臺(tái)面進(jìn)行擦拭。等待5分鐘后,關(guān)閉前窗,關(guān)燈,關(guān)風(fēng)機(jī),紫外燈照射30分鐘。視頻第三十一頁(yè),共四十三頁(yè)。生物安全柜的維護(hù)保持生物安全柜表面清潔和無(wú)污染狀態(tài)用70%酒精或者合適的消毒劑擦拭內(nèi)壁和工作臺(tái)面;如果使用漂白劑等腐蝕性消毒劑后,需要用無(wú)菌水再次進(jìn)行擦拭除去殘余的消毒劑;定期抬起工作臺(tái)面對(duì)其下面的區(qū)域進(jìn)行清潔;消毒后,用玻璃清潔器對(duì)前窗玻璃和紫外燈進(jìn)行清潔。第三十二頁(yè),共四十三頁(yè)。生物安全柜的維護(hù)定期保養(yǎng):用濕布擦拭內(nèi)壁和工作臺(tái)面;每年按需要更換紫外燈和日光燈;每年至少認(rèn)證一次
——《醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室—安全要求》——YY0569-2005生物安全柜——《實(shí)驗(yàn)室生物安全手冊(cè)》(第三版,2004)視頻第三十三頁(yè),共四十三頁(yè)。生物安全柜的維護(hù)生物安全柜的污染清除甲醛、過(guò)氧化氫熏蒸等方法應(yīng)由有資質(zhì)的專業(yè)人員來(lái)進(jìn)行在以下情況下需要進(jìn)行熏蒸:①在檢查和維修之前②在更換HEPA濾器之前③在移動(dòng)安全柜之前④安全柜被嚴(yán)重地污染⑤變換使用目的⑥長(zhǎng)時(shí)間未用⑦需要熏蒸的其它時(shí)間第三十四頁(yè),共四十三頁(yè)。生物安全柜的維護(hù)甲醛熏蒸步驟之一----準(zhǔn)備電爐兩個(gè);福爾馬林;氨水;100mL燒杯4個(gè);膠帶;透明塑料薄膜、75%酒精等。使用75%酒精對(duì)生物安全柜內(nèi)、外表面進(jìn)行消毒清潔;將生物安全柜和放置在同一房間內(nèi)的冰箱、CO2培養(yǎng)箱等儀器用膠帶紙進(jìn)行密封處理。視頻第三十五頁(yè),共四十三頁(yè)。生物安全柜的使用甲醛熏蒸步驟之二----熏蒸將電爐放在生物安全柜中,連接電源用兩個(gè)燒杯分取福爾馬林20mL、水50mL,置電爐上關(guān)閉視窗,用膠帶封嚴(yán)窗門(mén)開(kāi)啟電源,水和福爾馬林同時(shí)被加熱,待福爾馬林揮發(fā)完畢時(shí),關(guān)閉電源,保持密閉狀態(tài),過(guò)夜視頻第三十六頁(yè),共四十三頁(yè)。生物安全柜的使用甲醛熏蒸步驟之三----中和取氨水36mL、水50mL,分放于2個(gè)燒杯中,置電爐上再次將生物安全柜門(mén)密封開(kāi)啟電源,待氨水揮發(fā)完后,關(guān)閉電源密閉過(guò)夜視頻第三十七頁(yè),共四十三頁(yè)。生物安全柜的熏蒸第三十八頁(yè),共四十三頁(yè)。生物安全柜的熏蒸第三十九頁(yè),共四十三頁(yè)。生物安全柜的檢測(cè)什么情況下需要檢測(cè)?應(yīng)該由什么人來(lái)進(jìn)行檢測(cè)?需要進(jìn)行哪些內(nèi)容的檢測(cè)?第四十頁(yè),共四十三頁(yè)。生物安全柜的檢測(cè)生物安全柜的檢測(cè)的情況發(fā)生在:最初的購(gòu)買(mǎi)安裝完畢年檢移動(dòng)修理第四十一頁(yè),共四十三頁(yè)。生物安全柜的檢測(cè)生物安全柜的檢測(cè)應(yīng)由有資質(zhì)的單位檢測(cè)在美國(guó)必須有美國(guó)NSF授權(quán)的單位;沒(méi)有NSF授權(quán),也得有以下經(jīng)歷的:有過(guò)檢測(cè)經(jīng)驗(yàn);參加過(guò)技術(shù)課程或者廠商培訓(xùn)會(huì);參加過(guò)象CETA水平的商業(yè)會(huì)議;檢測(cè)設(shè)備擁有的校準(zhǔn)證書(shū)在我國(guó)有檢測(cè)資質(zhì)的單位:國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局醫(yī)療器械質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)中心和軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院第四十二頁(yè),共四十三頁(yè)。生物安全柜的檢
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